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POLARIMETRIA

La polarimetría es una técnica que consiste en medir la rotación óptica producida al pasar luz polarizada por sustancias quirales. El objetivo fue determinar la pureza de glucosa usando polarimetría y comparar la concentración de una muestra de suero de dextrosa. Se prepararon soluciones de glucosa y se midió su rotación óptica, obteniendo una curva de calibración que permitió cuantificar la concentración de glucosa en la muestra problema.

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POLARIMETRIA

La polarimetría es una técnica que consiste en medir la rotación óptica producida al pasar luz polarizada por sustancias quirales. El objetivo fue determinar la pureza de glucosa usando polarimetría y comparar la concentración de una muestra de suero de dextrosa. Se prepararon soluciones de glucosa y se midió su rotación óptica, obteniendo una curva de calibración que permitió cuantificar la concentración de glucosa en la muestra problema.

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POLARIMETRIA

Fecha de entrega: 24/10/2020

ªMontaña Tabares Laura , Murcia Perea Esteban ᵇ, Duran Gonzalez Isabella ᶜ


Universidad Santiago de Cali, Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Microbiología
Informe presentado al Prof. Jhon Jairo Rios Acevedo
ª [email protected]  ᵇ [email protected]
[email protected]

RESUMEN

La polarimetría es una técnica que consiste en medir la rotación óptica producida sobre un haz de luz
polarizada al pasar por una sustancia ópticamente activa, dicha rotación está determinada por la
estructura molecular y la concentración de moléculas quirales. El objetivo de esta práctica fue
determinar la pureza a partir de la cuantificación de una solución de glucosa preparada en el laboratorio
y se realizó una comparación de la concentración a partir de una muestra problema de suero de dextrosa
al 10%; por medio de esto, fue posible conocer el fundamento y el procedimiento para la determinación
de la concentración de una solución azucarada. Usando la técnica polarimétrica y conociendo el poder
rotatorio específico de esta en disolución acuosa

PALABRAS CLAVES: Polarimetría, rotación óptica, moléculas quirales.

ABSTRACT

Polarimetry is a technique that consists of measuring the optical rotation produced on a polarized light
beam when passing through an optically active substance. Said rotation is determined by the molecular
structure and the concentration of chiral molecules. The objective of this practice was to determine the
purity from the quantification of a glucose solution prepared in the laboratory and a comparison of the
concentration was made from a test sample of 10% dextrose serum. Through this method, it was possible
to know the basis and the procedure for determining the concentration of a sugar solution. Using the
polarimetric technique and knowing the specific rotatory power of this in aqueous solution.

KEYWORDS: Polarimetry, optical rotation, chiral molecules.

INTRODUCCIÓN carbono, nitrógeno, fósforo o azufre en la


molécula, lo cual es conocido como quiralidad.
La polarimetría es una técnica que incluye toda la La quiralidad generalmente es descrita como una
investigación de los fenómenos ópticos en los imagen de espejo de una molécula, la cual no
cuales interviene la luz polarizada, nos permite puede superponerse con ella misma (Figura 1). Al
medir el cambio que sufre el plano de esta, polarizar la luz y dejar que tan solo vibre en un
cuando atraviesa un medio transparente formado plano, si hacemos pasar la luz por una disolución
por sustancias ópticamente activas.1 La actividad de una sustancia quiral, ésta girará el plano de la
óptica rotatoria de una sustancia tiene su origen luz polarizada.1
en la asimetría estructural de los átomos de
determinaciones rápidas, deben ser fáciles de
manejar, y en algunos casos es bueno contar con
la posibilidad de automatizar los análisis
mediante un automuestreador.3

En esta práctica se realizaron diversas pruebas


empleando el polarímetro. Estas pruebas
consistieron en la determinación de la rotación de
Figura 1. Átomo de carbono quiral (en gris), de la glucosa, así como la determinación de la
un monosacárido unido a cuatro sustituyentes rotación en una muestra problema de
diferentes. concentración conocida proporcionada en el
laboratorio. Además se logró reconocer
Basándonos en esta propiedad de los azúcares, la plenamente el polarímetro y su funcionamiento.
polarimetría se puede utilizar en la industria
agroalimentaria para la cuantificación de sacarosa METODOLOGÍA
en la industria azucarera, de lactosa en la
industria láctea y del almidón tras su hidrólisis Para comenzar, la línea de calibración por
parcial a glucosa en la industria cerealista. El uso estándar externo se preparan 6 balones aforados,
de polarímetros también es un método extendido en los cuales se agrega glucosa con los siguientes
para la para la comprobación de la pureza en pesos; 1,0;5,0;10,0;15,0; 20,0 gramos, se lleva el
disoluciones azucaradas.2 aforo hasta 100 mL con agua destilada,
posteriormente el balon aforado que sobra se
Por otra parte, el polarímetro nos dará realiza el respectivo blanco. Por otra parte, se
información sobre la estructura molecular de la debe purgar la celda de 2 dm del polarímetro y
sustancia, su concentración, y en algunas llenarla con agua destilada, a su vez se calibra el
ocasiones nos dará la información sobre el polarímetro en cero. Así mismo se debe purgar la
solvente utilizado. La actividad óptica también es celda cada vez que se utilice cada una de las
influenciada por la temperatura, la longitud de soluciones anteriormente ya mencionadas y la
onda de la luz, y la longitud del camino óptico solución problema (suero de dextrosa al 10%),
(cubeta). Esto es importante, ya que el tipo de para cada una se debe leer su rotación en el
equipo a utilizar va a estar determinado por la polarímetro y se realizar por triplicado cada
exactitud necesaria en la determinación. El lectura de las soluciones.
ángulo de rotación permite asegurar la identidad y
calidad de sustancias, y su concentración en Por otro lado, en la línea de calibración por
mezclas. También puede indicar el progreso de adición estándar; se agregan 30 mL de la solución
reacciones y conversiones.2,3 Los polarímetros se problema a 6 balones aforados y se lleva el aforo
utilizan en un alto rango de aplicaciones, desde la hasta 100 mL a uno de los 6 balones aforados, en
determinación de pureza y concentración de los 5 balones restantes se les agrega; 0,5, 2,5; 5,0;
fármacos, hasta el chequeo de la madurez de 7,5; 10,0 gramos de glucosa, posteriormente se
productos agroquímicos, o la medición del disuelva bien, se completa hasta el aforo (100
contenido de azúcares en golosinas y bebidas. mL) con agua destilada, de la misma forma que se
Para lograr una medición de alta exactitud, la mencionó en el párrafo anterior, debe ser purgado
temperatura de la muestra debe ser controlada de la celda cada vez que se utiliza una solución
una manera muy exacta, porque la actividad diferente y se lee la rotación en el polarímetro, a
óptica depende de la temperatura. Además, los su vez realizando la lecturas por triplicado en
polarímetros deben ser capaces de realizar cada una de la soluciones.
Tabla 2. Cuantificación de glucosa + suero de
RESULTADOS dextrosa al 10% por estándar externo.

Ahora bien, continuando con la práctica de


laboratorio, en la tabla 1 y 2 se encuentran
expresados los resultados de rotación que se
obtuvieron por triplicado para cada una de las
soluciones preparadas para la cuantificación de
glucosa en adición estándar como lo indica la
metodología.

Tabla 1. Cuantificación de glucosa por adición


estándar.

Por otra parte, con los valores de concentración


(% p/v) y los resultados de rotación de la tabla 1,
se realizó la curva de calibración (gráfica 1) y se
obtuvo un R2 de 0,978.

Asimismo, en la tabla 2 se encuentran las lecturas


de rotación por triplicado de las soluciones
preparadas y la muestra, de la cuantificación de
glucosa por estándar externo, a su vez se calculó
el promedio de la muestra problema (suero de
dextrosa). Gráfica 1. Adición estándar, concentración vs
ángulo de rotación.
De la misma forma, en la gráfica 2 se realizó la Donde:
curva de calibración con la concentración de las
soluciones y el resultado de rotación expresados λ: 589,3 nm (normalmente se utiliza la longitud
en la tabla 2, obteniendo un valor de R2 = 0,9922. de onda de la línea D del sodio)
T: 20 ºC
α: ángulo de rotación de la luz polarizada
l= espesor de la capa de muestra atravesada (dm)
c= concentración de la disolución de sustancia
ópticamente activa (g/mL). Salvo que se indique
lo contrario el disolvente es el agua.4

Haciendo uso de la ecuación 1, junto con la


concentración obtenida previamente y el
promedio de los ángulos de rotación de la
Gráfica 2. Cuantificación de glucosa en suero muestra problema evidenciados en la tabla 2, se
dextrosa al 10% mediante la curva de estándar calculó la rotación específica donde se obtuvo el
externo. siguiente resultado:

Por otro lado, siendo alto el porcentaje de glucosa


obtenido a partir del método de adición estándar,
se realizó la cuantificación por medio de la curva
de calibración del estándar externo y se calcula la
concentración usando la ecuación de la recta
siendo:
DISCUSIÓN
y= 1,2088 x - 37,17
Las gráficas 1 y 2 nos indican un R2 de 0,978 y
-26,80=1,2088 x -37,17 0,9922 respectivamente lo cual nos indican que
están dentro del rango de aceptación.
Al despejar x obtenemos: Comparando este valor con el que está estipulado
en la teoría, en el cual, el coeficiente de
-26,80+37,17/1,2088= 0,6843 determinación (R2) debe ser mayor a 0,95 para
obtener una linealidad aceptable, por tal razón se
Se obtuvo una concentración de 6,84 % p/v satisfacen las condiciones de linealidad y se
cumple con el requerimiento del coeficiente de
El ángulo a través el cual una molécula rota la luz determinación ya mencionado anteriormente, lo
linealmente polarizada está dada por la siguiente que denota correspondencia entre los valores de
ecuación: absorbancia obtenidos.4

Por otra parte, se afirma que los compuestos


evaluados tienen un ángulo de rotación, donde
rotan la luz en dirección opuesta a las agujas del
reloj, son llamados levógiras o isómeros ópticos
Ecuación 1. Fórmula usada para calcular la (-)
rotación específica.
La capacidad de estas moléculas de hacer girar el
plano de polarización, es una propiedad que se le La rotación óptica es la propiedad que presentan
atribuye únicamente a una molécula ópticamente algunas sustancias líquidas o solutos en solución
activa, es decir, un compuesto quiral, ésta es de rotar el plano de polarización de la luz
constante para unas condiciones determinadas y polarizada que incide sobre la misma. Esta
se utiliza por ello en su caracterización.5 propiedad es característica de muchas sustancias
que presentan centros quirales, constituidos muy
La mutarrotación es un proceso espontáneo de frecuentemente por átomos de carbono con 4
isomerización que ocurre en monosacáridos al sustituyentes diferentes. El número máximo de
disolverlos en agua y el cual hace referencia a la isómeros ópticos posibles de una molécula es de
rotación óptica que sufre el carbono anomérico al 2n , siendo n el número de centros asimétricos.5
pasar de un confórmero al otro. Puede pasar de un
enlace de carbono alfa a uno beta, o viceversa. En Moléculas con rotación óptica:
la serie “D”, por convención si la disposición del -2-Bromobutano
OH es hacia arriba lo llamamos beta, si es hacia -Ácido 2-aminopropanoico (alanina)
abajo lo denominamos alfa, ocurriendo lo -Ácido 2-hidroxipropanoico (Ácido láctico)
contrario en la serie “L”, donde el OH hacia -Limoneno
arriba indica el confórmero alfa, y hacia abajo, el -Aspartamo
beta.Para pasar de un estado al otro debe pasar
primero por el estado de cadena abierta.6 CONCLUSIONES

En esta imagen podemos observar lo explicado ● La capacidad rotativa específica es una


anteriormente cualidad presente en los azúcares que le
permite girar el plano de polarización.
● Se cumplió con el objetivo de determinar
la concentración de la muestra de suero
de toda al 10%.
● La polarimetría es una técnica
fundamental en la industria química y
alimentaria especialmente en la industria
azucarera ya que brinda un estudio
óptimo para determinar la concentración
Imagen 1. Mutarrotación de la glucosa en de azúcar en soluciones que serán
α-D-glucopiranosa y β-D-glucopiranosa. comercializadas.

Otros azúcares que pueden generar mutarrotación


son los siguientes: REFERENCIAS

❖ D- Fructosa: 1. pce-iberica. (s.f.). Recuperado el 22 de


● α-D-Fructopiranosa Octubre de 2020, de
● β-D-Fructopiranosa pce-iberica:https://www.pce-iberica.es/in
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● β-D-Fructofuranosa os.htm
❖ Manosa: 2. García Martínez, E. (s.f.). Aplicación de
● α-D-Manopiranosa la polarimetría a la determinación de la
● β-D-Manopiranosa pureza de un azúcar. Recuperado el 22
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3. AGS ANALITICA. (s.f.). Recuperado el
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4. Suárez, R., Arévalo, E., Linares, L.,
Ustáriz, F., & Hernández, G. (2 de Mayo
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analítico para la determinación de
magnesio eritrocitario. Recuperado el 10
de Septiembre de 2020, de
https://www.redalyc.org/pdf/933/933132
04001.pdf
5. Rotación óptica, anexo 5:
http://www.anmat.gob.ar/webanmat/mer
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6. Philippi Eyzaguirre Jaime (1974).
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Santiago, Chile. Editorial Andres Bello.
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fWAHiDCVEC&pg=PA39&dq=que+es+
la+mutarrotacion+en+carbohidratos&hl=
es-419&sa=X&ved=2ahUKEwi33O375
9LsAhUJ2FkKHdyaBrYQ6AEwAHoEC
AMQAg#v=onepage&q=que%20es%20l
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