C.B.T.I.
S #155
Vazquez Carrillo Jessica Rosario
Doctor. Víctor Manuel Alfaro
2do. Semestre
O.E.M.L
(Operar Equipo de Laboratorio)
2LM
‘Cámara de Neubauer y Materiales de apoyo ’
Tijuana B.C 1 de abril del 2011
Cámara de Neubauer
La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para
realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo
celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc.
Esta cámara de contaje está adaptada al microscopio de campo claro o al de
contraste de fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente
deprimidas y que en el fondo de las cuales se ha marcado con la ayuda de un
diamante una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un
cubrecámaras que se adhiere por simple tensión superficial.
Luego se introduce el líquido a contar, al que generalmente se ha sometido a
una dilución previa con un diluyente, por capilaridad entre la cámara y el
cubrecámara; puesto que tiene dos zonas esto permite hacer dos recuentos
simultáneamente. Para contar las células se observa el retículo al microscopio
con el aumento adecuado y se cuentan las células.
Con base en la cantidad de células contadas, conociendo el volumen de líquido
que admite el campo del retículo, se calcula la concentración de células por
unidad de volumen de la muestra líquida inicial.
La fórmula de valoración del número de células (válida universalmente) es la
siguiente: Partículas por μl = (partículas contadas)/ (superficie contada
(mm²)profundidad de la cámara(mm)∙ dilución)
Observe que en la grilla de la cámara
de Neubauer las áreas de recuento de
eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glóbulos rojos se cuentan en las
áreas coloreadas de rojo, mientras
que los glóbulos blancos se cuentan
en las áreas coloreadas de azul. Ten
en cuenta que la grilla central tiene 25
cuadrados de 1mm x 1mm de área y
0.10 mm de profundidad. El factor de
dilución es por tanto de 1:200.
Convierte el número de glóbulos rojos
contados en 5 cuadrados a nº
glóbulos rojos/ µl. (1 µl (microlito) = 1
mm3).
Esta cámara se acompaña de los siguientes equipos graduados y sus cristales
de apoyo:
1. Pipeta de Salí
Está diseñada para determinar la cantidad de hemoglobina. Esta
graduada.
Estas pipetas requieren de un cuidado especial mantenimiento. Se recomienda
sumergirlas periódicamente en solución acuosa de detergente y semanalmente
en una solución de HCl 0.1 N (1). Es importante que el ajuste exacto de los 20 ul
s realice con una toalla absorbente y que esta también se use para limpiar bien
el exterior de la pipeta. En todo caso, es deseable que la pipeta no se introduzca
más allá de 2mm en la muestra de sangre.
Calibración de la pipeta:
El método es el siguiente: Engrasar el embolo de una jeringa de 2ml, a fin de
proveer un sello hemetico. Insertar el eje o espiga de la jeringa en un tapón de
hule al cual se le ha practicado un hueco adecuado para el propósito.
Insertar el extremo superior de una pipeta, Salí en el otro lado del tapón de hule.
2. Pipeta de thoma:
Pipeta graduada de cristal con incertidumbre de +-3 diseñada para funcionar
como cuenta glóbulos.
Función de la pipeta de thoma:
Le pones un torniquete al final, en el extremo donde
esta el bulbito luego al torniquete le pones una puntilla
de las pipetas semiautomáticas para que puedas aspirar,
primero sangre y luego el de acido acético bueno la
sangre se aspira hasta la marca de 5 no debe de tener
burbujas así que hazlo rápido es preferible que te pases a q te sobre, si te
pasas , el exceso lo remueves poniendo una gasa en la punta y solita jala la
sangre, repite el procedimiento hasta que este en el punto de 5 bueno luego ya
hasta el acido acético o la solución , si te pasas haces lo mismo y luego ya lo
llevas al agitador y luego lo vacías en la cámara de neubaer.
3. Manguera de boquilla blanca y roja:
La manguera que conecta a una trompa de vació y su función es que filtra
sustancias pastosas y sólidas de tamaño pequeño de partículas. Ayudan a la
pipeta de thoma.
4. Cubre hematimetro:
Sirve para cubrir las cámaras en la cuenta le leucocitos, plaquetas o eritrocitos y
es de vidrio.
Bibliografía:
[Link]
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qid=20080424155921AANd2Uh
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