UNIVERSIDAD NACIONAL «JORGE BASADRE GROHMANN»

Facultad de Ciencias - E.P- Biología Microbiología

BREVE INTRODUCCIÓN A LA HISTORIA
DE LA BACTERIOLOGÍA

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 INTRODUCCIÓN A LA BACTERIOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA GENERAL: estudio de las
Protozoología
propiedades fundamentales de las
bacterias

Rickettsiología
BACTERIOLOGÍA AGRÍCOLA: estudio de las
bacterias en relación con la fertilidad del
suelo.
MICROBIOLOGÍA BACTERIOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA INDUSTRIAL: estudio de
las bacterias en relación con el proceso
industrial.
Virología
La BACTERIOLOGÍA es la rama de la Biología que
estudia la morfología, ecología, genética y BACTERIOLOGÍA MÉDICA: estudio de las
bioquímica de las bacterias así como otros bacterias en relación con las enfermedades
muchos aspectos relacionados con ellas. Es de Micología
del hombre y animales.
gran importancia para el hombre por sus
implicaciones médicas, alimentarias, ambientales
y tecnológicas.
BREVE HISTORIA DE LA
BACTERIOLOGÍA
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
CONTAGIO VACUNACION INVEST. BASICA

Hebreos/ Griegos Variolización A.V. Leeuwenhoek

G. Fracastorius culturas antiguas 1675 descubre m.o
1547

John Hunter 1700 E. Jenner 1796 Needham-Sapllanzani

I. Semmelweis 1840 vacuna viruela Teoría abiogénica

John Snow 1850 Basi y Schonlein (Hongos)

TEORIA GERMINAL DE LA ENFERMEDAD Y EDAD ORO

Louis Pasteur, Robert koch y Josehp Lister (etc)
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
ANTONI VAN LEEUWENHOEK (1676): PADRE DE LA MICROBIOLOGÍA EMPÍRICA
Precursor de la Biología Experimental, Celular y la Microbiología. Descubridor de las Bacterias.

CHRISTIAN GOTTFRIED EHRENBERG. En 1828 introdujo el término bacteria, derivado del

griego βακτηριον ("bastoncillo").

ROGER BACÓN (1214-1294). Es conocido por el sobrenombre de Doctor Mirabilis

(‘doctor admirable’, en latín). Creador del Método Científico. Roger Bacón, sugirió
que las enfermedades contagiosas eran producidas por seres vivos invisibles.

GIROLAMO FRACASTORO (1478–1553): Teoría del Contagio. LA

ENFERMEDAD se puede trasmitir por: Contacto directo, Fomes (Fomites),
Transmisión a la distancia.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
FRIEDRICH G.J. HENLE (1809-1885): Médico alemán. “Los Postulados de Henle”
El agente causal de la infección debe ser encontrado en el cuerpo del paciente.
El agente causal debe ser posible aislarlo y reproducir experimentalmente la enfermedad.

ROBERT KOCH (1843-1910): EL FUNDADOR DE LA BACTERIOLOGÍA

1. Primeros estudios del carbunco
2. Estudio de la etiología de la tuberculosis y del cólera.
3. Aislamiento de la tuberculina y su efecto anafiláctico.
4. Creador de los cultivos sólidos.

POSTULADOS DE KOCH – 1882 : ETIOLOGÍA DE LA TUBERCULOSIS

La bacteria patógena debe aislarse siempre de animales enfermos y nunca
de animales sanos.
Cuando un animal está enfermo la bacteria debe aislarse en cultivo puro.
Si la bacteria se inocula a otro individuo debe reproducirse la enfermedad.
La bacteria debe aislarse nuevamente en cultivo puro.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA

Richard Petri
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
IGNAZ SEMMELWEIS (1818-1865): Se le considera pionero de la antisepsia (lavado de manos de personal
médico) y de la prevención de las infecciones nosocomiales e iatrogenia.

LOGROS DE LOUIS PASTEUR (1822-1895)

1857: Procesos de Fermentación láctica. 1861-1876: Fermentación alcohólica: crea el proceso de
PASTEURIZACIÓN para evitar “las enfermedades del vino y de la cerveza”.

ALEXANDRE YERSIN (1863-1943). Médico. Sus primeros trabajos, en colaboración con

Emile Roux, versan sobre el bacilo de la difteria, cuya toxina descubren en 1886. En 1894,
identifica el bacilo responsable de la enfermedad. Fallece en 1943.

JOSEPH LISTER (1827-1912)

Creó el método de la antisepsia, hoy conocido como ASEPCIA. LISTER,
concluyó en 1867 que debería ser posible evitar las infecciones post-
operatorias, desinfectando previamente los instrumentos quirúrgicos
(por calor), el área de operación y las manos del cirujano.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
FERDINAND COHN (1822-1895)
Botánico y Bacteriólogo alemán Investigó y analizó el origen bacteriológico de enfermedades infecciosas de las
plantas y los animales. Descubrió naturaleza y propiedades de las esporas bacterianas. En 1872 Cohn publicó
la primera clasificación de las bacterias basada en su morfología.

BERNHARD PROSKAUER (1851-1915)

Gran parte de la investigación de Proskauer estuvo dedicado a las desinfecciones y las
cuestiones de higiene del agua. Con el médico Daniel Wilhelm Otto Voges, desarrolló la
“Prueba de Voges-Proskauer", una reacción química utilizada en las pruebas para la
detección de acetoína por varias bacterias.

FRIEDRICH J. LOEFFLER (1852-1915). Bacteriólogo e higienista alemán.

Descubrió el bacilo del muermo (Burkholderia mallei), el de la difteria (Corynebacterium

diphtheriae), virus de la rubéola y de la septicemia del ganado vacuno. Contribuyó
además a la fabricación del suero antidiftérico.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
F. ZIEHL FRANZ ZIEHL (1857-1926). Introdujo la técnica de tinción del carbol fuscina para visibilizar el bacilo de Koch
(1882). También desarrolló la técnica de coloración de Ziehl-Neelsen, junto a FRIEDRICH NEELSEN (1854-
1894), para bacilos resistentes al ácido-alcohol.

PAUL EHRLICH (1854-1915): Serólogo, bacteriólogo y farmacólogo alemán.

Teoría de las tinciones vitales, Teoría de la bala mágica: Salvarsán 606 y Estudios sobre la
resistencia metabólica bacteriana contra los agentes químicos.

F. NEELSEN
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
ELYA METCHNIKOFF (1845-1916)
En 1884, propuso teoría de la fagocitosis (Teoría de la respuesta inmune celular). Estudió la microflora
intestinal humano y propuso el consumo de leches fermentadas y bacterias lácticas, productoras de grandes
cantidades de ácido láctico.

SERGEI WINOGRADSKY (1856-1933): pionero de los

estudios de los ciclos biogeoquímicos. Junto MARTINUS
BEIJERINCK (1851-1931), hicieron importantes contribuciones
al conocimiento de la Microbiología del suelo.
Proceso de nitrificación (quimioautotrofía). Identificó los géneros
Nitrosomonas y Nitrosococcus, y que ambas oxidan amonio a nitrito,
y Nitrobacter, que oxida nitrito a nitrato.
Considerados los PADRES DE LA ECOLOGÍA MICROBIANA y de la
S. WINOGRADSKY MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL, por entender y descifrar a los M. BEIJERINCK

microorganismos fuera del contexto de la medicina.

 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
DAVID HENDRICKS BERGEY (1860-1930): médico y bacteriólogo estadounidense.
BERGEY, Presidente de la Sociedad Americana de Bacteriología, revisó y renovó totalmente la clasificación
de los microorganismos , el cual se llamó: MANUAL DE DETERMINACIÓN DE BACTERIOLOGÍA, publicado en 1923.

HANS CHRISTIAN GRAM (1853-1938). Médico-bacteriólogo danés.

En 1884, durante su viaje a Berlín, diseñó y presentó el método microbiológico de tinción de bacterias
que lleva su nombre: COLORACIÓN GRAM.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
WILLIAM H. WELCH (1850-1934). Médico y bacteriólogo estadounidense.
Descubrió los efectos de la toxina de la difteria y el bacilo causante de la gangrena gaseosa (Clostridium
welchii).

ALEXANDER FLEMING (1881-1955). Médico y bacteriólogo inglés.

Fleming desarrolló importantes investigaciones en los campos de la
bacteriología, la quimioterapia y la inmunología. En 1922 descubrió la
lisozima y en 1928 descubrió accidentalmente la PENICILINA, en el curso
de sus investigaciones sobre la gripe.

CARL JOSEPH EBERTH (1835-1926). Médico y bacteriólogo alemán

Se le debe el descubrimiento en 1880 del agente causal de la fiebre tifoidea (bacilo de Eberth o Eberthella o
Salmonella typhi ), así como diversos trabajos sobre histología y organografía.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
GEORGES FERNAND ISADORE WIDAL (1862-1929). Médico y bacteriólogo francés.
En 1896 desarrolló un método de diagnóstico serológico para la fiebre tifoidea: Reacción de Widal.
La reacción de Widal demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes (aglutininas) contra los antígenos H
(flagelar) u O (somático) de la Salmonella typhi en el suero de los pacientes con fiebre tifoidea.

KIYOSHI SHIGA (1871-1957). En 1897 identificó la bacteria Shigella dysenteriae, el agente causante
de la disentería infecciosa. Su descubrimiento le permitió desarrollar un suero eficaz para el
tratamiento de la enfermedad.
Escribió y publicó un tratado en dos tomos sobre bacteriología clínica.

THEOBALD SMITH (1859-1934). Médico epidemiólogo estadounidense.

T. SMITH fundó el departamento de Bacteriología de la Universidad de Columbia donde se
dedicó a estudiar la contaminación fecal (coliformes) en el río Potomac. Estudió la fiebre
de Texas, una enfermedad que debilita al ganado.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
THEODOR VON ESCHERICH (1857-1911). Médico y bacteriólogo austro-alemán.
Descubrió el Bacillus coli o Colibacilo, hoy incluido en un género de bacterias que lleva su nombre (Escherichia)
dentro de la familia de las Enterobacterias.

GERHARD DOMAGK (1895-1964). Médico y bacteriólogo alemán.

En el año 1932, mostró los efectos antibacterianos de una sulfonamida, llamada prontosil, en
ratones con infecciones de estreptococos. En 1936 comprobó que la sulfonamido-crisoidina
era eficaz contra la infección por estreptococos.

JULES BORDET (1870-1961). Médico, bacteriólogo e inmunólogo belga.

Fue el descubridor del bacilo que produce la tos ferina: Bordetella pertussis y
desarrolló una vacuna contra la enfermedad.
1919, Premio Nobel de Fisiología y Medicina por el hallazgo de la capacidad
bactericida del suero de la sangre de los mamíferos (complemento).
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
CARL WOESE (1928-2012). Biofísico y microbiólogo estadounidense.
Creador de la nueva taxonomía molecular basada en la comparación entre especies de la llamada secuencia del
ARN ribosomal 16s y 18s que comparten todos los seres vivos del planeta y determinó un nuevo taxón, un supra-
reino de los DOMINIOS.

JOHN R. WARREN (1937-) y BARRY MARSHALL (1951).

Médicos y bacteriólogos australianos.
Warren y Marshall (1951) lograron cultivar y aislar a Helicobacter pylori en
varias de esas biopsias. Barry Marshall (1951). se inoculó a sí mismo el
Helicobacter pylori para comprobar la etiología de la enfermedad gástrica.
 BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
JOHN CRAIG VENTER (1946-). Biólogo y empresario estadounidense. DECODIFICÓ EL
GENOMA HUMANO.
Sintetizaron un genoma bacteriano (Mycoplasma mycoides) transfiriéndolo a otra célula
bacteriana (Mycoplasma capricolum), en sustitución de ADN del microplasma, dando
nacimiento a la BIOLOGÍA SINTÉTICA.
Celera Genomics
BREVE HISTORIA DE LA BACTERIOLOGÍA
 Llegué al mundo sin nada.
Me iré del mundo sin nada.

Solo se irán conmigo

Las obras buenas y malas
Que estarán escritas en el
Libro de mi vida.

Todo lo demás fue prestado.

ANÓNIMO.

MUCHAS GRACIAS
 UNIVERSIDAD NACIONAL «JORGE BASADRE GROHMANN»
Facultad de Ciencias - E.P- Biología Microbiología

ESTRUCTURA BACTERIANA

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 CARACTERÍSTICAS: BACTERIAS

CARACTERÍSTICAS GENERALES ELEMENTOS ESTRUCTURALES

 Son organismos unicelulares y pleomórficos ELEMENTOS OBLIGADOS
 El tamaño es un parámetro determinado genéticamente * Membrana citoplasmática
 Organismos con nutrición autótrofa o heterótrofa * Espacio periplásmico
 Metabolismo energético aeróbico o anaeróbico * Citoplasma y organelos
* Cromosoma bacteriano
 Reproducción Asexual: fisión binaria
 Forma reproductiva: vegetativa ELEMENTOS FACULTATIVOS
 Forma conservadora: espora * Cápsula y Pared Celular
* Flagelos, Pilis y Esporas
 Temperatura de crecimiento: mesófila
 Rango de pH : 4 - 8 EN EL CITOPLASMA
 Agrupación por tinción: Gram positivas - Gram negativas * DNA: cromosoma bacteriano
 Organismos comensales, patógenos verdaderos y * DNA: extracromosómico (facultativo)
oportunistas * Ribosomas, Vacuolas e Inclusiones
* Mesosomas (Pliegues membranosos)
 MORFOLOGÍA BACTERIANA
TAMAÑO: Determinado genéticamente
Importancia del pequeño tamaño de los procariotas
 Los nutrientes y materiales de desecho son transportados hacia dentro
y fuera de la célula, respectivamente.
 La velocidad de transporte determina la velocidad metabólica y por lo
tanto la velocidad de crecimiento de los microorganismos.
 Cuanto mayor es la relación superficie/volumen mayor es la capacidad
de realizar el pasaje de nutrientes y materiales de desecho.
 Cuanto menor es el tamaño, mayor es la relación superficie/volumen.
 CONSECUENCIAS DEL TAMAÑO

1. Metodológicas
© Microscopios y técnicas de tinción para su visualización 1. Cocos: * Esféricos: Staphylococcus aureus; S. pyogenes
© Estudio de características basado en promedios poblacional * Ovales: S.pneumoniae, Neisseria meningitidis

2. Propiedades Biológicas 2. Bacilos: * Cilíndricos : Eschericia coli, Salmonella typhi

* Fusiformes : Fusobacterium nucleatum, F. Necrophorum
© Relación superficie/volumen (s/v) es muy alta * De maza : Corynebacterium diphtheriae, M. tuberculosis
© Pequeño tamaño condiciona una alta tasa de crecimiento 3. Espirilos: * Espirilos: Spirillum minor, S. volutans
3. Propiedades Físicas * Vibrios: Vibrio cholerae
* Espiroquetas: Treponema pallidum; Borrelia recurrentis
© Movimiento browniano Leptospira interrogans.
© Capacidad de dispersión de la luz
4. Filamentosas, ramificadas o no: M.tuberculosis, M. leprae,
© Aumentan viscosidad del medio
Actinomyces israelli,
© Migran en un campo eléctrico Nocardia asteroides
© Aglutinan y precipitan a [ sales]
 FORMAS DE BACTERIAS

Estafilococo Estreptococo Diplococo

Bacilo esporulado Bacilo

Espirilo
Espiroquetas Espirilos Estreptobacilo
 ENVOLTURAS BACTERIANA
Cápsula

Capa S

Membrana
externa Tinción negativa de Streptococcus pyogenes vista Streptococcus pneumoniae
por microscopía electrónica de transmisión
(28,000X).
Peptidoglicano y
periplasma

Membrana interna

Cápsula Capa mucosa Biopelícula

Capa S de Aquaspirillum serpens de simetría hexagonal
 ENVOLTURAS BACTERIANA

PROPIEDADES GENERALES 1) CÁPSULAS POLISACARÍDICAS

1) Mejora en las propiedades de difusión de nutrientes. Los a) Heteropolisacáridos aniónicos: unidades de aminoazúcares,
polisacáridos extracelulares aniónicos funcionan como ácidos urónicos, polioles (en muchos casos con radicales
una resina de intercambio. fosfato, formiato, succinato, etc.).

2) Adhesión a sustratos inertes o vivos: colonización nichos b) Homopolisacáridos neutros: levanos, dextranos, celulosa y
ecológicos alginatos. (Ejm. Pseudomonas aeruginosa).

3) Adhesión a otras células: microcolonias y consorcios c) Alginatos (Azotobacter, Pseudomonas), consistentes en una
alternancia de distintos tipos de ácidos urónicos.
4) Protección contra la desecación
5) Protección contra la predación por parte de protozoos 2) CÁPSULAS POLIPEPTÍDICAS
6) Protección contra agentes antibacterianos: bacteriófagos, Están formadas por glutamil-polipéptidos. En B. anthracis el
metales pesados, células fagocíticas, detergentes, péptido es de poli-D-glutámico (sólo encontradas en el género
anticuerpos. Bacillus).
 GLICOCALIX o CAPA MUCOSA
Algunas bacterias excretan una capa amorfa de polisacárido mucoso denominada “slime” que incluye a todas las bacterias de una población. Ejm: Pseudomonas aeruginosa
o Streptococcus mutans.

Proceso de formación de la biopelícula en Pseudomonas aeruginosa. La adherencia bacteriana permite la formación de la biopelícula plana.
La biopelícula madura se establece cuando el agregado bacteriano genera la matriz mediante la producción de factores secretados. La
producción de la matriz se basa en los polisacáridos Pel y Psl, la proteína alginato y lectinas como LecA y LecB.

 El glicocalix protege a las bacterias contra los fagocitos.

 En la formación de biopelículas.
 Fija agua, evitando que la célula se reseque.
 CAPA - S
© Son capas cristalinas de proteínas superficiales de la envoltura
celular.
© Presentes en algunas bacterias pero son más abundantes y
características de las arqueas.
© Las proteínas de capa S se autoensamblan en arreglos monocapa
de dos dimensiones, en suspensión y sobre membranas lipídicas.
© Mayormente proteínas acídicas leves (pH 4-6) con muchos
aminoácidos hidrófobos.
© Sus funciones son idénticas a las de Eubacterias y son resistentes
a penicilina y lisozima.
Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus
En arqueas sin pseudomureina: las capas S
actúan dando forma a la arquea y participan en
la fisión.
 PARED CELULAR BACTERIANA
PEPTIDOGLUCANO
Estructuralmente está formado por cadenas glucosídicas en que se repite una
unidad elemental de N-acetil-glucosamina (NAG) unida por un enlace glicosídico
β1,4 a ácido N-acetil-murámico (NAM). Se unen a cadenas tetrapéptidas (L-alanina--
--D-glutámico----mDAP----D-alanina).

HANS CHRISTIAN GRAM

PROCEDIMIENTO
PARED CELULAR BACTERIANA
 PARED CELULAR BACTERIANA
CARACTERÍSTICAS GRAM-POSITIVAS GRAN-NEGATIVAS
Tinción de Gram Retienen el cristal violeta y se tiñen de morado Se decoloran. Toman el colorante de contraste
Capa de péptido glucano Gruesa (varias capas) Delgada (una capa).
Contenido en lipopolisacáridos (LPS) Virtualmente ninguna Alta
Contenido en lípidos y lipoproteína Bajo (las bacterias ácido-alcohol resistentes tienen Alto (debido a la presencia de membrana externa).
lípidos unidos al péptido glucano)
Acidos teicoicos Presentes en muchas de ellas Ausentes
Espacio periplásmico Ausente Presente
Membrana externa Ausente Presente
Estructura de los flagelos 2 anillos en el cuerpo basal 4 anillos en el cuerpo basal
Producción de toxinas Principalmente exotoxinas Principalmente endotoxinas
Resistencia a la rotura física Alta Baja
Sensibilidad de la pared celular a la lisozima Alta Baja (tratamiento previo)
Marcada Mucho menos marcada

SENSIBILIDAD A PENICILINA Y SULFAMIDAS

Sensible: estreptomicina, cloranfenicol, tetraciclinas Mucho menos marcada Marcada.
Inhibición por colorantes básicos Marcada Mucho menos marcada
Sensibilidad a detergentes aniónicos Marcada Mucho menos marcada
Resistencia a la azida sódica Marcada Mucho menos marcada
Resistencia a la desecación Alta Baja.
 PARED CELULAR BACTERIANA
 Polímeros de ribitol o glicerol fosfato Ác. Teicoico (glicerol) Ác. Teicoico (ribitol)
 Son antigénicos
Ác. Teicoicos  Controlan la entrada y salida de cationes
 Almacenan fosforo
 Intervienen en el crecimiento celular.
Ác. Teicurónicos Polisacáridos conteniendo ácido urónico (N-acetil-
galactosamina y ácido D-glucorónico). Ej. B. subtilis en
medio pobre de fosfatos.
Ác. Lipoteicoicos Asociados a la proteína M de Streptococcus pyogenes

Polisacáridos Importantes en la clasificación de estreptocos y

estafilococos (grupos A, B, C, etc).
Ác. Lipoteicoico

S. epidermidis S. aureus S. pyogenes

B. subtilis
 PARED CELULAR BACTERIANA

IMPORTANCIA DE LA PC

 Esencial en la interacción bacteria-huésped

 Barrera contra compuestos hidrofóbicos
 El lípido A otorga menor fluidez y mayor resistencia
 Estabilización de MC por interacción con Mg2+
 Endotoxina
 Antígeno O
 PARED CELULAR BACTERIANA
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

© Susceptible: colorantes básicos, detergentes aniónicos y © Resistentes: colorantes básicos, detergentes aniónicos y
catiónicos, fenol, sulfamidas, etc. catiónicos, fenol, sulfamidas, etc.
© Resistente: sustancias ácidas, agentes oxidantes, © Susceptibles: ácidos, agentes oxidantes, estreptomicina y
estreptomicina y teluritas. telurito.
© Resistentes: enzimas proteolíticas, acción lítica de alcalinos © Susceptibles: a enzima proteolíticas, acción lítica de alcalinos.
© Susceptibles: acción lítica lisozima © Resistentes: acción lítica lisozima.
© Resistentes: acción lítica de anticuerpo y complemento © Susceptibilidad lítica: anticuerpos y complemento.
© Elevada: estabilidad mecánica © Escasa: estabilidad mecánica
© Ausentes: LPS en pared celular © Presentes: LPS en pared celular
© Presentes: ác. teicoicos, ác. teicurónicos y ác. lipoteicoicos © Ausentes: ácidos teicoicos, ác. teicurónicos y ác. Lipoteicoicos
 PARED CELULAR: MYCOBACTERIAS
La P.C esqueleto formado por dos polímeros :
a) Peptidoglucano: (N-glucolil murámico en lugar del NAM)
b) Un arabinogalactano ( PM).
* Acidos micólicos
* Glucolípidos :
a) micolatos de trehalosa (factor de cordon)
b) Sulfolípidos de trehalosa
c) micósidos
* Ceras : unión de ác. Micólicos con ftioceroles.

© Su ácido alcohol resistencia

© Crecimiento lento
PROPIEDADES © Resistencia a detergentes
© Resistencia a antibacterianos comunes
© Antigenecidad
 ARCHEAS: PSEUDOMUREINA

Los miembros de las Archaea no son patógenos de humanos y no se discutirán

 MEMBRANA CELULAR
FUNCIONES
 Barrera osmótica
 Límite metabólicamente activo de la célula: establece la
frontera entre el protoplasto y el medio externo, impidiendo la
pérdida de metabolitos y macromoléculas del protoplasto.
 Selectividad amente el paso de sustancias entre el exterior y el
interior (y viceversa).
 Bioenergética (fotosíntesis, respiración)
 Biosíntesis de componentes de membrana, de pared y de
cápsulas,
 Secreción de proteínas.

FUNCIONES DE LOS MESOSOMAS

 Transporte de electrones, síntesis de componentes de las envueltas.
 Probable papel en la síntesis del septo transversal, en la división celular
 Puntos de anclaje del cromosoma bacteriano y su segregación
 Zonas de secreción de ciertas exoenzimas (ej. penicilinasa en Bacillus).
 Interviene en la formación de la pared celular durante la división celular
 CITOPLASMA
 Gel compuesto por 70% agua Oscillatoria spp.
 Carece de citoesqueleto
 Carece de organelos membranosos
 Aspecto granular homogéneo
– Ribosomas Poly-ß-hydroxybutyrate (PHB) Gránulos de cianoficina
– Cuerpos de inclusión
Magnetosomas Vesículas formadas por dos
* Ribosomas: 70S proteínas: GvpA y GvpC. Estas
vesículas permiten a los
* Inclusiones: microorganismos flotar en los
sistemas acuáticos. Las
1. Inclusiones orgánicas: producen las cianobacterias, las
bacterias foto tróficas verdes y
a) inclusiones polisacarídicas Gránulos de glucógeno
purpura, y algunas arqueo
Corynebacterium spp bacterias.
b) gránulos : p-ß-OHbutírico
c) inclusiones de hidrocarburos
d) gránulos de cianoficina
2. Inclusiones inorgánicas:
a) gránulos de polifosfato
Gránulos de azufre
b) glóbulos de azufre. Gránulos metacromáticos
Thiomargarita namibiensis
 CROMOSOMA BACTERIANO

DNA: circular, cerrado (excepto Borrelia que forma

bucles, Streptomyces que posee un cromosoma lineal) y
único. Sin histonas.

Nucleoides : 60% de ADN, 30% de ARN y 10% de proteínas.

Funciones:
 Expresión de las características genética
 Mecanismos de transferencia genética
 División bacteriana
 Síntesis proteica.

Tamaño: Ejm. Escherichia coli (4.700 kb). Rangos entre 700

kb de Mycoplasma genitalium (una bacteria carente de
pared y parásita) y las más de 12.000 kb (cianobacterias,
actinomicetos).
 CROMOSOMA BACTERIANO
PROPIEDADES DE LOS PLÁSMIDOS
I. PLASMIDOS
© Resistencia a antibióticos (plásmidos R).
Características: © Resistencia a metales pesados
© Plásmidos de virulencia: producción de toxinas,
 DNA circular y cerrado factores de diseminación, adherencia a tejidos, etc.
 De 1000 a 25,000 pb © Producción de bacteriocinas
 Autorreplicables © Producción de sideróforos.
 Transmisión hereditaria (no obligado)
 Transmisión interbacteriana (pilis sexuales) TIPOS DE PLÁSMIDOS
 Posibilidades de encontrar:  Sexuales
© 0 plásmido por célula  Resistencia (a antimicrobianos)
© 1 plásmido por célula  Determinantes de factores patogénicos (toxinas,
© 2 ó más plásmido iguales por célula cápsula)
© 2 ó más plásmidos  por célula  Codificadores de funciones metabólicas
 Factores COL: síntesis de bacteriocinas (antibiótico)
CROMOSOMA Y PLÁSMIDO BACTERIANO
 FLAGELOS Y FIMBRIAS

1. FLAGELOS: El antígeno flagelar se conoce como antígeno H. Composición

proteica. Tamaño es de unos 20 nm de diámetro y de entre 5 y 20 µm de
longitud. Proteínas MOT: provocan la rotación flagelar.
2. FIMBRIAS: Pequeñas fibras proteicas. Su número varía entre 100 y 1000 por
bacteria. Tamaño: 2 a 9 nm de diámetro/1 a 5 µm de longitud. Gran importancia
en la adhesión
3. PELO F: Es un tipo especial de fimbria producido por bacterias capaces de
transmitir su información genética a otras mediante conjugación bacteriana.
4. PROLONGACIONES DE ADHESIÓN: Algunos tipos de microorganismos son
portadores de prolongaciones con forma de ventosa que les permiten adherirse
a las células animales que infectan. Esto ocurre, por ejemplo, en ciertos
micoplasmas.
 FLAGELOS
1. Monotrichous: un sólo flagelo, usualmente en un polo.
2. Amphitrichous: dos penachos de flagelos en los dos polos.
3. Lophotrichous: dos o más flagelos en uno o ambos polos (S.volutans)
4. Peritrichous: flagelos alrededor del cuerpo bacteriano.
 ESPORAS
 Se encuentra en algunas bacterias Gram + (Bacillus y
Clostridium)
 Son estructuras muy resistentes al calor, la
desecación, la radiación, a ácidos y desinfectantes.
 Se diferencia de la célula vegetativa en el número de
capas que la rodean.
 Presenta ausencia de actividad metabólica
(criptobiosis).

Diámetro de la espora
 Esporas deformantes
 Esporas no deformantes Espora de Bacillus megaterium . Cubierta de espora (SC), extremo germinativo (G) capa externa del
cortex: (OCL) cortex: (Cx) pared celular (GCW), membrana plasmática (PM), y nucleoid (n)
Localización de la espora dentro del esporangio
PROPIEDADES:
 Terminal
 Subterminal © No presentan actividad metabólica
 Central © Gran resistencia al efecto del calor
© Gran resistencia al efecto de las radiaciones
© Gran resistencia al efecto de los productos químicos
 BACILOS FORMADORES DE ESPORAS

Bacillus cereus Bacillus subtilis Bacillus anthracis

Bacillus thurigiensis
Clostridium botulinum Clostridium tetani
 ESPORAS
CARACTERÍSTICA CÉLULA VEGETATIVA ENDOESPORA
Contenido de Calcio bajo alto
Ac. dipiconílico ausente presente
Pequeñas proteínas solubles en ácido ausentes presentes
Contenido de agua 80-90% 10-25%
pH citoplasma 7 5.5-6
Actividad enzimática elevada baja
Metabolismo elevado Bajo o ausente
Resistencia: calor, radiación, compuestos químicos baja elevada
Sensibilidad lisozima Sensible Resistente

GERMINACIÓN DE ESPORA BACTERIANA

Hay dos cosas infinitas:

“El Universo y la estupidez humana. Y del Universo no

estoy seguro”
Albert Einstein
 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

BACTERIAS ÁCIDAS LÁCTICAS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 INTRODUCCIÓN
1990 ELLIE METCHNIKOFF: postuló que las bacterias
BACTERIAS ÁCIDAS LÁCTICAS O BAL ácido lácticas (BAL) conferían beneficios a la salud
capaces de promover la longevidad. Propuso que la
“autointoxicación intestinal” y el envejecimiento
BAL: Son un grupo de microorganismos representados por varios géneros resultante podrían suprimirse modificando la flora
con características, morfológicas, fisiológicas y metabólicas en común. intestinal y reemplazando los microbios proteolíticos
que producen sustancias tóxicas.
1857 PASTEUR, descubrió a los microorganismos que causaban alteración
en los alimentos (fermentación láctica, butírica y butírica) y los llamó:
LACTOBACTERIAS

1890 WEIGMA, estableció el primer cultivo iniciador. En 1899 definió a los

BAL como aquellas bacterias que formaban leche ácida a partir del azúcar
de la leche.

1919 ORLA JENSEN, estableció los criterios de taxonomía de los BAL

basados en la morfología y fisiología describiéndolos como cocos y
bacilos.
 BACILOS ÁCIDOS LÁCTICOS O BAL
1917, ALFRED NISSLE: aisló una cepa no patógena de Escherichia coli a CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS BAL
partir de heces de un soldado de la Primera Guerra Mundial que no había  Cocos o bacilos
desarrollado enterocolitis durante un brote severo de shigellosis.  Gram positivos
 No esporulados
HENRY TISSIER: El primero en aislar una bífidobacteria quien la obtuvo  No móviles
de un lactante alimentado a pecho, y le dio el nombre de bacteria  Anaeróbicos, microaerófilos o aerotolerantes
Bacillus bifidus communis.  Oxidasa, catalasa negativas
 Ausencia de citocromos
 No reducen nitratos a nitritos
1965 LILLY Y STILLWELL: introducen el término “PROBIÓTICO”.
 Producen ácido láctico (producto principal)
 Ácidos tolerantes
 Amplia distribución
Funciones básicas de los microorganismos en el
organismo:
Metabólicas
Barreras
Interacción con el huésped.
Microbiota inicial: Bifidobacterium y Lactobacillus
CRITERIOS DE EVALUACIÓN DE UN PROBIÓTICO BACTERIAS POTENCIALMENTE PROBIÓTICAS
Según Castro y De Rovetto (2006): GRUPO INTEGRADO POR:
 Formar parte de la microbiota del intestino humano
 No ser patógeno ni toxigénico LACTOBACILLUS
 Mantenerse viable en medio ácido del estómago y en LACTOCOCCUS
contacto con la bilis LEUCONOSTOC
 Capacidad de adhesión en el epitelio intestinal
PEDIOCOCCUS
 Adaptarse a la microbiota nativa sin desplazarla
 Producir sustancias antimicrobianas AEROCOCCUS
 Capacidad para aumentar de forma positiva las funciones BIFIDOBACTERIUM
metabólicas e inmunológicas WEISELLA
 Producción de sustancias antimicrobianas (ácido láctico,
peróxido de hidrogeno, diacetilo y bacteriocinas).
LACTOBACILLUS ES EL GÉNERO QUE PRESENTA MAYOR
 Disminución del pH intestinal favoreciendo el crecimiento
de M.O beneficiosos. CANTIDAD DE ESPECIES CON CARACTERÍSTICAS
 Aumento a la resistencia de colonización por competencia PROBIÓTICAS Y PROPIEDADES BENÉFICAS PARA LA
con los patógenos. SALUD.
 Competición por nutrientes
 Estimulación de la respuesta inmune.
 BACTERIAS ÁCIDO-LÁCTICAS USADAS COMO PROBIÓTICOS
PRINCIPALES GÉNEROS DE M.O PROBIÓTICOS Y POSIBLE EFECTOS SALUD EN CONSUMIDORES

LACTOBACILLUS STREPTOCOCCUS GÉNERO EFECTOS

L. acidophilus S. cremoris Lactobacillus No patógenos. Algunas cepas oportunistas en personas
L. delbrueckii subsp S. salivarius subsp inmunodeprimidas.
bulgaricus thermophilus Lactococcus En ningún caso son patógenos
L. brevis S. faecium Streptococcus Sólo Streptococcus thermophilus se utiliza en productos
L. cellobiosus S. diacetylactis lácteos.
L. curvatus S. intermedius Enterococcus Oportunistas. Algunas cepas resistentes a antibióticos.
L. casei BIFIDOBACTERIUM Bacillus Sólo a Bacillus subtilis se le reconoce como organismos
GRAS (Generally Recognized As Safe = generalmente
L. fermentum B. bifidum reconocido como seguro). Uso como probiótico.
L. lactis B. adolescentis
Bifidobacterium Algunas cepas se han aislado a partir de procesos
L. plantarum B. animalis infecciosos.
L. reuteri B. infantis Saccharomyces En ningún caso son patógenos. Algunas cepas han sido
B. thermophilum aislados de procesos infecciosos.
 PRINCIPALES EFECTOS BENEFICIOSOS DE LAS CEPAS PRINCIPALES DE PROBIÓTICOS

CEPA EFECTOS BENEFICIOSOS

Lactobacillus acidophilus Adherencia epitelio intestinal humano
Equilibrio de la microbiota intestinal
Mejora respuesta inmune
Lactobacillus rhamnosus Prevención de la diarrea asociada a antibióticos
Tratamiento de la diarrea por rotavirus
Tratamiento de la diarrea causada por C. difficile
Mejoras en la enfermedad de Crohn
Lactobacillus casei Shirota Prevención de alteración microbiota intestinal
Prevención de cáncer de vejiga.
Lactobacillus gasseri Reducción de enzimas carcinógenos
Bacillus subtilis Utilización en la bacterioterapia oral
Restauración de la microbiota normal
Inmunoestimulación
Bifidobacterium bifidum Prevención de la diarrea viral
Propionibacterium Crecimiento y estimulación de otras bacterias
freudenreichii beneficiosas.
 PRINCIPALES EFECTOS BENEFICIOSOS DE LAS CEPAS PRINCIPALES DE PROBIÓTICOS

APLICACIONES EN SALUD APLICACIONES EN LA INDUSTRIA

Actividad frente a enfermedades inflamatorias  L. bulgaricus: elaboración de Yoghurt.

gastrointestinales  L. jughurti: también se usa en la elaboración de Yoghurt,
Prevención y tratamiento de diarreas pero es mas acidificante.
 L. helveticus: madurador de quesos suizos (Gruyere,
Actividad contra Helicobacter pylori
Ementhal).
Reducción del riesgo de padecer cáncer de colon  L. lactis: madurador de quesos duros.
 L. acidophilus: habitante normal del intestino humano, se
Actuación frente infección del tracto genitourinario
usa en productos para restablecer la flora intestinal
Efecto protector y estimulación del sistema inmune (Bioghur).
Reducción de la intolerancia a la lactosa  L. delbrueckii: fabricación industrial de ácido láctico.
 L. casei: madurador de quesos duros.
Actuación frente a hipertensión  L. plantarum: asociado a los vegetales, participa en la
Aplicación frente a alergias fermentación de silos
 ALIMENTOS PREBIÓTICOS Y PROBIÓTICOS
PREBIÓTICOS: Ingredientes fermentados selectivamente Los prebióticos son sustancias de la dieta (fundamentalmente
que dan lugar a cambios específicos en la composición consistentes en polisacáridos no almidón y oligosacáridos no
y/o actividad de la flora gastrointestinal, confiriendo así digeribles por enzimas humanas) que nutren a grupos seleccionados
beneficios a la salud del huésped. de microorganismos que habitan en el intestino. Favorecen el
crecimiento de bacterias beneficiosas por sobre las nocivas.
PROBIÓTICOS: Microorganismos vivos que confieren un
 Oligofructosa
beneficio a la salud del huésped cuando se los
 Inulina
administra en cantidades adecuadas.
 Galacto-oligosacáridos
SIMBIÓTICOS: Productos que contienen tanto probióticos  Lactulosa
como prebióticos.  Oligosacáridos de la leche materna
 GÉNERO: LACTOBACILLUS

Los Lactobacilos homofermentativos producen ácido

láctico. Este grupo está integrado por Lactobacillus
caucasicus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus lactis,
Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus delbrueckii.
Los Lactobacilos heterofermentativos producen además
de ácido láctico, CO2, etanol y otro productos volátiles;
ejem: Lactobacillus fermenti, capaz además, de dar buen
crecimiento a temperaturas elevadas (45ºC).
Son normalmente no mótiles, aunque también pueden
serlo (flagelación perítrica).
Rara vez producen pigmentos, aunque unas pocas
especies los producen de color amarillo, naranja, rojo o
pardo.
 GÉNERO: LACTOBACILLUS
ESQUEMA GENERAL DE LA FERMENTACIÓN LÁCTICA

COCOS BACILOS
HOMOFERMENTATIVAS: Ácido láctico (85%), ácido fórmico, ácido acético, alcohol
Streptococcus lactis, S. salivarius, S. Termobacterias (40°C) No crecen a 15°C
pyogenes, S. cremoris, S. thermophilus, S. Lactobacillus lactis, L. helveticus, L. acidophilus,
diacetilactis. L. bulgaricus, L. delbruckii
Pediococcus cerevisiae Estreptobacterias (30-37°C). Crecen a 15°c
Lactobacillus casei, L. plantarum, L. inulinus
HETEROFERMENTATIVAS: Ácido láctico, ácido acético, alcohol, CO2
Leuconostoc mesenteroides, L. citrovorum Lactobacillus brevis, L. fermenti, L. viridescens,
Bifidobacterium bifidum
 GÉNERO: LACTOBACILLUS
ESQUEMA BIOQUÍMICO DE LA FERMENTACIÓN LÁCTICA
 GÉNERO: LACTOBACILLUS

El género Lactobacillus (lactis-leche; bacillus-pequeños bacilos) se

caracteriza por presentar células en forma de bacilos largos y
extendidos, aunque con frecuencia pueden observarse bacilos
cortos o coco-bacilos coryneformes.
No esporulan y algunas cepas presentan cuerpos bipolares que
probablemente contengan polifosfato.
Los grandes bacilos homofermentativos presentan gránulos
internos revelados por tinción de Gram o por tinción con azul de
metileno.
Pared celular: Gram positiva (contiene peptidoglicano: del tipo
Lisina-D-Asparagina sea el más ampliamente distribuido, pero solo
presenta ácido teicoicos).

Lactobacillus casei
 GÉNERO: LACTOBACILLUS

LACTOBACILOS HOMOFERMENTATIVOS
CARACTERÍSTICAS OBLIGADOS:
CULTURALES LACTOBACILOS HETEROFERMENTATIVOS OBLIGADOS
Colonias
Fermentan las hexosas casideexclusivamente
Lactobacillus: son pequeñas
a ácido láctico(2-5
por mm), convexas,
Carecen suaves,principales
de enzimas con márgenesde laenteros,
vía FDP.opacas y sin de la glucosa
Degradación
pigmentos.noSólo
la vía Embden-Meyerhoff; en algunos
fermentan lascasos presentan
pentosas ni elcoloración amarillenta
se efectúa o rojiza.por la vía de la PENTOSAFOSFATO. Entre estas
exclusivamente
Algunas
gluconato. Entre estas especies
especies colonias rugosas.
y subespecies se encuentran: Lactobacillus
Otras, comoespecies confusus,secolonias
y subespecies viscosas por excepción.
encuentran:
Generalmente no presentan actividad proteolítica ni lipolítica que pueda apreciarse mediante halos
claros
L. delbrueckii subsp. formadosL. en
delbrueckii, medios sólidos
delbrueckii subsp.que contengan
lactis, proteínas obifermentans,
Lactobacillus grasas. Lactobacillus brevis,
Normalmente
L. delbrueckii subsp. bulgaricus, no reducen los nitratos, pero estaLactobacillus
L. acidophilus, reacción puede ocurrir en algunos casos,Lactobacillus
buchneri, cuando el pHcollinoides,
está por encima
Lactobacillus amylophilus, de 6,0.amylovorus,
Lactobacillus Lactobacillus confusus, Lactobacillus divergens,
No producen
Lactobacillus animalis, indol nicrispatus,
Lactobacillus ácido sulfídrico (H2S). Lactobacillus fermentum, Lactobacillus fructivorans,
Son catalasa
Lactobacillus farciminis, negativos,
Lactobacillus pero algunas cepas producen
gasseri, la enzima
Lactobacillus pseudocatalasa que descompone
fructosus, Lactobacilluselhalotolerans,
peróxidoLactobacillus
Lactobacillus helveticus, de hidrógeno. jensenii, Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus kandleri,
Son citocromo
Lactobacillus ruminis, negativos, por la ausencia de porfirinas;
L. salivarius, presentan
Lactobacillus kefir,una reacción bencidina negativa.
Lactobacillus minor,
Crecimiento
Lactobacillus sharpeae, en medio
Lactobacillus líquido: sus células precipitan
vitulinus rápidamente
Lactobacillus después que el crecimiento
reuteri, cesa.
Lactobacillus sanfrancisco,
No desarrollan olores típicos al crecer en medios
Lactobacillus yamanashiensis. comunes,vaccinostercus
Lactobacillus pero contribuyeny a modificar el sabor deviridescens.
Lactobacillus
alimentos fermentados (compuestos volátiles como diacetilo y sus derivados y H2S y aminas en el queso.
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
TINCIÓN GRAM: leche fermentada, secreción o hisopado vaginal, hisopado bucal, heces de
neonato, plantas en descomposición….

CULTIVO: Cultivo de pre-aislamiento: en caldo MRS

Cultivo de aislamiento: agar MRS

PRUEBAS DE IDENTIDAD.

Pruebas fisiológicas: cultivo en caldo a concentraciones diferentes de NaCl y crecimiento

a diferentes temperaturas.

Pruebas bioquímicas: crecimiento a pH 3.9

Pruebas moleculares: basadas en secuencias de ADN ribosomal, para identificar las

bacterias aisladas de su ambiente natural, como PCR (bacterias probióticas).
 “Hace dos mil años vine como
cordero, pronto vendré como León”

MUCHAS GRACIAS
 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

ESTREPTOCOCOS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 ESTREPTOCOCOS
GENERALIDADES GÉNERO: STREPTOCOCCUS

La familia Streptococcaceae posee, otros dos géneros Cocos gram positivos: forman cadenas o por
sin importancia médica. pares
La familia Enterococcaceae tiene seis géneros que Catalasa negativos
carecen de importancia médica. Inmóviles
Las familias Streptococcaceae y Enterococcaceae han No forman esporas
sido encuadradas en el Volumen III de la segunda Anaerobios facultativos (y capnofílicos) y
edición del Manual Bergey de Bacteriología Sistemática, anaerobios estrictos.
en el partado de "Bacterias Gram positivas con bajo Temperatura de crecimiento: 35–37°C
porcentaje de contenido en G+C", perteneciendo al
Phylum Firmicutes, clase Bacilli, orden Lactobacillales. pH: 7-7,6
 ESTREPTOCOCOS
GÉNERO STREPCOCOCCUS
El género Streptococcus se divide en 49 especies y 8 subespecies de las
cuales 35 han sido relacionadas con algún tipo de infección en humanos.
Las más importantes son:
© Streptococcus pyogenes: amigdalitis, impétigo, fiebre reumática aguda,
fiebre escarlata, glomerulonefritis aguda y fascitis necrotizante.
© Streptococcus pneumoniae (el neumococo): neumonía y también otitis y
meningitis.
© Streptococcus agalactiae: meningitis en neonatos y trastornos del (1895-1981)
embarazo en la mujer.
Rebecca Craighill Lancefield
© Streptococcus viridans: endocarditis y abscesos dentales.
© Streptococcus mutans: caries dental y endocarditis.
CRITERIOS DE CLASIFICACIÓN:
 Grupos de Lancefield,
 Patrones de hemólisis
 Virulencia
 Pruebas bioquímicas carbohidrato C 21 grupo
 Pruebas moleculares A – U (A, B, C, D y G)
ESTREPTOCOCOS

Como una muestra de la importancia actual de los estreptococos en la salud humana te doy un par
de datos: según la OMS, 1,2 millones de niños menores de 5 años mueren cada año por neumonía,
siendo la primera causa Streptococcus pneumoniae; se calculan que unas 700 millones de personas
pueden estar infectados por Streptococcus pyogenes, de las cuales 500.000 mueren cada año
 ESTREPTOCOCOS
HOSPEDEROS NATURALES

Grupo A Grupo B

 Portadores  Flora normal

 TGI, vagina

Grupo C y G
Grupo D
 Flora normal TRS
 Flora normal piel
cerdos, vacas, caballos
 TRS, TGI, TGU

S. pneumoniae  Nasofaringe, portadores

E. fecalis  Flora normal

Grupo viridans  Flora normal
S. pyogenes: estructura antigénica y factores de virulencia
 S. pyogenes: Factores de virulencia

FACTOR DE VIRULENCIA ACTIVIDAD

Cápsula (Polímero de ácido glucurónico No inmunogénica. Asociada a proteína M: antifagocitica, inhibe el
y N-acetilglucosamina complemento. Los grupos A y C poseen cápsula de ácido hialurónico.
Estreptolisinas O y S Estreptolisina O: estimula la producción de anticuerpos (pruebas de
ASO). Lisis de eritrocitos. Oxígeno lábil. Cepas: A, B, C, F y G.
Estreptolinina S: no genera anticuerpos, y tiene actividad de lisina
sobre todas las células sanguíneas. Oxígeno no lábil.
Ácidos teicoicos Favorece la adherencia
Estreptoquinasa Toxina enzimática que activa el plasminógeno, enzima proteolítica que
degrada la fibrina y lisa coágulos.
Toxina eritrogénica (A, B y C) Escarlatina (responsable del exantema).
Estreptodornasa Toxina enzimática que tiene acción sobre ADN (despolimerización).
 S. pyogenes: Factores de virulencia

FACTOR DE VIRULENCIA ACTIVIDAD

Dnasa (A – D) No citolíticas, pero despolimeriza el ADN libre presente en el pus.
Exotoxina SpeA Asociada al shock séptico
Exotoxinas SpeB y SpeC Superantígenos asociados a la erisipela.
Hialuronidasa Toxina enzimática que actúa como factor de propagación por el tejido
conectivo.
Proteína M (cepas virulentas) Factor antifagocítico y marcador epidemiológico. Principal factor
antifagocítico. CEPAS: M1, M3 y M18, (enfermedad invasiva grave). CEPAS: M3,
M18 y M30 (Fiebre reumática).
Proteína T (resistente a la tripsina) Marcador epidemiológico.
Proteína F Receptor, se une a fibronectina.
PATOGENIA Y CLÍNICA FARINGOAMIGDALITIS
Fiebre, cefalea, malestar general, escalofríos,
leucocitosis, adenopatías, amigdalitis, exudación serosa
y grisácea, con frecuencia dolor abdominal, náuseas y
vómitos.
 PATOGENIA Y CLÍNICA
FARINGOAMIGDALITIS IMPÉTIGO SUPERFICIAL

IMPÉTIGO: es una infección cutánea superficial, caracterizada por la aparición

de vesículas, de 1-2 mm, que rápidamente evolucionan a costras de color
ambarino, pruriginosas y acompañadas de adenopatías satélites.
 PATOGENIA Y CLÍNICA
ERISIPELA ESCARLATINA

Lesiones a nivel de piel en brazos y piernas de una mujer con fiebre escarlatina. El
sarpullido aparece primero como pequeñas ulceraciones rojas en el pecho y abdomen,
luego se disemina por todo el cuerpo. La lesión asemeja una quemadura solar y al
tacto parece un pedazo áspero de papel de lija. Usualmente es más rojo en las áreas
axilares e ingle.
 PATOGENIA Y CLÍNICA
FASCITIS NECROTIZANTE (gangrena estreptocócica). Es una infección de las fascias y tejidos subcutáneos profundos,
caracterizada por una necrosis rápida y extensa. La inflamación se extiende y se intensifica, la piel se oscurece y se torna púrpura, y
aparecen bullas de contenido hemorrágico.
 PATOGENIA Y CLÍNICA
FIEBRE REUMÁTICA (FR). Es una enfermedad El DIAGNÓSTICO se hace si hay 2 criterios mayores o 1 mayor + 2 menores,
caracterizada por producir lesiones inflamatorias no junto con alguna evidencia de infección estreptocócica, tal como elevación
de las ASO o antecedente de escarlatina.
supuradas que involucran el corazón, tejidos subcutáneos y
el sistema nervioso central. Es multisistémica y se presenta EVIDENCIAS DE INFECCIÓN ESTREPTOCÓCICA
con poliartritis.
 ASO elevado (otros anticuerpos estreptocócicos elevados)
Cepas implicadas: M3, M18 y M30 (Ocasionalmente M5)  Cultivo faríngeo positivo
 Prueba antigénica rápida
CRITERIOS DE JONES: FIEBRE REUMÁTICA  Escarlatina reciente
CRITERIOS MAYORES CRITERIOS MENORES
Artritis Fiebre
Carditis Artralgias GLOMERULONEFRITIS (Enfermedad de Bright):
Pericarditis Anorexia
Miocarditis Epistaxis Cepas implicadas: 12 (inf. Faríngeas); 49 (inf. a la piel).
Endocarditis Malestar general
Otras cepas nefritógenas : 1, 2, 3, 4, 6, 18, 25, 50 y 60.
Corea Taquicardia
Nódulos subcutáneos Pruebas de laboratorio: reactantes de Cuadro clínico: palidez y edema de la cara, hematuria y
Eritema marginado fase aguda (Proiteína C reactiva, VES
Poliartritis migratoria elevada, leucocitosis). Anticuerpos
proteinuria, hipertensión, cefalea, rara vez convulsiones.
contra ASO
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Faringitis: se Dx con datos clínicos y de laboratorio (cultivo y

serología).
Prueba de Acs Fluorescentes: identificar estreptococos en
sangre, LCR y pus de fuentes internas.
Dx de secuelas como GN y FRA: depende de la clínica. No hay
participación directa de organismos vivos. Cultivo de
garganta válido para portadores.
Serología: Prueba del ASO (titulación de antiestreptolisina
O), confirma o excluye la posibilidad de una infección
estreptocócica de vías respiratorias superiores. Los títulos
de ASO no se elevan por el hecho de ser portador.
 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE
Colonizan: TR, TGI bajo y la vagina (30 a 40 % en
embarazadas: serotipos I, II, III). Cepa III es la principal
implicada en infecciones a la mujer y neonato.
INFECCIONES más comúnmente implican recién nacidos y
lactantes, a menudo precedidos por la ruptura prematura de
membranas de la madre.
Enfermedades: meningitis neonatal, bacteriemia, neumonía y
S. pyogenes S. agalactiae
fiebre puerperal.
Transmisión: madre a hijo por el canal del parto, rotura
prematura de membranas, parto prolongado, enfermedad
materna diseminada, etc.
Enfermedad neonatal de comienzo precoz (7 días del
nacimineto) o tardío ( 7 días del nacimineto) :
Síndrome clínico: bacteriemia, neumonitis o meningitis. Es
indistinguible de la sepsis provocada por otros m.o
Infecciones en adultos: bacteriemia, neumonía, infecciones
óseas, articulares, cutáneas y tejidos blandos
 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE
incuba en un frasco de vela, en una atmósfera de CO 2 o en condiciones anaeróbicas. Por lo tanto,
La prueba CAMP es eficaz para la identificación "rápida y fiable" de Streptococcus agalactiae en el laboratorio
Algunos estreptococos del grupo A darán positivo en la prueba CAMP si la placa de prueba se

clínico, ya que los resultados se pueden observar en tan solo 18 horas y requieren pocas manipulaciones. La prueba
CAMP rara vez da falsos positivos con otros Streptococcus. Este fenómeno hemolítico fue descrito por primera vez en
1944 por Christie, Atkins y Munch-Petersen , y la prueba CAMP es un acrónimo de sus nombres.

S. aureus
S. agalactiae S. aureus

S. agalactiae
se debe utilizar la incubación al aire. ambiente.
Limitación de la prueba CAMP

S. pyogenes
El área de hemólisis aumentada ocurre donde la beta hemolisina secretada por Staphylococcus y el
factor CAMP secretado por Streptococcus del grupo B se cruzan (Ver figura).
 GRUPO STREPTOCOCCUS MUTANS
El término “estreptococos mutans” es un apelativo que denomina en realidad a un grupo de bacterias con
diversidad genética, antigénica y bioquímica, aunque comparten ciertos rasgos fenotípicos como la
fermentación de manitol y sorbitol, la producción de glucanos extracelulares a partir de sacarosa,
ciertos morfotipos coloniales al ser cultivados en agar con sacarosa y la inducción de caries a partir del
consumo de carbohidratos (sobre todo sacarosa) por parte del huésped.
ESTRUCTURA DEL GRUPO STREPTOCOCCUS
PARED CELULAR: CÁPSULA: compuesta por ácido hialurónico o
Mureína polisacáridos.
Ácidos teicoicos (antigénicos) y lipoteicoicos (adhesión) GLICOCÁLIX: constituido por glucanos y fructanos muy
Carbohidratos parietales: antigénicos, adhesión, agregación y importantes para la adhesión especialmente en la
coagregación bacteriana. formación de placa dentobacteriana.
Proteínas parietales:
El grupo de los MS incluye a las siguientes especies:
Carácter antigénico,
Acción enzimática como glucosil y fructosiltransferasas, S. mutans, S. sobrinus, S. cricetus, S. rattus,
Adhesinas, también actúan como S. downei, S. macacae y S. ferus
Fijadores de la película adquirida y S. mutans es la especie más estrechamente vinculada con
Como receptores de glucanos. la caries dental.
 STREPTOCOCCUS MUTANS
FACTORES DE VIRULENCIA
Acidogenicidad: fermenta los azúcares de la dieta
y produce principalmente ácido láctico como
producto final del metabolismo (pH bajo y
desmineraliza el esmalte).
Aciduricidad: capacidad para producir ácido en un
medio pH bajo.
Acidofilicidad: Puede resistir la acidez del medio.
Producen dextranasas y fructanasas. Metabolizan
polisacáridos extracelulares.
Corto efecto post-pH: requiere de poco tiempo para
recuperar su actividad de crecimiento habitual
tras ser sometido a un pH bajo.
 STREPTOCOCCUS MUTANS
CULTIVO (M+) Tubo con Melobiosa luego de la adición de rojo
fenol. (R+) Tubo con Rafinosa luego de la adición de
Para el cultivo de MS se suele utilizar el medio MSB (mitis salivarius bacitracina), rojo fenol. (E+) Tubo con Esculina luego de la adición
selectivo para S. mutans, S. sobrinus y S. rattus.
de citrato férrico amoniacal.
MSKB: modificación del MSB que presenta mayor selectividad. Uso: manejo de
muestras clínicas.
MS-MUT: medio de cultivo que se ha desarrollado para el aislamiento de S. mutans,
es una modificación del MSB; presenta una mayor selectividad frente a S. sobrinus
y no ha sido comparado en otros estudios fuera del citado.
Cepa de referencia S. mutans ATCC 25175: para la recuperación de esta cepa se
utiliza Infusión Cerebro Corazón o agar BHI.
 Streptococcus pneumoniae

Gram positivo
Anaerobio facultativo
Hemólisis viridans
Disposición en pares, lanceolado
Capsulado, 90 serotipos capsulares
Cápsula: polisacárida
La inmunidad es dependiente del serotipo

RESERVORIO: flora saprófita nasofaríngea

– Nasofaríngea: 74%
– Orofaríngea: 38%
– Simultánea: 37%
• Portadores infantiles: > 80%
• Portadores senescentes: 7%
TRANSMISIÓN: Gotitas de Pflüge, Tos, Estornudos,
Secreciones respiratorias
 Streptococcus pneumoniae: Patogenia
80% de casos de neumonías son producidas por Streptococcus
pneumoniae. INFECCIONES MENORES O CANALICULARES:
– Otitis media aguda
90 serotipos 8, 4, 3, 14, 7, 12, 9, 1, 18, 19, 6 y 23
– sinusitis
Serotipos patógenos: tipos 1 al 8 (75% de las neumonías por
neumococos) tipos 3 y 8 los más virulentos. INFECCIONES INVASORAS: – Neumonía
– Meningitis
Serotipos 6, 14 19 y 23: neumonías en niños.
– Septicemia
FACTORES PREDISPONENTES
* Sarampión * Fatiga,
* Infección virus respiratorios * Cardiopatías congestiva
* Leucopenia * Gases tóxicos
* Asma * Enf.pulmonar anatómica
* Alcoholismo * Tabaquismo
* Cirrosis nutricional * Defecto RI.
 NEUMONÍA NEUMOCÓCICA DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Mayor causa de neumonía adquirida en la comunidad • Examen microscópico: Coloración Gram

Afecta de preferencia a niños y ancianos • Confirmar: Prueba de Quellung
Importante motivo de consulta y hospitalización
Detección de antígenos: PCIE (P. Contrainmunoelectroforesis)
Segunda causa de hospitalización después de
detecta polisacárido capsular soluble.
enfermedades perinatales
Movilización de grandes recursos humanos, • Cultivo de esputo: Medio enriquecido
hospitalarios, económicos. • Identificación: exposición del cultivo a bilis

TINCIÓN GRAM

SINTOMATOLOGÍA DE LA NEUMONÍA:

Generalmente se acompaña: de inicio brusco, escalofríos,

leucocitosis, fiebre elevada (39 a 41 °C), postración, respiración
dificultosa y rápida y náuseas y vómitos, tos, esputo tenaz
herrumbroso, artralgia y dolor torácico.
 Diagnóstico Bacteriológico

CULTIVO AGAR SANGRE

PRUEBA DE LA OPTOQUINA S. pneumoniae . Anticuerpos fluorescente

S. pneumoniae

S. mitis

Reacción de Quellung
MUCHAS GRACIAS
 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 Familia: STAPHYLOCOCCACEAE
Género de importancia médica: Staphylococcus
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS
Géneros sin importancia médica: Gemella, Macrococcus y
Salinicoccus. Cocos esféricos (0.8 a 1.0 m de Ø)
Disposición: solo, en racimos, pares.
Género: Staphylococcus Grampositivos
Importancia médica: No esporulados
Inmóviles
© Staphylococcus aureus,
Pared celular: Acidos Teicoicos
© Staphylococcus epidermidis
© Staphylococcus saprophyticus Colonias de 1 a 3 mm
© Staphylococus lugdunensis Anaerobios facultativos
BIOQUÍMICA Y FISIOLOGÍA
Algunas especies tienen preferencia por
Metabolismo: Anaerobio facultativo
determinados nichos ecológicos:
Coagulasa positivo,
S. aureus (nariz, manos, región perineal) Catalasa positivo y
S. saprophyticus (zona periuretral y uretral) Oxidasa negativo
S. auricularis (conducto auditivo externo)
S. hominis y S. haemolyticus ( axilas, área púbica)
S. capitis ( cabeza)
S. cohnii ( pies)
 STAPHYLOCOCCUS AUREUS
CARACTERÍSTICAS GENERALES FACTORES DE VIRULENCIA
 Cocos Gram positivos de 0.7 a 1.2 micras se agrupan en racimos
 Forman colonias pequeñas, circulares y cremosas
 Constituidos por ácidos teicoicos en la pared celular
 Presentan polímeros como el ácido glucosaaminouránico
 Poseen factor de agregación y de coagulación
 Tienen gran poder de patogenicidad por la elaboración de factores de
virulencia (enzimas, toxinas, otros.)
 Son anaerobios facultativos y fermentadores de maltosa, lactosa,
glucosa y manitol

VIABILIDAD, PROPAGACIÓN Y TRANSMISIÓN

Reservorio: Humano, mamíferos, aves, alimentos y agua.
Hospedadores: Humanos y animales de sangre caliente.
Dosis infectiva mínima (DIM): Como mínimo 100.000 unidades.
Supervivencia ambiental: Sobrevive durante semanas en los cadáveres,
tejidos y órganos. Crece soluciones salinas (15% de NaCl).
Vías de entrada: Dérmica. Mucosas. Parenteral. Digestiva.
Distribución geográfica: Mundial.
Mecanismo de propagación y transmisión: ingesta de alimentos
contaminados, por contacto con personas, animales o elementos
contaminados.
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
FACTORES RELACIONADOS EN PATOGÉNESIS DE Staphylococcus aureus
 STAPHYLOCOCCUS AUREUS
PATOGENIA

El más importante es la portación nasal o cutánea

VIH
Hemodiálisis
FACTORES PREDISPONENTES
Trasplantes
Neoplasias
 Piel: impétigo, furúnculos, ántrax estafilocócico, etc. Drogadicción intravenosa
 Vías respiratorias: sinusitis , faringitis , bronquitis y neumonía Diabetes
 Vías digestivas: intoxicación alimentaria o enteritis
EPOC
 Vías urinarias: cistitis, nefritis y prostatitis Traumatismos, cirugía, quemaduras
 Otras infecciones: endocarditis, linfadenitis, osteomielitis, sepsis, infecciones Cuerpos extraños (suturas, prótesis, catéteres)
nosocomiales y muchas otras, dependiendo donde se encuentre. Raramente defectos en el sistema inmune
 INFECCIONES CLÍNICAS

Forunculosis Carbúnclo Piodermia

Síndrome de la piel escaldada Celulitis Foliculitis

 INFECCIONES CLÍNICAS INTOXICACIÓN ALIMENTARIA POR S. aureus
La bacteria produce y secreta exotoxinas como: las enterotoxinas estafilocócicas (SEs) A,B,C1,2,3,D,E,G,H,I,
que originan intoxicaciones alimentarias.

Paroniquia

Forúnculo
 IMPORTANCIA DE LOS ECN
En quienes se han instalado sondas, catéteres, cánulas, dispositivos de venoclisis, prótesis cardíacas o articulares (stents). En debilitados y/o
inmunocomprometidos, por cirugía, transplantes, traumatismos o quemaduras, terapias con corticoesteroides, diabetes, cáncer, leucemia, SIDA, etc.
 STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
Es el ECN patógeno más frecuente
Agente nosocomial
Muy aislado de puntas de catéteres, heridas, abscesos diversos, LCR y sangre
Causa 74-92% de septicemias debidas a ECN, vía su gran relación con catéteres i.v.
Ocasiona endocarditis asociada tanto a válvulas naturales como a las artificiales.
56 % de las cepas aisladas por hemocultivo son MRSE (meticilina resistentes):
terapias combinadas vancomicina + rifampicina o un aminoglucósido.
Bacteriemia intrahospitalaria
Endocarditis (válvula nativa y protésica)
Infecciones relacionadas a catéteres intravasculares
Derivaciones de LCR (hidrocefalias)
Infecciones relacionadas a catéteres de diálisis peritoneal
Infecciones del tracto urinario
Condro-osteomielitis esternal
Infecciones de prótesis articulares
Infecciones oftálmicas
Infecciones de heridas quirúrgicas, neumonía, abscesos intraabdominales raramente
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
1. Muestra de estudio: exudado, secreciones, sangre, orina, LCR,
alimentos y pus.
2. Tinción microscópica: coloración de Gram
3. Cultivo de aislamiento: Agar sangre (universal), agar mannitol
salado o Chapman.
4. Pruebas de grupo: Catalasa
5. Pruebas de patogenicidad: Coagulasa, DNAsa
6. Prueba de penicilinasa, otras pruebas.
7. Antibiograma Tinción Gram de pus
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis

Las colonias formadas por S. aureus suelen estar pigmentadas con

colores que van del gris, al amarillo o naranja y en condiciones
anaerobias o en caldos no produce pigmentos. Algunas cepas de S.
aureus presentan β-hemolisis, que es más notable en cultivos
prolongados.
MRSA
PRUEBAS DE PATOGENECIDAD S.aureus

Prueba de la DNAsa
Diferenciación de especies del género Staphylococcus

Diferencias entre géneros

ALGORITMO DE IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM POSITIVOS
STAPHYLOCOCCUS COAGULASA NEGATIVO
MUCHAS GRACIAS
 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

BACILOS FORMADORES DE ESPORAS

GÉNEROS
BACILLUS Y CLOSTRIDIUM

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 GÉNERO BACILLUS Y CLOSTRIDIUM
CARACTERÍSTICAS GENERALES

GÉNERO BACILLUS GÉNERO CLOSTRIDIUM

Bacterias en forma de bastón. 1. Género Clostridium: integrado por más de 100 especies de
Gram positivas bacilos anaerobios (excepto C.histolyticum, C.tertium) y
Aerobios estrictos o anaerobios facultativos formadores de esporas.
Beta hemolíticos, excepto B. anthracis 2. Por lo menos 20 especies son toxigénicas
Forman endosporas (oval o cilíndrica) 3. Organismos ubicuos: suelo, aguas residuales, flora microbiana
Catalasa positiva tracto gastrointestinal (animales y hombre).
Se agrupan formando cadenas 4. Patógenos: C. tetani (tétano), C.botulinum, C. baratii
Saprofitas: B. cereus y B. subtilis (botulismo), C. perfringens, C. septicum, C. histolyticum,
Móviles (flagelos perítricos), excepto: B.anthracis C.novyi (mionecrosis), C. difficile (diarrea y colitis
Controlador biológico: B. thurigiensis pseudomembranosa).
Presentan gran actividad bioquímica (ciclos 5. Sintetizan y secretan exotoxinas muy potentes.
biogeoquímicos del carbono y nitrógeno).
 GÉNERO BACILLUS
ACIDÓFILAS TERMÓFILAS DENITRIFICANTES PATÓGENOS DE VERTEBRADOS
 B. acidocaldarius  B. acidocaldarius  B. azotoformans
 B. coagulans  B. schlegelii  B. cereus  B. anthracis
 B. polymixa  B. stearothermophilus  B. laterosporus  B. cereus
 B. licheniformis  B. alvei
ALCALINOFILAS PATÓGENOS DE INSECTOS  B. pasteurii  B. coagulans
 B. alkalophilus  B. larvae  B. stearothermophilus  B. megaterium
 B. pasteurii  B. lentimorbis  B. subtilis
 B. popilliae PROD. DE ANTIBIÓTICOS  B. pumilus, etc.
PSICOTROFAS  B. thuringiensis  B. brevis
 B. globisporus  B. brevis  B. cereus
 B. insolitus  B. subtilis  B. circulans
 B. marinus  B. Subtilis
 B. macquariensis FIJADORES DE NITRÓGENO  B. licheniformis
 B. megaterium  B. macerans  B. polymixa
 B. polymixa  B. polymixa  B. pumilus
 B. laterosporus

Bacillus subtilis: Bacitracina-A, pero sobre todo Surfactin, el Iturin A y Fengycin

B. polymyxa: Polimixina-B
B. brevis: Tirocidina-A y Gramicidina-S
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Familia: CLOSTRIDEACEAE
Géneros: Clostridium (anaerobio)

Clostridium neurotóxicos Clostridium histotóxicos

C. tetani, C. botulinum C. perfringens, C. novyi
C. septicum

Clostridium enterotóxicos Clostridium piógenos

C. perfringens C. perfringens
C. difficile C. ramosum
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Clostridium perfringens Clostridium difficile Clostridium tertium

Clostridium difficile Clostridium tetani C. sporogenes

 CAPACIDAD PATOGÉNICA
GÉNERO BACILLUS GÉNERO CLOSTRIDIUM

Este género se define por los cuatro rasgos siguientes:

1. Presencia de endoporas;
2. Metabolismo anaerobio estricto;
3. Incapacidad de reducir sulfato a sulfito, y
4. Pared celular grampositiva.

Capacidad patógena debido:

1) Capacidad para sobrevivir en condiciones extremas

mediante la formación de esporas;
2) Rápido crecimiento en un ambiente enriquecido y
privado de oxígeno, y
3) Síntesis de toxinas histolíticas, enterotoxinas y
neurotoxinas.
 Bacillus anthracis
Bacilo voluminoso, de 4 a 6 m long. Cultivo
Gram positivo, no móvil.  B.anthracis: aerobio (anaerobio facultativo), forma
cadenas serpentinas y largas.
Extremos cuadrados
 Crece en pH entre 7.0 y 7.4. Se desarrolla en medios
Forma espora: central, oval, no deformante
simples
Forman cápsula: polipéptido formado por Ac.
 Colonias: pequeñas, opacas, color blanco grisáceo y
D-glutámico (antifagocítico)
duras. Bordes con flecos (melena de león).
En muestras clínicas: aparece como bacilo
 Es proteolítico y fermentativo.
único o emparejado.
Patogenia
 Factores de virulencia: Cápsula y Toxina
Vías de contagio
 Inoculación, inhalación o ingestión.

Tinción de Gram de B. anthracis, que muestra grandes barras Gram positivas con
esporas elipsoidales sub terminales en hemocultivo del paciente
 B.anthracis: Productos extracelulares

 Cápsula (ácido poli-D-glutámico), codificada por un plásmido

 Toxina :
* Factor de Edema (EF)
* Factor II o PA (antígeno protector): inmunógeno
* Factor III o LF (Factor letal): efecto mortal
LF + PA: mortal , no produce edema. Inmunógenos
EF + PA + LF: toxicidad máxima (provoca edema y necrosis e
incluso la muerte en animales. Inmunógenos.
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
1. Ántrax cutáneo (pústula maligna)
La lesión o pústula suele ser única, indolora, necrosante, seropurulenta, ulcerosa
y hemorrágica: La escara negra es la base del término “carbunco”. La lesión está
rodeada por una zona de edema intenso, causado por exudado gelatinoso.
B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS

Cortesía: An. Fac. med. v.74 n.2 Lima abr./jun. 2013

B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
2. Carbunco Pulmonar

Es mortal (100%), debido a la septicemia, que origina

la muerte temprana por toxina (a las 24 h). La tos no
productiva y los síntomas pulmonares vagos suelen
originar un Dx equivocado de “neumonía viral”.

3. Carbunco Intestinal
Enfermedad poco frecuente en el humano, pero 100%
fatal. Síntomas clínicos variables: adenopatías
mesentéricas y ascitis hemorrágica.
 Bacillus cereus
Características Generales
Bacilo Gram positivo,
Aerobio y anaerobio facultativo
Espora: central, forma elipsoide.
Crece entre los 10 - 48ºC, la temperatura óptima es entre 28 - 35º C.
Generalmente son móviles con flagelos perítricos.
Poseen antígenos somáticos y flagelares y de esporas.
Se puede aislar: alimentos naturales e industrializados, alimentos:
pasteles con crema, carnes y verduras, sopas, salsas, ensaladas, arroz y
cereales.
pH = 4,9 - 9,3; Aw = 0,93 - 0,95.
Al final de la fase exponencial ocurre la esporulación porque son menos
exigentes. La germinación de las esporas es a 30ºC. Las esporas resisten
100º durante 5-10 minutos.
 B. cereus: ENZIMAS Y TOXINAS
1. Lecitinasa (fosfolipasa): Produce efectos necróticos de células
intestinales.
2. Hemolisina: produce la lisis de glóbulos rojos
3. Factor letal: produce la muerte de conejos cuando por vía
endovenosa
4. Factor de permeabilidad vascular: alteraciones permeabilidad de los
vasos sanguíneos.
5. Toxina necrótica: produce necrosis de las células del epitelio
intestinal.
6. Toxina emética: produce vómitos. Toxina estable a 126ºC/90 minutos.
Estable a pH 2 y 11 durante 2 horas, puede sobrevivir en los
alimentos.
7. Factor del asa ileal de conejo: origina diarrea y salida de líquido en
experimentación.
 Bacillus cereus: Patogenia y Clínica
PODER PATOGENO

Toxina emética o vomitoxina (toxina termoestable: 120°C/1h).

Toxina diarrogénica (Toxina termolábil): Proteína de peso molecular 38-50 Kd.

Inactiva a 56ºC/5 minutos, es termolábil.

CUADRO CLINICO

Síndrome emético: nauseas y vómitos se producen al cabo de 1-5 hs, la

diarrea no es tan frecuente.

Síndrome diarreico: período de incubación de 8 a 10 horas, dolor abdominal y

diarrea, la clínica desaparece a las 12-24 horas.
 B. cereus: DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
El aislamiento e identificación de B. cereus en el laboratorio clínico bacteriológico a partir de coprocultivos no es
rutinaria.

En las muestras clínicas (heces) de los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad dan la confirmación de
que B. cereus está involucrado en el brote.

El análisis del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar el agente etiológico.

B. cereus en AST
B. cereus , tinción Gram B. cereus en agar sangre
 OTROS ESPECIES DE BACILLUS
BACILLUS THURIGIENSIS

Es un bacilo gram positivo,

B. stereathermophilus: control biológico Flagelación perítrica,
en autoclave. Anaerobio facultativo y quimioorganótrofo.
Actividad de catalasa.
B. subtilis: presente en el aire y en el polvo, Fermentan: glucosa, fructosa, trealosa,
es un contaminate de laboratorio, pero maltosa y ribosa.
puede producir enfermedad en personas Hidrolizan: gelatina, almidón, glucógeno,
inmunodeprimidas. También se utiliza esculina y N-acetil-glucosamina.
como controlador biológico en autoclave. Forman una inclusión parasporal (espora):
son tóxicos para distintos invertebrados.
B. thurigiensis: es utilizado como pesticida Proteína de toxicidad: CRY (del inglés,
por producir una toxina letal para ciertos Crystal).
insectos. B. thuringiensis se clasifica en 84 serovares
mediante serología del antígeno flagelar H.
 BACILLUS THURIGIENSIS

M. de contraste de fase, en fresco

 CLOSTRIDIUM TETANI
Características generales: Productos extracelulares (TOXINAS)
1. Bacilo Grampositivo Tetanolisina (lisis de los glóbulos rojos y neutrófilos)
2. Bacilo delgado, de 3 a 5 m long./0.3 a 0.7 diámetro. Tetanopasmina (neurotoxina soluble y termolábil)
3. Móviles: flagelos peritricos
4. Forman esporas terminal, esféricas y deformante del cuerpo
bacteriano.
5. No capsulado. Anaerobio obligado y débilmente proteolítico.

Estructura antigénica
1. Antígenos: somático (Ag. O) y flagelar (Ag. H)
2. Serotipos (10) con un solo tipo de toxina tetánica
 CLOSTRIDIUM TETANI
Tetanopasmina: se fija a gangliósidos (GT1) en membranas sinápticas y actúa en las sinapsis inhibidoras de nervios. Bloquea la función del
transmisor inhibidor (GABA, Glicina e incluso noradrenalina). La toxina se transmite vía axónica en sentido retrógrado: parálisis espástica.
CLOSTRIDIUM TETANI: PATOGENIA
 TÉTANO: PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO
Tratamiento no siempre satisfactorio, por MEDIDAS QUIRÚRGICAS
lo tanto es más importante la prevención:
Desbridamiento quirúrgico es importante,
1. Inmunización activa con toxoide, ya que retira el tejido necrosado en el cual
pueden proliferar más microorganismos.
2. Atención apropiada de heridas
ANTIBIÓTICOS
contaminadas con tierra,
Penicilina inhibe el crecimiento de C. tetani
3. Empleo profiláctico de la antitoxina, y detiene la producción de toxina.
TOXOIDE TETÁNICO
4. Administración de penicilina.
 Clostridium botulinum
Características ORIGEN DEL BOTULISMO
La intoxicación se adquiere por ingesta de:
Reservorio: es el aire, tierra y polvo, e
incluso el agua. Alimentos enlatados contaminados
Conservas caseras contaminadas
Espora oval, subterminal y deforma al bacilo.
Carne contaminada mal cocida
Metabolismo es fermentativo (carbohidratos)
y proteolítico.
Móviles con flagelos perítricos y con 4
antígenos distintos: somático, flagelar,
esporas y endotoxinas.
Clasificación: 4 clases (I a IV) y producen 7
toxinas serológicamente diferentes (A, B, C,
D, E, F y G).
Enfermedad: Botulismo una toxiinfección
alimentaria producida por ingerir alimentos
con la toxina (Toxinas: A, B y E).
 Clostridium botulinum
PATOGENIA Y CLINICA
ACCIÓN DE LA TOXINA
BOTULISMO POR ALIMENTOS: 08 tipos
inmunológicamente distintos de toxina (A,
B, C1 , C 2, D, E, F, G). Todas, excepto la
C2, son neurotoxinas. Los tipos A, B y E
son los más frecuentemente relacionados
con enfermedad humana.

SINTOMATOLOGÍA

Periodo de incubación: 12-72 h y hasta 8 días

Flacidez muscular, cansancio y lasitud La toxina es transportada a los nervios periféricos hacia el
SNC donde se fija a los terminales presinápticos de los
Vértigo y estreñimiento nervios colinérgicos, bloqueando la liberación de acetil-
Diplopía, Disfagia y Disfonía colina, produciendo parálisis total de los impulsos nerviosos.
Parálisis flácida hasta en músculos de la cara
Atelectasia (Disminución del volumen pulmonar)
Paro respiratorio
 Clostridium perfringens
 Bacilos rectos de 4-8 x 0,5-1,5 u., inmóviles y TOXINAS
anaerobios estrictos.
 Esporas ovaladas subterminales y no 1. Alfa (): Lecitinasa C o fosfolipasa,  la permeabilidad
deformante de la célula. vascular. Es mortal
 Producen H2S, lecitinasa, reducen los nitritos, 2. Beta (): es necrotizante. Induce hipertensión. No hemolítica
fermentan azucares. 3. Epsilón ():  permeabilidad de pared gastrointestinal. NH
 Necesidades nutritivas complejas: en su cultivo 4. Iota (): es necrotizante y produce  permeabilidad vascular.
necesitan aminoácidos y factores de Es mortal
crecimiento.
5. Delta () y Teta (): toxinas hemolíticas
 La temperatura óptima de las toxinas es 43-47º,
la máxima 50º, aunque la temperatura depende 6. Kappa (): colagenasa, es necrosante.
de la cepa. Las toxinas necesitan un pH próximo 7. Lambda (): proteasa. No es toxina.
a 7,5.
8. Mu (): hialuronidasa
 Las esporas son bastante resistentes al calor,
resisten 100º 1 hora, la germinación se produce 9. Nu (): DNAsa
a 70-80ºC.
C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
 C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
Toxinas mortales: alfa, beta, gamma y iota. MIONECROSIS (gangrena gaseosa)
Cl.perfringens, de tipo A, es el agente más frecuente de mionecrosis gaseosa. El 1. Síndrome de rápida necrosis del tejido muscular, con
tipoA (alfa) produce aumento de la permeabilidad vascular con hemólisis poca inflamación, y producción de gas en los tejidos.
masiva y hemorragia, destrucción tisular, toxicidad hepática y disfunción 2. En desgarradas, sucias, sobre todo cuando acompaña
miocárdica. La toxina beta es responsable de la enteritis necrozante fracturas, por cirugía pélvica o intraabdominal, aborto
La enterotoxina, proteína termolábil, es producida por mayormente por las séptico, etc.
cepas tipo A, pero también por las cepas tipo C y D. 3. La mionecrosis es una infección mixta.
 Diagnóstico Clínico
TÉTANO: El Dx del tétanos es clínico.
BOTULISMO: El Dx es clínico e epidemiológico.
MIONECROSIS: El Dx es clínico.

Diagnóstico BACTERIOLÓGICO

EX. DIRECTO: Tinción Gram. Tétanos (tejido necrosado)

Mionecrosis (tejido necrosado)

CULTIVO: Agar sangre (C. tetani, y C. perfringens)

Agar yema de huevo para anaerobios (C. botulinum)

SEROLOGÍA: Botulismo. Detectar cepa y la toxina implicadas

 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

BACILOS AEROBIOS GRAM POSITIVOS

NO FORMADORES DE ESPORAS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 BACILOS AEROBIOS GRAM POSITIVOS NO FORMADORES DE ESPORAS

Los bacilos grampositivos, aerobios y no esporulados son un grupo

heterogéneo de bacterias. Algunos de ellos representan patógenos
conocidos del ser humano (como Corynebacterium diphtheriae,
Mycobacterium tuberculosis), otros son fundamentalmente patógenos
animales que pueden producir enfermedad en el ser humano (p. ej.,
Erysipelothríx rhusiopathiae, Rhodococcus equi), otros producen
infección por ingesta de alimentos (Listeria monocytogenes), y otros son
patógenos oportunistas que acostumbran a infectar a pacientes
ingresados o inmunodeprimidos (como Corynebacterium jeikeium).
 GÉNERO LISTERIA
Respecto a la relación del género con
Joseph Lister, la bacteria fue bautizada en
honor de Lister por James Hunter Harvey
Pirie (1877- 1965), bacteriólogo escocés,
que identificó la bacteria en 1927 y la
denominó como Listerella hepatolytica. La
identificación de la bacteria ya se había
realizado un año antes (1926) por parte de
tres microbiólogos de Cambridge (Murray,
Webb y Swann) y que ellos denominaron
Bacterium monocytogenes.

La bacteria cambió varias veces de nombre

hasta que en 1957 Heinz Seeliger (1920-
1997) en recuerdo de la nomenclatura de
Pirie la designó Listeria monocytogenes.
 GÉNERO LISTERIA
Comprende 11 especies. Dos producen
enfermedades en el hombre:

L. monocytogenes
L. ivanovii
L. murrayi
L. grayi
L. seeligeri
L. welshimeri
L. innocua

L. monocytogenes posee 13 (1 al 13)

factores antigénicos somáticos (0)
termoestables y 4 (A, B, C, D)
antígenos flagelares (H) termolábiles.
Comprende 6 serovares:
Enfermedad humana: 1/2a , 1/2b, 4b
Serovares del medio ambiente: No
enfermedad.
 LISTERIA MONOCYTOGENES: MORFO-FISIOLOGÍA
Bacilo Gram positivo, corto, extremos redondeados, o a veces puntiagudo
(cocobacilo).
Tamaño: 0,5-2 µm de largo por 0,5 µm de grueso.
No esporulado, no capsulado, anaerobio facultativo y catalasa (+)
Motilidad (a temperatura ambiente) por flagelos peritricos.
Producción de Hemolisina (Listeriolisina O)
La P.C : Internalina (proteína superf. promotora de fagocitosis)
Crece en medios especiales: agar Mueller Hinton, agar Sangre de cordero
(identificación primaria).
Temperatura de crecimiento: están entre 1°C y 45°C, con una óptima de 30-37" C. Es
psicrotrófico.
pH: capaz de desarrollarse entre 5,1 y 9,6 de pH.
El crecimiento óptimo se produce en una atmósfera constituida por 5% de oxígeno y
5 - 10% de dióxido de carbono.
 L. MONOCYTOGENES: EPIDEMIOLOGÍA
RESERVORIO NATURAL LM es un microorganismo ubicuo. Se encuentra en el intestino de animales
y personas que actúan como portadores y, también, ampliamente
1. Gran variedad de animales distribuido en ambientes naturales como suelo, agua, efluentes, pastos y
2. Suelo abonado con excretas ensilados dónde sobreviven durante períodos extensos de tiempo. Se le
considera un germen Telúrico.
3. Forraje almacenado

FUENTES DE INFECCIÓN
HÁBITAT Y VÍAS DE CONTAMINACIÓN
1. Carnes y derivados
2. Leche cruda y lácteos
3. Alimentos preparados
4. Embutidos
5. Pescado fresco, congelado y
ahumado
6. Frutas y verduras
7. Huevos y ovoderivados, etc.
 L. MONOCYTOGENES: EPIDEMIOLOGÍA
TRANSMISIÓN
1. Vertical (madre-hijo)
2. Zoonótico (contacto con animales enfermos) y
3. Nosocomial (adquisición hospitalaria),
4. Actualmente se reconoce que la mayoría (99%) de los casos
de listeriosis humana son de transmisión alimentaria.
Quesos contaminados con Listeria
 L. MONOCYTOGENES: VIRULENCIA
Termosensor de virulencia

El gen prfA funciona como interruptor principal de los genes de virulencia de Listeria. A temperaturas bajas, cuando la bacteria vive en materia
vegetal en decomposición, la secuencia de iniciación del ARN mensajero de PrfA está plegada en forma de horquilla. Cuando la temperatura
sube a 37°C, la temperatura del cuerpo (centro), la horquilla se abre y queda accesible la secuencia de iniciación a la que se une el ribosoma
iniciando la traducción del mensajero del gen (derecha).
 L. MONOCYTOGENES: PATOGENIA

La LISTERIOSIS afecta esencialmente a personas con

el sistema inmunitario debilitado o modificado:
Inmunodeprimidos,
Recién nacidos,
Embarazadas,
Pacientes tratados con corticoides y
Personas de edad avanzada.

SÍNTOMAS GENERALES
 Malestar general
 Fiebre persistente Diarrea
 Dolor de cabeza
 Náusea, vomito
Ciclo de vida intracelular de L. monocytogenes. Centro: se muestra la internalización, la
 Diarrea
formación de la vacuola y el escape de la misma, la polimerización de la actina, la
 enfermedad leve similar a la gripe (p. ej., motilidad basada en la actina y la diseminación. Afuera: fotografías electrónicas
escalofríos, fatiga, dolor muscular y articular) mostrando LLO, PLCs, y ActA.
 LISTERIOSIS: ENFERMEDADES
FISIOPATOGENIA
ENFERMEDAD DE LA MUJER Enfermedad febril grave
GRÁVIDA Enfermedad febril leve, moderada
Aborto
GRANULOMATISIS INFANTISÉPTICA Infección adquirida in útero
SEPSIS Neonatal
En adultos con factor predisponente
INFECCIÓN DEL SISTEMA NERVIOSO Meningitis
CENTRAL Meningoencafalitis
Cerebritis
INFECCIÓN FOCAL Conjuntivitis, infección de la piel
Infección osteoarticular
Colecistitis, Hepatitis, Enfermedad gastro-intestinal
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
MUESTRAS CLÍNICAS: Sangre, LCR, Líquido ascítico, Líquido amniótico, Exudado endocervical, Meconio, Biopsias.
ANALISIS DE LA MUESTRA.
Ex. Directo: Coloración Gram
Cultivo: Agar sangre, agar tripteína soja, caldo BHI
Identificación Bioquímica: Tolerancia al NaCl, Hidrolisis de la Esculina en presencia de Bilis, Hidrólisis del Hipurato, Reacción de CAMP,
Producción de Acetoína, etc.
SEROLOGÍA. Fijación de Complemento (Laboratorio de Referencia)
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Listeria monocytogenes. Cultivo en agar sangre. Crece con

facilidad en medios nutritivos como TSA y agar sangre. La Crecimiento de Listeria monocytogenes en placa de ALOA.
temperatura optima de crecimiento es entre 30 y 37ºC, pero
su crecimiento es posible en temperaturas entre 1 y 45ºC.
Fuente: GEFOR ©
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA

L. monocytogenes:
crecimiento en paraguas

Características diferenciales de L.monocytogenes, Erysipelothrix rhusiopathiae y Corynebacterias.

Prueba Listeria Erysipelothrix Corynebacterium
A.sangre beta alfa variable
NaCl (6.5 %) + - -
Catalasa + - +
H2S - + -
Motilidad (25°C) + - -
 GÉNERO: CORYNEBACTERIUM

1. Grupo grande y heterogéneo.

2. Aeróbicos o anaeróbicos facultativos
3. Gram positivos, pequeños y pleomórficos. Revelan diversas formas o
configuraciones (en forma de V o de Y) o bacilos de forma irregular (semejantes a
un garrote o letras chinas).
4. Pared celular: arabinosa, galactosa, ácido mesodiaminopimélico (meso-DAP) y (en
la mayoría de las especies) cadenas cortas de ácidos micólicos.
5. Inmóviles, catalasa-positivas, oxidasas negativas.
6. La mayoría de especies fermentan los hidratos de carbono y producen ácido
láctico.
7. Muchas especies crecen bien en los medios de laboratorio comunes.
8. Algunas especies requieren lípidos (cepas lipofílicas).
9. En la actualidad se han descrito más de 60 especies de Corynebacterium.
10. Cepas virulentas producen potente toxina (codificada por virus lisogénico).
 GÉNERO: CORYNEBACTERIUM
PRINCIPALES ESPECIES GÉNERO CORYNEBACTERIUM CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE

Corynebacterium spp. ENFERMEDAD  Bacilos delgados, pequeños y muy pleomórficos

C. diphteriae Difteria  Longitud entre 2 y 6 m, y 0.5 a 1.0 m

C. jeikeium Infecciones portunistas  Gram positivos, Tinción de Loeffler: revela gránulos metacromáticos
C. urealyticum Infecciones UT  No esporas, no móviles
C. pseudodiphteriticum Endocarditis, ITR bajo  Algunas cepas pueden presentar cápsulas
C. ulcerans Faringitis  No acidorresistente
C. xerosis Infecciones Oportunista  Aerobios o anaerobios facultativos
C. renale Group Cistitis y pielonefritis TU  Requerimientos nutricionales complejos
rumiantes.
 Catalasa (+), oxidasa y ureasa (-)
 Fermenta la glucosa y maltosa
C. diphtheria: Bacilo de Klebs-Loeffler
 Presenta en el cuerpo bacteriano gránulos que contiene ácido
polifosfòrico (cuerpos de Babes-Ernst o gránulos metacromàticos).
 Corynebacterium diphtheriae
 C.diphteriae: coloniza la orofaringe y/o la piel.
 No invasor, pero toxigénico
 El hombre es el huésped único y el reservorio del germen.
 Transmisión: vía directa por microgotas respiratorias o
contacto cutáneo.
 P.I : de 2 a 7 días

La especie se subdivide en tres tipos:

1. var gravis: colonias no hemolìticas grandes, grises
irregulares y estriadas
2. var mitis: colonias hemolìticas pequeñas negras
lustrosas y convexas.
Bacteria Corynebacterium diphtheriae , coloreado con la técnica del azul de metileno. El espécimen
3. intermedius: colonias pequeñas no hemolìticas con fue tomado de un cultivo inclinado de Pai. Bastoncillos grampositivos pleomórficos cuyos extremos
características entre los dos extremos . pueden estar hinchados, produciendo una forma de club. Cortesía del CDC. Dr. P. B. Smith
 PATOGENIA
 P.C externa  Ag K (adherencia)
 Toxina diftérica  gen Tox (cepa lisogénica : fago B )
 Toxina: Fracción A  cataliza la ribosilación del ADP dependiente
de NAD, e inactiva el EF-2 de las cadenas polipéptidicas (en los
ribosomas). Fracción B  de unión.

Corynebacteriofago
CLÍNICA DE LA DIPTERIA
Sintomatología: Cefalea y faringitis moderada, sin eritema y
dolor característico de la faringitis estreptocócica. Hay disfagia,
febrícula y postración.
Seudomembrana: Color blanco grisáceo, con parches de necrosis y
negra. Se forma por la destrucción del epitelio (por parte de la toxina),
se acompaña con exudado (bacteria, leucocitos y hematies, células
plasmáticas y fibrina).
Hay adenopatías cervical e inflamación : aspecto de “cuello de toro”.
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
La muestra de cultiva en un médio enriquecido y selectivo como: como
agar sangre cystina-telurito o agar Tinsdale a 37°C enriquecido con 5% de
CO2. Incubación: 18 a 24 horas para su crecimiento.

COLORACIÓN GRAM

BIOQUÍMICA AGAR TELURITO AGAR TINSDALE

MUCHAS GRACIAS
 Universidad Nacional «Jorge Basadre Grohmann»
FACI - E.P Biología Microbiología
Bacteriología

COCOS Y BACILOS NO FERMENTADORES

GRAM NEGATIVOS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 INTRODUCCIÓN

Estudios recientes de la familia Neisseriaceae con

el empleo de técnicas de hibridación ADN-ARNr y
análsis del ARNr 16S, han conducido a una
reorganización taxonómica. Los componentes de
los géneros BRANHAMELLA, MORAXELLA Y
ACINETOBACTER han sido reubicados a una
nueva familia:

MORAXELLACEAE.
 FAMILIA: NEISSERIACEAE
Género: Neisseria

Cocos gramnegativos
Disposición: en parejas (diplococos), adoptan una Glucosa Maltosa Lactosa DNAsa
morfología semejante a la de un grano de café. N. gonorrhoeae + - - -
Tamaño: diámetro entre 0,6 y 1 um
N. meningitidis + + - -
Son inmóviles
No forman endosporas N. lactamica + + + -
Aerobios N. sicca + + - -
Oxidasa-positivas y, mayoría catalasas positivas
Presentan cápsula N. subflava + + - -
Especies no patógenas crecen en agar nutritivo N. mucosa + + - -
(incluyendo N. meningitidis); pero N. gonorroheae
N. flavescens - - - -
es nutricionalmente exigente.
Generan ácido por oxidación de hidratos de M. cartarrhalis - - - +
carbono (no por fermentación).
 NEISSERIA GONORRHOEAE
FACTORES DE VIRULENCIA
Cápsula Antifagocítica
Fimbrias o pilis Factor de adherencia, antifagocítico
AG. DE MEMBRANA EXTERNA
Proteína I (Por) Antígeno de superficie.
Proteína II (Opa) Adherencia intracelular
Proteína III (Rmp) Ag. protección de Ags. superficiales
Proteína Lip (H8) Igual que Opa LOS: es un LPS carente
de la porción polisacárida
OTRAS PROTEÍNAS “O” (P.M : 3 a 7 mil D).

Proteína fijadora de hierro (Fbp): Fija el hierro

Proteasa IgA1: Contra la IgA tipo I
-lactamasa: Hidroliza el anillo - lactámico
 EPIDEMIOLOGÍA PATOGENIA DE LA GONORREA

Huésped reservorio: los humanos CLÍNICA

Serotipos infectivos: T1, T2, T3, T4 y T5
(T1 y T2: más virulentos)
HOMBRE: afecta a la uretra, recto y faringe, aunque
Transmisión: Por contacto sexual
también a las glándulas, próstata, epidídimo y vesícula
Grupos de riesgo:
seminal con lo que produce esterilidad. Coloniza el
Pacientes con deficiencia del complemento
epitelio cilíndrico y de transición (no el escamoso).
Pacientes con múltiples contacto.

Distribucíon: Mundial
MUJER: afecta al cuello de útero, endometrio, trompa
de Falopio, ovario, peritoneo y en la mujer adulta no
afecta a la vagina ya que esta tiene un epitelio
estratificado, pero si a las chicas antes de la primera
menarquia.
 PATOGENIA DE LA GONORREA

COMPLICACIONES
El germen puede difundir por vía linfática y
producir : prostatitis, epididimitis e incluso
orquitis.

La estenosis uretral es producto de la

destrucción (esfacelo) del epitelio cilíndrico y
sustituido por epitelio escamoso
estratificado; también por formación de tejido
cicatrizal.
 PATOGENIA DE LA GONORREA
Oftalmía neonatarum

Faringitis gonocócica Gonorrea alrededor de la boca

PATOGENIA DE LA GONORREA

Gonorrea en vagina

Gonorrea en la cervix
PATOGENIA DE LA GONORREA
 CUADRO CLÍNICO DE LA GONORREA

SINTOMATOLOGÍA: LA ENFERMEDAD CLÍNICA DISEMINADA

Hombre: dolor a la micción, prurito (picor),

escozor, secreción de un exudado purulento Incluye: fiebre, artralgias migratorias, artritis
el cual al cronificarse se le da el nombre de supuradas en muñecas, rodillas y tobillos, y un
gota matinal o militar. exantema pustular sobre base eritematosa en las
extremidades, pero sin afectación de la cabeza y
Mujer: tiene una sintomatología menor que en tronco.
el hombre, pero se dan escozor, prurito y
exudado purulento; disuria y dolor abdominal.
Cuadros asociados con N.gonorrhoeae: Síndrome
Complicaciones: salpingitis, abscesos de Fitz-Hugh-Curtis (perihepatitis), conjuntivitis
tubováricos y enfermedad inflamatoria pélvica purulenta (neonatal), gonorrea anorrectal, faringitis,
(EIP). parotiditis e incluso endocarditis.
 EXAMEN GRAM

FASE AGUDA GONORREA FASE POST AGUDA GONORREA

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
 NEISSERIA MENINGITIDIS
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
 Ag K (capsular): 13 serotipos: A, B, C, Y, W-135, D, E, H, I, K, L, X, Z.
 Ag pili el cual ayuda a la adherencia a las células epiteliales de la mucosa.
 Endotoxinas de la membrana externa de la pared.
 Ig A proteasa: rompe la IgA de secreción (No existe defensa por parte del huésped y el
germen pasa a la sangre y pasa a las meninges.

EPIDEMIOLOGÍA PATOGENIA E INMUNIDAD

Amplia distribución en el mundo Factores de virulencia : pili, cápsula y endotoxina
Portador natural: ser humano. La endotoxina produce lesión vascular difusa: lesión endotelial,
El meningococo coloniza la nasofaringe inflamación de las paredes vasculares, trombosis coagulación
intravascular diseminada.
Transmisión: vía aerógena
Anticuerpos séricos: acción bactericida con intervención del
Enfermedad endémica: niños menores de 5 años complemento pueden prevenir la enfermedad sistémica.
NEISSERIA MENINGITIDIS

CUADRO CLÍNICO

 Amigdalitis, faringitis: no tienen

sintomatología aparente.

 Meningitis
Sintomatología: fiebre, cefalea, dolor de
garganta y erupción petequial que son
alteraciones cutáneas causadas por
coagulación intravascular diseminada.

 Síndrome de Waterhouse-Friederichsen:
el cual afecta a la capsula suprarrenal y es
de gravedad máxima.
 NEISSERIA MENINGITIDIS
Meningoencefalitis Bacteriana Aguda: Shock
 NEISSERIA MENINGITIDIS
MENINGOCOCEMIA FULMINANTE
Escalofríos, cefálea y vértigo y suele acabar en colapso circulatorio y muerte en un 70% de
casos no tratados. Lesiones metastáticas hay penetración perivascular con leucocitos y casí
siempre son hemorrágicas; se presentan grandes manchas purpúricas e irregulares, y dan
frotis positivos y cultivos positivos. En casos graves: Síndrome de Waterhouse-Friderichsen y
muerte.

Vasculitis asociada a sepsis por meningococo

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LAS INFECCIONES POR NEISSERIAS
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LAS INFECCIONES POR NEISSERIAS

PARA NEISSERIA MENINGITIDIS

Muestra: sangre, LCR, secreciones nasofaríngeas

Hemocultivo  10 ml de sangre fresca en 10 ml de medio líquido (caldo
de triptosa y fosfato) en anaerobiosis (10% CO2) por una semana; y
luego, pasar 0.1 ml de sangre a agar chocolate o a agar Thayer Martin.
Prueba de la Oxidasa y serología.
Examen directo Gram de sangre capilar en caso de septicemia
fulminante.
LCR: prueba de Quellung y de precipitina con antisuero conocidos.
 PRUEBA DE FERMENTACIÓN DE AZÚCARES

Neisseria meningitidis
Neisseria gonorrhoae
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO: PRUEBA DE LA OXIDASA PARA N. GONORRHOAE
Familia: Legionellaceae
 LEGIONELLA PNEUMOPHILA

CARACTERÍSTICAS
 Bacteria Gram negativa
 Forma bacilar o de bastón (0,3-0,9 x 2-20 µm)
 Aerobia estricta,
 No forma endospora
 No capsulado
 Móviles por flagelos polares o laterales.
 Reservorio: Agua dulce, lodos, agua estancada
 Huésped: Humanos, amebas L. pneumophila fagocitados por macrófagos. Coloración de
Giménez (esputo).
 Sensible a la radiación UV y a la desecación
 Temperatura óptima de crecimiento: 35ºC y 37ºC, (También: entre los 20ºC y los 42ºC)
 Transmisión: bioaerosoles contaminados o por aspiración de gotas de agua que
contengan la bacteria.
 Parásitos intracelulares facultativos y crecen en el interior de los protozoos.
 30 treinta especies del género: mayor importancia clínica (90%) L. pneumophila, y, el
10% restantes: L. micdadei, L. bozemanii, L. dumoffii y L. longbeachae.
 Nutrición: son exigentes y precisan L-cisteína, ion férrico y α-cetoácidos para su
crecimiento.
 ESPECIES DEL GÉNERO LEGIONELLA
Características de la prueba bioquímica
1. Móvil EPIDEMIOLOGÍA Y PATOGENIA
2. Catalasa positiva
3. Oxidasa negativa  Cultivo: Las colonias desarrollan en 3-5 días (medio de
4. Hidrólisis de hipurato positiva agar tamponado con extracto de levadura y carbón
vegetal). No crecen en medios comunes.
Especies Neumonía Fiebre de Pontiac P. Bioquím
 El crecimiento de Legionella se ve favorecido en el agua
L. pneumophila + Serogrupos 1 y 6 Hipurato (+) caliente, por lo que la exposición a fuentes de agua
L. micdadei + - caliente es un factor de riesgo importante para contraer la
L. gormanii + - enfermedad.
L. dumoffii + -  En el ser humano, la célula diana es el macrófago alveolar,
L. bozemanii + - aunque también pueden ser invadidos otros tipos
celulares.
L. longbeachae + -
L. wadsworthii + -  La infección pulmonar aguda y grave provoca una
respuesta inflamatoria necrótica aguda que se acompaña
L. jordanis + -
de una mayor presencia bacteriana en el espacio
L. feeleii + + - extracelular.
L. oakridgensis + -
 LEGIONELLA PNEUMOPHILA
CLÍNICA
ENFERMEDAD DEL LEGIONARIO: es una forma
severa de neumonía de inicio súbito con síntomas como
confusión, dolor de cabeza, diarrea, dolor abdominal,
fiebre, escalofríos, mialgia y tos (no productiva o
productiva con esputo).

Se puede distinguir de otras neumonías: patrón

radiológico de infiltración alveolar ocupante y, por lo
general, ausencia de respuesta a los antibióticos b-
lactámicos (amplio espectro) o aminoglucósidos.
 LEGIONELLA PNEUMOPHILA
CLÍNICA
Fiebre de Pontiac: se caracteriza tanto en niños como en adultos
por fiebre elevada, mialgia, cefalea y una debilidad extrema que
suele durar unos pocos días. También puede existir tos, dificultad
respiratoria, diarrea, confusión y dolor torácico, pero no existen
signos de infección invasiva.

DIAGNÓSTICO

 El cultivo de Legionella a partir del esputo, de otras muestras

obtenidas de las vías respiratorias, de la sangre o de los tejidos
es el PATRÓN ORO con el que comparar los métodos
diagnósticos de detección indirecta, pero resulta siendo difícil
por el proceso de descontaminación y el medio apropiado.

Descripcion: Condensación pulmonar bilateral de predominio en lóbulos  El ANÁLISIS DEL ANTÍGENO URINARIO que detecta el
superiores. El patrón radiológico es predominantemente intersticial. La serogrupo I de L. pneumophila ha revolucionado el diagnóstico
neumonía por Legionella puede originar cualquier patrón radiológico. Debe
sospecharse en inmunodeprimidos, especialmente si cursa con disnea,
de la infección por Legionella y posee una sensibilidad del 80%
diarrea, hiponatremia, etc. No obstante la clínica puede ser muy inespecífica. y una especificidad del 99%.
 Universidad Nacional «Jorge Basadre Grohmann»
FACI - E.P Biología Microbiología
Bacteriología

GÉNEROS: BORDETELLA Y HAEMOPHILUS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus
 Género: Bordetella
CARACTERÍSTICAS
Género Bordetella. 7 especies:
 Familia: ALCALIGENACEAE
 B. pertussis: es el principal patógeno humano y el que
 Aislada por primera vez en cultivo puro en 1906 por
produce la tos ferina, infección respiratoria, muy contagiosa
Bordet y Gengou
y grave en lactantes. Gran plasticidad génica.
 Cocobacilos gramnegativos
 Disposición: como células únicas o en pares
 B. parapertussis: origina un cuadro similar pero más leve y
 Cápsulado y no esporulados
 B. bronchiseptica: se comporta como patógeno oportunista.
 Inmóviles
 Poseen pili y oxidan aminoácidos como fuente de
energía.
 Aeróbica estricta y metabolismo oxidativo
 Crecimiento: exigente, se desarrolla en forma lenta
en los medios de cultivo (Bordet-Gengou, almidón-
agar-sangre). Colonias de B. pertussis aparecen usualmente a las 72 horas, son
 Tarda 48 a 72 horas en crecer, pequeñas, brillantes, lisas, de bordes regulares, convexas y de
 Se identifican por métodos inmunológicos. color perlado, (gotas de mercurio, o de rocío)
 Bordetella pertussis
EPIDEMIOLOGÍA CUADRO CLÍNICO

 B. pertusssis es un patógeno humano estricto, no La tos ferina es un cuadro clínico característico de los
aislándose de animales ni personas sanas. bebés. Tres periodos:
 Vía de transmisión habitual: vía aérea (secreciones
 1° CATARRAL: con rinorrea, lagrimeo, conjuntivitis,
respiratorias de enfermos).
malestar general y febrícula. Periodo más
PATOGENIA contagioso.

La acción patógena de B. pertussis ocurre sin invasión de los  2° PAROXÍSTICO: Tos convulsa. Puede haber
tejidos, es debida a la producción de una larga serie de niveles de oxígeno bajos o desmayarse durante un
factores de virulencia: acceso de tos. Algunos sufren fractura (o fisura) de
costilla debido a la fuerza con la que tosen. La
 La toxina pertussis, hiperpresión da lugar a vómitos e incluso a
 La hemaglutinina filamentosa y hemorragias y cianosis facial. La fiebre no es alta y
 La pertactina (principal componente de la vacuna pertusis hay leucocitosis.
acelular). Se unen a los cilios de las células epiteliales  3° CONVALESCENCIA: los ataques de tos
donde se multiplican y producen toxinas que alteran la disminuyen y la curación suele ser total.
defensa mucociliar y necrosan las células.
 Bordetella pertussis
FACTORES DE VIRULENCIA

 ADHESINAS HEMAGLUTININA FILAMENTOSA

(HAF) FIMBRIAS
 TOXINA PERTUSIS
 TOXINA ADENILATO-CICLASA
 CITOXINA TRAQUEAL
 TOXINA DERMONECRÓTICA
 LPS
 PERTACTINA
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
 Muestra de estudio: exudado nasofaríngeo
 Cultivo: es la técnica de confirmación diagnóstica
Aislamiento: cultivos durante el periodo catarral. Medios:
Bordet-Gengou y Regan-Lowe.
 Incubación: 36-37°C por 7-12 días (las colonias con un
pequeño halo de hemólisis que tiene aspecto de perla).
 Identificación fenotípica: Pruebas bioquímicas como catalasa,
Bordetella pertussis
ureasa y oxidasa
 Prueba de confirmación: por inmunofluorescencia (IFD) con
anticuerpos policlonales o monoclonales o aglutinación con
antisueros específicos desde la cepa.
 PCR: Detección molecular de ADN. Son rápidas, sensibles y
específicas.
 Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos: B. pertussis es
sensible a macrólidos y antimicrobianos de elección.
Bordetella bronchiseptica
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Bordetella pertussis

Bordetella pertussis
 HAEMOPHILUS INFLUENZAE
CARACTERÍSTICAS GENERALES FACTORES DE VIRULENCIA
 Descritos en 1892 por RICHARD PFEIFFER durante  Polisacárido capsular (a-f)
una pandemia de gripe.  Lipooligosacáridos (los)
 Cocobacilo gram negativo, inmóvil.
 Inmunoglobulina A proteasa
 No esporulado.
 Habitat: vía respiratoria superior
 Existen cepas capsuladas y otras no capsuladas,
designadas ‘tipificables’ y ‘no tipificables’
respectivamente.
 Exigentes desde el punto de vista nutricional, requieren
factor x (hemina) o factor v (NAD) o ambos para su
desarrollo.
 Aerobios o anaerobios facultativos
 Crecen en medios enriquecidos como agar chocolate.
 Serotipos capsulares: 6 (a, b, c, d, e, f)
 Factor de Virulencia principal: cápsula, serotipo b

SEROTIPO B: ASOCIADO A INFECCIONES SISTÉMICAS SEVERAS COMO MENIGITIS, NEUMONIAS, ARTRITIS

SÉPTICAS, EPIGLOTITIS, CELULITIS
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
 Toma de la muestra y transporte en medio
adecuado
 Examen Gram
 Cultivo en medios enriquecidos y antibiograma
 Métodos rápidos (hib)
 Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología
Bacteriología

DIAGNÓSTICO
BACTERIOLÓGICO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN COCOS
GRAMPOSITIVOS CATALASAS NEGATIVOS

Copyright © 2020 - Dr. César Cevallos Columbus

 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
MATERIALES DE TRABAJO CONDICIONES PREVIAS DEL PACIENTE
 Microscopios
 Jarra de Gas Pak 1. El paciente no debe haber recibido antibióticos en los
 Asas bacteriológicas últimos 8 días, previos a la obtención de la muestra.
 Mecheros 2. El paciente debe acudir en ayunas al laboratorio.
 Set colorantes de Gram 3. Debe cepillarse los dientes y no practicar gargarismo.
 Aceite de inmersión
 Discos de bacitracina
 Discos de optoquina
MUESTRAS CLÍNICAS
 Cultivo de S. aureus
 Placas de agar Sangre (de cordero) 1. Streptococcus pyogenes : Hisopado faríngeo, secreción
 Placas de agar chocolate bronqial.
 Tubos con medio Esculina Bilis 2. Streptococcus agalactiae : secreción vaginal, bronquial,
 Tubo con caldo nutritivo con NaCl 6.5% esputo
 Peróxido de Hidrógeno 3. Streptococus pneumoniae : Esputo, secreción bronquial
 Gradillas 4. Enterococcus faecalis : Orina, heces
 Lámina portaobjetos
 Lápiz marcador
 Hisopos estériles TOMA DE MUESTRA
 Bajalengua estériles
 Alcohol 1. Condiciones de asepsia y esterilidad
 Micropipetas 2. Calidad de la muestra
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
TOMA DE MUESTRA
1. Colocar al paciente sentado y pedirle que trague saliva fuertemente dos
veces.
2. Pedir al paciente, viendo hacia arriba que abra la boca, saque la lengua y
diga aahh, el cual sirve para elevar la úvula y evitar las náuseas.
3. Con un bajalenguas, presionar fuertemente la lengua hacia abajo y
simultáneamente iluminar bien el fondo de la garganta (detrás de la
úvula o campanilla), con una lámpara portátil de baterías o “flash light”.
4. Localizar en el fondo de la garganta y en las amígdalas (que se
encuentran a los lados), las siguientes lesiones:
5. Inflamación (enrojecimiento)
6. Pus (secreción blanquecina o amarillenta)
7. Úlceras blanquecinas
8. Con un hisopo estéril frotar firmemente las lesiones con sumo cuidado de
no tocar la lengua, la campanilla, la pared interna de los carrillos
(cachetes) o los labios, al retirar el hisopo.
9. Obtener un segundo hisopado de fauces para la siembra en AS de
cordero.
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

PROCEDIMIENTO EXAMEN DIRECTO: COLORACIÓN GRAM

1. Examen directo: Coloración Gram

2. Aislamiento en medios primarios y enriquecidos
(agar sangre, agar chocolate, agar bilis esculina):
Incubación 18-24 horas en anaerobiosis.
3. Lectura: cultural, actividad hemolítica (*)
4. Examen Gram (confirmación) S. pneumoniae
5. Pruebas de Identidad: S. pyogenes

 Prueba Bioquímica: Prueba de la catalasa E. faecalis

 Prueba de sensibilidad: Prueba de la Optoquina
y de la Bacitracina
 Prueba de CAMP
 Prueba de la Esculina Bilis
S. agalctiae
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
Cultivo de hisopado faríngeo (Faringitis aguda) en ASC. SE Microorganismos habituales de vías respiratorias superiores.
observa aislamiento de estreptococos beta hemolíticos NO se observa aislamiento de estreptococos beta hemolíticos.
 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO

Cultivo de secreción bronquial en ASC. SE observa Cultivo de orina en ASC. SE observa aislamiento de
aislamiento de estreptococos alfa hemolíticos enterococos alfa hemolíticos
 PRUEBAS DE IDENTIDAD

PRUEBA DE LA BACITRACINA PRUEBA DE LA OPTOQUINA PRUEBA DEL CAMP

Christie, Atkins y Munch-Petersen

 PRUEBAS DE IDENTIDAD

PRUEBA DE BILIS ESCULINA PRUEBA DE LA TOLERANCIA EN NACL 6.5%

Fundamento: la esculina, un glicósido, es hidrolizada por algunas bacterias, dando como

productos de degradación glucosa y esculetina. La esculetina al reaccionar con el hierro forma
un complejo de color castaño oscuro o negro.
 TABLA DE IDENTIDAD DE ESPECIES DE STREPTOCOCCUS

PYR = Pirrolidonil arilamidasa

 Universidad Nacional “Jorge Basadre Grohmann”
Facultad de Ciencias – E.P de Biología - Microbiología
Bacteriología

VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS

Y CULTIVOS DE REFERENCIA

PRÁCTICA N° 01

Copyright © 2020 - DR. CÉSAR CEVALLOS COLUMBUS

 VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS Y CEPAS DE REFERENCIA
¿QUÉ ES UN MEDIO DE CULTIVO? PRINCIPALES TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIO DE CULTIVO: es un sustrato o una solución de POR SU CONSISTENCIA

nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos.
POR SU USO
SÓLIDOS
LÍQUIDOS O CALDOS POR SU COMPOSICIÓN
COMPONENTES HABITUALES CONDICIONES QUE DEBE CUMPLIR SEMISÓLIDOS
DE UN MEDIOS DE CULTIVO UN MEDIO DE CULTIVO AISLAMIENTO POR SU PRESENTACIÓN
CRECIMIENTO GENERAL
IDENTIFICACIÓN
© Agar © Temperatura óptima NATURALES
TRANSPORTE SINTÉTICOS O SEMISINT.
© Extractos © Grado de humedad MANTENIMIENTO DE CEPAS COMPLEJOS
© Peptonas © pH
© Fuente de energía © Presión osmótica DESHIDRATADOS
© Fuente no energética © Presión de oxígeno SÓLIDOS EN PLACA PETRI
SÓLIDOS EN TUBO
© Fluidos corporales © Esterilidad del medio
LÍQUIEDOS EN TUBO
© Amortiguadores © Luz ambiental SEMISÓLIDOS EN TUBO
© Indicadores de pH © Viscocidad DE DOBLE FASE EN FRASCO O
© Agentes reductores TUBO
© Agentes selectivos
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS Y CEPAS DE REFERENCIA
Pre aislamiento
Aislamiento
Identificación
Purificación
Estudio de metabolismo
Estudio macroscópico
Pruebas de sensibilidad
Pruebas de CMI y CMB
Conservación
Transporte
Preparación de vacunas
Obtención de metabolitos
 VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS Y CEPAS DE REFERENCIA
El desarrollo y realización de análisis de control microbiológico (Bacteriológico) es una herramienta que tiene una
repercusión decisiva en el ámbito del diagnóstico clínico, de la salud pública, la tecnología alimentaria y el medio ambiente.

TRES CRITERIOS IMPORTANTES

La FIABILIDAD de los resultados obedece a criterios de acreditación que deben

presentar los laboratorios de diagnóstico, estos deben estar correctamente validadas.

La VALIDACIÓN no es más que la confirmación mediante la aportación de evidencia objetiva de datos que respaldan la existencia o
veracidad de algo, estos pueden obtenerse por medio de la observación, medición, ensayo/prueba u otros medios que han cumplido los
requisitos para una utilización o aplicación específica prevista.

CALIDAD. Conjunto de propiedades y características de un producto, proceso o servicio que le confieren su aptitud
para satisfacer las necesidades establecidas o implícitas.
 MEDIOS DE CULTIVO
EL LABORATORIO
DEBE ASEGURAR

LA CALIDAD
MEDIOS DE CULTIVO REACTIVOS

APROPIADA

PREPARACIÓN PREPARACIÓN
ESTE ES UN PUNTO CRÍTICO
ESTERILIZACIÓN CONSERVACIÓN
 EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
OBJETIVO Definir REQUISITOS
Se debe verificar (siempre que sea necesario) que los medios de cultivo y
diluyentes preparados por el laboratorio tengan las características adecuadas con
METODOLOGÍA respecto a:

Recuperación o supervivencia de los microorganismos de interés.

EVALUAR (Productividad)
Inhibición o supresión de los microorganismos no deseados. (Selectividad )
PRODUCTIVIDAD SELECTIVIDAD Propiedades bioquímicas (diferenciales y diagnósticas)
Propiedades físicas (por ejemplo, pH, volumen).
Sea estéril.

MEDIOS DE CULTIVO PRODUCTIVIDAD

DEFINICIÓN: rendimiento, recuperación, crecimiento de un microorganismo
que se espera que desarrolle en el medio de cultivo.
PREPARACIÓN y ESTERILIZACIÓN Según el medio de cultivo, se usa una cepa apropiada de referencia target
constituyen pasos críticos en el logro de para evaluar la productividad.
este objetivo
EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
S. aureus S. epidermidis

EJEMPLO: En un medio de cultivo no selectivo

como por ejemplo el PCA se evalúa el adecuado
desarrollo de las cepas target o blanco.
En este caso se usan E. coli ATCC 25922,
S. aureus ATCC 6538 y B. subtilis ATCC 6633
 EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

SELECTIVIDAD

DEFINICIÓN: la supresión del crecimiento de un

microorganismo que se espera sea inhibido en el medio
de cultivo.
Según el medio se usa una cepa apropiada de referencia
no-target para evaluar la selectividad

En un medio de cultivo selectivo como por ejemplo Caldo

Lauril sulfato (LST). Se evalúa el desarrollo de las cepas
target y no target.
En este caso las cepas target que se usan son E.coli ATCC
25922, C.freundii ATCC 43864 y las cepas no target
Enterococcus faecalis ATCC 29212. Evalúa reacciones
características: gas y turbidez.
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS

PRODUCCIÓN DE MEDICAMENTOS

PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS

ELABORACIÓN DE REACTIVOS

PRODUCCIÓN DE VACUNAS

AGENTES BIORREMEDIADORES
¿POR QUÉ ES NECESARIO LA PRESERVACIÓN Y
USO BIOTECNOLÓGICOS
MANTENIMIENTO DE LOS CULTIVOS MICROBIANOS?
VALIDACIÓN : MEDIOS DE CULTIVO
TAMBIÉN

Validación de métodos ESTUDIOS DE INVESTIGACIÓN

Asignación de valores a otros cultivos
INVESTIGACIÓN FORENSE
Comparación de resultados obtenidos por distintos
laboratorios
DIAGNÓSTICO CLÍNICO
Control de reactivos, métodos y procedimientos
Estudios comparativos
ANÁLISIS DE ALIMENTOS Y AGUAS
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Una CEPA es un CULTIVO MICROBIANO (Bacteriano) que
¿QUÉ ES UNA CEPA procede de un solo germen y por lo tanto tienen el mismo
patrimonio genético.

CLASIFICACIÓN CEPAS

BIOTIPO MORFOTIPO SEROTIPO PATOTIPO

Estructura, composición química de Basado en los antígenos que

la PC, pigmentos, requerimientos presenta en la superficie de su
nutricionales, necesidades gaseosas, membrana
requerimiento y tolerancia a T° y pH,
capacidad de utilizar fuentes de “C”,
“N”, “S”, etc. Basado en el tamaño Basado en la patogenicidad de los
y la forma. individuos de la población de los
patógenos.
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
CEPAS DE REFERENCIA CEPARIOS

Cepas con características fenotípicas y genotípicas definidas El sitio de depósito no solo de cepas de referencia, sino también de
que son empleadas como control para las determinaciones microorganismos aislados, caracterizados e identificados a partir de muestras
microbiológicas. de origen humano, obtenidas de investigaciones realizadas.

REQUISITOS ¿POR QUÉ ES IMPORTANTE CONSERVARLOS

Estabilidad y reproducibilidad de características típicas, morfológicas,

bioquímicas, fisiológicas, serológicas y genéticas de cada una de ellas.
VIABILIDAD PUREZA ESTABILIDAD

CRITERIOS DE CONSERVACIÓN ¿QUIÉNES DEBEN POSEER CEPARIOS?

 Viabilidad,
 Centros de referencia epidemiológica
 Pureza,
 Universidades
 Costos del proceso
 Cantidad de cultivo  Hospitales
 Frecuencia de uso  Instituciones privadas
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
TIEMPO DE CONSERVACIÓN

Conservación de microorganismos NO SUSCEPTIBLES

están los métodos restringidos, basados en la
CORTO PLAZO eliminación del agua de las células: LARGO DE PLAZO
 Desecación en papel filtro,
 En suelo,
 Arena,
TRANSFERENCIA OBLIGADA MÉTODOS DE ELECCIÓN
 Sílicagel,
 Esferas de alginato o sal.

ACUMULACIÓN DE PRODUCTOS TÓXICOS ULTRACONGELACIÓN LIOFILIZACIÓN

ENVEJECIMIETO Y MUERTE CELULAR

SU VIABILIDAD Y ESTABILIDAD GENÉTICA

1. La probabilidad de mutaciones, lo que ocasiona cambios fenotípicos
2. La pérdida de la calidad axénica de estos cultivos, por el manejo sostenido.
3. Espacio requerido, ya que dependerá de la cantidad de cepas a preservar. Se recomienda crear un duplicado de la colección de
microorganismos y almacenarla en un lugar diferente.
CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS

CULTIVOS O CEPAS DE REFERENCIA CEPAS DE COLECCIÓN (Cepas de referencia): Microorganismos definidos en

sus características fenotipicas y genotípicas, depositados y mantenidos en una
Colección de Cultivos (CC) o Centro de Recursos Biológicos (BRC) y catalogados
El laboratorio debe utilizar cepas de referencia con el acrónimo de la colección/BRC seguido de un número identificativo.
para demostrar la: TRAZABILIDAD

CEPAS DE RESERVA: cepas idénticas

obtenidas mediante un único subcultivo
LA TRAZABILIDAD SE REFIERE AL ORIGEN DEL PRODUCTO
de una cepa de referencia.

CEPAS DE TRABAJO: subcultivos primarios

La TRAZABILIDAD es la capacidad de rastrear todos los obtenidos de una cepa de reserva.
procesos, desde la adquisición de materias primas hasta la
producción, consumo y eliminación, para poder aclarar "cuándo y CEPAS COMERCIALES: cepas suministradas por casas
dónde fue producido qué y por quién" comerciales diferentes de las colecciones de cultivo
o Centros de Recursos Biológicos, y que pueden o no
proceder de una colección de cultivos.

CEPAS SALVAJES: No proceden de CC ni de BRC.

 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
Código Microorganismo Quanti-Cult Plus Strain LOS MICROORGANISMOS DE REFERENCIA PUEDEN INCLUIR
Q1100C Aspergillus brasiliensis (formerly A. niger) ATCC® 16404 TM* Cepas positivas robustas con características típicas
Q1221C Bacillus subtilis ATCC® 6633TM* Cepas positivas con crecimiento débil
Q5220C Burkholderia cepacia ATCC® 25416TM* Cepas bioquímicamente no reactivas (aquellas que
Q1503C Candida albicans ATCC® 10231TM* muestran diferentes reacciones de fermentación o
Q1601C Candida albicans ATCC® 2091TM* fluorescencia)
Q1703C Clostridium sporogenes ATCC® 11437TM* Cepas completamente inhibidas
Q1700C Clostridium sporogenes ATCC® 19404TM*
Q7030C Enterococcus faecalis ATCC® 29212TM*
Q7085C Escherichia coli ATCC® 8739TM*
Q4075C Kocuria rhizophila (formerly M. luteus) ATCC® 9341TM*
¿QUÉ PASA SI NO SE CUMPLE CON ESOS REQUÍSITOS?
Q5210C Pseudomonas aeruginosa ATCC® 9027TM*
Salmonella enterica subsp. enterica
Q6007C
serovar Abony
NCTC® 6017
NO permitirá asegurar la CALIDAD del resultado de
Q6000C†
Salmonella enterica subsp. enterica
ATCC® 14028TM*
experiencias que utilicen microorganismos:
serovar Typhimurium
Q6100C
Salmonella enterica subsp. enterica
ATCC® 13311TM*
NI en el diagnóstico
serovar Typhimurium
Q7016C Staphylococcus aureus ATCC® 6538TM*
NI en control de calidad
Q9002C Staphylococcus aureus ATCC® 6538PTM* NI en el contralor
Q6500C Staphylococcus epidermidis ATCC® 12228TM* NI en la investigación científica
Q7000C† Streptococcus pyogenes ATCC® 19615TM*
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
CEPAS DE REFERENCIA PRIMERA OPCIÓN: de una colección nacional e internacional
reconocida, con su respectivo Registro y Certificado.
Si una cepa se adquiere por cualquier vía que no sea la
CEPAS NCTC: Colección Nacional de Cultivos Tipos. Londres.
propia colección, NO se puede mencionar utilizando el
número que tienen en esa colección, sino solamente como CNCM: Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos.
Francia.
derivada de la cepa de colección.
ATCC: Colección Americana Cultivos Tipos. Rockville, EU.
ADQUISICIÓN DE CEPAS DE REFERENCIA CCTM: Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos.
Instituto Pasteur
NCIBM: Colección Nacional de Bacterias de la Marina Industrial.
1era opción: Obtención directa a partir de una colección CECT: Colección Española de Cultivos Tipos.
nacional e internacional reconocida.
2da opción: Proveedores comerciales certificados por ISO Los estándares biológicos ATCC son utilizados para
9001. asegura la FIABILIDAD de los resultados de investigación,
la REPRODUCIBILIDAD de la experimentación y la
Comercializan repiques de cepas de referencia adquiridas CONSISTENCIA en el método científico. Las normas ATCC
en una colección reconocida. Generalmente el 3er o 4to ayudan a garantizar la SEGURIDAD y la CALIDAD en sus
repique. Deben mantener sus recipientes originales. productos.
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
CEPA DE REFERENCIA
PROVEEDORES DE CEPAS DE REFERENCIA
SEGUNDO OPCIÓN: Reconstitución
(Sólo se acepta un único repique)
*
Proveedores acreditados por ISO 9001 que realizan
repiques a partir cepas adquiridas en la colección OBTENCIÓN DE LAS CEPAS DE RESERVA
reconocida. Oxoid Companie.
*
EJEMPLO: Microbiologics® es un proveedor licenciado de CONSERVACIÓN MEDIANTE DISTINTOS MÉTODOS Se subcultiva una
Cepas Originales NCIMB, NCTC y NCPF. Estas colecciones sola vez.
de referencia se utilizan en Investigación, Desarrollo y (Liofilización, nitrógeno líquido, ultracongelación rápida, etc.)
Educación para numerosas aplicaciones. Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento
Descongelación / reconstitución
*
CEPAS DE TRABAJO
(Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento)

UTILIZACIÓN EN EL CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS,

VALIDACIÓN DE MÉTODOS Y CONTROLES INTERNOS DE CALIDAD

( * ) Deben realizarse los controles de pureza y pruebas bioquímicas de la cepa.

 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS

REGISTRO DE CONTROL DE CALIDAD

CONTROL DE CALIDAD DE PUREZA Y VIABILIDAD
DE PUREZA Y VIABILIDAD DE LAS CEPAS

Se realiza a diferentes niveles del proceso. CADA VEZ QUE Fecha del control.
HAGA UN REPIQUE.
Identificación de la cepa. Género y especie del microorganismo.
Su finalidad es asegurarse que las cepas conservan su TIPO y Nº de colección.
viabilidad y sus caracteres bioquímicos.
Tipo de cepa (Cepa de referencia, reserva o trabajo).
Frecuencia de realización de este control: para las cepas Pruebas a realizar (depende del microorganismo):
de reserva almacenadas el laboratorio la establecerá en
cada caso.
Coloración de Gram
En caso de no presentar las características establecidas Características de las colonias en medios selectivos.
se ejecuta la Acciones correctivas establecida en el
procedimiento. Pruebas bioquímicas y serológicas.
 CEPAS O CULTIVOS MICROBIANOS
MODELO DE PROCEDIMIENTO DE COMPROBACIÓN DE LOS CULTIVOS
MUCHAS GRACIAS