Manual de toma de muestras

2016

Manual de Toma de
muestras
U.G.C. de Laboratorios
Complejo Hospitalario de Jaén

INDICE

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1. RECOMENDACIONES GENERALES

2. ETAPAS EN LA EXTRACCIÓN DE MUESTRAS SANGUINEAS

3. TIPOS DE ESPECIMEN

4. TUBOS UTILIZADOS PARA EXTRACCIÓN SANGUINEA

5. EXTRACCIÓN DE SANGRE CAPILAR

6. EXTRACCION DE SANGRE ARTERIAL

7. FACTORES QUE PUEDEN ALTERAR LA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

8. ORINA

9. HECES

10. LIQUIDOS BIOLOGICOS

11. IDENTIFICACIÓN DE LAS MUESTRAS

12. CRITERIOS DE RECHAZO

1. RECOMENDACIONES GENERALES

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En general el momento más adecuado para realizar la toma de muestra es entre las
7:30-9:30 de la mañana, (las determinaciones que necesiten extraerse en otra banda
horaria deberán de especificarse por el laboratorio). Además se recomienda un ayuno
previo de 8-10 horas y extraer la muestra antes de iniciar procedimientos diagnósticos
o terapéuticos que puedan interferir. Se debe registrar la hora exacta de la toma de
muestra y enviar ésta al laboratorio en el contenedor adecuado.

2. ETAPAS EN LA EXTRACCIÓN DE MUESTRAS SANGUÍNEAS

Para asegurar una correcta extracción sanguínea es importante tener en cuenta las
siguientes consideraciones:

 Identificación del paciente: es responsabilidad del ATS/DUE asegurarse de que la

muestra de sangre se extrae a la persona que figura en la petición; o En pacientes
ambulatorios/consultas externas: el ATS debe solicitar al paciente que se identifique
con su nombre completo y comparar este nombre con el que figura en el impreso
de petición y el número de identificación de esa petición con el número de etiqueta
de los tubos.
.

 Comprobar que el paciente esté en ayunas. Algunas determinaciones requieren

que el paciente se encuentre en ayunas o que realice dietas especiales antes de
la extracción de la muestra.

 Preparar materiales adecuados:

 Tubos de recogida de muestras, agujas y jeringas.

 Compresores.
 Alcohol isopropílico al 70% y compresas de gasa o compresas preparadas con
alcohol (en pacientes con problemas de dermatitis deben utilizarse torundas de
algodón seco).
 Torundas de Povidona-iodada, si van a extraerse hemocultivos.
 Rollos de gasa, tiritas.

3. TIPOS DE ESPECIMEN

La sangre venosa es el espécimen utilizado de forma habitual en los estudios analíticos

ya que su obtención es rápida y relativamente fácil. Según el tipo de estudio que se
vaya a realizar se puede obtener:

 Sangre total: la sangre obtenida por veno punción se recoge en un tubo con
anticoagulante en una proporción determinada. Generalmente es la muestra
usada para estudios hematológicos cualitativos, cuantitativos, grupo sanguíneo,
etc.

 Plasma: se obtiene añadiendo la sangre en tubo con anticoagulante (heparina

litio, citrato), centrifugando la muestra y alicuotando el líquido sobrenadante. Es

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fundamental mantener la proporción correcta de sangre-anticoagulante para
asegurar resultados correctos. Esta muestra es la utilizada para estudios de
coagulación.

 Suero: se obtiene dejando coagular la sangre sobre tubo seco sin

anticoagulante.

La sangre se deja reposar 10 minutos a Temperatura ambiente para que se forme el

coagulo y posteriormente se centrifuga obteniendo el suero en el sobrenadante. Es la
muestra utilizada en el laboratorio de bioquímica, serología e inmunología.

Debe evitarse zonas con hematomas, quemaduras, tobillos o pies en pacientes

diabéticos y con trastornos circulatorios.

En los procedimientos de punción venosa en adultos generalmente se utilizan las venas

del brazo, siendo la cubital media la más habitual por su calibre, accesibilidad y por ser
menos dolorosa, aunque también son frecuentes la cefálica y la basílica. Otras zonas
utilizadas, aunque menos frecuentes son el área de la muñeca, dorsal de la mano y
antebrazo.

Se deberán extremar los cuidados en pacientes con venas difíciles (recién nacidos,
obesos, pacientes con perfusión intravenosa). En estos pacientes se seleccionará el
lugar de extracción utilizando técnicas para favorecer la palpación de la vena (cerrando
el puño, colocar previamente el compresor 30 seg., golpear con el dedo índice el lugar
de punción, aplicar calor en la zona, masajear el brazo, etc.).

Posteriormente se coloca el compresor, que aumenta la cantidad de sangre acumulada

en las venas haciéndolas más prominentes. Hay que tener en cuenta que un compresor
no debe de mantenerse más de 2 minutos ya que puede producir hemoconcentración,
alterando el equilibrio entre el líquido y los elementos formes de la sangre. También es
conveniente tener en cuenta que el desinfectante utilizado (alcohol de 70º) se debe de
dejar secar para evitar hemólisis y escozor en la zona.

Para evitar hematomas durante la punción venosa se recomienda utilizar venas

grandes, quitar el compresor antes que la aguja y aplicar cierta presión en el lugar de la
punción tras la extracción sin flexionar el codo. Una punción venosa dificultosa o
incorrecta puede ser una frecuente causa de hemólisis, pudiéndose producir ésta en
ciertas ocasiones:

 cuando se utiliza una aguja muy fina

 al forzar el paso de la sangre de la aguja al tubo
 si se agita en exceso el tubo en vez de agitarlo suavemente
 si se tira con demasiada fuerza del émbolo de la jeringa
 al extraer sangre de hematoma

Como normas básicas en extracciones se tendrá en cuenta:

 No destapar los tubos y volverlos a cerrar ya que el tapón podría saltar por
exceso de presión y la muestra se derramaría.
 Hay que respetar SIEMPRE la proporción sangre-anticoagulante.
 Para evitar hemólisis dejar resbalar suavemente la sangre por la cara interna del
tubo.

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 Invertir suavemente varias veces el tubo lleno (si lleva anticoagulante), para
homogeneizar la muestra.

El ORDEN de extracción de los tubos sería:

1.- Frascos hemocultivo.

2.- Tubos secos.
3.- Tubos de coagulación (citrato).
4.- Tubos de VSG (citrato).
5.- Tubo de hemograma (EDTA).
6.- Tubos con aditivos (heparina, fluoruro oxalato….).

4. TUBOS UTILIZADOS PARA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

En el laboratorio se emplearán tubos con diferentes aditivos según el tipo de

determinaciones que se vayan a realizar. Con el fin de poder diferenciarlos con facilidad
se utiliza un código de colores:

 Tubo seco (sin aditivos o con gelosa): se usan para determinaciones en suero.
No llevan ningún tipo de anticoagulante, aunque sí pueden tener gel separador
que actúe facilitando la retracción del coágulo y separándolo del suero
definitivamente.
Tapón amarillo: Bioquímica, Serología, Inmunología.

 Tubo con EDTA-K3: la sal tripotásica del ácido etilendiaminotetraacético tiene

un efecto quelante sobre el calcio. Es el anticoagulante utilizado en
hematimetría, en el estudio cualitativo y cuantitativo de los elementos formes de
la sangre.
Tapón lavanda: Hematimetría, HbA1C.

 Tubo con citrato: Se utiliza en forma acuosa de citrato trisódico 0.106M,

tamponado para estabilizar el pH del plasma. Su acción anticoagulante se basa
en la precipitación de los iones calcio, y se usa fundamentalmente para los
estudios de coagulación y eritrosedimentación. El volumen de anticoagulante
viene preparado para un determinado volumen de sangre, proporción que no
puede variarse ya que se alteran los resultados de coagulación, por ello se exige
que el llenado de los tubos sea exacto. La relación de volumen de citrato sódico
y plasma tiene que ser de 1:9 (una parte de citrato por nueve de plasma). Si esta
proporción se modifica, recogiendo menos sangre, “muestras cortas”, aumenta
el tiempo de tromboplastina parcial (APTT) y el tiempo de trombina (PT),
especialmente si la relación aumenta a 1:7. Los valores de PT y APTT también se
ven alterados por un aumento en el valor del hematocrito (superior al 55%), ya
que se reduce el volumen de plasma en la muestra aumentando la relación
citrato-plasma. Este citrato en exceso forma complejos con el calcio elevando
ambos tiempos. En el caso contrario, en las muestras llenas en exceso, hay más
plasma del debido, y la relación citrato-plasma disminuye (ej. 1:20), entonces el
efecto es contrario, los tiempos se acortan. Tapón celeste: coagulación. Tapón
negro: VSG.

 Tubo con heparina-litio: la heparina ejerce su acción anticoagulante acelerando

la inhibición del factor Xa por la antitrombina, impidiendo así la activación de la
coagulación en el tubo. Se reserva su uso para estudios bioquímicos en plasma.

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Tapón verde: determinaciones bioquímicas en laboratorio de Urgencias.

 Tubo con fluoruro sódico-oxalato potásico: El fluoruro sódico se utiliza como

inhibidor de la glucólisis y se combina con el oxalato potásico por la acción
anticoagulante de éste.
Tapón gris: determinación lactato y alcoholemia.

ESQUEMA TUBOS DE EXTRACCIÓN SANGRE LABORATORIO

TAPON CARACTERISTICAS LABORATORIO DETERMINACIONES

Malva
13 X75. Edta K3, 3 ml. Hematología Test de Coombs directo, Hemograma E. de Coagulación
Inmunología E. de anemia, Grupo y RH, pruebas genéticas, HLa
Biología Molecular b27,B51, B57
Celeste
13X75, 4.5 ml, Coagulación Sintron, E. de Coagulación, Anticoagulante lúpico
Citrato (Adultos)

Celeste claro
13X75, 1.8 ml, Coagulación Pediátrico
Citrato Inmunológia
Rojo 16X100, 10 ml,
Tubo seco (sin Hematologia Test de Coombs indirecto, Retracción del coagulo
Aditivos)
Malva Ciclosporina, HB glicosilada, Amoniaco,
13X100, Edta K2, 6 ml Laboratorio Aminoacidos, Elastasa, Tacrolimus.
Sirolimus, Ac. Láctico

Rojo Glucosa, Urea, A. Urico Amilasa, CPK, CK-MB, GOT,

13X75, 3.5ml. Bioquímica GPT, GGT, Colesterol, HDL, LDL, Hierro, Ferritina,
Gel Separador General Transferrina, Iones, Bilirrubina, LDH, ECA, Magnesio, F.
Alcalina, P. Totales, Apolipoproteinas A y B, Zn.

Negro
8x100, 1.8 ml. Citrato Bioquímica VSG
General

D-Xilosa, Niveles de fámacos, Cortisol, Enolasa, PTH,

Amarillo 13x100, 5 ml. Bioquímica Fólico, B12, Eritropoyetina, HGH, Tiroglobulina, Péptido C,
Gel Separador General Somatomedina C, IGF-PB3, Sceening Prenatal, Perfil
tiroide, Hormonas Gonadales, H. Hipofisarias,
H. Suprarenales. P. totales y Electroforesis, Colinesterasa,
, Osmolaridad, Ac Oxálico,Citrato, Isoenzimas,
Osteocalcina,*Pirúvico, Procalcitonina.
Azul
13x75, 3.5 ml. Bioquímica Bicarbonato
Gel Separador Clínica
Electroforesis
[Link], ANA, Anti DNA, ENAs, ANCAs, Anti LKM,
Amarillo Inmunologia Ac. Anti Músculo liso, Anti mitocondriales,Anti
16x100, 8.5 ml. Tiroglobulina, TPO, Inmunoglobulinas, IGE total y
Gel Separador especifica, Gliadinas, Endomisio, Transglutaminasa,
Cardiolipina, Complementos, Alfa 1 antripsina,
Ceruloplasmina, *Crioglobulinas (37ºC), Prealbumina,

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Cistatina C.
Azul
13x100, 5 ml. Inmunologia Carga viral VHC
Gel Separador

Rojo
13x100, 5 ml. Microbiología Serología microbiana
Gel Separador

Verde 13x75, 3 ml.

Gel separador + Urgencias
Heparina de litio

Nácar 13x100, Carga viral del VIH, Catecolaminas, *Renina, Aldosterona,

Edta K2, 5 ml, Laboratorio ACTH, **Resistencias antirretroviales
Gel separador

5. EXTRACCIÓN DE SANGRE CAPILAR (PUNCIÓN CUTÁNEA)

Este método de extracción sanguínea se suele utilizar en niños para obtener una
pequeña cantidad de muestra. Hay diferencias entre la sangre capilar y venosa,
especialmente en la prueba de tolerancia oral a la glucosa. La sangre obtenida por la
punción cutánea se compone de una mezcla de sangre procedente de las arteriolas,
vénulas y capilares, y puede también estar diluida con fluido intersticial e intracelular.

La composición relativa de la sangre obtenida por este método dependerá de variables

tales como el flujo de sangre a la piel durante la recolección. Los lugares para la
obtención de sangre incluyen la superficie palmar de la falange distal de cualquier
dedo y la superficie plantar lateral o medial del talón.

La punción del dedo no deberá realizarse en lactantes menores de 18 meses ya que

hay una cierta probabilidad de lastimar el hueso. A mayor profundidad de penetración
en el sitio de punción, mayor volumen de sangre se obtendrá, por lo tanto, la lanceta
debería seleccionarse según el sitio de punción y la cantidad de sangre necesitada.

La profundidad de la incisión hecha en el talón de un infante es crítica ya que una

punción más profunda de 2,4 mm sobre la superficie plantar del talón especialmente
de niños muy pequeños puede dañar el calcáneo o hueso del talón. Esto puede
evitarse con el uso de lancetas semiautomáticas desechables de flujo de seguridad.

Después de la selección del lugar de punción cutánea, y antes de realizar la misma, se

debe:

 Limpiar la zona con una solución acuosa de alcohol al 70 % (evitar otros

desinfectantes ya que pueden alterar las concentraciones de urato, fosfatos o
potasio).
 Secar el lugar con una gasa estéril para asegurar que el alcohol residual se ha
eliminado (ya que de otra manera podría causar hemólisis).

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 La punción cutánea deberá realizarse con una lanceta desechable.
 Desechar la primera gota de sangre que fluye, ya que puede estar contaminada
con fluidos titulares.
 Recoger en el recipiente de micromuestras las gotas de sangre que fluyen en el
tubo colector realizando una ligera presión en el lugar de punción pero sin
apretar demasiado la zona.

En el caso de que las gotas no fluyan libremente desde el tapón colector al tubo de
micromuestra, éste puede golpearse suavemente para facilitar el flujo de gotas de
sangre en el tubo. Al terminar la recolección de sangre, deberá cerrarse el tubo
firmemente. Los tubos que contienen aditivos deberán mezclarse bien después de la
recolección de la muestra, invirtiendo suavemente el tubo varias veces.

La recolección de muestras de sangre en tubos capilares heparinizados destinados a las

mediciones relacionadas con los gases de la sangre debería hacerse después de
calentar la zona de punción con una toalla empapada en agua corriente a una
temperatura no mayor de 42° C para conseguir la «arterialización» del lugar de
punción.

Los tubos capilares deben estar libres de burbujas de aire después de la recolección.
Estas muestras deben colocarse durante su transporte al laboratorio, en un recipiente
con agua y trozos de hielo, para evitar que se produzcan cambios de importancia en su
pH.

Al concluir la recolección de la muestra, deberá presionarse la zona de punción con un

algodón o compresa de gasa estéril y mantenerla en la zona hasta que deje de sangrar.
Como una medida de seguridad, es aconsejable no aplicar vendajes adhesivos sobre la
zona de punción de recién nacidos y niños pequeños, no solamente a causa de la
irritación que el adhesivo puede ocasionar sino también debido a que el vendaje
podría llegar a soltarse y ser tragado por el niño.

Las lancetas desechables usadas para la punción cutánea deberán depositarse en un

contenedor de seguridad resistente a la perforación.

6. EXTRACCIÓN DE SANGRE ARTERIAL

La punción arterial se lleva a cabo principalmente para obtener muestras de sangre de

las arterias para realizar una gasometría arterial (que puede indicar problemas
respiratorios o de trastornos metabólicos). Sin embargo, las punciones arteriales se
realizan ocasionalmente para obtener un cultivo de sangre o muestras para química
sérica.

Para realizar este examen se toma una muestra de sangre arterial con una aguja
pequeña; dicha muestra puede tomarse de la arteria radial de la muñeca
(comprobándose primero, mediante la técnica de Allen, la existencia de una

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funcionalidad normal en la circulación de la arteria cubital), de la arteria femoral en la
ingle (no recomendada en niños recién nacidos por la posibilidad de lesionar la cadera
y la vena y nervio femoral) o de la arteria braquial en el brazo. Esta última es más difícil
de pinchar, y además, el nervio mediano descansa cerca de la arteria braquial, por lo
que existe la posibilidad de dañarlo accidentalmente.

También se puede realizar la extracción de la arteria pedia dorsal, en la parte superior

del pie, en situaciones especiales como lesiones en brazos, escayolas, quemaduras, etc.

La arteria temporal se utiliza especialmente en niños pequeños.

Si la muestra de sangre arterial va a realizarse de la arteria radial de la muñeca, antes de

realizar la extracción se puede evaluar la circulación a la mano mediante la técnica de
Allen: En esta prueba el paciente cierra firmemente el puño. Se aplica presión hasta que
se interrumpe la circulación en las dos arterias, la radial y la cubital. En esta situación, el
paciente abre y cierra la mano rápidamente hasta que la palma y los dedos estén
pálidos. Deja entonces la mano abierta.

El enfermero suelta sólo la arteria cubital y observa la mano, que debe irrigarse antes
de 15 segundos, tiempo que la sangre de la arteria cubital tarda en rellenar el lecho
capilar vacío. Si la arteria cubital no suministra sangre a toda la mano de forma
adecuada -maniobra de Allen negativa- no debe utilizarse la arteria radial como lugar
de punción. Si es positiva, puede utilizarse esta localización.

Después de extraer la sangre arterial, se debe aplicar presión en el lugar de la punción

durante por lo menos cinco minutos para detener completamente el sangrado. Si el
paciente está recibiendo un tratamiento anticoagulante o si tiene un tiempo de
coagulación prolongado, debe mantenerse la presión más tiempo. Dos minutos
después de comenzar a aplicar la presión, hay que inspeccionar de nuevo el lugar para
cerciorarse de que no se está desarrollando un hematoma. La colocación de un apósito
con presión no es aceptable. Si la hemorragia no cesa dentro de un tiempo razonable,
hay que avisar al médico encargado del paciente.

Mientras se está aplicando la presión sobre el lugar de la punción, hay que comprobar
si la jeringa tiene burbujas de aire. Si hay alguna presente, hay que desprenderla
cogiendo la jeringa con la punta de la aguja hacia arriba y expulsando cuidadosamente
cualquier cantidad de aire fuera de la misma.

Se quita la aguja y se tapa la jeringa con un tapón o se pincha la aguja en un tapón

para hacer que la jeringa sea impermeable al aire y al agua. El doblar la aguja es una
práctica TOTALMENTE INACEPTABLE.

La muestra debe enviarse inmediatamente al laboratorio para su análisis, de lo

contrario, la exactitud de los resultados no se puede garantizar.

7. FACTORES QUE PUEDEN ALTERAR LOS RESULTADOS EXTRACCIÓN DE SANGRE

 Paciente no estabilizado
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Es imprescindible que el enfermo repose unos 10-15 minutos antes de la extracción, si
tiene ventilación asistida las constantes deben estar estables 20 min antes de la
extracción. Se debe minimizar la ansiedad y el dolor ya que afectan al patrón
respiratorio.

 Burbujas de aire
Las burbujas de aire pueden alterar en gran medida el valor de la pO2, dependiendo
de la cantidad y tamaño de las mismas; cuantas más pequeñas sean las burbujas,
mayor será la superficie de contacto con la sangre, y más rápidamente se producirá la
variación. Una vez obtenida una muestra deben eliminarse inmediatamente las
posibles burbujas que haya en ella, y sellar herméticamente la jeringa con un tapón en
el cono. (Hay que retirar la aguja y desecharla). Las muestras de gases en sangre deben
ser anaerobias, por tanto, las que contengan burbujas se rechazarán.

 Dilución con la heparina

El uso de heparina líquida para “heparinizar” la jeringa con que se va a realizar la
extracción, puede provocar errores en la medición como consecuencia de la dilución
de la muestra. Este problema se evita si usamos heparina liofilizada.

 Refrigeración
La forma de eliminar o limitar los procesos metabólicos de la muestra es refrigerándola
(herméticamente cerrada) en un frigorífico hasta el momento de la medición. Está
especialmente contraindicada la inmersión en un recipiente con hielo después de su
extracción, debido a los procesos de hemólisis que provocan las grandes diferencias de
temperatura que el contacto con el hielo produce.

 Tiempo
La muestra debe ser entregada en el laboratorio para su análisis antes de 15 minutos.

 Coágulos
Debe rechazarse cualquier muestra que contenga coágulos. Los coágulos tienden a
formarse cuando se hace difícil realizar una punción y la sangre no se mezcla bien con
la heparina o queda estancada en la aguja.

8.- ORINA

Las muestras de orina son utilizadas por el laboratorio para diagnosticar y controlar el
tratamiento de las enfermedades del riñón o del tracto urinario y en la detección de
enfermedades metabólicas o sistémicas. Los métodos y horarios de recogida de las
muestras dependen de las pruebas solicitadas por el médico.

Son muchos los parámetros susceptibles de analizarse en orina. Actualmente, las

determinaciones en orina que representan el mayor volumen de trabajo en el
laboratorio es el Sistemático de orina mediante tiras multirreactivas junto con el análisis
del sedimento urinario y los urocultivos.

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8.1.-Orina de micción aislada

El análisis sistemático de orina y sedimento se solicita en función de una gran variedad

de indicaciones que incluyen:

 Ayuda en el diagnóstico de enfermedades.

 Seguimiento del progreso de enfermedades.
 Cribados poblacionales a pacientes asintomáticos o con enfermedades
congénitas.
 Control de la eficacia de los tratamientos.

8.1.1.- Toma de muestra orina micción aislada

Se prefiere la orina de 1ª hora de la mañana ya que presenta una mayor osmolalidad, lo

que refleja la capacidad que presenta el riñón para concentrar la orina. En esta orina de
1ª hora se encuentran más concentrados elementos como leucocitos, bacterias,
cilindros, hematíes, optimizándose así el rendimiento diagnóstico de las pruebas de
laboratorio. Además, presenta menores fluctuaciones en las determinaciones influidas
por la dieta, actividad física, etc.

Las orinas de micción aislada obtenidas de forma aleatoria se aceptan en situaciones

especiales como analíticas urgentes, o determinados estudios, como por ejemplo, en el
estudio del metabolismo óseo, que se recomienda la segunda orina de la mañana.

Se debe recoger la orina de la porción media de la micción (ya que está menos
contaminada por las bacterias del meato urinario que son arrastradas por la primera
parte de la micción). Se recomienda lavado previo de genitales externos con jabón y
aclarado posterior con abundante agua (si la orina se contamina con jabón pueden
verse afectados determinados parámetros como pH, o incluso el crecimiento
bacteriano puede verse inhibido).

En los pacientes pediátricos se deben utilizar bolsas colectoras con adhesivos

hipoalergénicos, cambiándose cada 15-20 minutos para evitar contaminaciones.

El procedimiento de recogida de la muestra es realizado por el propio paciente, por lo

que debe estar informado correctamente, verbal y por escrito; además, el
procedimiento varía para hombres, mujeres y niños.

Es fundamental extremar en esta técnica las condiciones higiénicas para asegurar la

esterilidad de la muestra.

Técnicas para mujeres

 Se recogerá la primera orina de la mañana.

 Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabón.
 Lavarse después la zona perineal, separando los labios mayores (que se
mantendrán así en todo momento), con agua, jabón y una gasa que se pasará
de delante hacia atrás; repetir el proceso varias veces.
 Enjuagar con agua para eliminar los restos de jabón, manteniendo siempre los
labios separados.

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 Empezar a orinar en el W.C. desechando los 20-25 primeros mililitros, tras lo
cual y sin interrumpir la micción, recoger la orina en el recipiente, sin que ésta
toque la piel.
 El frasco debe sujetarse para que no tenga contacto con las piernas, vulva o
ropa del paciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su superficie
interna.

Técnica para hombres

 Se recogerá la primera orina de la mañana.

 Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabón.
 Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento,
hasta que se haya recogido la orina.
 Lavarse el glande con agua, jabón y una gasa.
 Enjuagar los restos de jabón con agua, manteniendo el prepucio retraído.
 Empezar a orinar en el W.C. desechando los primeros 20-25 mililitros y, sin
interrumpir la micción, recoger el resto de la orina en el recipiente estéril.
 El frasco debe sujetarse para que no tenga contacto con las piernas, piel o ropa
del paciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su superficie
interna.

Técnica para niños.

En niños y niñas más pequeños (que no controlen esfínteres todavía), la orina se

recogerá en colectores o bolsas estériles especialmente diseñadas para ellos de la
siguiente forma:

 Lavado cuidadoso de los genitales y área perineal igual que en los adultos.
 Colocar la bolsa de plástico o el colector estéril.
 Retirar la bolsa en cuanto el niño haya orinado.
 Cada 20 minutos debe cambiarse la bolsa y reiniciar el proceso.

Se recomienda obtener un volumen mínimo de orina de 8-12 ml para el análisis de

anormales y sedimento. Se pueden aceptar volúmenes menores en muestras
procedentes de niños o pacientes oligo-anúricos.

Para cultivo bacteriano se necesita un volumen mínimo de orina (1-10 ml de orina). Sin
embargo, para el cultivo de hongos y virus, se necesitan volúmenes mayores (20-50 ml
de muestra). Para la búsqueda de micobacterias, la orina se recoge durante tres días
consecutivos, en este caso el volumen de orina debe ser 100-150 ml. En el caso de
parásitos se recogerá la orina de 24 horas.

Las muestras se trasportarán al laboratorio en el menor tiempo posible y aplicando las

normativas vigentes. Si el análisis se va a demorar más de dos horas el transporte
deberá ser refrigerado (2-8ºC), aunque esta medida puede producir la precipitación de
uratos o fosfatos amorfos.

Para el análisis sistemático de orina y sedimento no se recomienda el uso de ningún

conservante químico, aunque si el análisis se va a demorar pueden utilizarse recipientes
con conservantes (ácido bórico), principalmente si la muestra va destinada a urocultivo.

Tanto para anormales y sedimento como para urocultivo la muestra debe procesarse
en las 2-3 horas posteriores a su recogida, ya que algunos analitos pueden verse
afectados.
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Así, las bacterias a Temperatura ambiente se multiplican constantemente, y pueden

modificar la glucosa y el pH. El calcio, oxalato, ácido úrico tienden a formar cristales a
pH fisiológico.

También, se ha comprobado que los hematíes son especialmente sensibles a la lisis si se

demora el análisis. El resto de parámetros suele ser estable durante 24 h si se mantiene
la orina refrigerada (excepto en orinas muy diluidas o pH muy alcalino).

8.1.2.- Sedimento urinario

El análisis del sedimento microscópico de forma manual presenta falta de precisión y

una gran variabilidad interobservador. Para disminuir los factores que afecten a la
reproductibilidad de la técnica se ha de estandarizar el procedimiento preanalítico de la
muestra:

 Partir de un volumen de orina de 8-12 ml

 Centrifugar 5 minutos a 1500 rpm
 El factor de concentración del sedimento depende del volumen inicial y final de
orina tras decantación (1:8, 1:10, 1:12)
 Volumen de sedimento a examinar según la capacidad de la cámara
 Dejar reposar el sedimento en la cámara 1 minuto
 Observar microscópicamente al menos 10 campos (x40)

8.2.- Orina de 24 horas

La orina recogida durante 24h se obtiene con el fin de conseguir una muestra
homogénea y representativa de los analitos que se excretan de forma inconstante a lo
largo del día.

Sin embargo, la recogida de orina de 24h es un procedimiento engorroso sujeto a

numerosos errores preanalíticos y de estabilidad de los analitos, por este motivo, en los
últimos tiempos se tiende a sustituir las determinaciones de orina de 24 h por índices
de excreción referidos a creatinina urinaria en orinas de una micción (microalbúmina,
calcio, amilasa en orina).

También últimamente se tiende a sustituir el aclaramiento de creatinina por fórmulas

abreviadas (MDRD; Modification of Diet in Renal Disease). En algunas de estas fórmulas
intervienen determinaciones en suero de albúmina, creatinina, urea, factores
antropométricos como peso o superficie corporal y características demográficas como
sexo, edad y raza.

8.2.1.- Recogida de orina de 24 h

Debido a los errores preanalíticos que pueden surgir por una recogida inadecuada de
la orina de 24h, el paciente debe ser informado de forma oral y escrita del
procedimiento de toma de muestra.

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Cuando se entreguen recipientes que contengan conservantes que puedan suponer

un riesgo para el paciente se deberá informar oralmente sobre la forma correcta de
manipulación del envase.

Igualmente, el paciente debe ser informado si las determinaciones a realizar necesitan

algún tipo de dieta previa o si existe algún tipo de interferencia farmacológica.

NORMAS DE RECOGIDA ORINA 24 HORAS

 Esta prueba es válida solamente si la recogida de orina incluye toda la orina de

24 horas. Si por alguna razón no entra en el recipiente alguna cantidad de
orina emitida en este periodo puede que la prueba no sea exacta y tenga que
repetirse otro día.
 Comience el periodo de recogida de orina de 24 h a las 8 de la mañana. Orine
entonces en el WC (ya que esta orina se formó antes del periodo de recogida).
 A partir de ese momento, recoja toda la orina producida durante 24 horas hasta
las 8 de la mañana siguiente. A esta hora exactamente, orine de nuevo en el
contenedor para finalizar la recogida (ya que esta orina sí se formó durante el
periodo de recogida).
 Cierre el contenedor, manténgalo en lugar fresco (preferentemente nevera) y
remítalo al laboratorio.

Cuando el médico solicita simultáneamente determinaciones en orina de 24 h y

determinaciones de orina de una sola micción (anormales y sedimento, cultivo…) se
puede modificar el procedimiento de recogida de orina de 24 h con el fin de facilitar al
paciente la toma de muestra y evitar que se desplace dos días diferentes al punto de
extracción:

Procedimiento recogida orina 24 h modificado:

 Comenzar la recogida de orina de 24h dos días antes de la cita

 Antes de acostarse, orinar en el WC y anotar la hora exacta en el recipiente
 A partir de este momento, recoger toda la orina en el recipiente durante 24h,
orinando en el recipiente por última vez a la misma hora a la que se inició la
recogida el día anterior. Mantener la orina en lugar fresco, preferentemente
refrigerada
 El día de la cita, al levantarse, recoger la orina de 1ª micción en recipiente
pequeño siguiendo el procedimiento habitual de “porción media de primera
orina de la mañana” previo lavado de genitales externos

Los recipientes para recoger orina de 24 h deben ser contenedores de plástico opaco
con boca ancha, de 3 litros de capacidad, con escala graduada y con cierre seguro para
evitar derrames.

Se recomienda mantener la orina refrigerada durante el periodo de recogida de orina

de 24 horas hasta su entrega en el laboratorio o en los puntos de extracción periféricos.

Se recomienda enviar las muestras alicuotadas desde los punto de extracción

periféricos, con el fin de facilitar el transporte.

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 Manual de toma de muestras
2016
Para el alicuotado es necesario homogeneizar debidamente las orinas antes de obtener
una alícuota que sea representativa del total de la muestra, especificar en el
contenedor que se trata de orina de 24 h y anotar diuresis

En el caso en que se haya recogido la muestra en más de un contenedor, se deberán

homogeneizar todos los recipientes y mezclar el contenido del recipiente de forma
proporcional al volumen de muestra que contengan.

8.2.2.- Conservantes para orina de 24 h

En ocasiones en necesario añadir a la orina de 24 h determinados conservantes antes

de comenzar el proceso de recogida con el fin de evitar el deterioro de algunos
analitos. El conservante será suministrado por el laboratorio, y el TEL encargado deberá
informar debidamente al paciente sobre las precauciones que ha de tomar y del riesgo
que implica manipular los recipientes con ciertas sustancias.

Si existen varias opciones de conservación de la muestra se optará siempre por la

menos peligrosa para el paciente.

Si los análisis a realizar requieren el uso de diferentes conservantes se citará al paciente

en días distintos a pesar de que puede resultar algo incómodo para el paciente.

[Link].- Principales metabolitos en orina de 24 h. que necesitan conservantes

Ácido 5- aminolevulínico

Este metabolito es estable a pH < 5.5, por lo que se debe recoger con ácido acético
como conservante. En los casos en los que se solicite junto con otras determinaciones
como Porfobilinógeno y Porfirinas, (inestables en medio ácido) se recomienda utilizar
carbonato sódico previa recogida de la orina y congelar inmediatamente una alícuota
para el análisis de ALA.

La muestra congelada es estable durante 10 días.

La muestra debe protegerse de la luz (usar recipientes opacos).

Ácido 5-hidroxiindolacético
Recoger la muestra con 10 ml de Ácido clorhídrico 6N como conservante. Se puede
recoger la muestra sobre 10g de Ácido bórico con refrigeración o incluso únicamente
refrigerada sin conservantes, ajustando posteriormente el pH en el laboratorio
adicionando ácido clorhídrico.
Estabilidad: 2 semanas a 4ºC y 1 mes a -20ºC.

Condiciones especiales a tener en cuenta:

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 Manual de toma de muestras
2016
Suprimir de la dieta durante 3-4 días antes del análisis alimentos como plátanos,
berenjenas, piña, ciruelas y nueces así como fármacos como Reserpina (pueden
aumentar falsamente los niveles de Ác 5- OH- IndolAcético).

Ácido homovalínico
Utilizar como conservante 10 ml de Ácido clorhídrico 6N o 15 ml de ácido Acético
Estabilidad: 24 h a 4ºC . Si no se va a analizar en las primeras 24 h congelar.

Ácido úrico
El ácido úrico precipita a pH ácido, por lo que para su determinación se deberá ajustar
el pH en el laboratorio hasta alcanzar un valor superior a 6 añadiéndole Carbonato
Sódico o Hidróxido Sódico y dejando reposar la orina 1 hora para que se redisuelvan
los cristales que se hayan podido formar.

Ácido vanilmandélico
Recoger sobre 10 ml de Ácido clorhídrico 6N y refrigerarse durante recolección.
Estabilidad: 24h a 4ºC. Congelar para tiempos mayores.
Interferencias: Fármacos como L-Dopa usada en Párkinson aumenta la excreción de
AVM. La Iproniazida y Pergilina pueden reducir la excreción de AVM.

Microalbuminuria
Se recomienda utilizar orina refrigerada sin conservantes. Se admite la orina recogida
sobre ácido bórico o sobre ácido acético glacial. Las orinas muy ácidas precipitan las
proteínas.
Estabilidad: 7 días a Temperatura ambiente, 4ºC durante 2 semanas y a -5ºC durante 5
meses. Las orinas congeladas se deben de homogeneizar antes de usarlas para
determinación de microalbúmina.
Interferencias en la determinación de microalbúmina:

- Ejercicio físico intenso

- Infección del tracto urinario
- Después de cirugía
- Tras ingestión de grandes cantidades de líquido

Calcio
Se recomienda recogerlo sobre ácido clorhídrico 6N (aunque se puede acidificar
posteriormente en el laboratorio dejándolo reposar al menos 1 h para que se
redisuelvan los cristales de calcio que hayan podido precipitar).
Estabilidad: a pH ácido es estable durante 2 días a Temperatura ambiente, 4 días
refrigerada 4-8ºC y más de 3 semanas congelada.
La excreción de calcio en orina también puede determinarse en orina de micción
aislada (preferentemente 2ª orina de la mañana) calculando el cociente
Calcio/Creatinina, útil principalmente en niños incontinentes en los que es difícil
recoger orina a tiempo controlado.

Catecolaminas
Debe recogerse la orina sobre 10 ml de Ácido Clorhídrico 6N y mantener la orina
refrigerada.
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 Manual de toma de muestras
2016
Estabilidad: 24 h a 4ºC. Para periodos más largos mantener congelada.
Fármacos que pueden interferir en la determinación de catecolaminas:

 alfa-metildopa
 alfa-metil noradrenalina
 alfa-metildopamina
 isoproterenol

Se recomienda que durante tres días previos a la recogida de orina se mantenga una
dieta normosódica, e ingerir al menos un litro de agua diario. A valorar por el médico la
supresión de medicamentos tipo hipotensores, sedantes, tranquilizantes, salicilatos,
tetracicilinas al menos un semana antes de realizar el test.

Citrato
Se recomienda recogerlo sobre Ácido clorhídrico 6N o bien mantener refrigerado y
añadir posteriormente el ácido en el laboratorio y dejándolo homogeneizar.
Estabilidad: 24 h a Temperatura ambiente y 1 semana congelada.

Cortisol
Se puede recoger la orina sin conservante, manteniéndola refrigerada. Admite el uso
de algunos conservantes como ácido bórico, ácido acético o ácido clorhídrico.
Estabilidad: 48 h a Temperatura ambiente, y una semana a 4ºC.

Creatinina
Recoger la orina sin conservante, aunque se admite orina acidificada.
Estabilidad: 48 h Temperatura ambiente, 4ºC durante 1 semana y -20ºC durante 6
meses. Su concentración aumenta tras ejercicio físico, y dieta rica en carne.

Fósforo
Se recomienda recogerlo sobre conservante ácido aunque también se puede recoger
sin conservante y adicionar éste posteriormente en el laboratorio dejando
homogeneizar la muestra durante 1 hora para que se redisuelvan los cristales de
fosfato que se hayan formado.
Estabilidad: a pH ácido es estable durante 48h a Temperatura ambiente y durante 6
meses refrigerada 4-8ºC. La excreción de fósforo en orina también se puede determinar
en orina de micción aislada (se prefiere orina de 2ª hora de la mañana) calculando el
cociente fósforo/creatinina.

Glucosa
Recoger muestra de orina sin conservantes, refrigerada. También se admite orina
recogida con ácido bórico como conservante.
Estabilidad: 2 h a Temperatura ambiente o 48 h congelada.

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 Manual de toma de muestras
2016

Hidroxiprolina
Se recomienda recoger muestra de orina sin conservantes, pero mantener refrigerada.
Durante tres días previos a la recogida de la muestra se debe evitar ingerir: Carnes,
aves, pescado, marisco, salsas, helados, conservas, legumbres, frutos secos, refrescos
con gas, licores.
Se recomienda seguir dieta basada en : quesos, huevos, leche, yogures, lácteos, judías
verdes, manzanas, peras, naranjas, pan, arroz.
Estabilidad: 5 días a 4ºC y 1 año congelada.

Iones (sodio, potasio, cloro)

Recoger muestra de orina sin conservante. Se acepta el uso de ácido bórico.
Estabilidad: 45 días a Temperatura ambiente, 2 meses refrigerada y 1 año congelada.

Magnesio
Se recomienda recoger orina sobre 10 ml de ácido clorhídrico 6N.
Estabilidad: 24 h a Temperatura ambiente, 4ºC durante 72 h y a -20ºC durante 1 año.

Metanefrinas
La orina se recoge sobre 10 ml de Ácido clorhídrico 6N. Se admite ácido Acético pero
no se considera adecuado el ácido bórico.
Estabilidad: 1 mes a 4-8ºC y 3 meses congelada.
Se recomienda que para la determinación de metanefrinas y ácido vanilmandélico se
mantenga una dieta especial durante los 5 días previos a la recogida de la muestra,
evitando la ingesta de alimentos como: café, té, chocolate, caramelos, dulces, piña,
plátanos y quesos que no sean frescos.
También se recomienda evitar, en la medida de lo posible, medicamentos tipo
hipotensores, tranquilizantes, salicilatos y tetraciclinas.

N-Telopéptidos
No necesita el empleo de ningún conservante previo al inicio de recogida de orina de
24h. También se puede determinar en orina de micción aislada, preferiblemente de 2ª
hora de la mañana.
Estabilidad: 5 días a 4ºC y 1 mes a -20ºC.

Oxalato
Recoger la orina sobre Ácido clorhídrico 6 N, aunque también se admite su recogida
sin conservante y acidificar posteriormente en el laboratorio, dejando homogeneizar al
menos 1 hora para redisolver los posibles precipitados de oxalato que se hayan podido
formar.
Evitar ingerir en los días previos a la recogida alimentos como: cacao, fresas, o
espárragos.

Porfirinas

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 Manual de toma de muestras
2016
Se recomienda alcalinizar la orina con 5 g de Carbonato Sódico, mantener la orina
refrigerada y protegida de la luz (con recipientes opacos o tapándolos con papel de
aluminio).
Ajustar pH en laboratorio entre 8-9 para asegurar estabilidad.
Estabilidad: 4 días a Tempeatura ambiente, 7 días a 4ºC y 1 mes a -20ºC.

Porfobilinógeno
La recogida es igual que para las porfirinas, pero admite pH ligeramente ácido, por lo
que se puede recoger sobre ácido acético glacial, principalmente si se solicita la
determinación de porfobilinógeno con ALA y no con porfirinas.

Proteínas
Recoger muestra de orina sin conservantes, refrigerada (se admite el uso de ácido
bórico como estabilizante). No se admite orinas recogidas sobre ácido clorhídrico ya
que precipitan.
Estabilidad: 24 h a Temperatura ambiente, 4ºC durante 7 días y 1 mes a
-20ºC.

Urea
Recoger muestra de orina sin conservante, refrigerada.
Estabilidad: 48 h a Temperatura ambiente, 1 semana a 4ºC y 1 mes a -20ºC.

9.- HECES

El examen de heces está indicado en las diarreas crónicas y de forma general en los
procesos que cursan con insuficiencia digestiva, o en los que se busca un germen o
parásito de la enfermedad. La determinación de sangre oculta en heces tiene interés
cuando se sospecha hemorragia digestiva subclínica.

9.2.- Test Sangre Oculta en heces

Se recomienda recoger muestras en el recipiente adecuado.

Durante los 3 días anteriores a la toma de muestras, consistirá en un régimen sin carne,
embutido, pescados, huevos, lentejas, espinacas ni plátanos. Tampoco medicamentos
que contengan hierro o hemoglobina y debe evitarse todo tipo de legumbres verdes.
Se permitirá: leche, cebollas, arroz, pan, garbanzos.

9.3.- Calprotectina fecal

Se recomienda recoger muestras en el recipiente adecuado

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 Manual de toma de muestras
2016

10.- LÍQUIDOS BIOLÓGICOS

10.1.- Líquido cefalorraquídeo

El diagnóstico y tratamiento correcto de una enfermedad del SNC puede depender de

los resultados del examen del LCR en el laboratorio; debido a esto, este líquido tiene
que extraerse y manipularse correctamente.

El LCR es normalmente estéril y puede obtenerse mediante punción lumbar o, con

menos frecuencia, por punción cisternal, cervical o ventricular; cada uno de estos
procedimientos debe ser realizado asépticamente por un médico con experiencia en el
mismo y alertado el paciente sobre sus indicaciones y posibles complicaciones.

La zona de punción es generalmente la lumbar, pero también habría de nombrarse la

ventricular, suboccipital o por una derivación. Se debe marcar y desinfectar la zona de
punción. Es deseable para el paciente un tratamiento paliativo del dolor con un
anestésico local. La punción deberá ser sagital y ligeramente inclinada hacia arriba
(20°).

La cantidad que se recoja dependerá de la situación clínica, cuando se están buscando

células tumorales, es importante obtener tanto líquido cefalorraquídeo como se pueda
(hasta 30 ml sería un volumen óptimo en adultos). El tiempo de recolección de la
muestra deberá ser tan largo como sea posible, usando una aguja lo más fina posible,
para evitar el dolor de cabeza siguiente a la punción.

Factores a tener en cuenta durante la toma de muestra: El paciente en ayunas, debería

estar sentado, o pedirle que se tumbe de lado sobre un lecho plano. La espalda del
paciente deberá doblarse hacia delante y la posición será asegurada por un asistente.
La musculatura debería estar tan relajada como sea posible.

Debe anotarse la hora en que de toma la muestra, junto con información sobre
cualquier tratamiento inicial (p. ej. en la Meningitis bacteriana). Se recomienda usar una
aguja atraumática de punta de lápiz (0,7 mm el diámetro exterior), como la diseñada
por Sprotte y Whitacre para evitar el síndrome post-punción (dolor de cabeza).

Con el fin de evitar la contaminación de la muestra, se debe obtener y transportar el

líquido cefalorraquídeo en tubos cerrados. Es muy importante después de tomada la
muestra, enviarla al laboratorio lo antes posible por el medio más rápido.

El líquido cefalorraquídeo deberá distribuirse, en condiciones asépticas, en varios tubos

de poliestireno transparente con tapón (estériles y sin aditivos). Para citología, debe
evitarse el uso de aditivos tales como EDTA y fluoruro. Después de la obtención de la
muestra, se debe retirar la aguja y cubrir la herida adecuadamente. Los pacientes
deberán guardar reposo tendidos boca abajo al menos durante 30 minutos para evitar
pérdidas subsiguientes.

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 Manual de toma de muestras
2016
Indicaciones a tener en cuenta para la recolección de muestras de líquido
cefalorraquídeo:

 En ocasiones es útil la recolección de muestras en diferentes porciones

indicando la secuencia de llenado ya que facilita la determinación del origen de
los posibles hematies.
 No es aconsejable el uso de guantes empolvados con talco cuando se está
extrayendo líquido cefalorraquídeo, ya que podría alterar el examen citológico
del líquido cefalorraquídeo.
 El LCR debe ser centrifugado de inmediato. Si la centrifugación se lleva a cabo
rápidamente, la sangre proveniente de una punción traumática no generará
xantocromía.
 La congelación del líquido cefalorraquídeo es mejor llevarla a cabo a -70°C que
a -20° C ya que, por ejemplo, las bandas de proteínas oligoclonales desaparecen
lentamente después de estar almacenadas durante unos 6 meses a -20° C.

10.2.- Líquidos serosos; líquidos pleural, pericárdico y peritoneal

Los líquidos serosos son líquidos corporales que derivan del plasma y se encuentran en
la cavidad pleural, pericárdica y peritoneal. Estas cavidades corporales están delimitadas
por una membrana serosa parietal y una visceral, que están constituidas por una capa
de tejido conjuntivo con numerosos capilares y vasos linfáticos, y una capa superficial
de células mesoteliales. Los líquidos serosos son ultrafiltrados del plasma que derivan de
la abundante red capilar de la membrana serosa. Su formación es similar a la del líquido
extravascular en cualquier otra parte del organismo, y en ella intervienen la presión
hidrostática, la presión coloidosmótica y la permeabilidad capilar.
El examen del líquido en el laboratorio puede suministrar con frecuencia una
información diagnóstica de utilidad sobre las alteraciones que han motivado su
formación y servir de guía para un tratamiento adicional.

Se denomina paracentesis la extracción de líquido de una cavidad serosa del

organismo mediante aspiración percutánea (introduciendo una aguja a través de la
piel). Los términos específicos de toracentesis o toracocentesis, pericardiocentesis y
peritoneocentesis se refieren a las cavidades pleural, pericárdica y peritoneal,
respectivamente. El líquido de la cavidad peritoneal se denomina normalmente líquido
ascítico. De manera similar los términos hemotórax, hemopericardio y hemoperitoneo
se refieren a la presencia de sangre (normalmente, como resultado de una hemorragia
visible) dentro de las respectivas cavidades corporales. Aunque el término empiema se
usa a menudo para indicar la existencia de pus en la cavidad pleural (piotórax),
literalmente significa "pus dentro de una cavidad corporal".

Además de su valor diagnóstico, la paracentesis, que debe ser hecha con una técnica
aséptica por un médico con experiencia en el procedimiento y al corriente de sus
indicaciones y complicaciones potenciales, puede contribuir a mejorar los síntomas del
derrame, facilitar una descompresión de un órgano que suponía un peligro para la vida
del paciente, o permitir la instilación de fármacos en una de las cavidades corporales.

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 Manual de toma de muestras
2016
Debido a que la mayoría de los derrames son abundantes (generalmente más de 100
ml), es fácil obtener suficiente líquido para realizar todas las pruebas diagnósticas de
laboratorio necesarias con una sola muestra, evitando tener que repetir el
procedimiento. A menos que se prevean pruebas bioquímicas especiales o un estudio
microbiológico o citológico extenso, debe bastar una muestra de 50 ml para realizar un
examen completo de laboratorio.

l líquido debe transportarse rápidamente al laboratorio (en la hora que sigue a su

recogida) o, si el retraso es inevitable, debe estar refrigerado a 4ºC para evitar el
crecimiento bacteriano y la alteración de los componentes celulares, o de la
composición química.

Para los estudios de bioquímica el líquido debe recogerse sobre un recipiente estéril y
tapón de rosca (8-10 ml), dejar que coagulen las muestras y eliminar el coágulo o
cualquier otro material en suspensión (ej. células) mediante centrifugación. Se aconseja
procesar paralelamente sangre del paciente.

Para los estudios de citología se procederá igual pero utilizando el tubo con EDTA (1
mg/ml) como anticoagulante, no debe usarse citrato sódico u oxalato. Las células se
conservan relativamente bien entre 24 y 48 horas si las muestras se mantienen
refrigeradas.

Microbiología:
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera la
investigación de Mycobacterium spp. u hongos se enviará un volumen superior a 10
ml. Esta es la mínima cantidad necesaria para el estudio bacteriológico del líquido
empleado en la diálisis peritoneal.

Si es necesario evitar la coagulación de algunos de estos líquidos se usará heparina sin

conservantes; otros anticoagulantes pueden tener acción bacteriana. Los recipientes
idóneos son tubos estériles de tapón de rosca o de presión negativa sin conservantes.
Se llenarán hasta cerca del tapón, de esta forma pueden ser útiles para el estudio de
anaerobios, especialmente si la muestra es purulenta.

Es aconsejable para este tipo de muestras inocular paralelamente, en el lugar de la

extracción, dos frascos de hemocultivo, uno para aerobios y otro para anaerobios.

Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio y hasta su

procesamiento se mantendrán a temperatura ambiente.

Cuando las muestras se destinen a la investigación de micobacterias y hongos, deberán

mantenerse en nevera.

Los hemocultivos se mantendrán entre 35ºC y 37ºC, o en su defecto a temperatura

ambiente.

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 Manual de toma de muestras
2016
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringuilla y aguja para hacer
la extracción de la muestra, ya que los anestésicos pueden inhibir el crecimiento
bacteriano.

10.3.-. Líquido sinovial

Los trastornos de la membrana sinovial, la alteración en los elementos de sostén

articular y la presencia de cuerpos extraños pueden producir la acumulación de
grandes cantidades de líquido sinovial en las articulaciones. Su posterior análisis en el
laboratorio puede ser decisivo para el diagnóstico de la patología subyacente

La obtención del líquido debe realizarse con una jeringa sin anticoagulante. Una vez
recogida la muestra, en función del volumen obtenido, debe distribuirse en los
diferentes contenedores necesarios para realizar su estudio:

a - Tubo estéril para examen microbiológico.

b - Tubo sin aditivos para el estudio de cristales.
c - Tubo heparinizado o con EDTA para el recuento celular.

Para el estudio bioquímico puede utilizarse el tubo b o el tubo c. La observación

microscópica de los cristales debe realizarse en el menor tiempo posible tras la
artrocentesis y siempre sin anticoagulante para evitar la aparición de artefactos .

La muestra obtenida debe ser transportada al laboratorio a la mayor brevedad posible,

para evitar la degeneración celular. Si existe demora en el transporte, es necesario
conservar la muestra a temperatura entre 2 y 8 °C para reducir el metabolismo celular, a
excepción de la muestra para cultivo que ha de transportarse a temperatura ambiente.
En este caso también puede utilizarse un tubo con EDTA-fluoruro para el estudio
bioquímico y recuento celular.

La muestra destinada al estudio bioquímico debe ser centrifugada de inmediato para

separarla del contenido celular.

10.4.- Líquido seminal

Las instrucciones sobre la toma de muestra y las condiciones preanalíticas a seguir

serán facilitadas al paciente tanto por el clínico que solicita el análisis como por el
laboratorio mediante hoja informativa supervisada por el facultativo. Las
recomendaciones a seguir son:

10.4.1.- Período de abstinencia

Antes de la recogida de la muestra de semen a analizar, debe guardarse abstinencia

sexual durante un periodo entre 3 y 5 días (y no más de 7 días), lo que implica no tener
ninguna pérdida de semen por coito, masturbación, polución nocturna o cualquier otra
circunstancia durante estos días.

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 Manual de toma de muestras
2016
Si el período de abstinencia es inferior a 48 horas, la muestra se debe considerar como
no válida para su estudio. Si va a ser sometida a tratamiento para su uso en técnicas de
reproducción asistida, su utilización es inevitable pero conviene que el paciente sea
advertido de la posible pérdida de calidad de la muestra entregada.

10.4.2.- Medidas higiénicas

Es importante evitar una posible contaminación de la muestra. Lavarse el pene con

jabón y aclararse abundantemente con agua para evitar restos de jabón. No se debe
aplicar ningún tipo de pomada. Recoger la muestra sobre un frasco de plástico de boca
ancha estéril, cerrándolo con su tapa tras la obtención del semen (asegurarse de que
queda bien cerrado).

10.4.3.-. Lugar de obtención

Es importante recoger la muestra en una sala anexa o próxima al laboratorio para

asegurar el tiempo transcurrido desde la obtención hasta el inicio del estudio y para
evitar los cambios de temperatura que se producen en el transporte.
También la muestra se puede obtener en el domicilio del paciente haciéndola llegar al
laboratorio lo antes posible, preferiblemente antes de que hayan transcurrido 30
minutos desde la obtención del semen y siempre antes de los 60 minutos,
protegiéndola durante el transporte de cambios de temperatura (envolviendo el frasco
en papel de aluminio, guardándolo en un bolsillo en contacto con el cuerpo) y
siguiendo la normativa horaria de recepción de muestras que indique el laboratorio al
pedir la cita.

10.4.4 Obtención de la muestra

La muestra debe obtenerse por masturbación, los preservativos no pueden usarse

debido a que contienen lubricantes y espermicidas y el “coitus interruptus” es
inaceptable debido a que la primera fracción, rica en espermatozoides, se puede perder
fácilmente.

Es importante recoger el contenido total de la eyaculación. En caso de que se pierda o

se vierta alguna cantidad, por pequeña que sea, el paciente deberá comunicarlo al
personal de laboratorio ya que para el estudio de fertilidad la muestra no sería válida.

10.4.5.-. Recepción de la muestra y anamnesis

El personal del laboratorio debe identificar el frasco para la obtención de semen en el

momento de entrega por el paciente junto con el formulario de solicitud y la hoja de
trabajo del laboratorio.

La hoja de trabajo consta de los siguientes apartados:

 Etiqueta de identificación de la muestra

 Primer apellido

24
 Manual de toma de muestras
2016
 Segundo apellido
 Nombre
 Edad
 Teléfono
 Nº de hijos
 Motivo del análisis

La persona que recibe la muestra, deberá efectuar una breve entrevista al paciente
referente a:

 Hora de recogida de la muestra.

 Días de abstinencia sexual (mínimo 72 h y máximo 7 días). Si es inferior, la
muestra no se deberá aceptar en caso de su uso para estudio diagnóstico. Se
citará otro día al paciente.
 Recogida completa del volumen del eyaculado: en caso de pérdida, si se trata
de un estudio diagnóstico la muestra no es válida.
 Posibles procesos febriles en los 3 últimos meses: Las altas temperaturas pueden
afectar al espermatozoide en cualquiera de las fases previas a la eyaculación.
 Motivo del análisis de semen y si se ha realizado análisis seminales
anteriormente.

El personal del laboratorio debe saber que las muestras de semen, al igual que
cualquier otra muestra en el laboratorio, pueden contener virus patógenos (HIV, virus
de hepatitis, herpes) y por consiguiente deben ser manejadas con cuidado.

11- IDENTIFICACIÓN DE LAS MUESTRAS

Las muestras se identifican mediante el sistema de código de barras. Cada etiqueta

consta de diversas pegatinas con código y con número, tanto para las peticiones como
para las muestras (cada una tiene la leyenda del tubo al que corresponde), las etiquetas
pequeñas sirven para identificar las copias de las peticiones, otras muestras, alícuotas,
etc.

Es fundamental extremar la atención en la correcta identificación de petición y

muestras; por ello la identificación de ambas se realizará a la vez en el momento de la
extracción, un error en este paso es indetectable posteriormente.

Nunca se manipularán los códigos, en el caso de que el Laboratorio tenga la más

mínima duda sobre la identificación de la muestra, o se descubra la manipulación de un
código se rechazará esa muestra y todas las que se sospeche que puedan estar
implicadas.

La pegatina de la petición se coloca en el ángulo superior derecho de la misma,

siempre que no cubra ninguna información de la petición; en las muestras se colocan
siempre VERTICALMENTE a 1 cm del borde del tapón, y con el número de
identificación en la parte superior. La pegatina debe permitir ver el contenido del tubo.

25
 Manual de toma de muestras
2016

Todos los aparatos del Laboratorio disponen de lector de códigos de barras, y la lectura
la realizan verticalmente, la mala colocación de la pegatina origina el rechazo de la
muestra por mala identificación.

Casos especiales

Las pegatinas de los tubos de VSG, se colocan en la parte inferior del tubo, encima de la
etiqueta de identificación; colocarlas en otra posición imposibilitaría la lectura del tubo.

Las muestras que corresponden a diferentes extracciones de un mismo enfermo, como

por ejemplo una curva de glucemia o unos niveles de medicación, deben diferenciarse
unas de otras rotulando a qué extracción corresponden: 60´,120´ (Atención: no se
debe escribir sobre el código de barras).

Los frascos de orina normales y los botes de 24 horas se identificarán en el cuerpo de

los mismos.

11.- CRITERIOS PARA EL RECHAZO DE MUESTRAS

El establecimiento de criterios de aceptación-rechazo de los especímenes o las muestras

obtenidos que llegan al laboratorio, debe ser una de las medidas a tomar para el
establecimiento de un sistema de calidad adecuado.

En el laboratorio no podemos aumentar la calidad de las muestras que van a ser

analizadas y por tanto debemos asegurarnos no malgastar tiempo y recursos en
muestras de baja calidad, que por definición proporcionan resultados no fiables.

I. Las causas de rechazo de especímenes son:

a. Cumplimentación incorrecta del volante:

Con el fin de evitar un elevado número de devoluciones de muestras, se podrían
guardar durante un tiempo establecido (Ej.: 3-4 días) aquellas muestras cuyos volantes
no estuvieran correctamente rellenos e intentar contactar con el médico solicitante
para que nos facilitara los datos necesarios y entonces realizar las correspondientes
pruebas, siempre y cuando las condiciones preanalíticas lo permitieran. Esta medida
podría ser al principio contraproducente para el laboratorio por el esfuerzo que
supondría, pero sería una buena labor de formación hacia los médicos solicitantes, que
luego repercutiría en beneficio del paciente, disminuyéndose el número de incidencias
originadas por esta causa.
Un caso especial es el de las muestras que son de difícil obtención o rápido deterioro
(LCR, gases). La recomendación habitual es procesar dichas muestras, pero obligar a
que el responsable de la extracción acuda al laboratorio para dejar constancia escrita
del error y asuma la responsabilidad de las posibles consecuencias de una identificación
errónea.

26
 Manual de toma de muestras
2016

b. Utilización de contenedor inadecuado:

En el manual de toma de muestras debe quedar bien claro el tipo de recipiente/tubo
adecuado para cada determinación.

c. Muestra no recibida:
Aquella muestra que no se ha recibido en el Laboratorio, cuando en la petición se
solicitaba.

d. Muestra lipémica:
Aquella muestra de plasma o suero con alto contenido en grasa. Presenta un aspecto
blanquecino, y puede deberse a una extracción de una muestra de un enfermo con
alimentación parenteral o tras una ingesta copiosa. Hay determinaciones cuyos
resultados se alteran cuando existe este problema.

e. Volumen de muestra incorrecto:

Este criterio de rechazo de muestras es crítico en la determinación de las pruebas de
coagulación o en la velocidad de sedimentación globular, ya que se debe mantener la
proporción exacta entre el volumen de muestra y el de anticoagulante. Los tubos de
llenado por vacío están preparados para que el volumen de muestra que entre sea el
correcto. Cuando se llenan los tubos con jeringa debe tenerse mucho cuidado
especialmente para las determinaciones que exigen que esta proporción sea exacta.

f. Hemólisis:
Se produce por diferentes motivos que deben ser evitados:
Venopunción difícil, manejo incorrecto del espécimen obtenido, consecuencia de una
enfermedad que produzca destrucción in vivo de los eritrocitos.
El grado de interferencia de la hemólisis depende evidentemente de la intensidad de la
misma, de la concentración real del analito y de la metodología empleada.

g. Muestra coagulada:
Aquella muestra que se presenta coagulada parcial o totalmente, y que se extrajo con
anticoagulante en el tubo. Puede deberse a una extracción lenta, a una mezcla
incorrecta del anticoagulante con la muestra o a un defecto del propio anticoagulante.
Hay determinaciones cuyos resultados se alteran cuando existe este problema.

h. Muestra insuficiente:
Aquella muestra a la que no se le pueden realizar todas las determinaciones solicitadas
al agotar el espécimen. No entrará en esta categoría la muestra que se agote por una
repetición o por un mal procesamiento en el Laboratorio.

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i. Muestra mal identificada:

Las muestras que consideramos mal identificadas son aquellas en las que: no coinciden
datos de petición y muestras; no coincide código de barras de petición y muestras;
código de barras mal colocado; muestras sin identificar; código de barras despegado;
manipulación del código de barras.

II. Estas causas serán motivo de rechazo de las muestras, por lo que no se procesarán.

a. Muestra deteriorada en Laboratorio:

Aquella muestra que viniendo correctamente se deteriora en el proceso de
preparación: rota en centrífuga, derramada, caída al suelo, extraviada...

b. Temperatura de transporte inadecuada:

Hay determinaciones que sólo se pueden realizar bajo estrictas condiciones
preanalíticas. Por ejemplo, ácido láctico, gases, amonio u homocisteína, exigen el
transporte en hielo del espécimen, mientras que las crioglobulinas exigen que este
transporte sea en caliente. El laboratorio debe ser intransigente con las condiciones
preanalíticas de este tipo de determinaciones.

En la mayoría de analitos la temperatura es una variable continua y que por tanto no

afecta de una forma brusca sino que disminuye gradualmente la calidad de la muestra
en tanto en cuanto más se aleje de la temperatura óptima de transporte o de
conservación.

c. Recorrido preanalítico inadecuado:

Este parámetro es especialmente crítico en las muestras que llegan desde los centros
periféricos de extracción. Se expresa en unidades de tiempo a temperatura fija. Cuando
el tiempo máximo permisible es excedido se deben tomar las medidas de aviso o bien
de rechazo para analizar diferentes pruebas.

Para la mayoría de los analitos habituales, se acepta que un recorrido preanalítico de

dos horas es válido, y por encima de cuatro muchos de ellos disminuyen su calidad de
manera significativa.

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Complejo Hospitalario de Jaén

Avd. Ejército Español, 10
23007 Jaén

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