Metabolismo, nutrición y crecimiento de las bacterias.
El metabolismo se define como el conjunto de reacciones química coordinadas que se llevan a cabo en el
interior de una célula y que tiene la finalidad de generar energía y componentes necesarios para la vida de la
célula.
Catabolismo: Conjunto de reacciones químicas donde se degrada una molécula compleja en una molécula
sencilla con la consecuente formación de ATP en el proceso
Anabolismo: Es lo contrario a catabolismo, es decir, es el conjunto de reacciones químicas en donde se forman
moléculas complejas a partir de moléculas más sencillas con la consecuente gasto de energía en el proceso. A
partir de este se forman componentes células y tejidos corporales así como el crecimiento de los mismos.
La pieza clave para la formación de energía es el ATP. La energía se obtiene a partir de la hidrolisis de los
grupos fosfatos que se encuentran unidos a este. En la hidrolisis de ATP a ADP se genera una variación de
energía libre de -31 kJ.
Las bacterias usan, por lo general, las siguientes vías para genera energía:
Fosforilación a nivel de sustrato
Fosforilación oxidativa
Fotofosforilación (durante la fotosíntesis).
Respiración aeróbica
Producción de energía a partir de glucosa y presencia de oxígeno con la producción de dióxido de carbono y
agua. Se divide en:
1. Degradación de Glucosa a Piruvato
Glucolisis
Ciclo de pentosa-fosfato
Ruta de Entner-Doudoroff
2. Descarboxilación oxidativa
3. Ciclo de Krebs
4. Transporte de Electrones
Degradación de glucosa a Piruvato
Glucolisis
En este proceso se degrada la glucosa, produciendo dos moléculas de Piruvato y 2 equivalentes reducidos
NADH2 los cuales van a la CTE y producen cada una tres moléculas de ATP. En la degradación de la glucosa se
utilizan 2 moléculas de ATP, pero se producen 4 de ATP por fosforilación a nivel de sustrato Dando un balance
de 2 moléculas de ATP y 2 de NADH2. Esta vía ocurre tanto en presencia como ausencia de oxígeno.
Ciclo de la pentosa-fosfato
Ocurre en anaerobiosis como aerobiosis, en simultaneidad con glucolisis y la ruta de Entner-Doudoroff. Permite
la producción de azúcares de 4 y 5 carbonos, nucleótidos y NADPH y se generan 18 moléculas de ATP. En esta
vía se utiliza:
3 Glucosa-6-fosfato 2 Fructosa-6-Fosfato
6 NADP Gliceraldehido-3-fosfato
3 H2O 3 CO2 / 6 NADPH / 6 H+
Ruta de Entner-Doudoroff
En esta ruta se convierten hexosas a Piruvato con enzimas distintas a las de la glucolisis o pentosas fosfato.
Comparte la primeras reacciones de la ruta de las pentosas-fosfatos, sin embargo el 6-fosfogluconato NO SE
OXIDA, si no que SE DESHIDRATA para producir 2-keto-3-deoxis-6-fosfogluconato (KDPG) principal
intermediario de esta ruta. Se produce 1 ATP, 1 NADPH y una de NADH por cada molécula de glucosa.
Se observa en Pseudomonas, Rhizobium, Azotobacter y Agrobacterium. Más común en la Enterococcus faecalis.
Descarboxilación Oxidativa.
Algunos autores toman este paso como parte del Ciclo de Krebs. Este proceso se realiza dos veces y consiste en
la formación de 2 moléculas de Acetil-CoA a partir del Piruvato (cada molécula de Piruvato se convierte en Acetil-
CoA). Es de esta manera que se transportan los carbonos y es el principal sustrato del Ciclo de Krebs. También
se produce una molécula de CO2 y 1 molécula de NADH.
Ciclo de Krebs
Consiste en la conversión cíclica del fragmento acetil del Acetil-CoA en CO 2, electrones e hidrogeno. Por cada
fragmento de acetil oxidado se liberan 2 moléculas de CO 2, 3 de NADH y 1 FADH. Es una ruta muy común en
microorganismos de vida libre, bacterias aeróbica, algas, hongos y protozoarios.
Transporte de electrones.
Hasta aquí se tienen 4 moléculas de ATP por oxidación de una glucosa a seis CO 2. La mayor parte del ATP se
produce por oxidación de NADH y FADH 2 en la CTE que se encuentra en las bacterias en la membrana
plasmática. La generación de energía en esta cadena es debido a la oxidación del NADH y FADH 2 esto trae
como consecuencia que complejos acepten electrones de estas coenzimas y transcurran por la CTE, el
transcurrir de los electrones por la CTE bombea átomos de H al exterior de la célula que genera la fuerza protón
motriz necesaria para la síntesis de ATP. El aceptor final de estos electrones es el oxígeno.
Vía glucolítica
Fosforilación a nivel de sustrato 2 ATP
Fosforilación oxidativa con 2 NADH 6 ATP.
Descarboxilación oxidativa
Fosforilación del Acetil-CoA 2 NADH 6 ATP
Ciclo de Krebs
Fosforilación de nivel de sustrato GTP 2 ATP
Fosforilación oxidativa 6 NADH 18 ATP
Fosforilación oxidativa 2 FADH 4 ATP
Total ATP 38 ATP
Fermentación anaeróbica
Esto ocurre en bacterias que no presenta oxígeno, ellas deben oxidar el NADH a NAD para así obtener energía.
Esto se logra añadiendo los electrones de NADH a Piruvato para producir alcohol, lactato o acetato, fermentación
alcohólica, láctica y acética respectivamente. En el proceso hay una sustancia que se reduce al aceptar los
electrones y una sustancia que se oxida al donar los electrones.
Desde el punto de vista energético es muy poco rentable y que solo se producen 2 moléculas de ATP, frente a
los 38 de ATP de la respiración. Esto es así por la oxidación del NADH que en vez de entrar a la CTE se oxida,
es decir, cede sus electrones a compuestos orgánicos para de esta manera poder seguir produciendo algo de
ATP.
Respiración anaeróbica
En este tipo de respiración el aceptor de los iones no es el oxígeno sino nitrato, sulfato o metales. Los pasos son
parecidos a los de la respiración aeróbica, pero se produce menos energía, de 30 a 34 ATP por molécula de
glucosa.
Nutrición microbiana
Es el proceso mediante el cual un organismo toma sustancias del medio para su subsistencia, Estas sustancias
se denominan nutrientes y se necesitan para fines energéticos y biosintéticos.
Los mismos se clasifican en:
Macronutrientes como el carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno, y los mismos se expresan en gramos.
Micronutrientes como el potasio, calcio, magnesio y hierro, el valor de las mismas se expresan en miligramos.
Elementos trazas como el manganeso, cobre, zinc, níquel y el nivel de los mismos es microgramos.
Estos elementos se utilizan para la síntesis de energía o compuestos de las células.
Dependiendo de la fuente de carbono que utilicen los microorganismos existen dos tipos de metabolismos
energéticos:
Autótrofos: utilizan el CO2 y H2O como única fuente de alimento y a partir de estos se producen todas las
moléculas necesarias para su crecimiento y proliferación.
Heterótrofos: no utilizan el dióxido de carbono como tal y obtienen el carbono que necesitan a partir de otros
compuestos como la glucosa.
También se pueden clasificar los microorganismos de la siguiente manera:
Energía
Fotótrofos, utilizan la luz.
Quimiotrofos, a partir de la oxidación de sustancias orgánicas o inorgánicas.
Fuente de átomos de hidrogeno o electrones
Litótrofos: usan moléculas inorgánicas
Organótrofos: usan moléculas orgánicas.
Transporte de nutrientes
La membrana plasmática de los microrganismos es permeable a sustancias como oxígeno, dióxido de carbono y
NH3 y moléculas polares no ionizadas.
Transporte pasivo inespecífico Algunas sustancias atraviesan la membrana plasmática sin gasto de energía y
se debe a la diferencia de concentraciones a ambos lados de la membrana plasmática.
Difusión: es un tipo de transporte pasivo. Sustancias atraviesan la membrana plasmática por poros presentes en
ella.
Transporte pasivo específico: transporte en donde se usan transportadores específicos llamadas permeasas.
Difusión facilitada: pasa una sustancia a partir del gradiente de la concentración por las permeases
anteriormente comentadas. No hay gasto de energía. La molécula o sustancia se une a la parte externa de la
permeasa, esta sufre una cambio conformacional que permite su liberación dentro de la célula. La cinética que
exhibe este tipo de transporte es una cinética de Michaelis-Menten, debido a que la velocidad de transporte
aumenta con la concentración de sustrato hasta un valor límite que se expresa como V max logrado a partir de la
saturación de las permeasas.
Transporte activo: es un tipo de transporte en el cual hay gasto de energía y ocurre en contra del gradiente de
concentración debido a que la sustancia se transporte desde donde hay menos cantidad de ella hacia donde hay
más. Este tipo de transporte se realiza a expensas de un potencial electroquímico de protones previamente
creados a ambos lados de la membrana, bien sea por procesos de respiración, fotosíntesis o hidrolisis de ATP.
El mismo puede ser:
Transporte activo simporte: Transporte simultáneo en la misma dirección y por un mismo transportador.
Transporte activo simporte de iones de Na+
Transporte activo sensible a choque osmótico: dependen de transportadores ABC dependientes de proteínas de
unión periplásmica o ATPasas de tráfico, permite a las bacterias gramnegativas el paso de sustancias como
azucares, aminoácidos, vitaminas, oligopéptidos, etc.
Transporte acoplado a translocación de grupo: la entrada de la sustancia está directamente relacionada con el
cambio de constitución químico por unión covalente con un grupo químico.
Un tipo especial de transporte es la toma de hierro (en las bacterias). El mismo es un importante cofactor de
muchas enzimas y citocromos. Muchas bacterias secretan moléculas llamadas sideróforos, los cuales forman
complejos con el hierro férrico. Este complejo se une a un receptor especifico de la membrana externa en E. Coli
y posteriormente se libera en el espacia periplásmico para luego llegar al citoplasma.
Crecimiento bacteriano.
Para entender el crecimiento bacteriano es necesario hablar antes del proceso de división. Las bacterias se
dividen por fisión binaria en el cual se forman dos células hijas. Este proceso es asexual y ocurre cuando la
célula duplica su material genético, se empieza a formar el septum y las estructuras necesarias para la vida, de
ahora las bacterias, se mueven a cada polo, posteriormente se cierra el septum y se divide finalmente a las dos
células.
Se puede entender dos tipos de crecimiento, el crecimiento que involucra el crecimiento del tamaño de la
bacteria y el crecimiento de la cantidad de bacterias de una misma especie. Este último es un crecimiento
exponencial, lo que indica que de una célula se obtendrán dos, de estás dos se obtendrán cuatros, de estas
cuatro se obtienen dieciséis y así seguidamente.
Durante este crecimiento el número de célula se duplica, aumentan proporcionalmente por un mismo factor en la
unidad de tiempo.
La tasa de crecimiento refleja el número de generaciones por unidad de tiempo. Mientras que el Tiempo de
Generación o Duplicación es el tiempo que le toma a una bacteria en convertirse en dos, es decir, duplicar su
cantidad.
Esto ocurre en bacterias que crecen en ambientes ideales, con muchos nutrientes y sin la presencia o
acumulación de desechos tóxicos. Sin embargo el crecimiento se estudia en un sistema cerrado, donde los
nutrientes o desechos no pueden entrar o salir. En este sistema las bacterias dejan de crecer cuando los
nutrientes se agotan. Cuando los nutrientes no se agotan el crecimiento es ilimitado y esto se llama
CRECIMIENTO BALANCEADO, debido a que no se impide el crecimiento en la cantidad de bacterias.
En un sistema cerrado existen 4 fases que se observan en una curva de crecimiento:
Fase de latencia: tiempo de inoculación de cultivo e inicio de la duplicación. Las bacterias producen los
requerimientos necesarios para la maquinaria de replicación.
Fase de crecimiento logarítmico o exponencial: Fase en donde las células se duplican por fisión binaria de
manera exponencial, las bacterias se encuentran metabólicamente activas y es la fase ideal para la realización
de pruebas de identificación y sensibilidad.
Fase estacionaria: A medida que los nutrientes se agotan las bacterias entran en un estado en el que se detiene
su crecimiento.
Fase de muerte: Fase en la cual, debido a la falta de nutrientes, hay mayor número de bacterias muertas que
bacterias que se dividen.
Muchos factores afectan el crecimiento de las bacterias, es por esto que deben ser regulados en un ambiente de
crecimiento cerrado, tales factores son: el agua, el pH, la temperatura y concentración de oxígeno.
