Diana Laura Carranza Terán
Cinética enzimática
Los estudios sistemáticos del efecto de la concentración inical del sustrato sobre la actividad
enzimática comenzaron a realizarse a finales del siglo XIX. Ya en 1882 se introdujo el concepto del
complejo enzima-sustrato como intermediario del proceso de catálisis enzimática. En 1913, Leonor
Michaelis (foto de la izquierda) y Maud Menten (foto de la derecha) desarrollaron esta teoría y
propusieron una ecuación de velocidad que explica el comportamiento cinético de los enzimas.
Para explicar la relación oservada entre la velocidad inicial (v0) y la concentración inicial de
sustrato ([S]0) Michaelis y Menten propusieron que las reacciones catalizadas enzimáticamente
ocurren en dos etapas: En la primera etapa se forma el complejo enzima-sustrato y en la segunda,
el complejo enzima-sustrato da lugar a la formación del producto, liberando el enzima libre:
En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinéticas individuales de cada proceso y también
reciben el nombre de constantes microscópicas de velocidad. Según esto, podemos afirmar que:
v1 = k1 [E] [S]
v2 = k2 [ES]
v3 = k3 [ES]
Se puede distinguir entre enzima libre (E) y enzima unido al sustrato (ES), de forma que la
concentración total de enzima, [ET], (que es constante a lo largo de la reacción) es:
[ET] = [E] + [ES]
Como [E] = [ET] - [ES], resulta que: v1= k1[S] [ET] - k1 [S] [ES]
Este modelo cinético adopta la hipótesis del estado estacionario, según la cual la concentración del
complejo enzima-sustrato es pequeña y constante a lo largo de la reacción (Figura de la derecha).
Por tanto, la velocidad de formación del complejo enzima-sustrato (v1) es igual a la de su
disociación (v2+ v3):
v1 = v2 + v3
Además, como [ES] es constante, la velocidad de formación de los productos es constante:
v = v3 = k3 [ES] = constante.
Diana Laura Carranza Terán
Como v1=v2+v3, podemos decir que:
k1[S] [ET] - k1 [S] [ES] = k2 [ES] + k3 [ES]
Despejando [ES], queda que: siendo en donde la
expresión (k2+k3)/k1 se ha sustituído por KM, o constante de Michaelis-Menten.
La constante de Michaelis, KM, se define como
La expresión de la velocidad inicial (v0) de la reacción, la velocidad en t = 0, por lo tanto se
transforma en
La velocidad máxima de una reacción, Vmáx, se produce con altas concentraciones de sustrato,
cuando la enzima está saturada, es decir, se encuentra completamente de la forma de ES:
Por lo tanto, al combinar las Ecuaciones, se obtiene
Esta expresión, la ecuación de Michaelis-Menten, es la ecuación básica de la cinética enzimática.
¿Por qué las enzimas tienen un solo valor de pH, denominado el pH óptimo de catálisis?
Las variaciones de pH alteran los estados de ionización de las cadenas laterales de aminoácidos y,
por lo tanto, cambian las distribuciones de carga en las proteínas y los requerimientos para la
formación de puentes de hidrógeno.
Cuando el pH es el óptimo para la enzima, ésta tiene una conformación tridimensional que la hace
activa. Si cambia el pH óptimo, se altera la conformación de la enzima y el sustrato no puede
entrar a su sitio activo.
Interrumpe las interacciones no covalentes de la estructura terciaria, la estructura terciaria se
descompone y la proteína se desnaturaliza.
¿Por qué las enzimas tienen un solo valor de temperatura, denominado temperatura óptima de
catálisis?
El calentamiento hace que las propiedades de conformación de las proteínas sensibles, una
transición pronunciada indican que todo el polipéptido se despliega o “funde” cooperativamente,
es decir, casi de manera simultánea. La mayor parte de las proteínas tienen temperatura de fusión
muy por debajo de los 100 °C. Entre las excepciones, están las proteínas de las bacterias
termófilas.
Es la temperatura en la que la enzima presenta una máxima actividad, es decir, una temperatura
óptima, arriba o debajo de la cual la eficiencia de la enzima para catalizar disminuye rápidamente.
También la temperatura óptima es muy variable de enzima a enzima.
¿Por qué decimos que la concentración de sustrato es el principal factor que determina el
funcionamiento de las enzimas como catalizadores?
Aumentar la concentración de sustrato también aumenta la velocidad de reacción hasta un cierto
punto. Una vez que todas las enzimas se han adherido, cualquier aumento de sustrato no tendrá
efecto alguno en la velocidad de reacción, ya que las enzimas disponibles estarán saturadas y
trabajando a su máxima capacidad.
Diana Laura Carranza Terán
Cuando la concentración del soluto es baja poco a poco se alcanza la máxima actividad enzimática,
al aumentar más la concentración del soluto, perjudicamos a la enzima estorbándole.
Mientras más sustratos haya, estos acaparan más agua y no dejaremos que la enzima se disuelva
bien, afectando la estructura terciaria.
