HDLc -P

Colesterol HDL
Reactivo precipitante

Reactivo precipitante de HDL colesterol - Con Factor:

IVD A505 nm Muestra x 320 = mg/dL HDLc en la muestra
A546 nm Muestra x 475 = mg/dL HDLc en la muestra
Conservar a 2-8ºC
Cálculo LDL-colesterol
PRINCIPIO DEL MÉTODO Se calcula mediante la fórmula de Friedewald
Las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) y baja
densidad (LDL) del suero o plasma, se precipitan con Triglicéridos
fosfotungstato en presencia de iones magnesio. Tras su LDL colesterol = Colesterol total - - HDL colesterol
centrifugación, el sobrenadante claro conteniendo las 5
lipoproteínas de alta densidad (HDL) se emplea para CONTROL DE CALIDAD
determinar el colesterol HDL1,2. Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
SIGNIFICADO CLÍNICO Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
El colesterol transportado por las lipoproteínas de alta densidad el instrumento, los reactivos y el calibrador.
(HDL) a menudo se denomina “colesterol bueno”, ya que niveles Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
elevados están relacionados con un menor riesgo cardiovascular. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
Un nivel bajo de colesterol HDL es considerado uno de los principales tolerancias.
1,6,7
factores de riesgo cardiovascular .
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los VALORES DE REFERENCIA3
datos clínicos y de laboratorio. HDL-colesterol:
Hombres Mujeres
REACTIVOS Riesgo menor > 55 mg/dL > 65 mg/dL
R Ácido fosfotúngstico 14 mmol/L Riesgo normal 35-55 mg/dL 45-65 mg/dL
Riesgo elevado < 35 mg/dL < 45 mg/dL
Reactivo precipitante Cloruro magnésico 2 mmol/L
Ref. 1001092 LDL-colesterol:
Opcional Cholesterol Valores sospechosos a partir de : 150 mg/dL
Ref. 1001093
Valores elevados a partir de : 190 mg/dL
PREPARACION Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
El reactivo está listo para su uso. establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERISTICAS DEL METODO

CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Rango de medida: Desde el limite de detección de 1,57 mg/dL hasta el
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de limite de linealidad de 275 mg/dL.
caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se Si la concentración es superior al limite de linealidad, diluir la muestra 1/2
mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
luz y se evita la contaminación durante su uso. Precisión:
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Indicadores de deterioro de los reactivos: Media (mg/dL) 75,8 33,9 95,2 182
- Presencia de partículas y turbidez. SD 0,89 0,85 2,59 3,04
CV (%) 1,18 2,51 2,72 1,68
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505 nm (500-550). Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0,0015 A.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
- Equipamiento habitual de laboratorio. sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
comerciales (x).
MUESTRAS Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Suero o plasma1. Coeficiente de correlación (r): 0,99.
No utilizar muestras hemolizadas. Separar el suero de los Ecuación de la recta de regresión: y=0,9944x – 1,2346.
hematies lo antes posible. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.
INTERFERENCIAS
1
PROCEDIMIENTO No se han observado interferencias con triglicéridos hasta 4 g/L .
Precipitación Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
4,5
1. Dosificar en tubos de centrífuga: determinación del Colesterol HDL .

R (µL) 100 NOTAS

Muestra (mL) 1,0 SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
este reactivo en distintos analizadores.
2. Mezclar y dejar reposar 10 minutos a temperatura
ambiente. BIBLIOGRAFIA
3. Centrifugar 20 min a 4000 r.p.m. ó 2 min a 12000 r.p.m. 1. Naito H K. High-density lipoprotein (HDL) cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem
The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1207-1213 and 437.
4. Recoger el sobrenadante y determinar el HDL Colesterol. 2. Grove T H. Effect of reagent pH on Determination of HDL Cholesterol by
precipitation with Sodium Phosphotungstate-magnesium Clin Chem 1979;
Ensayo 25:560,.
Proceder según lo indicado en las instrucciones de trabajo 3. US National Cholesterol Education Program of the National Institutesof Health.
del reactivo de Colesterol. 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
CÁLCULOS 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
- Con Calibrador:
PRESENTACION
( A ) Muestra
x (Conc. Calibrador) = mg/dL HDLc en la muestra
( A ) Calibrador Ref: 1001095 Cont. 4 x 5 mL

BSIS12 Ed.2005 SPINREACT,S.A. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]
 HDLc -P

HDL Cholesterol
Precipitating reagent

HDL cholesterol precipitating reagent

IVD - With Factor:
A505 nm Sample x 320 = mg/Dl HDLc in the sample.
Store at 2-8ºC A546 nm Sample x 475 = mg/Dl HDLc in the sample
PRINCIPLE OF THE METHOD Calculation of LDL-cholesterol
The very low density (VLDL) and low density (LDL) According to the Friedewald Formula:
lipoproteins from serum or plasma are precipitated by
phosphotungstate in the presence of magnesium ions. After Triglycerides
removed by centrifugation the clear supernatant containing LDL cholesterol = Total cholesterol - -HDL cholesterol
high density lipoproteins (HDL) is used for the determination 5
of HDL cholesterol1,2. QUALITY CONTROL
Control sera are recommended to monitor the performance of assay
CLINICAL SIGNIFICANCE
procedures. If control values are found outside the defined range,
HDL particles carry cholesterol from the cells back to the liver. check the instrument, reagents and calibrator for problems.
HDL is known as “good cholesterol” because high levels are Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
thought to lower the risk of heart disease. corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
A low HDL cholesterol levels, is considered a greater heart
1,6,7
disease risk . REFERENCE VALUES3
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it HDL-colesterol:
should integrate clinical and other laboratory data. Hombres Mujeres
Lower risk > 55 mg/dL > 65 mg/dL
REAGENTS Standard risk 35-55 mg/dL 45-65 mg/dL
R Phosphotungstic acid 14 mmol/L Increased risk < 35 mg/dL < 45 mg/dL
Precipitating Reagent Magnesium chloride 2 mmol/L LDL-colesterol:
Ref. 1001092 Suspected above : 150 mg/dL
Optional Cholesterol
Ref. 1001093 Increased above : 190 mg/dL
These values are for orientation purpose; each laboratory should
PREPARATION establish its own reference range.
The reagent is ready to use.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
STORAGE AND STABILITY Measuring range: From detection limit of 1.57 mg/dL to linearity limit of 275
All the components of the kit are stable until the expiration mg/dL.
date on the label when stored tightly closed at 2-8ºC, If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2
protected from light and contaminations prevented during their with NaCl 9 g/L and multiply the result by 2.
use. Do not use reagents over the expiration date. Precision:
Signs of reagent deterioration: Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
- Presence of particles and turbidity. Mean (mg/dL) 75.8 33.9 95.2 182
SD 0.89 0.85 2.59 3.04
ADDITIONAL EQUIPMENT CV (%) 1.18 2.51 2.72 1.68
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 505 nm. Sensitivity: 1 mg/dL = 0.0015 A.
- Matched cuvettes 1.0 cm light path. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
- General laboratory equipment. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
The results obtained using 50 samples were the following:
SAMPLES Correlation coefficient (r): 0.99.
Serum or plasma1: Free of hemolysis. Removed from the Regression equation: y= 0,9944x – 1,2346.
blood clot as soon as possible. The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
Stability : HDL Cholesterol is stable for 7 days at 2-8ºC .
INTERFERENCES
PROCEDURE No interferences were observed with triglycerides up to 4 g/L1.
A list of drugs and other interfering substances with HDL cholesterol
Precipitation determination has been reported by Young et. al4,5.
1. Pipette into a centrifuge tube:
3

R (µL) 100 NOTES

Sample (mL) 1.0 SPINREACT has instruction sheets for several automatic
analyzers. Instructions for many of them are available on request.
2. Mix well; allow to stand for 10 min at room temperature.
3. Centrifuge at 4000 r.p.m. for 20 min or 2 min at 12000 BIBLIOGRAPHY
1. Naito H K. High-density lipoprotein (HDL) cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem
r.p.m.. The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1207-1213 and 437.
4. Collect the supernatant and test HDLc. 2. Grove T H. Effect of reagent pH on Determination of HDL Cholesterol by
precipitation with Sodium Phosphotungstate-magnesium Clin Chem 25:560,
Test 1979.
3. US National Cholesterol Education Program of the National Institutesof Health.
Following the Cholesterol reagent instructions. 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
CALCULATIONS 6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
- With Calibrator:
( A )Sample PACKAGING
x (Calibrator conc.) = mg/dL HDLc in the sample
( A )Calibrator
Ref: 1001095 Cont. 4 x 5 mL

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