γ-GT
γ - GT
Substrato carboxilado. Cinético
Determinación cuantitativa de gamma-glutamil 5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
transferasa (γ − GT) cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
IVD 6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto
(∆A/min).
Conservar a 2-8ºC
CÁLCULOS
PRINCIPIO DEL MÉTODO
La gamma-glutamil transferasa (γ-GT) cataliza la transferencia de un ∆A/min x 1190= U/L de γ-GT
grupo γ-glutamilo de la γ-glutamil-p-nitroanillida al dipéptido aceptor
glicilglicina, según la siguiente reacción: Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol
de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en
γ − GT
L- γ-Glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + Glicilglicina ⎯⎯ ⎯⎯→ unidades por litro (U/L).
L- γ-Glutamil-glicilglicina + Ácido 5-amino-2-nitrobenzoico Factores de conversión de temperaturas
La velocidad de formación del ácido 5-amino-2-nitrobenzoico, Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
determinado fotometricamente, es proporcional a la concentración Temperatura Factor para convertir a
catalítica de γ-GT en la muestra ensayada .
1,2
de medición 25ºC 30ºC 37ºC
25ºC 1,00 1,37 1,79
SIGNIFICADO CLÍNICO 30ºC 0,73 1,00 1,30
La gamma-glutamil transferasa (γ-GT) es una enzima que se 37ºC 0,56 0,77 1,00
encuentra presente en casi todos los tejidos del organismo, siendo
particularmente alta en hígado, páncreas, riñón y próstata. CONTROL DE CALIDAD
La determinación de los niveles de gamma-glutamil transferasa (γ- Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
GT) es el método mas útil para el diagnóstico y tratamiento de las SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
enfermedades hepatobiliares como obstrucción hepática, cirrosis o Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
1,2,5,6
tumores hepáticos . revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
datos clínicos y de laboratorio. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
tolerancias.
REACTIVOS
1
R1 VALORES DE REFERENCIA
TRIS pH 8,25 100 mmol/L
Tampón 25ºC 30ºC 37ºC
R2 Glicilglicina 100 mmol/L Mujeres 4-18 U/L 5-25 U/L 7-32 U/L
Substrato L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida 3 mmol/L Hombres 6-28 U/L 8-38 U/L 11-50 U/L
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
PREPARACIÓN establezca sus propios valores de referencia.
Reactivo de trabajo (RT): CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Ref: 1001185 Rango de medida: Desde el límite de detección 2,56 U/L hasta el límite de
Disolver ( → ) una tableta de R 2 Substrato en un vial de R 1 Tampón. linealidad 250 U/L.
Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con
Ref: 1001186 ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Disolver ( → ) una tableta de R 2 Substrato en 15 mL de R 1 Tampón. Precisión:
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 5 días a temperatura ambiente (15-25ºC). Media (U/L) 45,7 203 45,5 203
SD 0,66 1,72 1,04 3,43
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD CV (%) 1,44 0,85 2,28 1,69
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0008 ∆A/min.
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Coeficiente de regresión (r): 0.99.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9919x – 0,1042.
- Presencia de partículas y turbidez. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
- Absorbancias del Blanco a 405 > 1,20.
INTERFERENCIAS
MATERIAL ADICIONAL No utilizar plasma. Los anticoagulantes inhiben al enzima. La hemólisis
1
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm. elevada interfiere en el ensayo . Se han descrito varias drogas y otras
- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC) substancias que interfieren en la determinación de la γ-GT .
3,4
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio. NOTAS
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
MUESTRAS este reactivo en distintos analizadores.
Suero . La γ−GT es estable hasta 3 días a 2-8ºC, 8 horas a 15-25ºC y
1
1 mes a –20ºC. BIBLIOGRAFÍA
1. Gendler S. γ-GT. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
PROCEDIMIENTO Toronto. Princeton 1984; 1120-1123.
1. Condiciones del ensayo: 2. Persijn J P et al. J Clin Chem Clin Biochem 1976; (14) 9: 421-427.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .405 nm 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .1 cm paso de luz
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . 25ºC / 30ºC / 37ºC 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta: PRESENTACIÓN
RT (mL) 1,0 Ref: 1001185 Cont. 20 x 2 mL
Muestra (µL) 100 Ref: 1001186 10 x 15 mL
4. Mezclar, esperar 1 minuto.
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