CROMOSOMAS POLITÉNICOS
INTRODUCCIÓN
En 1881 Balbiani evidenció unas estructuras peculiares en los núcleos de ciertas
células secretoras de Chironomus. Posteriormente Heitz y Bauer en 1933 y
Painter en 1934 identificaron esas estructuras como cromosomas y hoy se sabe
que se encuentran en las células de los tejidos de secreción tales como: túbulos
de Malpighi, recto, intestino y glándulas salivales de los Díptera. También se han
hallado en algunas plantas (Nagl, 1969), en algunos ciliados (Ammermann, 1968).
Son cromosomas especializados en el sentido de que cada uno posee ácidos
nucleicos específicos y componentes proteínicos y a la vez toman una estructura
apropiada a su situación. Son cromosomas de núcleos interfásicos que se forman
por varias replicaciones sucesivas de cada par homologo íntimamente sinapsado
donde las cadenas hijas no se separan. Como consecuencia cada cromosoma
consiste de muchas fibras paralelas (aproximadamente 1024) dispuestas a lo largo
de su eje con los cromómeros poco espaciados que forman, como resultado de la
politenia, un patrón de bandas característico de cada brazo cromosómico y de
cada especie.
En la presente práctica se observaron cromosomas politénicos de larvas de
moscas de la fruta (Drosophila), tomando de estas las glándulas salivales.
1. OBJETIVOS
Conocer y aprender la técnica de aislar y teñir los cromosomas politénicos a
partir de glándulas salivales de larvas de Drosophila
Que el alumno observe el bandeo natural y las secuencias génicas de los
cromosomas
Que el alumno identifique las estructuras de los cromosomas politécnicos,
así como el número de cromosomas visibles en la preparación
2. MARCO TEÓRICO
Los cromosomas politénicos son cromosomas especializados en el sentido de que
cada uno posee ácidos nucleicos específicos y componentes proteínicos y a la vez
toman una estructura apropiada a su situación. Son cromosomas de núcleos
interfásicos que se forman por varias replicaciones sucesivas de cada par
homologo íntimamente sinapsado donde las cadenas hijas no se separan. Como
consecuencia cada cromosoma consiste de muchas fibras paralelas dispuestas a
lo largo de su eje con los cromomeros poco espaciados que forman, como
resultado de la politenia, un patrón de bandas característico de cada brazo
cromosómico y de cada especie.
El estudio minucioso de los cromosomas politénicos de las glándulas salivales de
las larvas de los simúlidos es una herramienta valiosa en la taxonomía para
registrar las especies crípticas dentro de una morfoespecie. Considerando que
muchas de las morfoespecies constituyen complejos de especies gemelas
(morfológicamente similares) los simúlidos no pueden identificarse solamente con
métodos taxonómicos convencionales. Se recomienda que las descripciones
taxonómicas incluyan, en lo posible, referencias citológicas y estén sustentadas
con láminas y fotografías de los cromosomas politénicos.
Procedimiento para el estudio de los cromosomas politénicos.
Después de hacer la disección, fijación, coloración y montaje de las glándulas
salivales de la larva y tomar las microfotografías de los mejores complementos
cromosómicos, se miden los cromosomas para conocer su longitud.
Los cromosomas se nominan con números romanos, en orden decreciente de
tamaño, con los brazos corto y largo designados como S y L, respectivamente y
los segmentos proximal, central y distal al centrómero como p, c y d
respectivamente.
El complemento entero se divide en 100 secciones, la proporción asignada a un
brazo es determinada por la contribución, el porcentaje, del brazo a la longitud
total del complemento. Las secciones se numeran del 1 al 100 iniciándose en IS y
finalizando en IIIL. Es así como, por lo general el cromosoma I se divide en 42
secciones, el cromosoma II en 30 y el III en 28.
3. MATERIALES
Cultivo de Drosophila sp.
Estereoscopio.
Microscopio.
Pinzas de disección.
Porta y cubreobjetos.
Orceina
Gotero.
4. PROCEDIMIENTO
Para la realización de este procedimiento se utilizaron larvas previamente
cultivadas de Drosophila sp., se llevaron a un estereoscopio para la extracción
de las glándulas salivales.
Posteriormente a las glándulas se colocaron en un portaobjetos donde se
agregó el colorante orceina, se dejó teñir por un periodo de 10 minutos, una
vez cumplido este tiempo se agregó un cubreobjetos y se realizó un squash
(presión con la punta de un borrador de bolígrafo), con el fin de extraer los
cromosomas que se encuentran dentro de las células.
Por último se observaron los cromosomas al microscopio, se observó con los
objetivos de 40x y 100x.
5. RESULTADOS
5.1. Placa 1:
5.2. Placa 2:
6. CONCLUSIÓN Y DISCUSIÓN
Los cromosomas politénicos son cromosomas de gran tamaño, se pudo observar
estos cromosomas en el núcleo de las células de las glándulas salivales de
Drosophila. Los cromosomas politénicos se observan como largas hebras de color
fucsia, en estos se observa también un patrón de bandas de color más oscuro las
cuales corresponden a un gen en específico.
El tamaño de estos cromosomas permite observar con facilidad las bandas
correspondientes a los genes, por ello en genética han sido tan importantes y han
permitido aislar genes que codifican para características como el color de los ojos
en las moscas, color del cuerpo, forma de las alas y patas entre muchas otras.
El estudio de los cromosomas politénicos también ha permitido diferenciar
genéticamente una especie de otra o establecer relaciones entre estas dado que
los patrones en las bandas proporcionan información valiosa del genoma de los
organismos.
7. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Menciona brevemente la importancia de los cromosomas politénicos para la
investigación genética.
R/. Los estudios de los cromosomas de las glándulas salivales han sido de gran
importancia en la taxonomía del número de dípteros en el mundo. Las diferencias
observadas en los patrones de bandeo permiten el reconocimiento de especies
hermanas biológicamente distintas lo cual es útil para establecer la identidad
de especies y sus relaciones filogenéticas.
2. Mencione por lo menos tres descubrimientos importantes relacionados con
cromosomas politénicos.
Edward Lewis, Christian Nüsslein-Volhard y Eric Wieschaus, reciben en 1995
el premio Nobel de medicina por sus descubrimientos en la biología del
desarrollo de Drosophila melanogaster, en donde establecen cuales son los
genes involucrados en la organización del desarrollo embrionario, la forma en
la cual están regulados, organizados, funcionamiento y finalmente su
homología con genes de otros organismos eucariontes incluyendo al humano,
dando por establecido que dichos procesos pueden ser regulados y funcionar
de una manera parecida en distintos organismos sin importar si son insectos,
mamíferos, peces, reptiles o aves.
Durante 1918 Hermann Joseph Muller utiliza rayos X y genera los primeros
cromosomas balanceadores (cromosomas que debido a la radiación, sufren
inversiones, traslocaciones y/o deleciones), dadas las características de estos
cromosomas, impedían la recombinación entre ellos y cromosomas normales,
ya que no había en su totalidad regiones homólogas, esto fue aprovechado en
un principio para mantener genes mutantes que en homocigosis fueran letales,
los estudios de Muller fueron más allá, y en 1926 demuestra que la radiación
puede producir daño genético y mutaciones, demostrando que las mutaciones
en Drosophila melanogasterno solo son espontáneas si no también pueden ser
inducidas por otros medios, estos estudios lo hicieron merecedor del premio
Nobel de Medicina en 1946.
En 1968 Dan L. Lindsley publica la primera recopilación de genes mutantes,
aberraciones cromosómicas y cromosomas balanceadores de Drosophila
melanogaster, esta obra contiene la descripción detallada, ubicación citológica
y cromosómica de los genes que se conocían en ese entonces, basado en su
mayoría en el trabajo y dibujos de Sturtevant y Bridges
respectivamente. Richard Lewontin, a finales de los 60’s y principios de los 70’s
utiliza una técnica que se encontraba en pleno desarrollo y perfeccionamiento:
la electrofóresis, con esta técnica encontró que algunas de las proteínas, de
distintos organismos eran muy parecidas entre sí, incluyendo proteínas de
Drosophila melanogaster; este descubrimiento inicio un bum en la investigación
de la biología molecular, abriendo un nuevo campo en la investigación
científica en el que Drosophila melanogaster también estaba incluida, ya que
se encontró que varias de sus proteínas eran altamente parecidas a las de
otros organismos, desde procariontes hasta eucariontes, incluyendo al
humano. En 1972 Jame Brown Boyd y Richard Setlow descubren genes
implicados en la reparación del ADN en Drosophila melanogaster, que
posteriormente se encontraría su homología con genes que provocaban la
misma alteración en bacterias, levaduras y humano.
3. Explica cómo se forman los cromosomas politécnicos
R/. Son cromosomas especializados en el sentido de que cada uno contiene
ácidos nucleicos específicos y a la vez toman una estructura apropiada a su
situación. Son cromosomas de núcleos interfasicos que se forman por varias
replicaciones sucesivas de cada para homologo íntimamente sinapsado donde las
cadenas hijas no se separan. Como consecuencia, cada cromosoma consiste de
muchas fibras paralela (aproximadamente 1024) dispuesta a lo largo de su eje
con los cromomeros poco especializados que forman, como resultado de la
politenia. Un patrón de bandas característico de cada brazo cromosómico y de
cada especie.
4. Menciona las características de los cromosomas politenicos.
R/. Además del cambio en el tamaño, los cromosomas politénicos presentan otras
dos características. En primer lugar, los cromosomas homólogos están asociados
entre sí en toda su extensión. Esta condición, denominada apareamiento
somático es propia de la mitosis de la mayoría de los Dípteros. La otra
característica peculiar es que los cromosomas muestran un patrón particular de
bandeo transversal que consiste en zonas más oscuras, llamadas bandas, que
alternan con zonas claras, llamada sinterbandas. Cuando se observan al
microscopio óptico se identifican como bandas oscuras y claras transversales
alternantes.
5. Investiga el origen de los rearreglos cromosómicos y cuál es su importancia en
el estudio de la genética de poblaciones
R/. Uno de los aspectos fundamentales en los genomas es la organización de los
genes en paquetes conocidos como cromosomas. Todos los organismos, desde
los más simples, hasta los más complejos tienen estas estructuras, siendo la
morfología y número de estos una característica de cada especie. Las mutaciones
cromosómicas son cambios, que pueden ser originados por errores en la mitosis o
meiosis en un individuo, y que pueden ser fijadas en la población durante la
evolución si representa alguna ventaja selectiva, en caso contrario, si tienen
efectos negativos severos en el fenotipo y/o en la fertilidad de los portadores, se
manifestará como una anomalía o síndrome genético que será eliminado de la
población.
6. En que otros organismos diferentes de Drosophila es posible encontrar
cromosomas politécnicos
R/. Otros organismos en los que podemos encontrar esto cromosomas son:
En los macronúcleos de protozoos ciliados, glándulas salivales de insectos
colémbolos, glándulas de la seda bombyx mori (lepidóptero), trofoblastos de
roedores y también en distintos tejidos de planta.
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