Unidad 2
ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
INGENIERÍA DE AGROINDUSTRIA
ANÁLISIS DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES
Grupo: 1
DOCENTE
ING. Paola Arguello
CURSO
5TO ¨A¨
FECHA REALIZADA
12/01/2021
FECHA DE ENTREGA
14/01/2021
RIOBAMBA – ECUADOR
Unidad 2
TRABAJO AUTÓNOMO N: 3
ANÁLISIS INSTRUMENTAL
OBJETIVO DE LA UNIDAD
Analizar la función de los ingredientes usados en la elaboración de balanceados
relacionándolo con su composición química para determinar su uso en la formación de
balanceados.
TEMA:
Diferencias de fundamento de los diferentes métodos de evaluación instrumental y su
aplicación.
OBJETIVO
Determinar el fundamento de cada técnica de evaluación instrumental a través de su
comparación y su aplicación.
I. DESARROLLO
1. Espectroscopía
La espectroscopia es el estudio de la interacción entre la radiación electromagnética y la
materia, con absorción o emisión de energía radiante. Tiene aplicaciones en astronomía,
física, química y biología, entre otras disciplinas científicas. La espectroscopia es una técnica
analítica experimental muy utilizada en química. Se basa en detectar la absorción o emisión
de radiación electromagnética por parte de una sustancia que queremos estudiar. Para
entender la técnica espectroscópica debemos pensar que siempre tenemos 3 elementos
básicos: la fuente de luz, la muestra que queremos estudiar y un detector. La fuente de luz
irradia la muestra, interacciona con las sustancias que la forman, estas modifican la luz
incidente (porque la absorben parcialmente o porque emiten una diferente) y con un detector
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registramos la luz resultante de interaccionar con la muestra. (ICIQ Virtual, 2013)
2. Espectroscopía infrarrojo
Emplea luz infrarroja, y se utiliza para determinar, cuantificar y obtener información
estructural de ciertas moléculas vínculos de las que vibran a la frecuencia del IR y absorben
parte de esta radiación.
La espectroscopia infrarroja se basa en la absorción de los rayos infrarrojos de luz por varias
moléculas en una muestra. Esta permite analizar todas las longitudes de onda del espectro
infrarrojo simultáneamente, siendo las que pertenecen a la región media la de mayor utilidad
práctica, cuya extensión se encuentra entre un rango de 4000 y 650 cm-1, ofreciendo un
método rápido y confiable para el análisis de compuestos orgánicos, células y tejidos entre
otras. (Marenco, Ariza, Calvo, & Daza, 2012)
2.1.Regiones espectrales
Aunque el espectro infrarrojo se extiende desde 10 a 14 300 cm-1, desde un punto de vista
funcional se divide en tres zonas: IR lejano, donde se producen las absorciones debidas a
cambios rotacionales, el IR medio (MIR o simplemente, IR), donde tienen lugar las
vibraciones fundamentales y el IR cercano (near infrared, NIR), donde se producen
absorciones debidas a sobre tonos y combinaciones de las bandas fundamentales. (Macha,
2002)
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TABLE 1DIVISION DEL ESPECTRO IR
2.2.Tipos de medidas en infrarrojo
Cuando la radiación incide en la muestra (Fig. 1), ésta puede sufrir diferentes fenómenos:
absorción, transmisión y reflexión. La intensidad de la luz transmitida a través de la muestra
(PT) es menor que la intensidad incidente (P0). Una parte de esta intensidad incidente se ha
reflejado (PR), mientras que otra parte ha sido absorbida por la sustancia (PA). (Macha,
2002)
FIGURE 1 FENÓMENOS DE ABSORCIÓN, TRANSMISIÓN Y REFLEXIÓN DE LA RADIACIÓN ELECTROMAGNÉTICA AL INTERÉS
CON LA MATERIA
3. Espectroscopía absorción atómica
Se emplea luz ultravioleta (UV) o visible para detectar y cuantificar metales presentes en una
muestra. La radiación interacciona con átomos de metal en estado gaseoso, que la absorben
y ésta provoca cambios en el nivel de energía de los electrones. (ICIQ Virtual, 2013)
Si conseguimos tener una muestra atomizada, es decir con sus átomos en estado gaseoso y
hacemos pasar una luz (en la región del UV), dicha luz va ser absorbida por los átomos
presentes en el estado gaseoso provocando una disminución de la intensidad para las
longitudes de onda características de dicho átomo. Esta técnica se utiliza principalmente para
el estudio de metales de forma cualitativa y cuantitativa. Es posible relacionar la
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concentración del metal con la absorción a través de la ley de Lambert-Beer (A=α·l), cuanto
mayor sea la concentración del metal en estado gas mayor será la absorción en el espectro.
(Sambrano, 2020). Se realizar un espectro de absorción. Donde la radiación procede de una
fuente térmica, lo que nos permite seleccionar, en función de la temperatura, la región del
espectro deseada. La radiación se descompone en sus diferentes frecuencias, obteniéndose el
espectro de referencia F0. Seguidamente se interpone en el paso óptico de la radiación una
muestra problema obteniéndose el espectro F. En este espectro puede observarse como la
señal disminuye en ciertas regiones, debido a la absorción molecular. A la relación entre la
intensidad de radiación de salida, F, y la intensidad de radiación de entrada, F0, se le conoce
como transmisión T =F/F0. La absorción se define como uno menos la transmisión = 1-T
= (F0 - F)/F0. La absorbancia es el logaritmo decimal cambiado de signo de la transmisión
A = - log (T) En un medio homogéneo en el que la densidad molecular sea constante, se
comprueba que la absorbancia es proporcional a la concentración y a la longitud del paso
óptico que atraviesa la muestra, x, es decir: A cx , donde c, es la concentración y es
una constante de proporcionalidad denominada absortibidad molar o coeficiente de extinción
molar, que es función de la frecuencia. A la ecuación anterior se le conoce como Ley de
Lambert-Beer. (Espectroscopia, 2010)
FIGURE 2 ESPECTROSCOPÍA DE ABSORBANCIA
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Equipo de Espectroscopía absorción atómica
1. Espectroscopía masas
A temperatura ambiente los electrones de los átomos que forman la materia se encuentran en
su estado electrónico fundamental. La excitación de uno de estos electrones a un estado
energético superior, por encontrarse sometido a una llama, un plasma (LIBS) o una chispa
eléctrica genera, un estado de inestabilidad de corta duración (denominado estado excitado)
que evoluciona produciendo la vuelta del electrón del estado excitado a su estado
fundamental y la emisión de un fotón a una longitud de onda característica de dicho átomo
(de igual energía que el transito electrónico). La medida de dicha emisión puede estudiarse
con el uso de un espectrómetro que trabaje en unas longitudes de onda en el UV, visible y
una pequeña parte del infrarrojo cercano. El espectro generado es un espectro de líneas.
(Sambrano, 2020)
Equipo de Espectroscopía masas
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1. Espectroscopía UV y visible,
Implica luz de la zona del ultravioleta y visible y se emplea para determinar y cuantificar
ciertas moléculas que a partir de la interacción con la radiación, sufren cambios en los
niveles energéticos de los electrones de algunos tipos de enlaces (Sambrano, 2020)
En la región UV y visible, es común caracterizar el espectro mediante la longitud de onda
en nanómetros (1nm=10-9m). El visible abarca desde 700 a 400 nm. (Espectroscopia,
2010)
FIGURE 3ESPECTROSCOPIA UV Y VISIBLE.
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2. Diferencias de fundamento de los diferentes métodos de evaluación instrumental y aplicación.
Métodos de Fundamentos Aplicación
evaluación
instrumental
Se basa en la absorción de los rayos infrarrojos de luz por Caracterización e identificación de materiales
varias moléculas en una muestra, permitiendo analizar o Polímeros y plásticos
todas las longitudes de onda del espectro infrarrojo. Entre o Sólidos inorgánicos (minerales, catalizadores.)
un rango de 4000 y 650 cm-1, es un método rápido y Análisis de productos farmacéuticos y de síntesis.
confiable para el análisis de compuestos orgánicos, Análisis de contaminantes
células, tejidos, etc. Biomedicina (análisis de tejidos)
En una molécula, los átomos no ocupan posiciones fijas Conservación artística (análisis de pigmentos,
sino que vibran dentro de un determinado espacio. materiales utilizados…)
Estos cambios de posición de los elementos de una Industria del reciclaje (identificación de materiales
molécula no pueden realizarse de manera discontinua poliméricos)
sino que requieren la absorción de cierta cantidad de Seguimiento de procesos químicos
energía (región del infrarrojo). o Polimerizaciones, curado.
Espectroscopía Vibraciones entre los átomos de una molécula: o Reacciones catalíticas.
infrarrojo - Vibraciones de valencia (tensión o elongación)
- Vibraciones d (Valenciana, 2006)
e deformación (torsión, flexión o tijera)
Cada modo de vibración tiene asignada una frecuencia
que
Corresponde a una banda de absorción en la región
infrarroja.
No todas las vibraciones posibles se pueden detectar en
forma de radiaciones infrarrojas; de esta forma sólo se
perciben aquellas que implican un cambio en su
momento dipolar.
(Castillo, 2017)
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Se emplea luz ultravioleta (UV) o visible para detectar y Ciencias forenses: En un laboratorio de química
cuantificar metales presentes en una muestra forense, no solamente para la detección de trazas
Esta técnica se utiliza principalmente para el estudio de de elementos en los casos de uso de armas
metales de forma cualitativa y cuantitativa. de fuego (Análisis de residuos inorgánicos como
Es posible relacionar la concentración del metal con la Plomo, Selenio y Antimonio), también puede
absorción a través de la ley de Lambert-Beer (A=α·l), utilizarse para toxicología (Envenenamiento por
cuanto mayor sea la concentración del metal en estado Plomo o Mercurio).
gas mayor será la absorción en el espectro. Ciencias Ambientales: Análisis de aguas
Todo elemento, en el estado fundamental, dispone sus residuales y potables, análisis de fertilizantes y
Espectroscopía electrones ordenados en diferentes niveles energéticos. de tierras.
absorción Cuando se aplica una energía al átomo, ésta puede ser Farmacéutica: Determinación de concentraciones
atómica absorbida y los electrones más externos del átomo de drogas terapéuticas en fluidos biológicos y
pueden moverse a niveles energéticos superiores, preparados farmacéuticos.
originando una configuración menos estable del átomo, Alimentos: Control de calidad en los alimentos,
el estado excitado. Determinación de composición cárnica de
Como este estado resulta ser inestable, el átomo vuelve embutidos y conservas.
inmediatamente a su estado fundamental, devolviendo Industria: Análisis de vidrios y silicatos
energía luminosa. Comunicaciones: determina la no linealidad de
La técnica de absorción atómica mide la energía barrido de frecuencia usando EAA saturada con
absorbida por el átomo para alcanzar el estado excitado. el objetivo de corrección de la no linealidad
La técnica de emisión atómica mide la energía liberada de barrido de frecuencia óptica y monitor de
espontáneamente desde el estado excitado. frecuencia en tiempo real. Átomo involucrado:
Los espectros de absorción/emisión de un elemento Rubidio
consisten en registrar las longitudes de onda de (Anon, 2017)
absorción/emisión, denominadas líneas de emisión
debido a la naturaleza discreta de estas longitudes de
onda.
(Razmilic, 2016)
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Está basada en la obtención de iones a partir de moléculas Elucidación estructural de moléculas orgánicas e
orgánicas en fase gaseosa; una vez obtenidos estos iones, inorgánicas.
se separan de acuerdo con su masa y su carga y Identificación y análisis cualitativo y cuantitativo de
finalmente detectan por medio de un dispositivo analitos en estado sólido, líquido y gaseoso en
adecuado. estado puro o en mezclas complejas (previa
La espectrometría de masas se fundamenta en la separación cromatografía).
separación de partículas moleculares o atómicas por su Determinación del peso molecular de péptidos,
diferente masa. proteínas y oligonucleicos.
El proceso de la espectrometría de masas comprende
Determinación de residuos de pesticidas en
básicamente cuatro etapas:
alimentos.
Ionización de la muestra.
Espectroscopía Aceleración de los iones por un campo eléctrico. Control de compuestos orgánicos volátiles en el
de masas Dispersión de los iones según su masa/carga. agua de suministro.
Detección de los iones y producción de la correspondiente Aplicaciones cualitativas
señal eléctrica. Determinación del peso molecular de todas las
(Rouesseac, 2003) sustancias que pueden volatilizarse por la posición
del pico correspondiente a la masa patrón.
Caracterización y análisis de polímeros: el polímero
se piroliza en condiciones controladas y los productos
volátiles se hacen pasar a un espectrómetro para su
análisis.
Análisis de sangre: gracias a la rapidez del método,
se puede emplear incluso como control durante un
proceso quirúrgico.
(Rouesseac, 2003)
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3. Cromatografía de gases
La cromatografía de gases es un método de análisis inmediato en el cual los componentes de
la mezcla a separar se reparten entre dos fases, entre las que se establece una sucesión de
equilibrios de disolución o de adsorción constantemente desplazados: una de las fases es
inmóvil, tiene una superficie especifica muy grande es la fase estacionaria la otra fase, móvil,
circula a través de la fase estacionaria.
La fase móvil es un gas, la fase estacionaria es un liquido poco volátil. Así según las
características del reparto de las sustancias introducidas en la fase móvil, unas se quedarán
más retenidas por la fase estacionaria que otras. De esta forma, se obtendrá una separación
de los diversos componentes de la mezcla. El grado de separación entre dos sustancias cuales
quiera, dependerá, por lo tanto, de sus relativas constantes de reparto entre ambas fases.
Para una sustancia dada, el equilibrio de reparto existe entre las fases móvil y estacionaria
puede quedar alterado por diversas variables tales como la temperatura, el flujo de gas
portador y la naturaleza de la fase estacionaria. (Gehenne, 1979)
4. Cromatografía liquida de alta eficiencia
Es un tipo de cromatografía en columna (la fase estacionaria se sitúa dentro de una columna),
el compuesto pasa por la columna cromatográfica a través de la fase estacionaria
(normalmente, un cilindro con pequeñas partículas redondeadas con ciertas características
químicas en su superficie) mediante el bombeo de líquido (fase móvil) a alta presión a través
de la columna.
La muestra a analizar es introducida en pequeñas cantidades y sus componentes se retrasan
diferencialmente dependiendo de las interacciones químicas o físicas con la fase estacionaria
a medida que adelantan por la columna. La utilización de presión en este tipo de
cromatografías incrementa la velocidad lineal de los compuestos dentro la columna y reduce
así su difusión dentro de la columna mejorando la resolución de la cromatografía. (Skoog,
West, Holler, Holler , & Stanley, 2001)
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5. Diferencias entre cromatografía de gases y cromatografía liquida de alta eficiencia
CROMATOGRAFIA DE GASES CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA
EFICIENCIA
La fase móvil es el gas La fase móvil es el liquido
La muestra se volatiza y se inyecta en la cabeza de Separar moléculas y especies iónicas, productos naturales
una columna cromatográfica lábiles, materiales poliméricos
Son favorables debido a su bajo viscosidad que Mediante el bombeo de líquido (fase móvil) a alta presión a
produce una baja caída de presión en la columna través de columna
Se trabaja con sobrepresiones de una o dos Se emplea bombas de alta presión de precisión, y los
atmósferas, sobre la atmosférica conductos y las columnas son de metal y no de cristal o
plástico. (Polo, 2015)
La eficiencia y capacidad de pico son mayores La eficiencia y capacidad de pico son menores
La instrumentación es más sencilla, por cuanto no Comprende un amplio rango de aplicaciones
requiere bombas de alta presión
Con una fase móvil líquida interactiva, otro Su única función es la de transportar el analito a través de la
parámetro se encuentra disponible para la columna
selectividad, en adición a una fase estacionaria activa
(Shellie, 2013)
Tiene gran versatilidad como técnica analítica y a La muestra a analizar es introducida en pequeñas cantidades
sus ventajas como tal en cuanto a tamaño de y sus componentes se retrasan
muestras
El análisis se mide más rápidamente y generalmente Es una técnica relativamente más lenta
en minutos, aunque pueda tomar tan poco como un
par de segundos
La influencia de la temperatura sobre la La temperatura no es muy considerable
distribución del equilibrio es considerable
Emplea una fase estacionaria con discriminador Facilita la detención de los solutos debidos a que el entorno
quiral para la separación de enantiómeros no perturba prácticamente la medida, por lo que se dispone
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de un gran número de detectores muy sensibles. (Delvin,
2004)
Realizado en substancias inestables más altas de las Realizado generalmente en las composiciones tan sensibles
temperaturas pudo conseguir tan térmicamente al calor de la temperatura ambiente puede ser analizado con
desnaturalizado (Blumberg, 2012) seguridad usando la técnica. (Yagues, 2008)
Permiten emplear columnas capilares, sin Fluye a través de una columna que contiene a la fase fija
empaquetamiento
Aplicaciones
Medioambientales: Análisis de pesticidas y Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides,
herbicidas, análisis de hidrocarburos, analgésicos
semivolátiles y volátiles, análisis del aire. Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos,
Alimentos y aromas: fragancias y aromas, lípidos
aceites, bebidas, ácidos orgánicos, azúcares, Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales,
FAMES, ésteres metílicos, triglicéridos, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos
alcoholes. Productos de la industria química: Aromáticos
Química Industrial: alcoholes, ácidos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes
orgánicos, aminas, aldehídos y cetonas, Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
ésteres y glicoles, hidrocarburos, disolventes, Química forense: Drogas, venenos, alcohol en
anilinas, gases inorgánicos. sangre, narcóticos
Biociencia: drogas, fármacos, alcoholes y Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de
contaminantes en sangre, disolventes drogas, extractos de orina, estrógenos. (Ozores, s.f.)
residuales.
Derivadas del petróleo: gas natural, gases
permanentes, gas de refinería, gasolinas,
gasóleos, parafinas. (Ozores, s.f.)
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II. CONCLUSIONES
El uso de la espectroscopia es una técnica analítica experimental utilizada en la
química se obtiene mediante el estudio de la absorción y emisión de radiación
electromagnética por parte de la materia. Según la técnica espectroscópica
elegida, podemos obtener una información u otra (información estructural,
cuantitativa, cualitativa) porqué dependiendo del tipo de luz, interaccionará de
una forma u de otra con las moléculas de la muestra. También tomando en cuenta
la espectroscopía absorción atómica es la técnica más pertinente utilizar de esta
técnica en nuestra carrera Análisis de aguas residuales y potables, análisis
de fertilizantes y de tierras y Control de calidad en los alimentos, Determinación
de composición cárnica de embutidos y conservas
La utilización de la cromatografía, es tan rápido el desarrollo de una gama
analíticas, incluyendo cromatografía de gas y cromatografía liquida de alta
eficiencia, puede permitir la separación, detección, caracterización y
cuantificación de analitos y las rutas metabólicas relacionados.
Mediante la cromatografía liquida de alta eficiencia en la agroindustria es
utilizado para la cuantificación de nutrientes (vitaminas, flavonoides,
antioxidantes, coenzimas, aminoácidos, ácidos grasos esenciales, esteroles,
identificación de carbohidratos, etc.), también la caracterización cuali y
cuantitativa, control de composición de productos elaborados, constituyendo la
HPLC una herramienta fundamental en procesos de desarrollo de ciertos
productos.
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