ENZIMAS
Msc. LUIS MENESES MERCADO
Introducción
Concepto
Términos relacionados con la actividad de las
enzimas.
Nomenclatura
Características
Propiedades
Clasificación
Cinética de Michaelis Menten
Inhibición enzimática
Regulación enzimática
Mecanismos de acción
Importancia de las enzimas en el diagnóstico
clínico
Competencia y subcompetencia
Competencia: Describe, identifica, comprende y
adquiere bases sólidas de los principales
compuestos orgánicos que forman parte
estructural del cuerpo humano.
Subcompetencia: Reconoce la importancia de las
enzimas en los procesos metabólicos y la utilidad
diagnostica.
Introducción
ENZIMAS
No afectan el Poseen un
Catalizadores equilibrio
proteicos químico centro Se regulan
de una reacción catalítico
k1 k3
Aumento y
99% E + S ↔ ES → E + P
disminución de la
(1% ribozimas) k2
actividad
Las enzimas son catalizadores
biológicos, de naturaleza proteica, las
que salen inalteradas al finalizar la
reacción.
Un catalizador es un agente capaz de
acelerar una reacción química, sin
formar parte de los productos finales.
Términos relacionados con la acción enzimática
Apoenzima: Referido solo a la parte proteica de la
enzima.
Holoenzima: Es la proteína unido a una coenzima
y/o ión metálico.
Grupo Prostético: Componente orgánico unido
fuertemente (covalentemente) a la apoenzima.
Cofactor:
Son moléculas inorgánicas, cuya presencia es
necesaria para que la enzima sea activa.
a) Iones inorgánicos
Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+ , Cu2+. etc.
Las coenzimas son moléculas orgánicas
la mayoría son vitaminas hidrosolubles.
Clasificación de acuerdo a su función:
1. Transferencia de electrones: NAD +(P),
FAD, FMN, CoQ.
2. Transferencia de grupos: TPP, CoASH
3. Transferencia de potencial de energía:
UDP-Glucosa, CDP etc.
Isoenzimas: enzimas con diferentes
estructuras que tienen la misma acción
enzimática en diferentes tejidos u
órganos. Ejemplo: Hexoquinasa
(cerebro) y la glugoquinasa en el
hígado.
Zimógenos: Forma inactiva de enzimas
digestivas de las proteínas, al perder
una cadena de oligopéptidos pasan a
su forma activa. Ejemplo: Pepsinógeno
por acción del HCl pasa a pepsina.
Nombre Trivial: sufijo –asa (ej. Ureasa,
Hexoquinasa)
Nombre Sistemático: El número de
clasificación es una serie de 4 dígitos que
designan la clase, subclase, sub-subclase y
número de orden de la enzima dentro de la
clasificación internacional que va precedido
por las siglas EC.
Características generales de las enzimas
•No sufren modificación al final de la reacción.
•Poseen un peso molecular elevado.
•Poseen un centro catalítico.
•No cambian la constante de equilibrio de una reacción química.
•Son muy específicas.
•Actúan disminuyendo la energía de activación de una reacción química.
•Actúan en condiciones óptimas de PH, concentración de sustrato, presión
y temperatura.
•Se saturan
La actividad enzimática – es la eficiencia,
con que una enzima procesa a su sustrato.
Entre más moléculas de sustrato es
convertido en el producto en un periodo
de tiempo, mayor es la actividad
enzimática.
Existen varias unidades para expresar la
actividad enzimática. Una de las unidades
de mayor uso es UI – Unidad Internacional.
UI se define como cantidad de micromoles
de sustrato, transformados en el producto
en un volumen de 1 ml y en un periodo de
1 minuto.
Alto poder catalítico (Menor energía de
activación)
Naturaleza proteica
Poseen sitios activos
Especificidad de sustrato
Se regulan
Oxidorreductasas. Reacciones de
oxidorreducción , requieren de coenzimas.
Lactato deshidrogenasa: Lactato ↔
piruvato (oxidación)
Transferasas. Transferencia de grupos de
átomos (amina, carboxilo, fosforilo) de
un sustrato a otro (ej. Quinasas
transfieren el grupo fosfato,
transaminasas, cesión de un grupo
amina).
Glucoquinasa:
Hidrolasas. Ruptura de
enlaces (C-O, C-N, C-S, O-P)
por adición de agua
Ej.:
Liasas. Ruptura de uniones C-C, C-S y C-
N no por hidrólisis.
Descarboxilasa:
Isomerasas. Interconvierten isómeros.
Ligasas o sintetasas. Catalizan la formación de enlaces
entre C y O, N, S u otros átomos utilizando en general ATP
Glutamina sintetasa: Ácido glutámico + amoníaco + ATP ↔
glutamina
La enzima se une al o los sustratos formando
un complejo transitorio
E + S ↔ ES → E + P
k1 k3
E + S ↔ ES → E + P
k2
Para muchas enzimas la V de catálisis o formación del
producto varía con la [S]:
› Cuando [S] es pequeña, V es casi proporcional a [S]
› Cuando [S] es elevada, V es practicamente independiente
de [S]
La ecuación de M-M da cuenta de estas características
cinéticas:
V= Vmax[S] KM= k2+ k3
[S] + KM k1
El valor de KM para una enzima depende de cada
sustrato y de condiciones ambientales tales como
temperatura y fuerza iónica.
KM = concentración de sustrato necesario para
que la enzima alcance la mitad de la velocidad
máxima.
El Km es inversamente proporcional a la afinidad
de la enzima por su sustrato.
La representación gráfica de la ecuación de
Michaelis-Menten (velocidad de reacción frente a
[S]) es una hipérbole. La Vmax corresponde al
valor máximo al que tiende la curva experimental,
y la KM corresponde a la concentración de sustrato
a la cual la velocidad de la reacción es la mitad
de la Vmax.
Inhibición enzimática
La inhibición enzimática puede ser
Irreversible o reversible.
En la inhibición irreversible: El inhibidor
queda covalentemente unido a la enzima
o ligado muy fuertemente (ej. acción de
gases neurotóxicos sobre la enzima
acetilcolinesterasa).
Reversible. Ocurre cuando el efecto
inhibitorio de un compuesto puede
contrarrestarse incrementando la
concentración del sustrato o retirando el
agente inhibidor.
Inhibición competitiva. Un inhibidor
parecido al sustrato se une al centro
activo de la enzima impidiendo la
unión del sustrato. La unión del
sustrato y el inhibidor son mutuamente
excluyentes. Puede ser superada a
concentración suficientemente alta
de sustrato.
Ejemplo:La Succinato Deshidrogenasa
es inhibida por el malonato.
› Inhibición no competitiva. El inhibidor
y el sustrato pueden unirse
simultáneamente a una molécula de
enzima. Ej. Metales pesados
Los niveles de sustrato determinan
generalmente la mayor o menor actividad
enzimática.
En algunas vías metabólicas, cuando la
cantidad de producto final excede las
necesidades, se frena la actividad
enzimática: inhibición por retroalimentación
(feed-back).
.
REGULACIÓN ALOSTERICA: Es el mecanismo
de regulación enzimática en donde actúan
activamente ciertos efectores o moduladores
sobre el sitio alostérico de la enzima.
.
MECANISMOS DE ACCIÓN ENZIMÁTICA
Modelo de la llave y cerradura (FISHER)
E S S
E y S tienen forma
complementaria
Modelo del
sitio
inducido
E (KOSLAND)
+ E S
Enfermedades hepáticas: transaminasas
ALT (Alanina aminotransferasa)
AST (Aspartato aminotransferasa)
Enfermedades pancreáticas: Enzimas
digestivas: amilasa, lipasa, pepsina.
Enfermedades del corazón: CPK, LDH,
AST
Ejemplos del uso diagnostico de isoenzimas son el
estudio de la Lactato Deshidrogenasa y de la
Creatin quinasa
Lactato Deshidrogenasa (LDH)
Esta enzima esta formada por la asociación de cinco cadenas
peptidicas de dos diferentes tipos de monómeros: M y H.
Las variantes encontradas en el ser humano son:
LDH1: M4 ,Abunda a nivel muscular
LDH2: M3 H
LDH3: M2 H2
LDH4: MH3 sérica)
LDH5: H4 ,Abunda a nivel cardiaco
Creatin Kinasa (CK) , también conocida como Creatin
fosfoquinasa (CPK) es otro ejemplo de isoenzimas cuyo
estudio es útil para el diagnostico. Hay tres isoenzimas de
CK formadas cada una por la combinación de diferente
subunidades:
CK1 (BB) abunda en el cerebro y en la musculatura lisa.
CK2 (MB) abunda en el corazón y aparece en ciertas
cantidades en el musculo esquelético.
CK3 (MM) abunda en el musculo esquelético y el
cardiaco .
Conclusiones
Todo proceso metabólico depende de la acción de las
enzimas.
Las enzimas aceleran las reacciones a nivel del
organismo y no alteran el equilibrio químico.
Las enzimas actúan en condiciones óptimas de sustrato,
temperatura, pH.
La actividad de las enzimas es regulada.
Las enzimas intracelulares aparecen en sangre por
traumatismos que sufren los tejidos ejemplo: la hepatitis.
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