Biodegradación de diésel en suelos arenosos
Biodegradación de diésel en suelos arenosos
ISSN: 0124-177X
rgya@[Link]
Universidad Nacional de Colombia
Colombia
Muskus Morales, Angélica María; Santoyo Muñoz, Claudia; Plata Quintero, Luijesmarth Silvia
Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioaumentación-
bioventing, para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna
Gestión y Ambiente, vol. 16, núm. 2, agosto-, 2013, pp. 83-94
Universidad Nacional de Colombia
Medellín, Colombia
RESUMEN
El presente estudio fue desarrollado dentro del convenio de cooperación institucional realizado entre la
Universidad Pontificia Bolivariana, Seccional Bucaramanga y el Instituto Colombiano de Petróleos – ICP, con el fin
de dar solución a una problemática que se presenta en las zonas de manejo de hidrocarburos, donde se evidencian
suelos arenosos contaminados con diésel hasta concentraciones del 6% y a una profundidad máxima de 80 cm.
Para el desarrollo metodológico se contaminó un suelo artificialmente con diésel para evaluar las técnicas de
Bioventing, Atenuación Natural, Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, utilizando montajes en columnas.
Se definieron los parámetros de diseño y seguimiento como dimensiones de las columnas, caudal de entrada,
concentración de diésel, oxígeno disuelto y crecimiento bacteriano; para la bioaumentación se inoculó el suelo
con un consorcio bacteriano producido por el ICP. Se realizaron los montajes experimentales por triplicado y se
controló el proceso durante cuatro meses. Los resultados obtenidos mostraron que en la técnica de Bioventing
se obtuvieron porcentajes de remoción de diésel hasta del 97%. Con la técnica de Bioventing-Bioaumentación se
alcanzaron porcentajes de remoción hasta del 75% y con las técnicas de Atenuación Natural y Bioaumentación,
los porcentajes de remoción no superaron el 48%. El estudio mostró que el consorcio bacteriano utilizado y
evaluado mediante las técnicas de Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, no potencializó la eficiencia
1. Msc. Ciencias de la Ingeniería.
de los procesos de biorremediación del suelo arenoso contaminado con diésel.
Docente Investigadora Tiempo
Palabras claves: Atenuación Natural, Bioaumentación, Bioestimulación, Biorremediación, Completo de la Facultad de
Ingeniería Ambiental. Universidad
Bioventing, Diésel, Suelos Contaminados, Consorcio Microbiano, Experimentos en Columna. Pontificia Bolivariana.
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ABSTRACT 2. Especialista en Microbiología
The present study was developed within an inter-institutional agreement between the Universidad Pontificia
Ambiental.
Bolivariana, UPB-BBGA and the Colombian Petroleum Institute-ICP, in order to provide a solution to an environmental Docente Investigadora Tiempo
problem that occurs in areas where hydrocarbons are handled and where sandy soils have been found to be Completo del Departamento de
contaminated with diesel fuel with concentrations up to 6% at a maximum depth of 80 cm. For this study, the Ciencias Básicas. Universidad
soil samples were artificially contaminated with diesel fuel in order to evaluate Natural Attenuation, Bioventing, Pontificia Bolivariana.
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Bioaugmentation and Bioaugmentation-Bioventing soil remediation techniques through the use of column experiments.
The design parameters, column dimensions, inflow, diesel concentration, dissolved oxygen, bacterial growth, and 3. Estudiante Ingeniería Ambiental.
monitoring were defined. Bioaugmentation was performed inoculating a bacterial consortium produced by the Estudiante de Ingeniería
ICP. The experimental setup was assembled in triplicate and was monitored through a period of four months. The Ambiental. Universidad Pontificia
Bolivariana.
experimental results showed that Bioventing technique was the most effective, reaching up to 97% diesel removal
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from the contaminated soil; with the Bioaugmentation- Bioventing, diesel fuel removal percentage was 75%, and the
Natural Attenuation and Bioaugmentation techniques resulted in diesel fuel removal percentages not greater than Universidad Pontificia Bolivariana.
48%. This study showed that the microbial consortium evaluated and provided by the Colombian Petroleum Institute Seccional Bucaramanga.
proved to be not efficient for potentializing bioremediation processes of sandy soils contaminated with diesel fuel. Grupo de Investigación en
Ingeniería Sanitaria y Ambiental
Keywords: Natural Attenuation, Bioaugmentation, Biostimulation, Bioremediation, Bioventing, Diesel, – GINSA
Contaminated Soils, Microbial Consortium, Soil Column Experiments.
1. INTRODUCCIÓN
La industria del petróleo ha sido una actividad económica significativa en nuestro país; sin
embargo, la exploración en busca del petróleo, sus procesos de almacenamiento, transporte y
refinación, han generado impactos en la dinámica de los ecosistemas y en el suelo en particular,
ocasionando cambios en sus características físicas, químicas y biológicas. Consciente de esta
situación, el Instituto Colombiano del Petróleo-ICP y la Universidad Pontificia Bolivariana, Seccional
Bucaramanga, establecieron un convenio de cooperación institucional para el desarrollo de
investigaciones que propenden por la biorremediación de suelos contaminados con hidrocarburos,
como el diésel. Este es de mucho interés ambiental debido a que su producción masiva, y su uso
como combustible, es una fuente común de contaminación de la superficie del suelo y el subsuelo,
a través de fugas de tanques de almacenamiento subterráneos y tuberías. Su presencia en el medio
natural genera preocupación debido a su toxicidad, su composición fisicoquímica y su punto de
ignición, aunque el impacto ocasionado por un derrame de diésel en el suelo depende de múltiples
factores como son las características y tipo de suelo, la temperatura, la vegetación, la profundidad
de los niveles freáticos o la ubicación de fuentes de agua, entre otros;.
El diésel es una mezcla de hidrocarburos saturados como parafinas y cicloparafinas y sólo un
4% de poliaromáticos como BTEX, Naftalenos y Alquilbencenos (Heath, J.S., K Koblis, S.L. Sager
& Day, C, 1993). El diésel no es totalmente biodegradable; su biodegradabilidad depende de la
estructura química de sus compuestos orgánicos, de la biodisponibilidad y de la presencia de oxígeno
en el medio. Los microorganismos son capaces de absorber e incorporar los hidrocarburos como el
diésel, mediante tres mecanismos; por absorción del hidrocarburo disuelto en la fase acuosa del suelo
(Bouchez, M., Blanchet, D & Vandecasteele, J.P, 1996, Mulder et al., 1998), por consumo a través del
contacto directo entre la célula y las finas gotas del hidrocarburo (Stelmack PL., Gray MR & Pickard
MA, 1999; Bouchez, M., Blanchet, D., Bardin, V & Vandecasteele, JP, 2001) y por incorporación de
la sustancia en forma de micelas formadas por un biosurfactante sintetizado por el microorganismo
(GoswamI P & Singh HD, 1991; Shreve GS, Inguva S, Gunnam S, 1995). Después de incorporado el
diésel en el interior celular, la biotransformación se puede llevar a cabo bajo condiciones oxigénicas o
anoxigénicas. En general la degradación oxigénica de los hidrocarburos alifáticos saturados presentes
en el diésel se da a partir de diferentes mecanismos, como son la oxidación terminal, diterminal y
subterminal. El mecanismo de degradación principal de los alcanos es la oxidación terminal, en la
cual uno de los grupos metilo terminales es oxidado por acción de la enzima alcano-monooxigenasa
a alcoholes de cadena larga; el alcohol es nuevamente oxidado por la enzima deshidrogenasa a
aldehído y a ácidos grasos, los cuales son degradados a través de la b-Oxidación a Acetil CoA. (Das
& Chandran, 2010).
Para los isoalcanos, alquenos y alquinos, la biodegradación oxigénica se lleva a cabo al igual
que para los alcanos, a través de la oxidación terminal, diterminal y subterminal, pero la degradación
es significativamente inferior a la que se produce con los alcanos (KORA, 2008). La biodegradación
aerobia de los cicloalcanos, conocidos como naftenos, cicloparafinas o hidrocarburos alicíclicos ha
sido poco estudiada y se ha planteado que se lleva a cabo posiblemente a través de reacciones de
cometabolismo o sinergismo (KORA, 2008). Para los hidrocarburos aromáticos como el benceno, el
primer paso en la degradación es la oxidación o la hidroxilación a través de la acción enzimática de la
dioxigenasa, formando como producto un Diol, el cual es convertido a catecol a través de la enzima
dehidrogenasa. Esta ruta de degradación también es aplicable a otros hidrocarburos aromáticos
(KORA, 2008). Cuando el oxígeno no se encuentra disponible, la degradación se lleva a cabo en
condiciones anaerobias y son utilizados como aceptores de electrones sustancias como el nitrato, óxido
de hierro, óxido de manganeso y sulfato (Wiedemeier, T.H., Rifai, H.S., Wilson, J.T & Newell, C, 1999).
Se han aislado varias cepas de microorganismos anaerobios alcano-oxidantes (Aeckersberg,
F.; Rainey, F., Widdel, F, 1998; Rueter et al, 1994), especializados en biotransformar alcanos de cadena
larga (entre C1 y C20) o de cadena media (entre C6 y C16) utilizando ya sea el sulfato o el nitrato como
aceptor de electrones. La degradación anaerobia de compuestos aromáticos es posible a través de
tres vías diferentes como son por formación de la Benzoil-CoA; por formación de resorcinol y a través
de la formación de floroglucinol (Evans, WC & Fuchs, G, 1988; Schink, B., Brune, A & Schnell, S,
1996; Fuchs, G., et al., 1994; Heider, J & Fuchs, G., 1997; Schink, B., Philipp, B & Müller, J., 2000).
Entre los microorganismos identificados con capacidad de biodegradar diésel están, Pseudomonas
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Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioaumentación- bioventing,
para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al
spp., Xanthomonas spp., Acinetobacter junii, Actinomyces spp., Bacillus cereus, Bacillus sphaericus,
Bacillus fusiformis, Arthrobacter spp., Bacillus pumilus, Micrococcus spp., Pseudomonas jessenii,
Pseudomonas resinovorans, Exiguobacterium spp, Pseudomonas fluorescens. (Bento, F., Camargo,
F., Okeke, B & Frankenberger, W, 2003; Alisi C., et al, 2009).
Teniendo en cuenta el potencial de biodegradación del diésel anteriormente descrito, la
aplicación de técnicas de biorremediación representa una alternativa eficiente, económica, versátil
y ambientalmente amigable (Margesin, R & Schinner, F, 2001), para la descontaminación de suelos.
La biorremediación se encuentra definida como el uso de microorganismos para la degradación de
contaminantes (Atlas, RM & Bartha, R, 1998), lo que permite la restauración de ambientes impactados
debido a la biodiversidad biológica presente en el suelo y la adaptabilidad de los microorganismos
en degradar o transformar diferentes tipos de contaminantes tanto orgánicos como inorgánicos.
Para la aplicación de tecnologías de biorremediación es necesario realizar el estudio y control de
las características presentes en el medio contaminado; de esta forma se puede lograr la activación
de los potenciales de biodegradación de los contaminantes por medio de la estimulación o incluso
por el ajuste de algunas condiciones como pH, temperatura y la adición de aceptores de electrones,
entre otros. Dentro de las técnicas de biorremediación más económicas se encuentran la Atenuación
Natural, Bioventing, Bioestimulación y Bioaumentación, (Skipper, H.D, 1999).
La Bioaumentación se entiende como la introducción de especies de microorganismos que ayuden
a la biodegradación de los contaminantes presentes en el suelo. La unión de estos sistemas de múltiples
microorganismos conforman lo que se conoce como consorcio microbiano y representa un acercamiento
a los modelos naturales (Ledin M, 2005), pero con microorganismos especializados en la biodegradación
de compuestos como el diésel. Sin embargo, numerosos estudios muestran que los factores bióticos y
abióticos influyen en la adaptación de la microbiota introducida y por lo tanto influye significativamente
en el proceso de biorremediación (Gerntry, H., Rensing, C & Pepper, I, 2004). En la técnica de Bioventing
se realiza una aireación forzada al suelo contaminado, potencializando la biodegradación oxigénica
(Huesemann M.H. & Truex M.J, 1996; Brinkmann, U., & Reineke, W, 1992). La Atenuación Natural es
definida por la USEPA (1996), como el uso de procesos naturales para contener la propagación de
la contaminación por derrames químicos y reducir la concentración y la carga contaminante en sitios
afectados. Dentro de estos procesos naturales se incluyen la degradación biológica, la volatilización, la
dispersión, la dilución, la degradación radioactiva y la sorción de los contaminantes en la materia orgánica
y minerales de arcilla del suelo (Mulligan, CN & Yong & RN, 2004). La bioestimulación es la introducción
de nutrientes y sustancias químicas que estimulan el crecimiento de los microorganismos nativos del
suelo para mejorar el proceso biológico de remediación (Bento, F et al., 2005). Diversos estudios han
comprobado que la biorremediación de diésel puede ser inducida por medio de la estimulación de los
microorganismos autóctonos, la adición de nutrientes y oxígeno en el suelo (Seklemova, E., Pavlova &
Kovacheva, K, 2001) o a través de la inoculación de un consorcio microbiano en el suelo (Richard, JY
& Vogel, T.M, 1999; Barathi, S & Vasudevan, N, 2001).
El presente trabajo tiene como objetivo evaluar cuatro diferentes alternativas como son
la Atenuación Natural, el Bioventing, la Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, para la
remediación de un suelo arenoso contaminado artificialmente con diésel en experimentos en columna.
2. METODOLOGÍA
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columnas, ya que impide la formación de zonas muertas por flujo de agua y la adhesión del hidrocarburo
en los vértices de las uniones; (3) debido a que el material de la columna se encontrará en contacto
permanente con la muestra de suelo así como también con el caudal infiltrado se recomienda la
utilización de un material poco poroso para el diseño como es el acrílico; (4) la circulación del agua
debe ser de forma ascendente y a un caudal bajo que no permita el arrastre del contaminante hacia
la parte superior de la columna y debe realizarse desde la base hacia la parte superior, de manera
que se simulen eventos de precipitación en el sistema. La columna se diseñó con una altura de 50.8
cm; un diámetro interno de 12.08 cm, obteniendo una relación de 4.2; un diámetro externo de 13.33
cm y un volumen de 6 l. Cada columna posee tres puertos equidistantes entre sí para la adición de
aire, como se muestra en la figura 1.
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para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al
cual no se recirculó el agua adicionada. A través de una bomba peristáltica MF 07519-25 se inyectó
constantemente un caudal de agua de 0,1 LPS que simulara condiciones de infiltración natural por
efecto de la lluvia sin producir arrastre del contaminante. La figura 2 muestra el montaje final de las
columnas en las cuatro condiciones diferentes.
3. ANÁLISIS DE RESULTADOS.
El análisis de los resultados obtenidos de la medición del volumen de agua de salida de cada
una de las columnas evaluadas mostró fluctuaciones en los primeros días, lo que correspondió a
una fase de estabilización y ajuste de los elementos que constituían el sistema. Aproximadamente a
los 40 días de operación se observó que el caudal se mantuvo en un rango entre 0.1 y 0.15 ml/min,
coincidiendo con el caudal establecido previamente. Sin embargo, la determinación del coeficiente de
variación del volumen de agua evidenció que no hay homogeneidad de los datos y por lo tanto cada
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Gráfica 1. Crecimiento
microbiano en el elutriado.
Atenuación natural (Condición1)
y Bioaumentación (Condición 4)
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embargo, comparando las concentraciones obtenidas mensualmente en cada uno de los tratamientos
y observando los valores finales de grasas y aceites en cada una de las columnas, se pudo determinar
que el tratamiento que presentó mejor resultado fue el de Bioventing, seguido por el de Bioaumentación-
Bioventing, Bioaumentación y Atenuación Natural.
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La gráfica 6 muestra que las eficiencias de remoción en la técnica de Atenuación Natural, fueron
homogéneas en todas las zonas de la columna evaluadas y se encontraron remociones entre el 26%
y 47%. Analizando los resultados anteriores, se puede establecer que no se produjo ningún proceso
de degradación biológica porque no hubo crecimiento de microorganismos, pero si hubo una escasa
degradación por procesos de oxidación química, puesto que se presentó oxígeno aportado por el
caudal de entrada; además también se deben tener en cuenta los posibles fenómenos de transporte
y arrastre del contaminante por parte del caudal de infiltración.
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CONCLUSIONES
AGRADECIMIENTOS
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