Reproducción

celular
Practica 10

Manual biología I
Prá ctica10
Reproducción Celular
Objetivos
 Preparar el material para el estudio de mitosis en célula vegetal.
 Distinguir células en interfase y en las distintas etapas de la mitosis.
 Comparar sus observaciones con ilustraciones de mitosis en célula animal.
 Estudiar el efecto de la colchicina sobre los microtúbulos del huso, lo que determina que las células se
detengan en metafase.
 Estudiar el efecto de la cafeína sobre la reproducción celular.

Materiales:
Bulbos de cebolla con raices, Orceína aceto-clorhídrica, Lámparas de alcohol, Cristal de reloj, pinzas, tijeras,
navajas, Goteros, Escalpelo, Papel de filtro, Laminillas y cubreobjetos, Microscopios, Papel absorbente. Solución
de colchicina al 0.5%, solución de cafeína al o.1%. Preparaciones permanentes de raíces tratadas con colchicina
y cafeína.

Introducción
Una célula pasa durante su vida por una serie de etapas que se conocen en conjunto como ciclo celular. Este
tiene dos grandes períodos: la interface y la división celular. Esta ocurre en el núcleo (cariocinesis) y en el
citoplasma (citocinesis).

Sabemos que las células se producen de células preexistentes. La serie compleja de eventos que ocurren
cuando una célula se divide, de tal forma que las células hijas reciban el mismo número y tipo de cromosomas
que poseía la célula progenitora, es lo que conocemos con el nombre de mitosis. Este proceso es necesario para
la reparación y producción de tejidos, y para el crecimiento y desarrollo embrionario, entre otros.

El tiempo que tarda la división en completarse varía desde minutos hasta horas y depende de factores como
temperatura, nutrición y especialización de las células. La mitosis es un proceso fisiológico continuo, pero para
facilitar su estudio se ha dividido en fases o etapas.

Los mecanismos esenciales de división ocurren en el núcleo, por lo que estos cambios serán observados con
mayor detenimiento.

PARTE (A) Procedimiento

Preparación del colorante (orceína aceto - clorhídrica)

La orceína aceto-clorhídrica se prepara de la siguiente manera: poner a hervir 50 ml de ácido acético glacial,
añadir 2 g de orceína, dejar hervir durante 7 minutos, enfriar y agregar 55 ml de agua destilada. Filtrar y por cada
9 partes de solución añadir una parte de HC1 normal.

Preparación de las raíces

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Para obtener las raíces se colocan cebollas en frascos con agua de manera que no queden sumergidas, pero
que toquen la superficie del agua. Es conveniente que a las cebollas se les eliminen las escamas externas para
conseguir un desarrollo más rápido de las raíces, y que se cambie el agua todos los días, de esta manera se
pueden conseguir raíces en un período de 48 horas. (Figura 10.1-A).

Realice un corte de aproximadamente 2mm en el extremo terminal de las raíces más cortas. Coloque la muestra
en un vidrio de reloj con el colorante y caliente en una lámpara de alcohol hasta que se inicien vapores. Retire
del calor y deje enfriar la preparación. Caliente de nuevo y repita esta operación tres veces. La orceína tiñe
algunas estructuras celulares como el núcleo y los cromosomas. Es importante no calentar demasiado para
obtener buenas preparaciones.

Extraiga la muestra del vidrio de reloj, con ayuda de la aguja o una pinza fina y colóquela en un portaobjetos.
Agregue una o dos gotas de la solución de orceína evitando que la preparación se seque; si esto ocurre agregue
otra gota de solución.

Coloque un cubreobjetos encima de la raíz y golpee sobre él suavemente con la punta de un lápiz, para separar y
esparcir las células. Pliegue varias veces un papel absorbente (filtro o toalla) hasta darle la forma del
portaobjetos, pero ligeramente mayor. Coloque este plegado sobre el cubreobjetos. Comprima suavemente con
el dedo pulgar sin que se resbale el cubreobjetos con esto se consigue aplastar y esparcir aún más las células.
(Figura 10.1 -B-E).

Observación de las raíces

Examine la preparación con el menor aumento; desplácela de tal forma que pueda registrar todo el campo bajo
el cubreobjetos. Localice una zona en la que haya varias células en división. Cambie al objetivo de mayor
aumento. Dibuje por lo menos 5 células completas con cada uno de los diferentes estados de mitosis, numere
sus dibujos según el orden, guiándose del dibujo que se le proporciona. Compare con los dibujos sobre mitosis
en células animales. ¿Nota alguna diferencia? (figura l0. 2 y 10.3)

Parte (B)

Efecto de Colchicina y Cafeina durante la Mitosis

PROCEDIMIENTO

Para la determinación del número de cromosomas de una célula se buscará aquella fase mitótica en la que los
cromosomas estén más espiralizados e independientes entre sí: la metafase.
No obstante en muchas ocasiones resulta muy difícil el conteo aún en metafase por lo que se recurre a
tratamientos especiales para aumentar la espirilización de los cromosomas. La colchicina es una droga que se
extrae del Colchicum hispanicum y cuyo efecto tiene como consecuencia la despolimerización de la tubulina que
forma las fibras del huso. Al no formarse huso los cromosomas no se colocan en placa y siguen espiralizándose,
acortando su longitud, separándose más entre sí y facilitando su conteo.

Preparación de las raíces

Se han preparado raíces que fueron colocadas durante 6 horas en una solución de colchicina al 0.5%. Y también
recibirá una preparación de células de raíces de cebolla tratadas con cafeína. La cafeína actúa impidiendo la
citocinesis. Observe ambas preparaciones en el microscopio y conteste:

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Figura 10.1. Instrucciones para preparar la laminilla del ápice de la raíz de la cebolla 65

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 Figura 10.2. Meristemos de raíz
de cebolla mostrando
diferentes etapas de la mitosis

Figura. 10.3 Etapas mitosis célula animal en langosta (para comparar)

Realice un esquema de sus observaciones en el siguiente cuadro:

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Profase Prometafase/Metafase

Anafase Telofase

PREGUNTAS DE ESTUDIO

1. ¿En qué fase distingue mejor los cromosomas?

2. ¿Qué forma y color tienen?

3. ¿Cómo reconoce una célula en profase?

4. ¿Cuál es la fase más abundante en su preparación?

5. Señale las diferencias que existen entre la mitosis en célula animal y célula vegetal.

6. ¿En qué tipo de célula ocurre la mitosis?

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7. ¿Cuál es el resultado final?

8. ¿Cuál es la importancia biológica de la mitosis?

9. ¿Qué fase de mitosis es más abundante en su preparación?

10. ¿Qué posición tienen los cromosomas en esta fase?

11. ¿Qué diferencia encuentra usted entre la preparación inicial y la tratada con colchicina?

12. ¿Cómo usted reconoce las células afectadas por la cafeína?

13. Complete el siguiente cuadro y calcule el índice mitótico. El IM se obtiene colocando de numerador al número
de células en mitosis y como denominador al total de células en el campo.

Fase Número de células Número total de la

clase
Interfase
Profase
Prometafase/Metaf
ase
Anafase
Telofase

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PRÁCTICA 11:

ESTUDIO DE LA MEIOSIS EN
PREPARACIONES FIJAS
DE TESTÍCULOS DE RATÓ N
OBJETIVOS
Identificar las diferentes fases de la meiosis en cortes de testículos.
Comparar la mitosis con la meiosis para establecer las diferencias que existen entre
ambos procesos.

MATERIALES
Laminillas fijas de cortes de testículos de ratón y saltamontes. Microscopios.

INTRODUCCIÓN
El aparato reproductor masculino en los mamíferos está formado por las gónadas y un grupo
de conductos y glándulas que en conjunto constituyen el tracto reproductor masculino. Las
gónadas masculinas son los testículos y produce los gametos (espermatozoides) que son
transportados a lo largo del tracto reproductor. En el momento de la eyaculación las glándulas
accesorias (vesículas seminales, próstata y glándulas bulbouretrales) vierten los productos de
su secreción, los cuales junto con los espermatozoides constituyen el semen.

Los testículos son estructuras pares y ovaladas cuyas principales funciones son dos: a)
Producción de espermatozoides por el proceso de meiosis, una forma de división celular en la
que las células resultantes tienen solo la mitad de los cromosomas de la célula que le dio
origen y b) Síntesis de hormonas masculinas, los andrógenos que regulan la producción de
espermatozoides. Usaremos cortes de testículos de ratón aprovechando que, en esta especie,
sus fases son muy ordenadas y claramente reconocibles, tratando de distinguir las mismas y
diferenciarlas de la mitosis común.

Cada testículo se subdivide en 250 compartimientos, conocidos como lóbulos, y cada uno de
ellos contiene túbulos seminíferos “portadores de semillas”.

Los túbulos forman los espermatozoides y también se pueden encontrar las células Leydig que
son las encargadas de producir la testosterona en el hombre. Además, en estos túbulos se
encuentran dos tipos de células, las primeras son llamadas espermatogonias, las cuales tienen
como función formar espermatozoides. Por otro lado, están las células Sertoli, que brindan
soporte y nutrición a los espermatozoides.

La espermatogénesis se divide en dos estadios en el primer estadio se conservan los 46

cromosomas, en cambio en el segundo estadio se encuentran los 23 pares de cromosomas. Las
células pasan de 70

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mitosis a meiosis I y luego a Meiosis II. Dentro de la Meiosis I hay etapas importantes que
reconocer debido a que en ellas es que ocurre el arreglo nuevo del material genético. Para su
comprensión las etapas de la Profase I se han dividido en:

Leptoteno: En esta etapa los cromosomas son reconocibles al microscopio óptico, aunque los
cromosomas se han replicado en una fase muy temprana no hay indicios de que estos estén
formados por dos cromátidas hermanas, situación que se hace visible al utilizar un microscopio
electrónico.

Zigoteno: En este punto de la Profase I ocurre la sinapsis (meiosis) de los cromosomas

homólogos y se forman los quiasmas sinápticos

Paquiteno: El "cromosoma" resultante se denomina tétrada o bivalente, por estar formado por
las dos cromátidas de cada cromosoma, y, por lo tanto, cuatro en total. En este punto puede
presentarse el fenómeno de entrecruzamiento cromosómico o crossing-over: durante el
entrecruzamiento, un fragmento de una cromátida puede separarse e intercambiarse por otro
fragmento de su correspondiente homólogo.

Diploteno: Los cromosomas, después del "crossing-over", quedan unidos por puntos de
contacto llamados quiasmas.

Diacinesis: Los quiasmas se desplazan hacia los extremos de los cromosomas.

La Profase II es de corta duración. Desaparecen la membrana nuclear y el nucléolo. Los

cromosomas comienzan a condensarse. Se forma el huso acromático entre los centriolos, que
se han desplazado a los polos.

PROCEDIMIENTO

Observe en las laminillas:

A. Epidídimo que almacena los espermatozoides y se observa lleno de espermatozoides

maduros.

B. Glándula intersticial que produce hormonas (andrógenos) principal responsable de

sustentar el proceso de espermatogénesis.

C. Tubos seminíferos donde ocurre la espermatogénesis. Identifique en estos últimos:

Células de Sertoli o citotrofos de forma triangular ó alargadas, posición basal, núcleo grande
pálido y con nucleolo prominente, a las que se les atribuye inducir la maduración final.

Espermatogonias: Células próximas a la membrana basal, de citoplasma escaso y hay dos tipos:
las Gonias A, pequeñas de núcleo oval y sin gránulos y las Gonias B, también pequeñas
paralelas a la membrana basal con núcleo esférico y gránulos intranucleares. Estas células se
encuentran siempre en los testículos y la gran mayoría sigue su evolución hacia
espermatozoides, mientras que otras se conservan como gonias. Las células que evolucionan
hacia espermatozoides aumentan rápidamente de tamaño y de volumen llamándose
espermatocitos ó simplemente citos.

Espermatocitos primarios: En el testículo de roedor es fácil observar en los espermatocitos

primarios cromosomas gruesos y son más grandes que las gonias, algunos se comienzan a
alejar de la membrana basal. ¿Qué explicación daría usted para este alejamiento? (3).

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Haga un esquema donde represente los espermios, células Sertoli y vasos sanguíneos
periféricos. ¿Qué relación existe entre ellos?

Los espermatocitos primarios son los tipos de células más frecuentes, ello podría ser debido a
un aumento en el número de este tipo celular o a una longevidad mayor que los otros.

¿A cuál de estas razones atribuye usted esto? (4). Diga por qué piensa así. (5)

Espermatocitos secundarios: Raros porque es una fase rápida.

Espermátidas: Muy abundantes con núcleo redondo y de color pálido, próximas a las colas de
espermatozoides.

Espermios-espermatozoides: Los primeros se reconocen por su forma alargada con cola

parecidos a los espermatozoides, su núcleo es también alar- gado y todavía están formando la
pared del tubo seminífero adherido a las células de Sertoli. Cuando terminan su maduración
son espermatozoides y ocupan la luz del túbulo.

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 Fig. 11 Organización del testículo y la espermatogénesis Fuente: Biología de
Solomon, Berg & Martin 2009.

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Preguntas de aná lisis
1. ¿Cuál es el significado de la fase "S" de la Interfase de la división celular?
2. ¿Cuáles son las diferencias específicas entre la cariocinesis y la citocinesis en
animales y plantas?
3. Según la cantidad de células que se encuentran en cada etapa de la mitosis en la
punta de la raíz de la cebolla, ¿qué etapa de la mitosis es la más larga?
4. Enumerar y explicar las 3 principales diferencias entre la mitosis y la meiosis durante
la Profase I, Anafase I e Interfase II.
5. Comparar la mitosis y la meiosis completando la Tabla 3:

Mitosis Meiosis
Número de cromosomas de las
células progenitoras
Número de replicaciones de ADN
Número de divisiones celulares
Número de células hijas producidas
Número de cromosomas de las
células hijas
Mayor importancia

6. ¿Cuál es la principal diferencia entre Meiosis I y Meiosis II?

7. ¿Cuándo ocurre el cruce? ¿Por qué es esto significativo?
8. ¿Cómo se relaciona la frecuencia del cruce con la distancia entre los genes?

9. ¿Cuáles son las funciones del testículo?

10. ¿Cuáles hormonas regulan la producción de células masculinas?

11. ¿Cuáles células son haploides y cuales son diploides?

12. ¿Cuáles estadios de la profase I son reconocibles en los espermatocitos?

13. ¿Cuál será el contenido cromosómico de las células que permanecen como
gonias?
a. Haploide
b. Diploide
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 14. En las células de Sertoli dada la prominencia del nucleolo y la existencia de
grandes vacuolas, estas células estarían relacionadas:
i. Con la división celular de las células vecinas
ii. Con la nutrición de las células vecinas
iii. No tienen nada que ver con las células vecinas
iv. Son una consecuencia del alejamiento de éstas de los vasos
sanguíneos

Material extra para profundizar (opcional)

Meiosis
Mas detalles de esta información en el vinculo
https://www.cellsalive.com/meiosis_js.htm
Para complementar el ejercicio de reconocimiento de las fases de la meiosis
descargue el siguiente vinculo y completa la información solicitada
https://www.cellsalive.com/worksheets/MeiosisPhases.pdf

Mitosis
Para comprender le proceso de la división celular y el surgimiento del cáncer por favor
ejecute la actividad, diríjase al simulador disponible en el vinculo anexo.

https://www.biointeractive.org/es/classroom-resources/el-ciclo-
celular-eucarionte-y-el-cncer

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Para comprender el simulador, descargue la guía de
trabajo en español en el vínculo anexo y complétela.
https://www.biointeractive.org/sites/default/files/media/file/2020-
03/CicloCelularResumen-Estudiante-HCA.pdf

Para comprender el simulador, descargue la guía de

trabajo en ingles en el vínculo anexo.
https://www.biointeractive.org/sites/default/files/media/file/2020-
02/CellCycleInDepth-StudentWS-CL.pdf

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