Informe Laboratorio de Microbiología General
Práctica N° 7: Recuento bacteriano.
Recuento bacteriano.
Hugo Andrés Niño Garzón, Isabella Muñoz Trochez
haninog@[Link], imunozt@[Link]
INTRODUCCIÓN
La practica de recuento bacteriano se usaron 2 muestras de agua, un de agua
potable y otra de agua de la quebrada La Iguana , en las cuales se querían
comparar la carga bacteriana de cada uno y la presencia de coliformes totales
y E. coli presentes en estas muestras
RESULTADOS
RECUENTO DE UFC Y NMP UTILIZANDO EL METODO INDIRECTO (para agua de La
Iguana)
Recuento de Unidades Formadoras
de Colonias en agar nutritivo
(#UFC/mL)
Se estimo la concentración de la
muestra (103)que crecio en agar
nutritivo para calcular el UFC
UFC/ml= 1281UFC/mL * 103 * 10 =
1.3*107 UFC/ml
UFC(totales)= 1.3*107 UFC/ml*200ml
= 2.6.3*109
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Práctica N° 7: Recuento bacteriano.
Recuento de Unidades Formadoras
de Colonias en agar chromocult
(#UFC/mL)
Se estimo la concentración de la
muestra (103)que crecio en agar
nutritivo para calcular el UFC
UFC/ml= 1281UFC/mL * 103 * 10 =
1.3*107 UFC/ml
UFC(totales)= 1.3*107 UFC/ml*200ml
= 2.6.3*109
Numero Mas Probable (NMP) de
Coliformes totales y E. coli en el
caldo fluorocult
Con presencia de Coliformes totales y
E. coli en 3 tubos de ensayo con 1 mL
de muestra obtuvimos un (3-3-3) en la
tabla de NMP el cálculo de UFC
Aplicando la formula de NMP/mL
NMP/mL = 3/(3mL)1/2 = 1.73 mL
Usando un 95% de limite de
confianza[1]
Discusión
1. ¿Cómo se pueden diferenciar los Coliformes totales y las E. coli en el
medio de cultivo agar chromocult?
En agar chromocult “cuando hay E. coli presente se escinden los dos
sustratos, lo que da lugar a colonias que adquieren un color entre azul oscuro
y violeta en oposición al rojo asalmonado de otras colonias de bacterias
coliformes. Las bacterias no coliformes aparecen como colonias incoloras o,
con baja frecuencia, de color turquesa.”[2]
2. Explique las reacciones bioquímicas de estos microorganismos en el agar
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chromocult.
En el agar chromocult el principio para coliformes y E. coli “se basa en la
capacidad de la ß-D-galactosidasa, una enzima que es característica de las
bacterias coliformes, para escindir(romper o dividir) el sustrato Salmon-GAL.
la reacción produce colonias de coliformes de color rojo asalmonado.
En el recuento de E. coli se basa en la escisión de los sustratos X-glucurónido
por la ß-D-glucuronidasa y Salmon-GAL por la ß-D galactosidasa, una
combinación enzimática que es característica de E. coli.”[2] formando
colonias de color azul.
3. ¿Qué ventajas e inconvenientes presentan cada uno de los métodos
aplicados en esta práctica?
Metodo NMP , presenta la ventaja de su sencillez , de ser un método que
determina la presencia o no de E. coli (con reactivo de kovac) pero como
desventaja podemos afirmar su falta de exactitud para el conteo de
En la siembra de agar chromocult hay indicadores que diferencian E. coli de
Coliformes totales pero cuando la dilución es baja es imposible sacar un
numero de recuento de UFC debido a la alta carga bacteriana presente y
presentar ese calculo.
4. ¿Cómo se pueden diferenciar los Coliformes totales y las E. coli en el
medio de cultivo caldo fluorocult LMX?
“Para la identificación de E. coli bajo la exposición a la luz ultravioleta permite
la rápida detección de E. coli de color azul fluorescente. Como el medio
posee el aminoácido triptófano, la reacción indol es fácilmente dada por
adición del reactivo de Kovacs. La formación de un anillo rojo confirma la
presencia de E. coli. En este medio de cultivo, sepueden obtener resultados
de 18 a 24 h.”[3]
Las coliformes totales no forman anillo rojo con la adicción del reactivo de
kovacs ni presentan fluorescencia.
5. ¿Por qué es tan importante detectar la carga bacteriana en una muestra
determinada?
La importancia de detectar la carga bacteriana radica en el hecho de conocer
que tan nociva puede ser una muestra , la presencia de Coliformes totales y
E. coli que ocasiona enfermedades graves para la salud publica.
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CONCLUSIONES
- Es importante conocer la carga bacteriana de una fuente de agua ya
que esto nos indicara si es potable o no.
- Los métodos utilizados cualifican la presencia de coliformes pero no
cuantifican la cantidad exacta de la población bacteriana, el resultado
es aproximado.
- En agar nutritivo como se esperaba no hubo crecimiento para agua
potable , solo algunas colonias por contaminación a la hora de
sembrar.
- En agar chromocult , hubo diferenciación visual de Coliformes totales y
E. coli.
- En los resultados se presento solo el agua de La iguana ya que en agua
potable se espera que todos los resultados sean negativos como
efectivamente paso
BIBLIOGRAFÍA
Paginas consultadas
1. [Link]
[Link] Pag.30
Consultado 10/10/17 21:09
2. [Link]
INTL-Site/es_ES/-/USD/ShowDocument-File?ProductSKU=MM_NF-
C164546&DocumentId=[Link]&DocumentType=DS&Lan
guage=ES&Country=NF&Origin=PDP
Consultado 10/10/17 21:20
3. [Link]
Probable-NMP-en-Alimentos-Usando-Fluorocult-LMX
Consultado 10/10/17 21:44
