Universidad del Valle de México Campus Lomas Verdes
Investigación previa de la práctica 3: Coprocultivo.
Francisco González Luis Angel, Galán Aguilar Melissa, García García Diana Alejandra,
Hernández Hernández Oscar Hilario, Velazco Villalvazo Dalia del Carmen.
Asignatura: Microbiología Clínica
Licenciatura en QFBT
Periodo 2022-4
Docente: Porraz Ramírez Javier.
Fecha de entrega: 04 de abril de 2022.
INVESTIGACIÓN PREVIA
Fundamento del coprocultivo. Tipos de microorganismos que pueden
crecer en un coprocultivo.
Se basa en la recogida de heces como muestra
del paciente enfermo para estudiar casos de La ingestión de patógenos causa infecciones,
diarreas persistentes o recurrentes sin motivo que pueden quedar limitadas al tracto
conocido. gastrointestinal o comenzar en el intestino para
diseminarse hacia otras partes del organismo.
Mediante estos exámenes se pueden identificar Una amplia gama de patógenos microbianos
diferentes patologías a través de la puede infectar el tracto gastrointestinal, entre
identificación de bacterias, mediante el ellos los más importantes son:
sembrado de la muestra fecal y posterior
tinción. Igualmente se pueden examinar ● Escherichia coli.
posibles huevos o restos de parásitos. ● Salmonella.
● Campylobacter
● Shigella
● Vibrio cholerae.
● Clostridium perfringens
● Bacillus cereus
Cabe mencionar, que se producen diarreas
secretoras cuando los microorganismos
causales son capaces de colonizar el tubo
digestivo, en todos los casos estos agentes
deben superar múltiples defensas del huésped,
Figura 1. Medio de cultivo tras haber también pueden producir poderosas toxinas
realizado un coprocultivo. que van a actuar colonizando la parte distal y
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proximal del intestino. Otros microorganismos Datos de Seguridad de los Reactivos.
capaces de identificar en un coprocultivo son:
Agua destilada
● Shigella
● Salmonella - Densidad: 997 kg/m³
● Yersinia - Fórmula: H₂O
● Campylobacter - Masa molar: 18,01528 g/mol
● Escherichia coli - Punto de ebullición: 100 °C
- Punto de fusión: 0 °C
- Denominación de la IUPAC: Oxidane,
Water
Cristal violeta
Figura 2. Crecimiento de microorganismos en
- Fórmula: C24H28N3Cl
coprocultivo.
- Peso molecular: 407.98
- Familia química: COLORANTES
- Densidad 1,19 g /cm³
¿Cómo se realiza el conteo de UFC/ml y - pH (valor) 2,5 - 3,5 (agua: 10 g /l , 20
cuando se considera elevado? °C)
- Punto de fusión/punto de congelación
Para calcular el número de UFC/ml en una 189 - 194 °C
muestra, se toma el número de colonias de la
dilución contable; asumiendo que el valor de
una colonia es igual a una UFC/ml, el valor
equivale al número de UFC/ml que existe en el
volumen de la gota que dejó el replicador.
Mediante una regla de tres, se determina el
número de colonias que hay en 100 µl y
después en 1 ml. Lugol
Finalmente, una vez que el número de colonias
ha sido determinado en 1 ml, el resultado se - Forma: líquido
multiplica por el factor de dilución en la cual - Color: marrón
se contaron las colonias y así se obtiene el - Olor: ligero
número de UFC/ml de la bacteria de interés - pH 3,5 a 20 °C
contenida en la muestra. - Punto /intervalo de ebullición: 100 °C
a 1.013 hPa
Para considerar que el conteo de UFC/ml es - Punto de inflamación: No aplicable
elevado en el coprocultivo, se debe considerar - Inflamabilidad (sólido, gas) No hay
primero el tipo de microorganismo que se información disponible.
presenta en el cultivo. Por ejemplo, la dosis
infectante de la salmonella oscila entre 105 y
109 UFC/ml mientras que la dosis infectiva de
Clostridium perfrigens se sitúa entre 106 y 108
UFC/g,
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Alcohol OBJETIVOS
- Fórmula: C2H5OH General.
- Densidad: 789 kg/m³
- Masa molar: 46,07 g/mol Identificar los principales microorganismos
- Punto de ebullición: 78,37 °C que se pueden encontrar en una muestra de
- Denominación de la IUPAC: ethanol heces.
- Punto de fusión: -114,1 °C
- alcoholes: Metanol, Propanol Específicos:
● Identificar el fundamento para llevar a
cabo un coprocultivo.
● Conocer los agares de selección para
un coprocultivo.
● Conocer la metodología de siembra
para su posterior aplicación en una
muestra de heces.
Acetona
● Conocer cómo se lleva a cabo el
conteo de UFC/ml y cuando se
- Fórmula: C3H6O
considera elevado para un
- Densidad: 784 kg/m³
coprocultivo.
- Punto de ebullición: 56 °C
- Masa molar: 58,08 g/mol
- Punto de fusión: -95 °C
- Clasificación: Cetona MATERIAL
- 1 Gradilla
- Tubos de ensayo
- 5 Asas de siembra desechable y
normales
- Hisopo
- Papel filtro
- 3 Pipetas de vidrio de 0.1 ml
Safranina
- Pinzas metálicas
- Alcohol
- Fórmula: C20H19N4+·Cl-
- Algodón
- Peso molecular: 350.85 g/mol
- Vaso de precipitado
- pH (valor) 10 (20 °C)
- Mechero Bunsen
- Punto de fusión/punto de congelación:
- Portaobjetos
no determinado
- Cubreobjetos
- Punto inicial de ebullición e intervalo
- Microscopio
de ebullición: 100 °C a 1.013 hPa
- Cubeta de tinción
- Densidad 1 g /cm³
- Pinzas de madera
- Frasco lavador
- 20 Cajas Petri
- 30 tubos de 13x100 con tapón de rosca
Equipo:
- Incubadora
- Balanza
- Microscopio
- Autoclave
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Sustancias:
Frascos de 50 ml que contengan:
- Agua destilada
- Cristal violeta
- Lugol
- Alcohol/Acetona
- Safranina
Agares
- 200 ml agar sangre
- 200 ml agar Mc Conkey
- 200 ml agar entérico Hektoen
- 200 ml agar xilosa, lisina desoxicolato
- 200 ml agar salmonella-shigella
- 200 ml agar sulfito de bismuto
- 200 ml agar verde brillante
- 50 ml de caldo selenito
- 50 ml de TSI
- 50 ml de LIA Diagrama 2: Procedimiento para llevar a
- 50 ml de Citrato de Simmons cabo la siembra de medios de cultivo
- 50 ml de MIO (Salmonella - Shigella).
- Negro Sudan
BIBLIOGRAFÍA
METODOLOGÍA
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de bacterias cultivables mediante el
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Diagrama 1. Procedimiento para llevar a - Picazo, J. (1994). Gastroenteritis
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Procedimientos en Microbiología
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