¿Qué es la microbiología médica?

“El estudio de los microorganismos (incluyendo bacterias, virus, hongos y parásitos)

los cuales son de importancia médica porque son capaces de causar enfermedades
en seres humanos”
¿Por qué es importante?
• La infección es una de las causas más importantes de mortalidad y morbilidad en la población.

Flora Norma
Colonización
• Presencia de un organismo en un sitio pero no causa reacción tisular
(inflamación), síntomas o enfermedad.
• Puede ser la flora normal
• Puede ser flora anormal – tal como después que el paciente ha recibido antibióticos.
Infección
• Cuando los organismos invaden un sitio del cuerpo y se multiplican iniciando una
reacción tisular produciendo síntomas/enfermedad.
Clasificación de organismos
• Kingdom Phyllum (family) Genus Species
Organisms that can cause disease are many and varied and include:
• Viruses Bacteria Fungi Parasites
Relevancia de la clasificación
• Diferentes:
- Enfermedades
- Modos de transmisión
- Tratamiento-e.g. los
antibióticos no curan
infecciones virales

Generalidades
• Se clasifican en dos grandes grupos

1. Archeas Metanogenicas: CO2 y H2 --------- CH4

Halofilas : Medios salinos
 Termoacidofilas : Altas Toy Ph acidos.
2. Bacterias
Miembros de Eubacterias
• Bacteria Micoplasma Spirochete
• Rickettsia Chlamydia Actinomycete

• "Las bacterias son pequeñas y simples, viven de forma independiente en lugar de formar
organismos pluricelulares"
• Su tamaño oscila entre 0,3 y 2,5 um
• Construcción celular, caracterizada por:
- No presentar un núcleo con membrana nuclear
- Material nuclear simple -> ADN único y circular
- Carecen de la mayoría de los organelos presentes en eucariontes.
- Poseen ribosomas mas pequeños 70s (subunidades 30s y 50s)
- La mayoría presenta una cubierta protectora llamada Pared Celular.
- Bacterias son
- No histonas asociadas con el DNA Paredes celulares con peptidoglican
- Se dividen por fisión binaria (no por mitosis)
- Cromosoma bacteriano en el área “nucleoide
- Cromosoma bacteriano y DNA extra-cromosómico, los “plásmidos”

Identificando Procariotas - Formas

• Forma de bastón: bacilos.
• Forma esférica: cocos.
• En forma espiral: espirilos.
• Algunas bacterias crecen formando cadenas o agrupamientos.
BASTONES
Escherichia coli
Epulopiscium
COCOS
Estreptococos
ESPIRALES
Espiroqueta
Borrelia
• Bacteria (del griego, bakteria, ‘bastón’), nombre que reciben los organismos
unicelulares y microscópicos, que carecen de núcleo diferenciado y se
reproducen por división celular sencilla.
FORMAS BACTERIANAS

Tamaño
• El diámetro de la mayoría de los cocos: 1.0μ
• Los bacilos miden de 2-3μm de longitud y 0.3- 0.5μm
(diámetro)

Estructura bacteriana
Célula Procariota
Envoltura cel:
- Glicocálix (Cápsulas, capa de limo)
- Pared celular,
- Membrana celular
Citoplasma:
- Ribosomas,
- Gránulos,
- Nucleoide/Cromosoma (Plásmidos)
Apéndices: Flagelos, Pilis y Fimbrias

Glicocálix
• Cubierta de moléculas externas a la pared celular, hecha de azúcares y/o proteínas.
• 2 tipos
1. cápsula – altamente organizada, fuertemente atada
2. Capa de limo - pobremente organizada y atada.
• funciones – unión – Inhibir fagocitosis por los leucocitos – receptor

Cápsulas & capas de limo

• Cubre la parte exterior de la célula
• bien definida: cápsula
• no definida: capa de limo o glicocálix
• usualmente polisacáridos
• Frecuentemente se pierden en cultivos in vitro
• protectoras in vivo
• Tinciones especiales: Tinción de la cápsula Klebsiella pneumoniae
 ¿Qué es el biofilm?
• La placa que se forma en tus dientes y que te los destruye
Tinción de Gram
• 1884 Hans Christian Gram
• Gram (+) – Gram (-)
1. Cristal violeta
2. Grams Iodine
3. Alcohol
4. Safranina (Contraste)

Resultados
• Gram (+) violeta
• Gram (-) rojo
• Diferencia – por la estructura de la pared celular
- Gram (+) gruesa pared celular
- Gram (-) delgada pared celular

• Cocos Gram + • Aglomerados: característica usual de Staphylococcus spp., S. aureus

• Cadenas o pares: característico de Streptococcus spp., S. pneumoniae

• Bacilos gram + • Gruesos: Clostridium spp., tal comoC. perfringens, C. difficile, C. tetani
• Delgados: e.g. Listeria spp.

• Cocos Gram- • Diplococo: Neiseria spp., tal como N. meningitidis o N. gonorrhoea,

Moraxella spp. y Acinetobacterspp.

• Coccobacilos: Acinetobacter spp., el cual puede ser ya sea Gram-positivo

or Gram- negativo, y se denomina Gram-variable.

• Bacilos gram- • Delgados: Enterobacteriaceae (coliformes), como E. Coli

• Coccobacilos: Haemophilus spp., tal como H. influenzae
• Curvos: Vibrio spp.o Campylobacter spp., como V. cholerae, C. jejuni
• Delgados en forma de aguja: Fusobacterium spp.
ESTRUCTURAS BASICAS

Nucleoide
■ DNA circular de doble banda
■ No tiene membrana
Citoplasma
• Ribosomas
• Plásmidos
• Gránulos: - Glucógeno - Ac. β-hidroxibutírico
• Mesosomas
Ribosomas

• síntesis de proteínas 70S, dos subunidades 50S 30S

Plásmidos bacterianos
• DNA extra- cromosómico
• Número múltipe de copias
• Confieren factores de patogenicidad y de resistencia a antibióticos
• Replicación bacteriana
Gránulos citoplásmicos
• Nutrientes
• Gránulos metacromáticos
- Básicos
- Valor diferencial Corynebacterium diphthriae
Mesosomas
• Síntesis de energía
• Invaginaciones de la membrana celular
• Gram positivas
• Trabaja como un huso
• Inicia replicación y duplicacion
Pared celular:
• Peptidoglicano
• Provee un sustento fuerte y flexible para proteger a las bacterias de la explosión o colapso debido a
la presión osmótica.
• Columna de glicano
- Ácido murámico
- glucosamina
• Cadena de péptidos lateral
• Puentes de péptidos cruzados de unión
- D- y L- amino ácidos
- ácido diaminopimélico
• enlace B1 4

Ácido Murámico
• D-amino ácidos
•Ácido diaminopimélico
• no sintetizado por mamíferos
Histonas: proteína que ayuda a enrollar el ADN, evitan que se rompa y mutaciones
Peptidoglicano
• El ácido N-acetilmurámico es único en la
pared bacteriana; no se encuentra en ningún
otro tipo celular u organismos.

• El peptidoglicano está formado por filamentos

de glicano alternando con residuos de ácido
N-acetilmurámico y N-acetilglucosamina
unidos por enlaces β-1,4.

• Estos filamentos de glicano están entrecruzados por aminoácidos.

• Un tetrapéptido está unido a cada ácido N-acetilmurámico en el siguiente orden: L-alanina-D-

glutamina-L-R3-D-alanine.

• El peptidoglicano confiere fuerza a la pared celular.

Síntesis de peptidoglicano
• El peptidoglicano se forma en 4 etapas:
1.Precursor de formación (en citoplasma) involucrando derivados UDP de los amino azúcares
2.Transferencia a través de la membrana.
3.Polimerización sobre la superficie exterior de la membrana.
4.Reacción de transpeptidación que entrecruce el peptidoglicano.
4 grupos basados sobre la composición de la pared celular
1. Gram positivas (e.g. Bacillus subtilis): gruesa, no tiene m. externa
2. Gram negativas (e.g. E. coli): lipoproteínas, porinas
3. Bacterias sin pared celular (e.g. Mycoplasma genitalium)
4. Bacteria con paredes celulares químicas únicas (e.g. Mycobacterium tuberculosis)

Pared gram positiva

• Consiste en
- Una gruesa y homogénea capa de peptidoglicano de 20-80 nm de grosor
- Fuertes enlaces de polisacáridos ácidos, incluyendo el ácido teicoico y el ácido lipoteicoico.
- Membrana celular
• Retiene el cristal violeta y se tiñen de morado.
• No porinas
• E.periplasmico no hay o delgado
Envoltura celular de la gram+
- Ácido teicoico: polímero, fósforo, Una columna de ribitol o glicerol
• Ácido teicurónico: polímero, no fósforo, Una columna de ácido glucurónico

Ácidos teicoicos y teicurónicos

• Toman iones de metales
• Dirigen enzimas autolíticas
- Forman agujeros en la pared celular
–Permiten la inserción de la pared celular (síntesis)
Ácidos Lipoteicoicos
• Membrana celular
• Aparta autolisinas de la pared celular.
Pared gram negativa
• Consiste en
- Una membrana externa conteniendo lipopolisacárido (LPS), lipoporoteinas
- Delgada capa de peptidoglicano
- Membrana interna
- 2 capas
- 8-1nm
- E.periplasmic extenso
- Si porinas
• se tiñen de rojo por la tinción de contraste safranina.

Membrana externa
• Lipopolisacárido (LPS): Endotoxina
• fosfolípidos
• Proteínas:porinas
• Bacterias Gram negativas: Barrera más permeable, Espacio entre la membrana interna y externa
• Espacio periplásmico: Almacena enzimas degradativas
• Bacterias Gram positivas: No tienen espacio periplásmico
Peptidoglicano gram-
• Lipoproteína de Braun: Une la pared celular a la membrana externa
Funciones de la pared celular
1. Mantener la forma de la bacteria
2. Rigidez, protegiendo a la célula de la lisis
3. osmótica
4. Intercambio de nutrientes y químicos
5. Antigenicidad
6. Relacionada con su patogénesis
Bacterias sin pared
• Resulta de la acción de:
- enzimas líticas de la pared celular
- Antibióticos que inhiben la biosíntesis del peptidoglicano.
• Usualmente no-viables
• Bacterias sin pared que no se replican:
- esferoplastos (con membrana externa-gram-)
- protoplastos (sin membrana externa-gram+).
• Bacterias sin pared que se replican: – Formas L
Funciones de la membrana celular
• Semi-permeable
• Funciones
- Permeabilidad y transporte
- Excreción de exoenzimas hidrolíticas y proteínas patogénicas
- Producción de energía
- Funciones de biosíntesis
Estructuras especiales
Flagelos
• móviles
• Organelos locomoteres
• Prueban el medio ambiente
• Responden a alimentos/venenos: quimiotaxis
• Anclados en la membrana celular
• Se proyectan como hebras
• Subunidades de flagelina (proteína)
• Mueve a la célula por acción propulsora

Pilis
• Cabellos
• Sexual
• Adhesión al epitelio

Estructura de la membrana y ensamblaje

transporte y transformación de energía
Funciones de la membrana citoplásmica
• Barrera permeable u osmótica: la membrana es impermeable a moléculas con
carga o de un MW >100
• Localización de los sistemas de transporte para importar todas las moléculas necesarias que
están cargadas o que tienen un MW>100
• Generación de energía: se localiza el sistema de transporte de electrones (ETS)
y la síntesis de ATP por la enzima ATPasa
• Funciones especializadas que involucran la síntesis de pared celular, división celular y
replicación de DNA.

Estructura del Flagelo

> 40 genes involucrados
Funciones del Flagelo
• Proteína, antigénico
• Estructura locomotora
• Factor de adherencia
• Diferenciación
Filamentos axiales
• Espiroquetas
- similar función de los flagelos
- Van a lo largo de toda la longitud de la célula
- Movimiento como el de una serpiente.
Pili (fimbrias, Pilus)
• Proyecciones de la célula como
cabellos
• Conjugación sexual
• Adhesión al epitelio del huésped

La endospora
• m.interna < cortex < m.externa < cubierta < exosporium
• Células durmientes
• Producidas al escacear los nutrientes
• Resistentes a condiciones adversas
- altas temperaturas
- solventes orgánicos
• Contienen dipicolinato de Ca
• Bacillus y Clostridium
Espora
• Capa de peptidoglicano
• Cortex
- entre dos membranas
- menos entrecruzamientos
- ácido murámico deshidratado
ENDOSPORAS:
• Estructuras fabricadas en el interior de algunas bacterias, las cuales
son resistentes al calor, compuestos químicos, desecación,
radiación, ácidos y desinfectantes.
• familia Bacteriaceae Bacillus (cilindros aerobios
esporógenos)(carbunco) y Clostridium (cilindros anaerobios
esporógenos).
• forma de reposo latente dentro del ciclo vital.
• Permanecen latentes por largos periodos de tiempo.
 • por la falta de los nutrientes esenciales
PROPIEDADES DEL NUCLEO DE LA ENDOSPORA:
- sufre una deshidratación del 10 al 30% comparado con el
núcleo de una célula vegetativa normal lo que favorece a la
endospora en:
• aumento a la resistencia al calor.
• Resistencia al peróxido de hidrogeno.
• Inactiva las enzimas del núcleo.
• Producción de proteínas llamadas SASP.
- Protegen el DNA para la formación de una célula vegetativa nueva.
-Son fuente de Carbono y energía para nueva célula vegetativa

TIPOS DE ENDOSPORAS: Terminal Subterminal Central.

TIEMPO DE VIDA DE UNA ESPORA: Indefinido, hasta que las condiciones del medio sean
favorables (Clostridium aceticum --- 30 años)
COLORACION DE LA ENDOSPORA: verde malaquita, Eosina o safranina
FORMACIÓN:
0. La célula se encuentra en la etapa final de crecimiento xponencial y contiene dos cromosomas.
1. El DNA celular se hace más denso y centrode, recambio
intracelular de proteínas.
2. Se forma un tabique- causa de la invaginación de la
membrana citoplasmática. El DNA es segregado en
dos compartimentos (la espora en desarrollo y la
célula madre).
3. El citoplasma delimitado por dos membranas, La
membrana más interna se transformará en la
membrana citoplasmática de la espora en
germinación
4. forma la corteza de la espora, comienza a
acumularse calcio, y a sintetizarse Acido
Dipicolínico.
5. Aparece el exosporio. La membrana exterior se
transforma en la capa cortical por la incorporación
deproteínas ricas en cisteína. resistencia frente a los
agentes antimicrobianos.
6. Maduración de la espora. citoplasma se vuelve homogéneo y
electrodenso. La capa cortical se completa.
7. La endospora es liberada por la lisis de la célula.
• La espora madura es capaz de producir de nuevo una célula vegetativa.
Los pasos implicados en este proceso son:
1. Activación de la espora por el calor o el envejecimiento
2. Germinación,
3. Crecimiento para dar una célula vegetativa.