UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

TESIS DE GRADO PREVIA A LA OBTENCIÓN DEL TITULO DE:

INGENIERO AGRONÓMO

TEMA:

“ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE Lasiodiplodia theobromae AISLADO DE MANGO

DE EXPORTACIÓN FRENTE A INDUCTORES FLORALES Y FUNGICIDAS EN
CONDICIONES DE LABORATORIO”

AUTORA:

EVANGELYN GEANELLA HANNA AGUILAR

GUAYAQUIL – ECUADOR
2016

i
 DEDICATORIA

A Dios todo poderoso quien me bendice y da sabiduría para culminar una etapa más en mi
vida.

A mis padres Ángela Aguilar Rezabala, Sixto Hanna Moran, quienes gracias a sus
esfuerzos entrega total y consejos he podido culminar mis estudios universitarios.

A mi hija Evangelyn Zuñiga Hanna quien ha sido mi motor me ha dado impulso para seguir
adelante, a mi amigo compañero y padre de Evangelyn quien me ha colaborado desde que
llegó a mi vida Ing. Agr David Alexis Zuñiga Kanki, muchas gracias amor.

A mis hermanos Antonio Hanna Aguilar, Wendy Hanna Aguilar quienes de una u otra
forma han sabido ayudarme siempre.

Evangelyn Hanna Aguilar

iii
 AGRADECIMIENTO

La autora deja constancia de sus más sinceros agradecimientos a personas e instituciones

que brindaron su colaboración para que realice este trabajo.

A la Universidad de Guayaquil Facultad de Ciencias Agrarias, Docentes, personal

administrativo y de servicios quienes de una u otra forma colaboraron para que cumpla mi
meta.

A la Facultad de Ciencias médicas por prestar las instalaciones de su laboratorio y poder

ejecutar mí trabajo de tesis de grado.

Un reconocimiento especial a mi Directora y Tutora de Tesis Ing. Agr. Leticia Vivas Vivas
Msc. quien me brindo sus conocimientos en todo momento.

A mis amigos José de Santis, Madelen Mejía, Karla Checa por su amistad y consejos
gracias por su colaboración.

Quien no espera vencer ya está vencido

iv
 La responsabilidad de los resultados,
conclusiones y recomendaciones del
presente trabajo de investigación,
pertenece exclusivamente el autor.

Evangelyn Geanella Hanna Aguilar

C.I. 0930706189
Teléfono celular: 0991355829
Email: eva-hanna@[Link]

vii
 FICHA DE REGISTRO DE TESIS
TÍTULO “Actividad biológica de Lasiodiplodia theobromae aislado de mango de exportación frente a
inductores florales y fungicidas en condiciones de laboratorio”
AUTOR: Evangelyn Geanella Hanna Aguilar REVISORES: Ing. Agr. Leticia Vivas Vivas MSc.

INSTITUCIÓN: FACULTAD:
UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL CIENCIAS AGRARIAS

CARRERA: Ingeniería Agronómica

FECHA DE PUBLICACIÓN: No. DE PÁGS.: 54
ÁREAS TEMÁTICAS: Fitopatología cultivos

PALABRAS CLAVES: Lasiodiplodia theobromae

RESUMEN:
La presente investigación se realizó en los laboratorios de las facultades de Ciencias Agrarias y Ciencias Médicas
de la Universidad de Guayaquil. Los objetivos fueron: 1) Evaluar el efecto de paclobutrazol y nitrato de potasio
sobre el crecimiento micelial de Lasiodiplodia theobromae y 2) Determinar el efecto de siete fungicidas sobre el
crecimiento micelial de L. theobromae. Los tratamientos con inductores florales fueron etrel, nitrato de k y pbz y
con fungicidas Fungaflor, Azufre, Aliete, Cuprofit, Captan, Phyton y Mertec. El hongo fue aislado de ramas de
mango Tommy Atkins en el medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) una vez que fue purificado se multiplicó
masivamente para efectuar las pruebas frente a inductores florales y fungicida, para ello se adicionó al medio de
cultivo cada uno de los tratamientos, se dispensó en cajas Petri y luego se colocó en el centro un disco de 10mm
de crecimiento micelial de L. theobromae, se incubó a 28 oC y se procedió a medir el crecimiento del hongo,
durante tres días debido al que el testigo absoluto cubrió toda la caja de 90mm de diámetro. Los datos se
expresaron en mm por día y porcentaje de crecimiento e inhibición del crecimiento micelial con respecto al
testigo absoluto. Los tratamientos con PBZ no permitió el crecimiento de L. theobromae lo que correspondió al
100% de inhibición del crecimiento micelial. Por otra parte, los tratamientos imazalil, cuprofit, fosetil de
aluminio y thiabendazol inhibieron el 100% de crecimiento micelial de L. theobromae en condiciones de
laboratorio.
No. DE REGISTRO (en base de datos): No. DE CLASIFICACIÓN:

DIRECCIÓN URL (tesis en la web):

ADJUNTO URL (tesis en la web):
ADJUNTO PDF: Sí NO
CONTACTO CON AUTOR: Teléfono: E – mail:
0991355829 eva-hanna@[Link]

CONTACTO EN LA INSTITUCIÓN: Nombre: Ing. Agr. Leticia Vivas Vivas, MSc.

Ciudadela Universitaria “Dr. Salvador Allende”.Av.
Delta s/n y Av. Kennedy s/n. Guayaquil- Ecuador Teléfono: 04-2288040

E – mail: [Link]/facultades/[Link]

viii
 ÍNDICE GENERAL

Contenido Página
Caratula I
Tribunal de sustentación ii
Dedicatoria iii
Agradecimiento iv
Certificado del gramático V
Certificado de la directora vi
Ficha de registro de tesis viii
Índice general ix
Índice de Cuadro de texto x
Índice de Cuadros de anexos xi
Índice de Figuras de texto xii
Índice de Figuras de Anexo xiii
Resumen xiv
Summary xv
I. INTRODUCCIÓN 1
Objetivo General 2
Objetivos Específicos 2
II. REVISIÓN DE LITERATURA 3
2.1. Características de Lasiodiplodia theobromae 3
a Taxonomía 3
b Ecología 4
c Descripción del patógeno 4
2.2. Rango de Hospederos 6
2.3. Control 7
2.3.1 Productos utilizados en el cultivo de Mango 8
III. MATERIALES Y MÉTODOS 10
3.1. Localización del estudio 10
3.2. Factores estudiados 10
3.3. Materiales 10
3.4. Tratamientos 10
3.5. Diseño experimental 11
3.6. Análisis de varianza y análisis funcional 11
3.7. Manejo del experimento 12
3.7.1 Recolección de muestras 12
3.7.2 Desinfección de las muestras 12
3.7.3 Confrontación del crecimiento micelial de L. theobromae con
inductores florales fungicidas 13
3.8 Datos registrados 13
IV. RESULTADOS 14
V. DISCUSIÓN 20
VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 21
VII. BIBLIOGRAFÍA 22
ANEXOS 25
ix
 ÍNDICE DE CUADROS DE TEXTO

Contenido Página

Cuadro 1. Descripción de los tratamiento. 11

Cuadro 2. Promedios diarios de crecimiento micelial de Lasiodiplodia

theobromae con inductores florales durante tres días en condiciones
de laboratorio. Universidad de Guayaquil, 2016. 14

Cuadro 3. Promedios diarios de crecimiento micelial de Lasiodiplodia

theobromae con fungicida durante tres días en condiciones de
laboratorio. Universidad de Guayaquil, 2016. 17

x
 ÍNDICE DE CUADROS DE ANEXOS

Contenido Página
Cuadro 1A. Análisis de seis variables Guayas, 2016. 26

Cuadro 2A. Análisis de la varianza de la variable crecimiento de Lasiodiplodia 28

theobromae (cm) en 24 horas, transformados para a √ Promedio +
0.5. Universidad de Guayaquil, 2016.

Cuadro 3A. Datos sobre crecimiento de Lasiodiplodia theobromae (cm) en 24

horas, transformados para a √ X + 0.5. Universidad de Guayaquil,
2016. 28

Cuadro 4A. Análisis de la varianza de la variable crecimiento de Lasiodiplodia 29

theobromae (cm) en 48 horas, transformados para a √ Promedio +
0.5. Universidad de Guayaquil, 2016.

Cuadro 5A. Datos sobre crecimiento de Lasiodiplodia theobromae (cm) en 48 29

horas, transformados para a √ Promedio + 0.5. Universidad de
Guayaquil, 2016.

Cuadro 6A. Análisis de la varianza de la variable crecimiento de Lasiodiplodia 30

theobromae (cm) en 72 horas, transformados para a √ Promedio +
0.5. Universidad de Guayaquil. 2016.

Cuadro 7A. Datos sobre crecimiento de Lasiodiplodia theobromae (cm) en 72 30

horas, transformados para a √ Promedio + 0.5. Universidad de
Guayaquil, 2016.

Cuadro 8A. Resumen de la significancia estadística de seis variables obtenidos 31

dentro del experimento.

xi
 ÍNDICE DE FIGURAS DE TEXTO

Contenido Página

Figura 1. Porcentaje de crecimiento micelial diario de Lasiodiplodia

theobromae tratados con inductores florales. Universidad de 15
Guayaquil, 2016.

Figura 2. Porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae a

las 72 horas en tratamientos con inductores florales. Universidad de 16
Guayaquil, 2016.

Figura 3. Porcentaje de crecimiento micelial diario de L. theobromae en

tratamientos con Fungicidas. Universidad de Guayaquil, 2016. 18

Figura 4. Porcentaje diario de inhibición del crecimiento micelial de L.

theobromae en tratamientos con fungicidas. Universidad de 19
Guayaquil, 2016.

xii
 ÍNDICE DE IMÁGENES DE ANEXOS

Contenido Página

Imagen 1A. La autora realizando la esterilización de la cámara de flujo laminar y

materiales de laboratorio utilizados en la investigación. 32

Imagen 2A. Crecimiento fungoso del hongo para la confrontación con cada uno de
los tratamientos 33

Imagen 3A. La autora identificando la colonia de hongos en cada una de las cajas 34
petri para realizar la respectiva toma de datos.
Imagen 4A. Identificación de los tratamientos donde no hubo crecimiento micelial. 35

Imagen 5A. Balanza digital con el producto a utilizarse, la autora realizando el

respectivo procedimiento. 36

Imagen 6A. Identificación y toma de datos de crecimiento micelial en cada uno de 37

los tratamientos.
Imagen 7A. Realizando la siembra del hongo en una cámara de flujo laminar 38
debidamente esterilizado.
Imagen 8A. El hongo en cada uno de los tratamientos listos para ser evaluados. 38

Imagen 9A. Cada uno de los tratamientos dentro de la cámara de flujo laminar. 39

xiii
 RESUMEN

La presente investigación se realizó en los laboratorios de las Facultades de Ciencias Agrarias

y Biotecnología de Ciencias Médicas, de la Universidad de Guayaquil. Los objetivos fueron:
1) Evaluar el efecto de paclobutrazol y nitrato de potasio sobre el crecimiento micelial de
Lasiodiplodia theobromae y 2) Determinar el efecto de siete fungicidas sobre el crecimiento
micelial de Lasiodiplodia theobromae.

Los tratamientos del estudio con inductores florales fueron etrel, nitrato de k y pbz y con
fungicidas imazalil (Fungaflor), azufre (Azufre micronizado), fosetil Al (Aliete), oxido de
cobre (Cuprofit), captan (Captan), sulfato de cobre pentahidratado (Phyton) y thiabendazole
(Mertec).

El hongo fue aislado de ramas de mango cultivar Tommy Atkins en medio de cultivo papa
dextrosa agar (PDA) una vez que fue purificado se multiplicó masivamente para efectuar las
pruebas frente a inductores florales y fungicidas, para ello se colocó en el medio de cultivo
cada uno de los tratamientos y en el centro un disco de 10 mm de crecimiento micelial de L.
theobromae.

Se procedió a medir el crecimiento del hongo, cada 24 horas durante tres días debido al que el
testigo absoluto cubrió toda la caja de 90 mm de diámetro. Los datos se expresaron en mm por
día y porcentaje de crecimiento e inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae con
respecto al testigo absoluto.

Los tratamientos con PBZ no permitió el crecimiento de L. theobromae lo que corresponde al

100% de inhibición del crecimiento micelial. Por otra parte, los tratamientos imazalil, oxido
de cobre, Fosetil de aluminio y thiabendazole inhibieron el 100% de crecimiento micelial de
L. theobromae en condiciones de laboratorio.

xiv
 SUMMARY

This research was conducted in the laboratories of the Faculty of Agricultural Sciences and
Biotechnology of Medical Sciences, University of Guayaquil. The objectives were to: 1)
evaluate the effect of paclobutrazol and potassium nitrate on mycelial growth Lasiodiplodia
theobromae and 2) To determine the effect of seven fungicides on mycelial growth
Lasiodiplodia theobromae.

Study treatments with floral inducers were ethrel nitrate pbz and imazalil fungicide
(Fungaflor), sulfur (sulfur micronized), fosetyl Al (Aliete), copper oxide (Cuprofit), captan
(Captan), copper sulfate pentahydrate (Python) and thiabendazole (Mertec).

The fungus was isolated from branches mango cultivar Tommy Atkins among potato dextrose
agar culture medium (PDA) once was purified massively multiplied for testing against floral
and fungicidal inducers, for it was placed in culture medium each treatments and center disc
10 mm mycelial growth of L. theobromae.

We proceeded to measure the growth of the fungus, every 24 hours for three days due to the
absolute control that covered the entire box 90mm in diameter.
Data were expressed in mm per day and percentage growth and inhibition of mycelial growth
of L. theobromae compared to absolute control.

PBZ treatments prevented the growth of L. theobromae corresponding to 100% inhibition of

mycelial growth. Moreover, the treatments imazalil, copper oxide, fosetyl aluminum and
thiabendazole inhibited 100% mycelial growth of L. theobromae under laboratory conditions.

xv
 I. INTRODUCCIÓN

En Ecuador la mayoría de las exportaciones se realizan a diferentes destinos y se componen

fundamentalmente de productos de origen primario. El cultivo de mango es conocido en el
mundo y se ha constituido en un rubro de importancia económica y social dentro del sector
agrícola. Benefician a la población que participa en la industrialización y comercialización de
este cultivo. Por su ubicación geográfica, más del 90 % de las exportaciones son enviadas a
Europa.

La mayor superficie cultivada con mango se ubica principalmente en la provincia del Guayas,
con unas 7700 ha registradas de las cuales, 6500 aproximadamente están dedicadas a
exportación. Las restantes, se destinan a los mercados locales y la industria por ejemplo
elaboración de jugos y concentrado de mango (Mango Ecuador, s.f.).

Las enfermedades de las plantas son uno de los principales problemas que se tiene que
afrontar en la agricultura porque reducen las cosechas, desmejoran la calidad del producto,
limitan al mismo tiempo la disponibilidad de alimentos y materias primas para una serie de
industrias.

Es común observar en las zonas húmedas, que los frutos son atacados por enfermedades
fungosas y bacterianas, las cuales afectan su valor comercial, entre ellos la causada por
Lasiodiplodia theobromae que depende de varios factores como ubicación geográfica,
condiciones ambientales, variedad y prácticas culturales empleadas (Khanzada, et. al. 2004).

En Ecuador se ha observado que L. theobromae afecta a raíces, ramas y avanza hacia el

pedúnculo de las hojas y en cosecha a los frutos, lo que ocasiona el debilitamiento del árbol y
consecuentemente vida útil del mismo. Por ello, es necesario disponer de alternativas de
manejo, mediante estudio del efecto de fungicidas sobre la actividad biológica de este hongo

1
en condiciones de laboratorio así como de inductores florales, debido a que éstos son
comúnmente usados en este cultivo.

Los objetivos de esta investigación fueron los siguientes.

Objetivo general

Determinar el efecto de inductores florales y fungicidas sobre Lasiodiplodia theobromae en

condiciones de laboratorio.

Objetivos específicos

1. Evaluar el efecto de paclobutrazole y nitrato de potasio sobre el crecimiento micelial

de Lasiodiplodia theobromae.

2. Determinar el efecto de siete fungicidas sobre el crecimiento micelial de Lasiodiplodia

theobromae.

2
 II. REVISIÓN DE LITERATURA

2.1 Características del hongo Lasiodiplodia theobromae

Según Alves (2008), L. theobromae es un patógeno de plantas con muy amplia gama de
huéspedes. Causa pudrición y muerte regresiva en la mayoría de las especies que infecta. En
su post cosecha es una enfermedad común de los cítricos, conocida como pudrición del
pedúnculo.

L. theobromae es un parásito facultativo que generalmente infecta a sus plantas huéspedes

penetrando a través de heridas y de tejidos en descomposición. El hongo es de aparición
frecuente en las regiones tropicales y subtropicales, donde ha sido identificado como la causa
de enfermedades en aproximadamente 280 especies de plantas vasculares, entre las cuales
destacan aguacate, algodón, cacao, café, caña de azúcar, caucho, mango, maní, pino, tabaco,
entre otros (Ecuador Forestal, 2014).

a. Taxonomía

El causal de la muerte regresiva se clasifica de la siguiente manera:

Reino: Mycetae
División: Eumycota
Subdivisión: Deuteromycotina.
Clase: ascomycetes
Orden: Sphaeropsidales
Familia: Sphaeropsidaceae
Género: Lasiodiplodia
Especie: Lasiodiplodia theobromae
Griffon & Maubl. (Botrydiploidia theobromae Pat.)

3
 b. Ecología

Fundesyram (S. f.) expresa que la temperatura adecuada para el desarrollo del hongo es de
23°C, al igual que la humedad relativa y precipitaciones medias. La enfermedad es agresiva
cuando la plantación es sometida a estrés prolongado por exceso de humedad, las plantas son
débiles por falta de abonado, falta de protección de las heridas después de la poda, residuos de
tejidos vegetales infectados en el campo, inducciones florales con dosis muy altas y continuas.

c. Descripción del patógeno

La Molina (s.f.) señala que L. theobromae es la especie de la clase ascomycete, pleomórfico y
plurívoro que tiene una amplia distribución geográfica pero con mayor prevalencia en áreas
tropicales y subtropicales al inicio las colonias son blancas con hifas hialinas, luego forman un
micelio granular, ramificado y septado, de color gris oscuro, con un agregado de hifas y
estromas, donde se visualizan los picnidios agrupados, con ostiolos que dan salida a
picnidiosporas hialinas, ovales y unicelulares cuando son jóvenes y recién separadas del
picnidio, oscuras y septadas cuando son viejas y libres.

Capriles L (s.f.), sostiene que el hongo L. theobromae, en muchas ocasiones, es considerado

un patógeno secundario, oportunista, siendo realmente un patógeno agresivo cuando la
presencia de heridas y el ambiente le favorecen. El hongo afecta a las plantas de varias formas.

d. Síntomas y daños
Rodríguez (1999), indica que los síntomas en frutos se manifiestan como manchas de color
pardo oscuro, de consistencia húmeda semiblanda y esponjosa que se expande rápidamente y
se recubre en un período de ocho días con un micelio de color negro, que presenta masas de
las picnidiosporas del hongo, con apariencia de abundante polvillo negro como el hollín. En
frutos pequeños y medianos no es muy frecuente la enfermedad, pero en frutos de cosecha y
en mazorcas sobre maduras su incidencia es muy alta, constituyendo una fuente permanente de
inóculo. La infección interna sucede en los primeros estados de desarrollo de los frutos,

4
aunque no se manifieste exteriormente. Los frutos enfermos sobre maduros son livianos, de
corteza muy quebradiza, vacíos o con almendras en proceso de germinación.

Capriles L (s.f.), relata que en ramas y raíces la manifestación del hongo es más severa, se
ubica a cualquier altura del tronco y ramas o en las raíces, presentándose como manchas
oscuras, secas, agrietadas, deprimidas y endurecidas en la corteza, mientras que internamente
las necrosas de color castaño rojizo son de dimensiones más grandes que en el exterior y con
una apariencia fibrosa, motivada a la intensa actividad celulítica del hongo.

La Molina (s.f.), señala que en las ramas jóvenes las lesiones pueden ocasionar hipertrofias y
rajaduras que en ocasiones exudan un líquido amarillento. Esta necrosis se expande
rápidamente en varios sentidos, pudiendo alcanzar la médula y provocando la muerte de las
áreas superiores o de toda la planta, por obstrucción de los vasos del xilema. La enfermedad se
hace evidente por la marchitez y amarillamiento que presentan las hojas afectadas, las cuales
mueren rápidamente, toman una apariencia tostada y quedan colgantes, luego se desprenden
dejando las ramas desnudas con muerte regresiva. Antes de morir se suceden brotaciones
frecuentes de hojas pequeñas y más oscuras que lo normal. La enfermedad, a veces, no afecta
toda la planta, sino que las áreas por encima de las yemas inferiores pueden brotar con
chupones vigorosos y le da un aspecto de muerte sectorial.

Cedeño (1995), afirma que el patógeno, produce lesiones que ocasionan defoliación y muerte
regresiva en las ramas. Las lesiones se originan en los entrenudos y en los sitios de emergencia
de hojas y ramas secundarias. Al inicio de la enfermedad es la presencia de manchas marrón
claro que luego se ensancha mostrando en el centro blanco grisáceo. Cuando la enfermedad
alcanza los tejidos internos, las hojas se vuelven amarillas y posteriormente se caen.

Maldonado y Rodriguez (2006), indican que el síntoma mas consicuo fue la presencia de
chancros acompañados de exudados blanquecinos y grumosos de tamaños variables ubicados
indistintamente en el tronco ramas y árboles jovenes y adultos afectados.

5
El mismo autor señala que L. theobromae ataca en cualquier estadio de la planta y todos los
órganos de ésta (raíz, tallo, hojas, fruto, ramas). En frutos almacenados ocasiona pudrición. El
hongo está en la atmósfera, en los tejidos vegetales frescos o muertos la diseminación del
hongo es por el viento, insectos, herramientas de poda, agua y el ser humano, penetrando en
los tejidos vegetales por aberturas naturales como heridas ocasionadas por las podas, insectos
o cualquier otro agente.

2.2. Rango de hospederos

Fundesyram (s.f.), reporta que en cacao el inóculo inicial lo constituyen las densas
aglomeraciones de picnidios del hongo presentes, especialmente en las mazorcas maduras,
enfermas, momificadas y colgantes que permanecen en las plantas. Desde allí, los conidios son
dispersados por el viento, el agua, los implementos de trabajo o los insectos perforadores del
tronco que se ocupan de diseminar la enfermedad y obstruir los vasos conductores de savia,
provocando en un período aproximado de tres meses la muerte de ramas o de toda la planta.
Las manchas en los frutos se desarrollan en forma rápida, recubriéndose con las estructuras del
hongo en unos ocho días, lo cual se acelera si presentan heridas.

El mismo autor indica que los hospederos del hongo L. theobromae, afecta a más de 500
especies de plantas, muchas de ellas frecuentes en cacaotales (Theobroma cacao), aguacate
(Persea americana), mango (Mangifera indica), coco (Cocos nucifera), yuca (Manihot
esculenta), caña de azúcar (Sacharum officinarum), cítricas (Citrus spp), café (Coffea
arabica), ñame (Dioscorea alata), batata (Ipomea batata), maíz (Zea mays), ciruela (Prunnus
domestica), agave (Agave sisalana), pinos (Pinus caribaeae) los que pueden actuar como
huéspedes intermediarios.

Sandoval [Link]. (2013) expresan que la pudrición en frutos de mango cuando es afectado por L.
theobromae es de color café claro a oscuro, se origina alrededor del pedúnculo y se extiende a
lo largo de él con márgenes onduladas. En los árboles muestreados se observaron ramas con
secamiento descendente que iniciaba en el ápice y avanzaba hacia la base de la rama,
contrastaban con ramas de aspecto normal, y mostraban haces vasculares necrosados y

6
exudados gomosos rojizos. En un estado avanzado de muerte descendente, los árboles
exhibían secamiento con defoliación parcial y ramas con hojas secas y verdes.

2.3 Control
Capriles (s.f), indica que deberán aplicarse todos los correctivos agronómicos necesarios para
minimizar los factores predisponentes a la enfermedad como drenajes y sombrío deficientes,
carencias nutricionales, utilización como sombrío de plantas hospederas y presencia de
malezas. La aplicación de podas sanitarias y la erradicación de árboles muertos, removiendo y
quemando el material enfermo de las plantaciones y protegiendo las heridas ocasionadas, son
labores necesarias.

Para el control de la enfermedad se utilizaron diferentes métodos el químico de forma racional

y uno de los más eficaces, tanto en condiciones de campo como en post-cosecha, de allí la
importancia y motivación para el estudio del control de las mismas (Khanzada, et. al. 2004).

Según Gamarra (2009) el control integrado comprende medidas culturales, físicas, químicas y
un monitoreo continuo de la enfermedad por lo tanto se debe:
 Diseñar un paquete integral en el control de la enfermedad, paralelo al control químico
de la parte radicular y aérea es necesario fortalecer al árbol con prácticas de
fertilización y mejora del suelo con aplicaciones de materia orgánica y yeso agrícola.
 Monitoreo continuo y revisando la aparición de partes secas del árbol identificando el
origen de las mismas durante todo el proceso productivo con énfasis después de
labores como poda, inducción floral, floración, crecimiento del fruto y sobre todo
después de la cosecha.
 Eliminar panículas que no tienen fruto luego del cuaje definitivo, luego, después de la
cosecha limpiar el campo eliminando panículas muertas de cosecha anterior y residuos
vegetales que pudieran haber en el suelo.
 Eliminar todo tejido muerto luego aplicar en zonas de corte o a todo el árbol un
fungicida sistémico (sulfato de cobre pentahidratado, thiabendazole o benomyl) y en

7
 cortes de diámetro mayor a un centímetro, luego de 12 horas aplicar un cicatrizante a
base de cobre.
 Desinfectar herramientas de poda con solución de hipoclorito de sodio en agua a la
proporción de 1:3, asimismo, el podador deberá al menos lavarse las manos con la
misma solución luego de terminar el árbol podado.
 Eliminar árboles de raíz donde la enfermedad ha sido avanzada e incinerarlos para
reducir el inoculo en campo. Fertilizar apropiadamente (N, P, K, Ca, Mg) incidiendo
en el calcio y magnesio así como los micro nutrientes hierro, zinc y cobre.
 Alternar los fungicidas para evitar que el hongo tome resistencia. El número de
aplicaciones dependerá del grado de infección de la plantación que deberá
determinarlo un técnico especializado. Aplicaciones en “drench” de los productos.

2.3.1. Productos utilizados en el cultivo de mango

Paclobutrazol
El paclobutrazol es un regulador de crecimiento que ha sido utilizado como promotor de la
frotación floral con excelentes resultados en algunas variedades comercialmente importantes.
Entre sus efectos se citan floración temprana y profusa, madurez temprana en frutos,
restricción de la brotación vegetativa, eliminación de la alternancia productiva, incremento en
la producción de flores perfectas y altos rendimientos (Burondkar y Gunjate, 1993; Werner,
1993; Whiley, 1993).

Tongumpai et al. (1997) señalaron que la cantidad de paclobutrazol a aplicar al suelo está en
función del tamaño del árbol y del cultivar. Otros factores a considerar, es el tipo de suelo y el
sistema de riego, los cuales pueden afectar la actividad del producto. La sobredosis puede
causar efectos indeseables como reducción drástica del crecimiento, malformación de
inflorescencias y deformaciones en los brotes.

De acuerdo con Rodríguez (s.f.) en la evaluación el efecto del paclobutrazol sobre el

crecimiento de los brotes vegetativos en los cultivares de mango Kent y Tommy Atkins, así

8
como su influencia sobre el inicio de la floración y la producción en Jagüey Grande, manifestó
un ligero adelanto en el inicio de la floración por efecto del empleo del paclobutrazol así como
la emisión de panículas en las yemas apicales, sub apicales y axilares, compactas y de menor
tamaño que las obtenidas en las plantas testigo.

Nitrato de potasio
Ferrari (1995), indica que se han probado exitosamente compuestos como el nitrato de potasio,
nitrato de amonio, nitrato de calcio y algunos bioreguladores para incrementar el rendimiento
y controlar la floración en el trópico. Al respecto se han reportado adelantos en la floración de
30 a 45 días, incremento en la producción, adelanto en la cosecha y atenuación de la
alternancia productiva en mango 'Haden' por efecto del KNO3.

Davenport y Núñez-Elisea (1990) encontraron que el nitrato de potasio fue efectivo para
promover la floración del mango cuando éste se desarrolla en condiciones tropicales.

9
 III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. Localización del estudio

La presente investigación se realizó en los laboratorios de las Facultades de Ciencias Agrarias

y Ciencias Médicas, de la Universidad de Guayaquil, ciudadela universitaria “Salvador
Allende” ubicada entre las Av. Delta s/n y Kennedy s/n.

3.2. Factores estudiados

 Inductores florales
 Fungicidas

3.3. Materiales

Cajas petri, medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA), agua destilada estéril (ADE), ácido
láctico, cámara de flujo laminar, microscopio, autoclave, cámara fotográfica, espátulas, pinzas,
pipetas, algodón, alcohol al 70 y 90%, mechero, jeringas de 1ml, saca bocado, lápiz graso,
fósforos, cámara de neubauer, ramas, hojas de mango cultivar Tommy Atkins, libreta de
apuntes, bolígrafo, cámara fotográfica y productos inductores florales y fungicidas
(Imagen1A).

3.4. Tratamientos estudiados

Los tratamientos estuvieron constituidos por tres inductores florales y siete fungicidas, los que
se describen en el Cuadro 1.

10
Cuadro 1. Descripción de los tratamientos. Universidad de Guayaquil, 2016.

Dosis kg
Tratamientos Ingrediente activo Concentración gramos
L/h

Inductores
1 Etrel etileno 100 100 ppm
2 Nitrato de potasio nitrato de potasio 90 100 ppm
3 PBZ paclobutrazol 75 100 ppm

Fungicidas

4 Fungaflor imazalil 500 100 ppm

5 Azufre azufre 99 100 ppm

6 Aliete fosetil de aluminio 800 100 ppm

7 Cuprofit óxido de cobre 70 100 ppm

8 Captan captan 800 100 ppm
9 Phyton sulfato de cobre 247 100 ppm

10 Mertec thiabendazol 50 100 ppm

11 Testigo 0 0

3.5. Diseño experimental

El diseño experimental usado fue completamente al azar con 11 tratamientos y cuatro

unidades experimentales (caja Petri).

3.6. Análisis de varianza y análisis funcional

Para el análisis de varianza los datos fueron transformados a √x+0,5; el esquema se observa a
continuación:

11
Fuente de Variación Grados de Libertad

Repeticiones (r-1) 3
Tratamientos (t-1) 10
Error experimental (r-1)(t-1) 30

Total (r)(t)-1 43

Para la comparación de las medias se usó la prueba de rangos múltiples de Tukey al 5% de

probabilidad.

3.7. Manejo del experimento

3.7.1. Recolección de muestras

La recolección de muestras se realizó en la hacienda Bonanza ubicada en la parroquia

Cerecita, cantón Guayaquil, provincia del Guayas. Las muestras consistieron en ramas y hojas
afectadas por la enfermedad. Se colocaron en fundas plásticas codificadas y luego fueron
llevadas al laboratorio.

3.7.2. Desinfección de las muestras

En el laboratorio las muestras de hojas se cortaron en porciones de 0.5 cm en cuadrados que

incluyeron tejidos enfermos y aparentemente sanos. En el caso de ramas delgadas se hicieron
secciones de 0.5 cm de largo; ambas muestras se sumergieron en vasos de precipitación los
cuales contenían hipoclorito de sodio al 1.5%, durante un minuto, luego se enjuagaron tres
veces con agua destilada estéril (ADE), se colocaron en papel filtro estéril para eliminar el
exceso de humedad, finalmente en la cámara de flujo laminar donde previamente se había
dispensado en cajas petri al medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) se procedió a colocar
cinco porciones de los tejidos por cada caja, luego se incubó durante 20 días a 28oC. El
crecimiento micelial de L. theobromae, inicialmente es de color blanquecino y luego se torna
gris, con este crecimiento se hizo la identificación microscópica y se procedió a purificarlo y
12
multiplicarlo masivamente en el mismo medio, para la posteriormente confrontarlo con cada
uno de los tratamientos.

3.7.3. Confrontación del crecimiento micelial con inductores florales y fungicidas

Una vez obtenida la colonia fungosa purificada se procedió a confrontar con cada uno de los
tratamientos a estudiar. Para este propósito se usó medio de cultivo PDA, al que se añadió los
inductores florales y los fungicidas a investigar, una vez que el medio solidificó se colocó en
el centro un disco de 10 mm del crecimiento micelial de L. theobromae. Luego se incubó a
28°C (Imagen 2A).

3.8. Datos registrados

Se registró el crecimiento micelial de L. theobromae cada 24 horas hasta que en el testigo

absoluto cubrió toda la caja Petri de 90 mm. Luego estos datos se transformaron a porcentaje
de crecimiento e inhibición micelial con respecto al testigo absoluto (Imagen 3A).

13
 IV. RESULTADOS

4.1. Efecto de paclobutrazol y nitrato de potasio sobre el crecimiento micelial de

Lasiodiplodia theobromae

4.1.1. Crecimiento micelial (cm)

El tratamiento paclobutrazol (pbz) durante 72 horas no permitió el crecimiento de crecimiento

micelial de L. theobromae y fue diferente de los demás tratamientos, el tratamiento de mayor
crecimiento fue el testigo absoluto cuyo valor a los tres días fue 8 cm y fue diferente
estadísticamente de los demás (Cuadro 2).

Cuadro 2. Promedios diarios de crecimiento micelial de Lasiodiplodia theobromae tratados

con inductores florales durante tres días en condiciones de laboratorio. Universidad
de Guayaquil, 2016.

Crecimiento micelial (cm) por hora

Tratamientos Promedio
24 48 72

Etrel 1.75 ab1/ 3.25 a 6.50 a 3.83

Nitrato de potasio 1.33cd 1.95 b 3.19 b 2.16
PBZ 0.00 d 0.00 d 0.00 c 0.00
Testigo 2.38 a 4.00 a 8.00 a 4.79

Promedio 1.37 1.55 4.42 2,70

C.V. (%) 18.83 12.00 13.79

1/
Las cifras de las columnas con la (s) misma (s) letra (s) son iguales estadísticamente de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey al 5% de probabilidad.

14
4.1.1. Porcentaje de crecimiento micelial de L. theobromae con respecto al testigo

Los porcentajes de crecimiento micelial de L. theobromae durante tres días mostraron que el
tratamiento con paclobutrazol fue el de mejor efecto, pues no hubo crecimiento del hongo
(Imagen 4 anexo); el tratamiento con nitrato de potasio fue menor y a los tres días tuvo un
máximo valor de 39,85%, Etrel obtuvo 81,25%; el testigo absoluto alcanzo el mayor valor a
los tres días (Figura 1). De acuerdo al análisis de varianza hubo diferencias significativas, el
tratamiento con paclobutrazol fue diferente de los de más tratamientos (Figura 1).

Figura 1. Porcentaje de crecimiento micelial diario de Lasiodiplodia theobromae tratados con

inductores florales. Universidad de Guayaquil, 2016.

15
 4.1.3. Porcentaje de inhibición micelial
El porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae fue diferente en todos
los tratamientos con respecto al testigo absoluto al tercer día de evaluación. El tratamiento con
paclobutrazol (pbz) tuvo el 100 % de inhibición micelial, los tratamientos con etrel y Nitrato
de K que presentaron valores de 18,75 y 60,15 % en su orden, obviamente el testigo (sin
aplicación) no hubo porcentaje de inhibición al término de las 72 horas (Figura 2).

120

100 a
100

80
60,15 b
Porcentaje

60

40
18,75 c

20
0d

0
Etrel Nitrato K PBZ Testigo
Inductores Florales

Figura 2. Porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae a las 72 horas

después de tratados con inductores florales con respecto al testigo absoluto.
Universidad de Guayaquil, 2016.

16
4.2. Efecto de siete fungicidas sobre el crecimiento micelial de Lasiodiplodia theobromae.

4.2.1. Crecimiento micelial (cm)

Los fungicidas Fungaflor, Aliete, Cuprofit y Mertec, no permitieron el crecimiento micelial

de L. theobromae, durante los tres días de evaluación. El tratamiento con Captan a las 72
horas creció 0,7 cm a diferencia de los tratamientos con Azufre, Phyton y testigo absoluto
que presentaron los valores más altos con 4, 2 y 8 cm, respectivamente; hubo diferencia
significativa entre tratamientos (Cuadro 3).

Cuadro 3. Promedios diarios de crecimiento micelial de Lasiodiplodia theobromae con

fungicidas durante tres días en condiciones de laboratorio. Universidad de
Guayaquil, 2016.

Crecimiento micelial por hora (cm)

Tratamientos Promedio
24 48 72
Imazalil (Fungaflor) 0.00 b1/ 0.00 d1/ 0.00 c1/ 0,00
Azufre (Azufre) 1.48a 3.25 a 4.00 a 2,91
Fosetil de Aluminio (Aliete) 0.00 b 0.00 d 0.00 c 0,00
Oxido de cobre (Cuprofit) 0.00 b 0.00 d 0.00 c 0,00
Captan (Captan) 0.33 b 0.50 cd 0.70 c 0,51
pentahidratado (Phyton) 0.70b 1.75 bc 2.00b 1,48
Thiabendazol (Mertec) 0.00 b 0.00 d 0.00 c 0,00
Promedio 0.36 0,79 0.96 0,70
C.V. (%) 18.83 12.00 13.79
1/
Las cifras de las columnas con la (s) misma (s) letra (s) son iguales estadísticamente de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey al 5% de probabilidad.

17
 4.2.2. Porcentaje de crecimiento micelial

Los tratamientos con los fungicidas Fungaflor, Aliete, Cuprofit y Mertec, tuvieron efecto
sobre el crecimiento micelial de L. theobromae y fueron estadísticamente iguales entre si y
diferente de los demás en el tercer día de evaluación. El tratamiento con Captan presentó 8,75
% a diferencia de los tratamientos con Azufre, Phyton y el testigo (sin aplicación) que
obtuvieron los valores más altos con 50; 25,01 y 100 % de crecimiento micelial de este hongo
respectivamente (Figura 3).

Figura 3. Porcentaje de crecimiento micelial diario de L. theobromae tratados con fungicidas.

Universidad de Guayaquil, 2016.

18
 4.2.3. Porcentaje de inhibición micelial

El porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae, con respecto al testigo

al tercer día de evaluación los tratamientos, Fungaflor, Aliete, Cuprofit y Mertec,
presentaron el 100 % de inhibición, los tratamientos con Captan, Phyton, presentaron valores
de 91,25 y 74,99 % en su orden a diferencia de Azufre y el testigo absoluto, que presentaron
valores de 50 y 0 % de inhibición respectivamente (Figura 4).

120
100 a

100 a

100 a
100 a

100 91,25 ab

74,99 bc
Porcentaje

80

60
50 c

40

20
0d

0
Fungaflor Azufre Aliete Cuprofit Captan Phyton Mertec Testigo
Fungicidas

Figura 4. Porcentaje diario de inhibición del crecimiento micelial de L. theobromae tratados

con fungicidas. Universidad de Guayaquil, 2016.

19
 V. DISCUSIÓN

El efecto de paclobutrazol (PBZ) con respecto al testigo absoluto mostró que éste producto
inhibió el crecimiento micelial de Lasiodiplodia theobromae, cabe mencionar que éste es un
promotor de floración en mango como lo reporta Pérez Barraza (2011).

Los fungicidas imazalil (Fungaflor), fosetil Al (Aliete), oxido de cobre (Cuprofit) y

thiabendazol (Mertec), no permitieron el crecimiento micelial de L. theobromae, con respecto
al testigo absoluto que presento el 100% de crecimiento durante los tres días de evaluación
concordando con Reyes Córdova et al, (2014) quienes indican que la aplicación de fungicidas
inhibieron el crecimiento de este hongo. Por otra parte, la investigación de Tovar et al (2013)
difieren de los resultados, debido a que ellos reportan que Captan tuvo el mayor porcentaje de
inhibición de crecimiento micelial de este hongo en condiciones in vitro.

Si bien el efecto de los fungicidas tienen un comportamiento diferente sobre la inhibición del
crecimiento micelial de L. theobromae esto posiblemente debe estar relacionado con la
variabilidad del patógeno, modo de infección y la susceptibilidad a productos químicos siendo
necesario conocer el comportamiento de éste para establecer estrategias efectivas de control
como lo reportan Picos-Muñoz et al (2015).

20
 VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

De acuerdo a los resultados se concluye que:

 Solamente el paclobutrazol (PBZ) fue el inductor floral que inhibió el crecimiento

micelial de L. theobromae.

 Los fungicidas imazalil (Fungaflor), fosetil Al (Aliete), oxido de cobre (Cuprofit) y

thiabendazole (Mertec) inhibieron el crecimiento micelial de L. theobromae.

Se recomienda:

 Evaluar el efecto de PBZ y Nitrato de potasio sobre L. theobromae en condiciones de

campo.

 Evaluar el efecto de PBZ sobre la germinación de las esporas de L. theobromae en

condiciones de laboratorio.

 Validar el efecto de los fungicidas Fungaflor, Aliete, Cuprofit y Mertec sobre el

desarrollo de síntomas de L. theobromae en condiciones de campo.

21
 VII. BIBLIOGRAFÍA

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