Unidad III

Célula eucariota: Hongos

 Características generales de la célula
eucariota
1. Presencia de un núcleo individualizado por una
membrana nuclear doble y porosa
2. Cromosomas formados por moléculas lineales
de DNA asociados a proteínas histonas
3. Ribosomas con coeficiente de sedimentación
80S
4. Citoplasma compartimentalizado por un sistema
de endomembranas
 Características generales de fungi
a. Son organótrofos de nutrición osmotrófica, es
decir, están excluidos los organismos que realizan
fotosíntesis. También están excluidos aquellos
organismos organótrofos que tienen una nutrición
endocitósica
b. Son organismos filamentosos o unicelulares sin
movimiento propio. No presentan cilios ni flagelos
c. Presentan reproducción sexual o asexual mediante
esporulación, fragmentación de estructuras
celulares, gemación
d. Poseen pared celular formado por quitina, no
celulosa
 Mixomicetos

Antiguamente se
consideraban como hongos
a algunos organismos
como los Mixomicetos
(Physarum) y Oomicetos
(Phytophthora)

The slime mold Physarum

polycephalum
 Oomicetos
• Phytophthora
• Pared celular celulosa
y sin quitina
• Presentan flagelos
• Phytophthora
infestans, causing
late blight in potatoes
 La hifa y el micelio
• Hifas, estructuras
tubulares y ramificadas.
La masa de hifas forma el
micelio
• Las hifas pueden estar
interrumpidas por
tabiques o septos, los
cuales pueden ser
completos a medida que
la hifa envejece.
Penicillium is a septate fungus – the Non-Septate Hyphae (Coenocytic hyphae)
individual cells are separated by
cross walls called septa
 Hifas
• La hifa constituye la
unidad fisiológica y
morfogenética.
• Se desarrollan a partir de
una espora, de
fragmentos de hifas o de
otras estructuras
reproductivas
• Realiza todas las
actividades nutricionales
y metabólicas que
sustentan el crecimiento
de todo el organismo.
 Diferenciaciones de la hifa vegetativa

• Las hifas pueden

diferenciarse según
demande el estadío
del ciclo de vida que
atraviesa el hongo o
las condiciones
ambientales
imperantes
 Diferenciaciones nutricionales

a) Anillos constrictores,
Formados principalmente
por aquellas especies que
atrapan nemátodos y se
nutren de ellos. Consta
por una célula basal y tres
células osmosensibles de
paredes delgadas
Arthrobotrys feeding
b) Nudos adhesivos,
son células
morfológicamente
distintas, sésiles o con
pedúnculos, dilatadas y
cubiertas con un
material adhesivo. Su
función es la misma que
en los anillos
nematode trapped by adhesive
hyphal knot
c) Redes adhesivas.-
Son ramificaciones de
una hifa que se unen
formando varios
orificios revestidos de
material adhesivo y que
participan en la captura
de nemátodos
d) Apresorios, son
dilataciones de la pared
unidas fuertemente a la
superficie del sustrato
(planta o animal) a
partir de las cuales
proyectan hifas
invasivas
e) Haustorios, hifas que
se proyectan y
ramifican en el interior
de las células de la
planta hospedera y que
permite nutrirse al
hongo de los
componentes
citoplasmáticos. Specialized branch of a parasite formed inside host
cells to absorb nutrients
Diferenciaciones de resistencia
• Varias especies de hongos filamentosos
presentan estructuras de conservación
frente a condiciones ambientales
adversas. Estas estructuras se forman a
partir de hifas que se diferencian.
a) Clamidosporas,
células intercalares o
terminales de una hifa
que engrosa su pared,
individualizándose, las
clamidosporas resisten
condiciones
ambientales extremas
b) Rizomorfos.-
cordones gruesos
constituidos por hifas
paralelas que pierden
su individualidad y se
cubren de una corteza
gruesa y dura.
c) Esclerotes,
estructuras globulares,
muchas veces
macroscópicas,
formado por hifas que
constituyen un
seudotejido y están
revestidos de una
corteza gruesa y dura.
 Diferenciaciones reproductivas
• Las hifas pueden dar lugar a una variedad
de estructuras reproductivas tanto
asexuales como sexuales.
• Las hifas reproductivas asexuales más
comunes son los esporangióforos
(zigomicetos) y los conidióforos
(ascomicetos, basidiomicetos y
deuteromicetos).
Rhizopus sp. Aspergillus sp.
 Crecimiento del micelio
o El crecimiento del micelio es el resultado del
crecimiento de sus hifas y ramificaciones.
o El crecimiento de las hifas, se realiza por extensión
apical debido a la síntesis y deposición de los
componentes de la pared celular
o Al igual que en las raíces de las plantas, el
crecimiento apical de las hifas les proporciona una
gran capacidad de penetración en estructuras sólidas
y la facilidad para desarrollarse en ambientes con
una concentración de sólidos muy alta (suelo).
 Crecimiento en sustrato sólido
 Cuando un propágulo se
coloca sobre un sustrato
sólido, se produce la
germinación de un tubo
germinal y luego de un
tiempo se observa el
micelio que se dispone de
una manera circular
(colonia); a medida que
pasa el tiempo la colonia Aspergillus flavus
aumenta en superficie
debido al aumento de su
radio
 Crecimiento en medio líquido
o Sin agitación.-
Tiene el mismo
comportamiento cultural
si el propágulo se
coloca sobre un medio
líquido sin agitación.
 Crecimiento en medio líquido
o Con agitación
Si un propágulo se
coloca en un medio
líquido en agitación
constante, se puede
encontrar dos tipos de
comportamiento: a) un
crecimiento miceliar
amorfo o en malla
crecimiento miceliar amorfo o en malla
 Crecimiento en medio líquido
b) Un crecimiento en
esferas (“pellets”). Se
produce una
diferenciación del
metabolismo a lo largo del
volumen del pellet: la
parte central del pellet se
encuentra en
metabolismo secundario,
mientras que la zona pellets
periférica se encuentra en
metabolismo primario
Dimorfismo
o Varias especies de hongos presentan la capacidad
de cambiar de forma según las condiciones
ambientales imperantes.
o Los hongos crecen como hifas (fase M ) o como
old

levaduras (fase Y ).
east

o Especies filamentosas  levaduriforme

Ej. Mucor sp.
o Levaduriforme  forma filamentosa
Ej. Candida albicans
Causas del dimorfismo
Para el caso de Mucor sp.
a) siempre se requiere de una hexosa fermentable
para el crecimiento levaduriforme y
b) la anaerobiosis generalmente favorece el
crecimiento de levadura, mientras que las
condiciones aerobias usualmente inducen al
crecimiento miceliar.
En otros géneros, es la presión parcial de O2 o CO2
la que determina el cambio de forma.
 Dimorphism in the Pathogenic Fungi

• Fungal dimorphism is the morphological and

physiological conversion of certain fungi from one
phenotype to another when such fungi change from
one environment to another.
• Various environmental host factors control fungal
dimorphism. These factors include amino acids,
temperature, carbohydrates, and trace elements (e.g.
zinc).
Diagrammatic representation of the saprophytic
and invasive tissue forms of pathogenic fungi
Some environmental or genetic factors that cause transitions between mycelial
growth, yeast-like growth.
 Differences in wall composition
The wall components of M and Y forms sometimes
differ:
• Mucor rouxii the Y form has more mannose than
the M form;
• Paracoccidioides brasiliensis the Y form has α-1,3
glucan, whereas the M form has β-1,3 glucan;
•Candida albicans the M form has more chitin than
the Y form;
• Histoplasma capsulatum and Blastomyces
dermatitidis the M form has less chitin than the Y
form.
Estructura celular
 Hyphal Ultrastructure
Diagram illustrating the ultrastructure of a
septate hypha
Diagrammatic representation of a fungal hypha

Aut = autolysis; AVC = apical vesicle cluster; Chlam = chlamydospore; ER = endoplasmic reticulum; G =
Golgi apparatus; Gl = glycogen; L = lipid; M = mitochondria; MT = microtubules; MW = melanized wall; N =
nucleus; P = plasmalemma; R = ribosomes; S = septum; SP = septal plug; V = vacuole; W = wall; Wo =
Woronin body.
El citoplasma se encuentra compartimentalizado en:

a) Vacuolas, que reservan grasas, proteínas,

aminoácidos o carbohidratos.
b) Mitocondrias, generación energética
c) Aparato de Golgi, donde se realiza la síntesis de
muchos polisacáridos y, también, la incorporación de la
fracción sacárida de las glicoproteínas.
d) Microcuerpos (Glioxisomas y peroxisomas), también
están presentes en la estructura de los hongos.
f) Microtúbulos, formado por tubulina y dispuestos en
forma paralela a lo largo de la hifa
g) Microfilamentos formados de actina, junto con los
microtúbulos participan en la migración de núcleos
durante la formación de conidias, además, las
microfibrillas se encuentran en mayor cantidad en el
ápice de las hifas.
h) Retículo endoplasmático, presente en las dos
formas, rugoso y liso con funciones similares que en
otras células eucariotas. Almacenamiento y transporte
celular.
i) Cuerpos vesiculares, relacionados funcionalmente
a la extensión apical y a la formación de la pared,
estos cuerpos vesiculares pueden ser:
Macrovesículas, microvesículas
(derivados del aparato de Golgi y contienen formas
zimógenas de quitina sintetasa) y filasomas
(microvesículas con arreglos espinulados en su
membrana), tanto las microvesículas como las
filasomas pueden ser estados morfológicos de los
quitosomas.
j) Lomasomas, vesículas membranosas localizadas
entre la pared y la membrana plasmática y participa
en la formación de nuevo material de pared,
particularmente durante el engrosamiento
secundario de la misma.
k) Cuerpos de Woronin, participan en la oclusión de
los poros de los septos y juegan un papel
importante en la protección de la hifa cuando ésta
sufre roturas.
 Pared celular
• La pared proporciona una interfase entre el
hongo y su entorno. Confiere la forma a la célula
que la envuelve.
• La pared actúa controlando la secreción y
entrada de moléculas a la célula.
• Es una estructura altamente dinámica y está
sujeta a cambios y modificaciones en los
diferentes estados del crecimiento y desarrollo
de los hongos.
Composición
• Formadas primariamente por polisacáridos, tanto
homo como heteropolisacáridos.
• En algunos hongos, las proteínas pueden estar en
cantidades significativas y frecuentemente
asociadas a polisacáridos.
• Otros componentes menores en muchos hongos
son los lípidos y las melaninas.
• De acuerdo a su función, los polisacáridos de las
paredes de los hongos pueden dividirse
principalmente en dos grupos: Estructurales y de
la matriz
… composición

a) Polisacáridos estructurales: Homopolímeros

insolubles en agua y altamente cristalinos (quitina y
glucano R)

b) Polisacáridos de matriz, son amorfos o

ligeramente cristalinos y mayormente solubles en
agua.
Existe una relación entre la composición de la pared
celular y la taxonomía de los hongos
 Levaduras: (Hemiascomicetos y hemibasidiomicetos),
consiste principalmente de glucanos ß-1,3 con enlaces
espaciados ß-1,6 que determinan ramificaciones cortas
(las ramificaciones disminuyen la cristalinidad de la
molécula).
POLISACÁRIDOS La quitina está presente sólo en la zona de separación
ESTRUCTURALES entre la célula madre y la hija en los hemiascomicetos (S.
cerevisiae).
Hongos filamentosos: Todos tienen quitina junto con
glucano ß-1,3 como principales componentes
estructurales. La quitina es una molécula lineal altamente
cristalina, por lo tanto insoluble en agua.
Levaduras: Formado por complejos de mananos y
proteína  mananoproteína.
POLISACÁRIDOS DE LA Filamentosos: Formados por glucanos α-1,3 y algunos α-
MATRIZ 1,4 alternados. En zigomicetos se encuentran también
quitosanos.
 Componentes macromoleculares de las paredes de los
hongos
Quitina: Homopolímeros β-1,4 de N-acetilglucosamina
Elementos de
β-glucanos: Homopolímeros β-1,3 formado por D-glucosa
estructura con enlaces β-1,3 y β-1,6 (glucano R)
α-glucanos: Homopolímeros α-1,3 de glucosa (glucano S) y
Componentes α-1,4 alternados
de matriz Glicoproteínas: Proteínas unidas a mananos y a otros
polisacáridos
Quitosanos: Homopolímero β-1,4 de la D-glucosamina
Componentes Polímeros de D-galactosamina
Poliurónidos
misceláneos
Proteínas, melaninas, lípidos
The major components of fungal walls.
Figure 1. Representation of the fungal cell wall. The major components of the fungal cell wall are chitin,
glucans and glycoproteins. Although species-specific variations exist, the cell wall components are thought to
be arranged as shown. Most of the chitin is considered to be located near to the plasma membrane. The
beta-1,3-glucan extends throughout the cell wall. The glycoproteins are extensively modified with N- and O-
linked oligosaccharides. Many of the glycoproteins have GPI anchors, which tether them to the plasma
membrane while other glycoproteins are secreted into the cell wall space. The proteins, glucans and chitin
components are integrated into the wall by crosslinking the chitin, glucans, protein-associated
oligosaccharides and GPI anchors together.
 Biosíntesis
• La hifa crece apicalmente debido al crecimiento de la
pared y de la membrana plasmática.
• La quitina, se sintetiza mediante la polimerización de
la N-acetilglucosamina catalizada por la quitina
sintetasa
• La quitina sintetasa se produce como zimógeno en el
RER y se transporta primero al aparato de Golgi,
luego salen contenida en las macrovesículas a partir
de las cuales se producen los quitosomas
(microvesículas) que se concentran en el ápice
formando el cuerpo apical (Spitzenkörper).
• Las microvesículas o quitosomas se fusionan con la
membrana plasmática donde la quitina sintetasa se
activa mediante proteólisis parcial.
• Los microtúbulos y los microfilamentos participan en
la migración de las vesículas orientando el flujo
citoplasmático.
• La síntesis de los glucanos implica primeramente la
activación de la ß- o de la α-glucosa (según el caso)
en UDP-glucosa y luego la polimerización por la ß-
1,3-glucano sintetasa o la α-1,4-glucano sintetasa.
• La síntesis de los mananos se realiza por la acción de
la manano sintetasa sobre unidades de manosa
activadas (GDP-manosas), las cuales requieren de un
lípido poliprenoide transportador de membrana
(dolicol) y luego la unión a proteínas para dar lugar a
mananoproteínas.
Figures A-C. Ultrastructure of the hyphae of Sclerotium rolfsii, prepared for electron microscopy by freeze substitution.
From photographs supplied by Dr Robby Roberson (see Roberson & Fuller, 1988).
Fig. A. Young region of a hypha, showing progressive changes in ultrastructural organisation behind the hyphal apex. The
apex contains a Spitzenkörper (S). Behind this is a zone rich in mitochondria (M, the dark tubular structures), then a zone
containing tubular vacuoles (light coloured) and nuclei (N).
Fig. B. Part of a mature region of a hypha (the apex, not shown, is towards the right of the image) showing mitochondria
(M), vacuoles (Va), Golgi bodies (G, seen as dark, ring -like structures) and longitudinally running microtubules (MT).
Fig. C. Close-up of the Spitzenkörper - an accumulation of small, membrane- bound vesicles of different sizes and
contents, surrounding a central, vesicle -free core. The hyphal plasma membrane is seen as a thin dark line immediately to
the right of the Spitzenkörper; two thin wall layers are seen outside the plasma membrane.
Simplified model of wall growth at the hyphal apex. From Deacon
(1997)
Simplified model of apical growth of fungal hyphae. G = Golgi body; V = vesicle; M = microtubule. From Deacon (1997).

The apical vesicles that make up the Spitzenkörper are thought to be produced from Golgi bodies and then transported to the tip by
elements of the cytoskeleton - perhaps the microtubules, actin microfilaments and motor proteins like myosin.
•The vesicles fuse with the plasma membrane at the tip, and release their contents. These contents almost certainly differ in the
different types of vesicle, but are thought to include:
•enzymes involved in wall synthesis,
•enzymes involved in wall lysis,
•enzyme activators,
•some preformed wall polymers such as mannoproteins, although most wall polymers are synthesised in situ at the tip.
•The wall is thin and thought to be structurally weak at the extreme tip, enabling new wall materials to be inserted. So the structural
integrity of the hyphal tip might depend on the "actin cap" - a meshwork of actin microfilaments. The wall is strengthened
progressively behind the apex by cross-linking of wall polymers
Reproducción asexual

oDurante el ciclo de vida de los hongos, el estado

genético de mayor preponderancia es el haploide
oEn este estado pueden diseminarse mediante
procesos asexuales que no implican cambio en el
nivel de ploidía del hongo.
oLos hongos producen una diversidad de estructuras
de reproducción asexual que provienen de cuatro
mecanismos básicos: esporogénesis, conidiogénesis,
gemación y fisión
a) Esporogénesis.- Una
hifa se diferencia en
esporangióforo a partir
del cual se produce un
saco terminal llamado
esporangio que contiene
las esporangiosporas.

Rhizopus, a zygomycete that grows on

simple sugars. This fungus is often found on
moist bread or fruit. a. The dark, spherical,
spore-producing sporangia are on hyphae
about 1 cm tall. The rootlike hyphae
(rhizoids) anchor the sporangia.
b) Conidiogénesis.-
El conidióforo da
lugar a
conidiosporas
libres las cuales
pueden ser
unicelulares o
multicelulares.

Aspergillus sp.
c) Gemación.- Caracteriza
a las levaduras
d) Fisión.- Implica la
separación de dos células
mediante la formación
de un septo o mediante
la individualización de las
células de una hifa dando
lugar a las artrosporas. Scanning electron microscopy image of Saccharomyces
cerevisiae
 Reproducción sexual

Cariogamia
Fusión de los
Plasmogamia núcleos haploides
Fusión de los
para dar lugar a
gametos para dar
una estructura
lugar a una célula
diploide
heterocarionte

Meiosis
Se reproduce la
recombinación y da
lugar a núcleos
haploides los cuales
pueden o no seguir
mitosis
• Especies heterotálicas, cuando las estructuras
sexuales provienen de dos individuos diferentes
• Especies homotálicas, las estructuras sexuales se
encuentran en el mismo individuo
Clasificación

• El reino Fungi contiene cinco phyla principales que

se establecieron de acuerdo con su modo de
reproducción sexual o el uso de datos moleculares
• Los cinco phyla de hongos son: Chytridiomycota,
Zygomycota, Ascomycota, Basidiomycota y
Glomeromycota.
• El Deuteromycota es un grupo informal de hongos
no relacionados que comparten un carácter común:
usan una reproducción estrictamente asexual.
 The kingdom Fungi

Ancestro
común
Muchos micólogos reconocen actualmente cinco grupos principales de
hongos, aunque la evidencia genómica reciente indica que los quitridios y
zigomicetos son parafiléticos.

Número aprox
Phylum Ejemplo Características de especies
vivientes
Hongos acuáticos, flagelados que producen
Chytridiomycota Allomyces gametos haploides por reproducción sexual o 750
zoosporas diploides por reproducción asexual.

Las hifas multinucleadas carecen de tabiques, a

excepción de las estructuras reproductivas; la
Rhizopus, fusión de hifas conduce directamente a la
Zygomycota 1050
Pilobolus formación de un cigoto en zygosporangio, en el
cual la meiosis ocurre justo antes de que germine;
la reproducción asexual es más común.
Forman micorrizas arbusculares. Las hifas
Glomeromycota Glomus multinucleadas carecen de tabiques. Se 230
reproduce asexualmente.
En la reproducción sexual, las ascosporas se
Ascomycota Trufas, morillas forman dentro de un saco llamado ascas; la 64000
reproducción asexual también es común.
En la reproducción sexual, las basidiosporas
Champiñones, nacen de estructuras en forma de maza llamadas
Basidiomycota 33000
setas, roya basidias; reproducción asexual ocurre
ocasionalmente
Filogenia del hongo
Árbol filogenético generalizado
basado en secuencias de genes de
RNA ribosómico 18S describe las
relaciones entre los grupos
principales (phyla) de hongos. Un
género típico se enumera para cada
grupo y se representa en el árbol.
 Chytridiomycota
• Únicos hongos que
mantienen una etapa
flagelada
• La evidencia apunta a que
pertenecen a Fungi por la
composición de pared
celular, enzimas y rutas
metabólicas.
 The major components of fungal walls.

AAA, alpha-amino adipic acid pathway; DAP, diamino-pimelic acid pathway.

Chytridiomycota
• De agua dulce, marinos; algunos
son parásitos de plantas y de
dípteros, mientras que otros
viven en plantas muertas y
partes de insectos. Algunos son
unicelulares y otros producen
micelio con hifas cenocíticas.
• Presenta gametos flagelados
• Dos ejemplos de importancia:
Synchytrium endobioticum
produce la “sarna de la papa” ;
Allomyces
 Zygomycota
o Hifas cenocíticas
o Son exclusivamente
terrestres, algunos son
parásitos de animales y
plantas, otros tienen uso en
biotecnología industrial
o Rhizopus stolonifer y Mucor
o Reprod. sexual: zigosporas
o Reprod. asexual:
esporangiosporas Rhizopus stolonifer

o Algunos son dimórficos

Reproducción asexual Reproducción sexual

Zigosporangio
Ciclo de vida de zigomicetos

(+) (-) (+) (-)

Esporas
(n) Hifas de diferentes sepas
Reproducción se juntan
asexual
Reproducción
4 sexual

Zigoespora
germinando

2
Esporangio Zigospora
(n) (2n)
3
 Ascomycota
• Presentan un micelio formado por hifas
haploides septadas.
• Su reproducción asexual es por conidiosporas o
yemas; reproducción sexual por ascosporas
• Su reproducción sexual se realiza por la
formación de esporas dentro de una estructura
en forma de bolsa o saco llamada ASCAS.
• 35 000 especies, muchas de importancia
económica.
• Unicelulares (levaduras) y filamentosos
• Marinos, de agua dulce y terrestres
Los ascomicetos se dividen en dos grandes grupos:

• Hemiascomicetos, son generalmente

unicelulares, reproducción asexual es por
gemación o por fisión y producen ascas libres.
Ej. Levaduras
• Euascomicetos, son miceliares, la
reproducción asexual es por conidiosporas y
producen ascas contenidas en ascocarpos.
Existen tres tipos básicos de ascocarpos:

a) Cleistotecio,
estructura esférica en
cuyo interior se
encuentran las ascas.
Ej. Tallaromyces,
Eurotium
b) Peritecio, estructura
piriforme y hueca, con
una abertura en la parte
angosta (ostiolo) en
cuyo interior se
encuentran las ascas.
Ej. Neurospora, Erysiphe
• c) Apotecio,
estructura en
forma de plato en
cuya superficie se
encuentran las
ascas.
Ciclo de vida Ascomicetos
Ascocarpo
Conidia
germinando

Plasmogamia

Conidióforo 2
con conidias
(n)

1 Reproducción
Reproducción sexual
asexual
3

Hifas dicarióticas
con ascas (n + n)

mitosis meiosis

7 Ascaspora
germinando Asca con Kariogamia 4
ascasporas (n) (2n)
6 5
 Phylum Basidiomycota

• Presentan especies
miceliares y algunas
unicelulares
• Se reproducen
asexualmente por
conidiosporas, yemas
• Reproducción sexual por
basidiosporas que se
producen sobre
estructuras llamadas
basidias.
• Los basidiomicetos
incluyen unas 30 000
especies, algunas de
las cuales son de
importancia
económica tanto en Agaricus bisporus (“champiñones”)

la alimentación como
en la agricultura.

Amanita muscaria
Ciclo de vida Basidiomiceto
Plasmogamia 4
1
Basidiocarpo
3 Germinación de
basidiosporas

Basidia con
basidiosporas
Agalla mostrando las
basidias

Meiosis
Kariogamia
2
Deuteromicetos
• Conocidos como
hongos imperfectos
• Grupo “informal”que no
tiene base filogenética
• No se pueden clasificar
dentro de filos porque
no se conoce la fase •Se encuentran la mayoría de
sexual. los hongos patógenos del ser
humano
• Se reproducen
asexualmente por •Pie de atleta
conidias •Candida albicans
Deuteromycota
• La gran cantidad de hongos que producen conidios, pero
cuyos estados sexuales están ausentes, raros o
desconocidos. A estos hongos se han denominado
"Deuteromycota“ o "Fungi Imperfecti", pero el término más
apropiado es hongos mitospóricos (las esporas se producen
sólo por división nuclear mitótica).
• Es probable que la mayoría de estos hongos se asignen a
géneros de Ascomycota mediante comparaciones de
secuencias de genes.
• Los géneros y especies sin etapa sexual conocida reciben
nombres genéricos provisionales, denominados "géneros de
forma". Cuando se descubre una etapa sexual, el hongo
debe cambiarse de nombre y describirse de acuerdo con las
características de su etapa reproductiva sexual, el llamado
"estado perfecto".