Práctica 4 : EXTRACCIÓN ADN BUCAL
OBJETIVO
El objetivo principal de esta práctica es extraer ADN de células en humanos procedentes de
la mucosa oral. De esta manera podemos aplicar los conocimientos teóricos adquiridos
poniendo de manifiesto la estructura fibrilar del ADN.
MATERIALES Y EQUIPOS NECESARIO
● Asas de siembra
● Agua embotellada
● Varilla
● Tubos de ensayos
● Puntas de micropipetas
● Vaso de precipitado
● Micropipetas
● Auxiliar de cremallera
● Gradilla
● Probeta
● Espátula
● Reloj de vidrio
● Balanza
● Pipetas 5 y 10 ml
REACTIVOS
● Etanol (alcohol etílico)
● Agua destilada
● NaCl
● Solución jabonosa
MUESTRAS
● Saliva ( células de las mucosas bucal)
PROCEDIMIENTO
Lo primero que hacemos es ponernos la bata, nos recogemos el pelo y nos ponemos los
guantes.
Ahora descontaminamos la superficie de trabajo con alcohol a 70%.
Pasamos a preparar todo el material necesario.
Y empezamos a desarrollar la práctica:
1) Hay que realizar los cálculos correspondientes para preparar las soluciones
2) Una vez preparados , nos hacemos un primer enjuague con agua embotellada en mi
boca y lo escupimos.
3) Luego se hace un segundo enjuague de aproximadamente unos 2-3 minutos para ir
despegando las células.
4) Esa agua se deposita en un vaso de precipitado.
5) Ahora hay que echar 5 ml de la mezcla anterior en un tubo de ensayo.
6) Ahora añadimos 1 ml de NaCl y movemos con la varilla suavemente.
7) Luego añadir 1 ml de solución jabonosa y menear suavemente.
8) Lo dejamos reposar durante 1 minuto.
9) Ahora le añadimos 5 ml de alcohol etílico dejando caer por la pared del tubo y poco
a poco.
10) Esperamos a que suba unos 10 minutos o algo mas.
11) Una vez que los filamentos de ADN sube a la fase acuosa con la ayuda de un asa
de siembra cojemos los filamentos de ADN y los ponemos en un porta
12) Ahora vamos a teñirlo con azul de metileno y lo enjuagamos con agua destilada
13) Lo dejamos secar y cuando este seco lo llevamos a mirar al microscopio
14) Una vez mirado pasamos a recoger todo el material y a hacer la limpieza
15) Los materiales de vidrio se friegan con jabón y agua del grifo y un último enjuagado
con agua destilada y poniéndolos a secar en los escurridores
16) Las pipetas con las puntas hacia arriba en el lavapipetas la mesa con alcohol al 70%
y lo que haya que tirar a los contenedores correspondientes
17) Nos aseguramos de que todo queda recogido.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
ACTIVIDADES
1. ¿Para qué se añade la solución jabonosa?
2. ¿Por qué las fibras de ADN quedan en la capa alcohólica?
3. Las fibras de ADN que obtenemos ¿están purificadas? Razona tu respuesta.