COD 11580 COD 11581 LACTATE DEHYDROGENASE

1 x 50 mL 1 x 200 mL (LDH)
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para medir la concentración de LDH
LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
Sólo para uso in vitro en el laboratorio clínico PIRUVATO

FUNDAMENTO DEL MÉTODO CONTROL DE CALIDAD

La lactato deshidrogenasa (LD o LDH) cataliza la reducción del piruvato por NADH, obteniéndose Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioquímica niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) y II
lactato y NAD+. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de desaparición (cod. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida.
del NADH, medido a 340 nm1,2. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, así como
LDH
Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+ procedimientos de corrección en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias
aceptables.
CONTENIDO
CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
COD 11580 COD 11581
− Límite de detección: 4,7 U/L = 0,078 µkat/L.
A. Reactivo 1 x 40 mL 1 x 160 mL
B. Reactivo 1 x 10 mL 1 x 40 mL − Límite de linealidad: 1250 U/L = 20,92 µkat/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir la
muestra 1/2 con agua destilada y repetir la medición.
COMPOSICIÓN − Repetibilidad (intraserie):
A. Reactivo: Tris 100 mmol/L, piruvato 2,75 mmol/L, cloruro de sodio 222 mmol/L, pH 7,2 Concentración media CV n
B. Reactivo: NADH 1,55 mmol/L, sodio azida 9,5 g/L 3,9% 20
324 U/L = 5,40 µkat/L
Nocivo (Xn): R22: Nocivo por ingestión. R31: En contacto con ácidos libera gases tóxicos. S28.1: 1029 U/L = 17,15 µkat/L 2,3 % 20
En caso de contacto con la piel lavar inmediata y abundantemente con agua.
− Reproducibilidad (interserie):
CONSERVACIÓN
Concentración media CV n
Conservar a 2-8ºC.
324 U/L = 5,40 µkat/L 6,6% 25
Los Reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se
1029 U/L = 17,15 µkat/L 3,3 % 25
conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro: − Sensibilidad: 0,123 ∆mA⋅L/U⋅min = 7,41 ∆mA ⋅L/µkat⋅min.
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco inferior a 1,200 a 340 nm − Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias sistemáticas
(cubeta de 1 cm). significativas al ser comparados con reactivos de referencia. Los detalles del estudio
comparativo están disponibles bajo solicitud.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
− Interferencias: La hemólisis o la tardía separación del suero ocasionan resultados elevados
Reactivo de Trabajo. Vaciar el contenido del Reactivo B en el frasco del Reactivo A. Agitar debido a la elevada concentración de LD en los eritrocitos. La lipemia (triglicéridos < 10 g/L) y
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de Reactivo la bilirrubina ( < 20 mg/dL) no interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir3.
A + 1 mL de Reactivo B. Estable 2 meses a 2-8ºC.
Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al cambiar
MATERIAL ADICIONAL de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.
− Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 25, 30 ó 37ºC para CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
lecturas a 340 nm.
La lactato deshidrogenasa se encuentra presente en todas las células del organismo aunque sus
− Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. mayores concentraciones se hallan en el hígado, corazón, riñón, músculo esquelético y
eritrocitos.
MUESTRAS
La concentración de LDH en suero o plasma está aumentada en pacientes con enfermedad
Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estándar. El suero o plasma debe separarse hepática, alteraciones renales, infarto de miocardio, muchas enfermedades malignas, distrofia
de los elementos celulares lo antes posible. No utilizar muestras hemolizadas. muscular progresiva y en casi cualquier causa de hemólisis4,5.
La lactato deshidrogenasa en suero o plasma es estable 2 dias a temperatura ambiente y 24 El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino
horas a 2-8ºC. Utilizar heparina como anticoagulante. que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
PROCEDIMIENTO NOTAS
1. Precalentar el Reactivo de Trabajo y el instrumento a la temperatura de reacción. 1. Este reactivo puede utilizarse en la mayoría de analizadores automáticos. Solicite información
2. Pipetear en una cubeta: (Nota 1) a su distribuidor.

Reactivo de Trabajo 1,0 mL BIBLIOGRAFÍA

Muestra 20 µL
1. Sociedad Española de Química Clínica, Comité Científico, Comisión de Enzimas. Método
3. Mezclar e insertar la cubeta en el fotómetro. Poner el cronómetro en marcha. recomendado para la determinación en rutina de la concentración catalítica de lactato
deshidrogenasa en suero sanguíneo humano. Quim Clin 1989; 8: 57-61.
4. Pasados 30 segundos, anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto
durante 3 minutos. 2. Scientific Commitee. Recommandations pour la mesure de la concentration catalytique de la
lactate deshidrogenase dans le serum humain a 30°C. Ann Biol Clin 1982; 40: 87-164.
5. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio (∆A/min).
3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
CÁLCULOS 4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
La concentración de LDH en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula general: ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
6 5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
Vt × 10 2001.
∆A/min × = U/L
ε × l × Vs
El coeficiente de absorción molar (ε) del NADH a 340 nm es 6300, el paso de luz (l) es 1 cm, el
volumen total de reacción (Vt) es 1,02, el volumen de muestra (Vs) es 0,02, y 1 U/L equivale a
0,01667 µkat/L. Se deducen los siguientes factores para calcular la concentración catalítica:

x 8095 = U/L
∆A/min
x 135 = µkat/L

VALORES DE REFERENCIA
Temperatura Adultos
de reacción U/L µKat/L

25ºC 105-210 1,70-3,50

30ºC2 140-280 2,30-4,70
37ºC1 207-414 3,40-6,80

Los valores a 25ºC se han obtenido a partir de los de 30ºC mediante un factor de conversión.
Estos valores se dan únicamente a título orientativo; es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios intervalos de referencia.

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