MICROBIOLOGÍA I
2021
APO 6
Marcha bacteriológica:
generalidades. Antibiograma.
ANTIBIOGRAMAS
Algunas definiciones…
• Antibiótico: sustancia química producida
naturalmente por un microorganismo que en
concentraciones bajas destruye o inhibe el
desarrollo de otros microorganismos. Ejemplo:
Penicilina
• Antimicrobiano: toda sustancia de origen natural,
semisintética o sintética, que mata o inhibe el
desarrollo de microorganismos, causando escaso
o nulo daño al hospedador
Antimicrobianos y su utilización:
• En medicina humana para el tratamiento de
enfermedades infecciosas y raramente de
forma preventiva
• En medicina veterinaria para el tratamiento
de enfermedades infecciosas y como
promotores de crecimiento en animales de
producción
Clasificación de antimicrobianos según:
• Origen: naturales, semisintéticos o sintéticos
• Actividad antibacteriana: espectro reducido, espectro
intermedio y amplio espectro
• Efecto antibacteriano: bactericidas o bacteriostáticos
• Estructura química: beta-lactámicos, aminoglucósidos,
tetraciclinas, fenicoles etc.
• Mecanismo de acción: penicilinas y beta-lactámicos
inhiben la síntesis de la pared celular; aminoglucósidos y
fenicoles inhiben o afectan la síntesis proteica;
quinolonas inhiben la duplicación del ADN
• Pautas farmacocinéticas/farmacodinámicas
MUESTRA
AISLAMIENTO
OBSERVACIÓN DIRECTA
CULTIVO
MARCHA BACTERIOLÓGICA
PREPARACIÓN DE
MEDIOS DE CULTIVO
PRUEBAS BIOQUÍMICAS Y FISIOLÓGICAS
IDENTIFICACIÓN
PRUEBAS INMUNOLÓGICAS
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS
Una vez identificada la bacteria se realiza la prueba de
susceptibilidad a los antimicrobianos con el objetivo de conocer el
antibiótico adecuado y la concentración adecuada para el
tratamiento!!!
Métodos de determinación
de la sensibilidad antibiótica
se clasifican en
Cuantitativos Cualitativos
permiten conocer determinar
Sensible Resistente
CIM CBM
(Concentración (Concentración Intermedio
inhibitoria bactericida
mínima) mínima)
CIM: mínima concentración de antibiótico capaz de inhibir el desarrollo in
vitro de una población bacteriana
CBM: mínima concentración de antibiótico capaz de producir la muerte in
vitro de una población bacteriana
Sensible: cepa bacteriana causante de una infección es inhibida por la dosis
recomendada del antibiótico apropiado
Intermedio: cepas causantes de una infección pueden ser inhibidas por
concentraciones de antibiótico más elevada a la recomendada, siempre que
se pueda aumentar la dosis o que la droga pueda concentrarse
fisiológicamente en el tejido afectado
Resistente: cepas bacterianas que no son inhibidas por las concentraciones
del antimicrobiano usualmente alcanzadas con dosis normales o son cepas
que tienen un mecanismo de resistencia específica
Quiénes evalúan las concentraciones de
antibiótico (punto de corte) a utilizar???
Además establecen metodologías, criterios de
interpretación, parámetros de control de calidad
¿Cómo se realiza la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos de
forma cualitativa? Método por difusión con disco. Veamos los pasos
a seguir…
1. Contar con la bacteria aislada e identificada a partir de la
muestra
2. Realizar un inóculo en agua fisiológica estéril para lograr una
turbidez de 0,5 en la escala de McFarland (cantidad de bacterias
por ml = 1,5 x 108 UFC/ml)
3. Medio de cultivo sólido Müller-Hinton. Sembrar con un hisopo
estéril humedecido a partir del inóculo logrado anteriormente
4. Colocar los discos de antibióticos a evaluar, a las distancias
recomendadas por la CLSI
5. Incubar en estufa durante 18-20hs a 37° en condiciones
aeróbicas. Recordar que los requerimientos de incubación
dependerán de la bacteria!!!
6. Observar e interpretar los resultados
1. Muestra sembrada en 2. Cultivo puro en 3. Pruebas bioquímicas
agar sangre (o en el ATS de las colonias y/o complementarias
medio que corresponda) crecidas en el paso 1 de ser necesario
6. Siembra a partir del
4. Cultivo puro de la 5. Preparación del
inóculo en el medio Müller-
bacteria identificada inóculo a partir del
Hinton e incorporar los
en el paso 3 cultivo puro del paso 4
discos de antibióticos
RESISTENTE
Resultados: según el tamaño del halo de
inhibición se considera a la bacteria sensible,
intermedio o resistente
Se puede conocer la CIM de un antibiótico por el
método de difusión llamado E-test
Se puede conocer la CIM y la CBM a través de un
método cuantitativo: dilución en caldo
Debido al abuso y mal uso de los antimicrobianos tanto
en medicina humana como en medicina veterinaria,
incluso en el área de agricultura, las bacterias
adquirieron y adquieren diferentes mecanismos de
resistencia antimicrobiana, provocando dificultades a la
hora de aplicar un tratamiento para combatir una
enfermedad. Es por ello que es importante realizar una
prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos antes de
medicar!
Recomendaciones de la OMS para el uso de
antimicrobianos en animales de producción
• Recomendación 1: Uso general de los antimicrobianos. Se recomienda una
reducción general del uso de todas las clases de antimicrobianos de importancia
medica en los animales destinados a la producción de alimentos
• Recomendación 2: Uso en la estimulación del crecimiento. Se recomienda una
restricción completa del uso de todas las clases de antimicrobianos de
importancia medica para estimular el crecimiento de los animales destinados a
la producción de alimentos
• Recomendación 3: Uso preventivo (en ausencia de enfermedad). Se
recomienda una restricción completa del uso de todas las clases de
antimicrobianos de importancia medica con el fin de prevenir enfermedades
infecciosas que todavía no han sido diagnosticadas clínicamente en los animales
destinados a la producción de alimentos
• Recomendación 4: Uso terapéutico y con fin de control (presencia de la
enfermedad). Se propone que los antimicrobianos considerados de importancia
crítica para la medicina humana no deben utilizarse para controlar la
propagación de enfermedades infecciosas diagnosticadas clínicamente en
grupos de animales destinados a la producción de alimentos
Criterio 1: (C1) Clase de antimicrobiano que constituye uno de los pocos o el único tratamiento disponible
para tratar infecciones bacterianas graves en humanos.
Criterio 2: (C2) Clase de antimicrobiano utilizada para tratar infecciones humanas causada por: 1) bacterias
que pueden ser transmitidas a los humanos a partir de fuentes no humanas y 2) bacterias que pueden
adquirir genes de resistencia a partir de fuentes no humanas.
Criterio de priorización 1: (P1) Gran número absoluto de personas, o uso en una elevada proporción de
pacientes con infecciones graves en entornos de atención sanitaria, afectadas por infecciones bacterianas
en las que esa clase de antimicrobiano es la única alternativa, o una de las pocas existentes para tratar
infecciones humanas graves.
Criterio de priorización 2: (P2) Clase de antimicrobiano de uso muy frecuente en cualquier indicación
medica humana o de uso en una gran proporción de pacientes con infecciones graves en entornos de
atención sanitaria, dado que dicho uso puede favorecer la selección de resistencia en ambas
circunstancias.
Criterio de priorización 3: (P3) Clase de antimicrobiano utilizado para tratar infecciones humanas en las
que hay pruebas de la transmisión de bacterias resistentes o de genes de resistencia a partir de fuentes no
humanas.
Fin primera parte!!!