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Biodegradación de diésel en suelos arenosos

Este estudio evaluó cuatro técnicas de biorremediación para suelos arenosos contaminados con diésel: atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioventing-bioaumentación. Se contaminó artificialmente un suelo arenoso con diésel y se realizaron montajes experimentales en columnas. La técnica de bioventing mostró los mayores porcentajes de remoción de diésel, hasta 97%. La técnica de bioventing-bioaumentación alcanzó remociones hasta 75%. Las técnicas de atenuación natural
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Biodegradación de diésel en suelos arenosos

Este estudio evaluó cuatro técnicas de biorremediación para suelos arenosos contaminados con diésel: atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioventing-bioaumentación. Se contaminó artificialmente un suelo arenoso con diésel y se realizaron montajes experimentales en columnas. La técnica de bioventing mostró los mayores porcentajes de remoción de diésel, hasta 97%. La técnica de bioventing-bioaumentación alcanzó remociones hasta 75%. Las técnicas de atenuación natural
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Gestión y Ambiente

ISSN: 0124-177X
rgya@[Link]
Universidad Nacional de Colombia
Colombia

Muskus Morales, Angélica María; Santoyo Muñoz, Claudia; Plata Quintero, Luijesmarth Silvia
Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioaumentación-
bioventing, para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna
Gestión y Ambiente, vol. 16, núm. 2, agosto-, 2013, pp. 83-94
Universidad Nacional de Colombia
Medellín, Colombia

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Revista Gestión y Ambiente

Evaluación de las técnicas de atenuación natural,


bioventing, bioaumentación y bioaumentación- bioventing,
para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos
en columna

Evaluation of natural attenuation, bioventing, bioaugmentation


and bioaugmentation-bioventing techniques,
for the biodegradation of diesel in a sandy soil, through column experiments
Recibido para evaluación: 26 de diciembre de 2012
Aceptación: 4 de abril de 2013
Angélica María Muskus Morales1
Recibido versión final: 15 de mayo de 2013 Claudia Santoyo Muñoz2
Luijesmarth Silvia Plata Quintero3

RESUMEN
El presente estudio fue desarrollado dentro del convenio de cooperación institucional realizado entre la
Universidad Pontificia Bolivariana, Seccional Bucaramanga y el Instituto Colombiano de Petróleos – ICP, con el fin
de dar solución a una problemática que se presenta en las zonas de manejo de hidrocarburos, donde se evidencian
suelos arenosos contaminados con diésel hasta concentraciones del 6% y a una profundidad máxima de 80 cm.
Para el desarrollo metodológico se contaminó un suelo artificialmente con diésel para evaluar las técnicas de
Bioventing, Atenuación Natural, Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, utilizando montajes en columnas.
Se definieron los parámetros de diseño y seguimiento como dimensiones de las columnas, caudal de entrada,
concentración de diésel, oxígeno disuelto y crecimiento bacteriano; para la bioaumentación se inoculó el suelo
con un consorcio bacteriano producido por el ICP. Se realizaron los montajes experimentales por triplicado y se
controló el proceso durante cuatro meses. Los resultados obtenidos mostraron que en la técnica de Bioventing
se obtuvieron porcentajes de remoción de diésel hasta del 97%. Con la técnica de Bioventing-Bioaumentación se
alcanzaron porcentajes de remoción hasta del 75% y con las técnicas de Atenuación Natural y Bioaumentación,
los porcentajes de remoción no superaron el 48%. El estudio mostró que el consorcio bacteriano utilizado y
evaluado mediante las técnicas de Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, no potencializó la eficiencia
1. Msc. Ciencias de la Ingeniería.
de los procesos de biorremediación del suelo arenoso contaminado con diésel.
Docente Investigadora Tiempo
Palabras claves: Atenuación Natural, Bioaumentación, Bioestimulación, Biorremediación, Completo de la Facultad de
Ingeniería Ambiental. Universidad
Bioventing, Diésel, Suelos Contaminados, Consorcio Microbiano, Experimentos en Columna. Pontificia Bolivariana.
[Link]@[Link]
ABSTRACT 2. Especialista en Microbiología
The present study was developed within an inter-institutional agreement between the Universidad Pontificia
Ambiental.
Bolivariana, UPB-BBGA and the Colombian Petroleum Institute-ICP, in order to provide a solution to an environmental Docente Investigadora Tiempo
problem that occurs in areas where hydrocarbons are handled and where sandy soils have been found to be Completo del Departamento de
contaminated with diesel fuel with concentrations up to 6% at a maximum depth of 80 cm. For this study, the Ciencias Básicas. Universidad
soil samples were artificially contaminated with diesel fuel in order to evaluate Natural Attenuation, Bioventing, Pontificia Bolivariana.
[Link]@[Link]
Bioaugmentation and Bioaugmentation-Bioventing soil remediation techniques through the use of column experiments.
The design parameters, column dimensions, inflow, diesel concentration, dissolved oxygen, bacterial growth, and 3. Estudiante Ingeniería Ambiental.
monitoring were defined. Bioaugmentation was performed inoculating a bacterial consortium produced by the Estudiante de Ingeniería
ICP. The experimental setup was assembled in triplicate and was monitored through a period of four months. The Ambiental. Universidad Pontificia
Bolivariana.
experimental results showed that Bioventing technique was the most effective, reaching up to 97% diesel removal
luijes_694@[Link]
from the contaminated soil; with the Bioaugmentation- Bioventing, diesel fuel removal percentage was 75%, and the
Natural Attenuation and Bioaugmentation techniques resulted in diesel fuel removal percentages not greater than Universidad Pontificia Bolivariana.
48%. This study showed that the microbial consortium evaluated and provided by the Colombian Petroleum Institute Seccional Bucaramanga.
proved to be not efficient for potentializing bioremediation processes of sandy soils contaminated with diesel fuel. Grupo de Investigación en
Ingeniería Sanitaria y Ambiental
Keywords: Natural Attenuation, Bioaugmentation, Biostimulation, Bioremediation, Bioventing, Diesel, – GINSA
Contaminated Soils, Microbial Consortium, Soil Column Experiments.

Volumen 16 - No. 2, Agosto de 2013, Medellín ISSN 0124.177X. pp 83-94 Gestión y


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Revista Gestión y Ambiente

1. INTRODUCCIÓN

La industria del petróleo ha sido una actividad económica significativa en nuestro país; sin
embargo, la exploración en busca del petróleo, sus procesos de almacenamiento, transporte y
refinación, han generado impactos en la dinámica de los ecosistemas y en el suelo en particular,
ocasionando cambios en sus características físicas, químicas y biológicas. Consciente de esta
situación, el Instituto Colombiano del Petróleo-ICP y la Universidad Pontificia Bolivariana, Seccional
Bucaramanga, establecieron un convenio de cooperación institucional para el desarrollo de
investigaciones que propenden por la biorremediación de suelos contaminados con hidrocarburos,
como el diésel. Este es de mucho interés ambiental debido a que su producción masiva, y su uso
como combustible, es una fuente común de contaminación de la superficie del suelo y el subsuelo,
a través de fugas de tanques de almacenamiento subterráneos y tuberías. Su presencia en el medio
natural genera preocupación debido a su toxicidad, su composición fisicoquímica y su punto de
ignición, aunque el impacto ocasionado por un derrame de diésel en el suelo depende de múltiples
factores como son las características y tipo de suelo, la temperatura, la vegetación, la profundidad
de los niveles freáticos o la ubicación de fuentes de agua, entre otros;.
El diésel es una mezcla de hidrocarburos saturados como parafinas y cicloparafinas y sólo un
4% de poliaromáticos como BTEX, Naftalenos y Alquilbencenos (Heath, J.S., K Koblis, S.L. Sager
& Day, C, 1993). El diésel no es totalmente biodegradable; su biodegradabilidad depende de la
estructura química de sus compuestos orgánicos, de la biodisponibilidad y de la presencia de oxígeno
en el medio. Los microorganismos son capaces de absorber e incorporar los hidrocarburos como el
diésel, mediante tres mecanismos; por absorción del hidrocarburo disuelto en la fase acuosa del suelo
(Bouchez, M., Blanchet, D & Vandecasteele, J.P, 1996, Mulder et al., 1998), por consumo a través del
contacto directo entre la célula y las finas gotas del hidrocarburo (Stelmack PL., Gray MR & Pickard
MA, 1999; Bouchez, M., Blanchet, D., Bardin, V & Vandecasteele, JP, 2001) y por incorporación de
la sustancia en forma de micelas formadas por un biosurfactante sintetizado por el microorganismo
(GoswamI P & Singh HD, 1991; Shreve GS, Inguva S, Gunnam S, 1995). Después de incorporado el
diésel en el interior celular, la biotransformación se puede llevar a cabo bajo condiciones oxigénicas o
anoxigénicas. En general la degradación oxigénica de los hidrocarburos alifáticos saturados presentes
en el diésel se da a partir de diferentes mecanismos, como son la oxidación terminal, diterminal y
subterminal. El mecanismo de degradación principal de los alcanos es la oxidación terminal, en la
cual uno de los grupos metilo terminales es oxidado por acción de la enzima alcano-monooxigenasa
a alcoholes de cadena larga; el alcohol es nuevamente oxidado por la enzima deshidrogenasa a
aldehído y a ácidos grasos, los cuales son degradados a través de la b-Oxidación a Acetil CoA. (Das
& Chandran, 2010).
Para los isoalcanos, alquenos y alquinos, la biodegradación oxigénica se lleva a cabo al igual
que para los alcanos, a través de la oxidación terminal, diterminal y subterminal, pero la degradación
es significativamente inferior a la que se produce con los alcanos (KORA, 2008). La biodegradación
aerobia de los cicloalcanos, conocidos como naftenos, cicloparafinas o hidrocarburos alicíclicos ha
sido poco estudiada y se ha planteado que se lleva a cabo posiblemente a través de reacciones de
cometabolismo o sinergismo (KORA, 2008). Para los hidrocarburos aromáticos como el benceno, el
primer paso en la degradación es la oxidación o la hidroxilación a través de la acción enzimática de la
dioxigenasa, formando como producto un Diol, el cual es convertido a catecol a través de la enzima
dehidrogenasa. Esta ruta de degradación también es aplicable a otros hidrocarburos aromáticos
(KORA, 2008). Cuando el oxígeno no se encuentra disponible, la degradación se lleva a cabo en
condiciones anaerobias y son utilizados como aceptores de electrones sustancias como el nitrato, óxido
de hierro, óxido de manganeso y sulfato (Wiedemeier, T.H., Rifai, H.S., Wilson, J.T & Newell, C, 1999).
Se han aislado varias cepas de microorganismos anaerobios alcano-oxidantes (Aeckersberg,
F.; Rainey, F., Widdel, F, 1998; Rueter et al, 1994), especializados en biotransformar alcanos de cadena
larga (entre C1 y C20) o de cadena media (entre C6 y C16) utilizando ya sea el sulfato o el nitrato como
aceptor de electrones. La degradación anaerobia de compuestos aromáticos es posible a través de
tres vías diferentes como son por formación de la Benzoil-CoA; por formación de resorcinol y a través
de la formación de floroglucinol (Evans, WC & Fuchs, G, 1988; Schink, B., Brune, A & Schnell, S,
1996; Fuchs, G., et al., 1994; Heider, J & Fuchs, G., 1997; Schink, B., Philipp, B & Müller, J., 2000).
Entre los microorganismos identificados con capacidad de biodegradar diésel están, Pseudomonas

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Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioaumentación- bioventing,
para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al

spp., Xanthomonas spp., Acinetobacter junii, Actinomyces spp., Bacillus cereus, Bacillus sphaericus,
Bacillus fusiformis, Arthrobacter spp., Bacillus pumilus, Micrococcus spp., Pseudomonas jessenii,
Pseudomonas resinovorans, Exiguobacterium spp, Pseudomonas fluorescens. (Bento, F., Camargo,
F., Okeke, B & Frankenberger, W, 2003; Alisi C., et al, 2009).
Teniendo en cuenta el potencial de biodegradación del diésel anteriormente descrito, la
aplicación de técnicas de biorremediación representa una alternativa eficiente, económica, versátil
y ambientalmente amigable (Margesin, R & Schinner, F, 2001), para la descontaminación de suelos.
La biorremediación se encuentra definida como el uso de microorganismos para la degradación de
contaminantes (Atlas, RM & Bartha, R, 1998), lo que permite la restauración de ambientes impactados
debido a la biodiversidad biológica presente en el suelo y la adaptabilidad de los microorganismos
en degradar o transformar diferentes tipos de contaminantes tanto orgánicos como inorgánicos.
Para la aplicación de tecnologías de biorremediación es necesario realizar el estudio y control de
las características presentes en el medio contaminado; de esta forma se puede lograr la activación
de los potenciales de biodegradación de los contaminantes por medio de la estimulación o incluso
por el ajuste de algunas condiciones como pH, temperatura y la adición de aceptores de electrones,
entre otros. Dentro de las técnicas de biorremediación más económicas se encuentran la Atenuación
Natural, Bioventing, Bioestimulación y Bioaumentación, (Skipper, H.D, 1999).
La Bioaumentación se entiende como la introducción de especies de microorganismos que ayuden
a la biodegradación de los contaminantes presentes en el suelo. La unión de estos sistemas de múltiples
microorganismos conforman lo que se conoce como consorcio microbiano y representa un acercamiento
a los modelos naturales (Ledin M, 2005), pero con microorganismos especializados en la biodegradación
de compuestos como el diésel. Sin embargo, numerosos estudios muestran que los factores bióticos y
abióticos influyen en la adaptación de la microbiota introducida y por lo tanto influye significativamente
en el proceso de biorremediación (Gerntry, H., Rensing, C & Pepper, I, 2004). En la técnica de Bioventing
se realiza una aireación forzada al suelo contaminado, potencializando la biodegradación oxigénica
(Huesemann M.H. & Truex M.J, 1996; Brinkmann, U., & Reineke, W, 1992). La Atenuación Natural es
definida por la USEPA (1996), como el uso de procesos naturales para contener la propagación de
la contaminación por derrames químicos y reducir la concentración y la carga contaminante en sitios
afectados. Dentro de estos procesos naturales se incluyen la degradación biológica, la volatilización, la
dispersión, la dilución, la degradación radioactiva y la sorción de los contaminantes en la materia orgánica
y minerales de arcilla del suelo (Mulligan, CN & Yong & RN, 2004). La bioestimulación es la introducción
de nutrientes y sustancias químicas que estimulan el crecimiento de los microorganismos nativos del
suelo para mejorar el proceso biológico de remediación (Bento, F et al., 2005). Diversos estudios han
comprobado que la biorremediación de diésel puede ser inducida por medio de la estimulación de los
microorganismos autóctonos, la adición de nutrientes y oxígeno en el suelo (Seklemova, E., Pavlova &
Kovacheva, K, 2001) o a través de la inoculación de un consorcio microbiano en el suelo (Richard, JY
& Vogel, T.M, 1999; Barathi, S & Vasudevan, N, 2001).
El presente trabajo tiene como objetivo evaluar cuatro diferentes alternativas como son
la Atenuación Natural, el Bioventing, la Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, para la
remediación de un suelo arenoso contaminado artificialmente con diésel en experimentos en columna.

2. METODOLOGÍA

Las condiciones experimentales desarrolladas se basaron en el interés particular manifestado por


el ICP, en estudiar alternativas de biorremediación para suelos arenosos contaminados con diésel, en los
cuales la contaminación se encuentra ubicada a una profundidad máxima de 80 cm (Zona No Saturada del
Suelo), con concentraciones que varían hasta un máximo de un 6%. Los procesos de biorremediación se
evaluaron en experimentos en columna que permitió el control de variables que afectan los procesos de
degradación del diésel. Para el desarrollo metodológico se tuvieron en cuenta los siguientes parámetros:

2.1 Diseño de las columnas


Para el diseño de las columnas se tomó como referencia la Norma Técnica Alemana DIN V
19736 que recomienda: (1) relación altura- diámetro, la cual no debe ser inferior a 3, garantizando
tiempos de retención que permitan mejorar los procesos de biodegradación; (2) forma cilíndrica de las

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Ambiente
Revista Gestión y Ambiente

columnas, ya que impide la formación de zonas muertas por flujo de agua y la adhesión del hidrocarburo
en los vértices de las uniones; (3) debido a que el material de la columna se encontrará en contacto
permanente con la muestra de suelo así como también con el caudal infiltrado se recomienda la
utilización de un material poco poroso para el diseño como es el acrílico; (4) la circulación del agua
debe ser de forma ascendente y a un caudal bajo que no permita el arrastre del contaminante hacia
la parte superior de la columna y debe realizarse desde la base hacia la parte superior, de manera
que se simulen eventos de precipitación en el sistema. La columna se diseñó con una altura de 50.8
cm; un diámetro interno de 12.08 cm, obteniendo una relación de 4.2; un diámetro externo de 13.33
cm y un volumen de 6 l. Cada columna posee tres puertos equidistantes entre sí para la adición de
aire, como se muestra en la figura 1.

2.2 Características de las muestras de suelo contaminado


Se tomó una muestra de 10 Kg de suelo arenoso de los predios de la Universidad Pontificia
Bolivariana y se contaminó artificialmente por aspersión al 2,5% en peso con diésel de petróleo,
teniendo en cuenta las necesidades de evaluación de la contaminación.

Figura 1. Diseño de la Columna.


Fuente: Las autoras.

Después de contaminar el suelo se determinaron las características fisicoquímicas, como


textura, humedad gravimétrica, densidad real y pH; los análisis se realizaron en el laboratorio de
suelos de la Universidad Pontificia Bolivariana y mostraron un suelo de textura arenosa (>90%),
con una humedad del 11%, de densidad real de 2,20 g/ml, con un pH determinado en agua de 7.3
y determinado en KCl de 6.2. Posteriormente se realizó la activación del consorcio bacteriano y se
inoculó el suelo, según las indicaciones presentadas en la ficha técnica del producto; finalmente se
realizó el armado y llenado de cada columna.

2.3 Diseño Experimental


Para evaluar el proceso de biorremediación de suelo contaminado con diésel de petróleo, se
tuvieron en cuenta cuatro condiciones diferentes que permitieron analizar las posibles alternativas
presentadas en los procesos de biodegradación. La primera condición correspondió al tratamiento
de Atenuación Natural que se utilizó como control, donde se tuvo suelo contaminado e inyección de
agua. En la condición dos se realizó un tratamiento de Bioventing, donde se tuvo el suelo contaminado
con inyección de agua y adición de oxígeno introduciendo aire a la columna por medio de una
bomba, marca RESUN- modelo AC-9904, con regulador de caudal y cuatro salidas. Este proceso se
realizó continuamente a través de los puertos equidistantes de la columna, para evitar una menor
interferencia con el flujo de agua. En la tercera condición se aplicó la combinación de las técnicas
Bioventing y Bioaumentación y se tuvo suelo contaminado e inoculado con un consorcio microbiano
suministrado y producido por el Instituto Colombiano del Petróleo, constituido por cepas bacterianas
preseleccionadas, no modificadas genéticamente según la ficha técnica del producto; además se
inyectó agua y se adicionó oxígeno al sistema. En la cuarta condición se realizó solo tratamiento
con bioaumentación, en donde se tuvo suelo contaminado e inoculado con el consorcio bacteriano.
El montaje se realizó por triplicado para obtener datos estadísticos confiables analizando
un total de doce (12) columnas. Cada columna correspondía a un sistema abierto en paralelo en el

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para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al

cual no se recirculó el agua adicionada. A través de una bomba peristáltica MF 07519-25 se inyectó
constantemente un caudal de agua de 0,1 LPS que simulara condiciones de infiltración natural por
efecto de la lluvia sin producir arrastre del contaminante. La figura 2 muestra el montaje final de las
columnas en las cuatro condiciones diferentes.

Figura 2. Montaje Final del


Sistema de Biorremediación.
Fuente: Los autores

2.4 Puesta en marcha y control del proceso


Se realizó una prueba de trazador con una solución salina del 1% que permitió determinar las
condiciones de empaquetamiento de la columna y la porosidad efectiva. Con la porosidad efectiva
determinada mediante la prueba del trazador, se calculó la velocidad efectiva dentro de la columna
y se estableció el tiempo que tardó una gota de agua en atravesar el medio poroso (suelo arenoso),
lo cual correspondió a 14 días lo que equivale a un Volumen de Poro Intercambiable (VPI). Con base
en estos cálculos se determinó el VPI en términos de tiempo experimental así: Mes 1=2.5 VPI; Mes
2=5.07 VPI; Mes 3=7.07 VPI; Mes 4=10VPI.
El proceso se controló por un periodo de cuatro meses de la siguiente manera:
Etapa de arranque: Se determinó el contenido bacteriano en suelo contaminado y no
contaminado, se controló el caudal de entrada de agua y el oxígeno disuelto en cada columna.
Etapa de desarrollo: El proceso se controló por un periodo de 4 meses, tomando muestras
del agua de salida de la columna para la determinación de la concentración de diésel, contenido
bacteriano, caudal de entrada y oxígeno disuelto.
Etapa final: Después de los cuatro meses de monitoreo, se desmontaron las columnas y se
determinó la concentración de diésel en el suelo y el contenido bacteriano en las tres zonas de las
columnas (zona baja, zona media y zona alta).
Los métodos para el análisis de las muestras fueron: técnica de vertido en placa y determinación
de las Unidades Formadoras de Colonias para el conteo bacteriano (FERNÁNDE, L., 2006);
determinación de grasas y aceites Standart Methods 5522 D, para la determinación de diésel en
agua y suelo, Medición de oxígeno disuelto en agua con el equipo Tipo Hqd Portable Meter Modelo
HQ40d con una sonde de Oxígeno LDO10101.

3. ANÁLISIS DE RESULTADOS.

El análisis de los resultados obtenidos de la medición del volumen de agua de salida de cada
una de las columnas evaluadas mostró fluctuaciones en los primeros días, lo que correspondió a
una fase de estabilización y ajuste de los elementos que constituían el sistema. Aproximadamente a
los 40 días de operación se observó que el caudal se mantuvo en un rango entre 0.1 y 0.15 ml/min,
coincidiendo con el caudal establecido previamente. Sin embargo, la determinación del coeficiente de
variación del volumen de agua evidenció que no hay homogeneidad de los datos y por lo tanto cada

Gestión y 87
Ambiente
Revista Gestión y Ambiente

columna trabajó en condiciones diferentes de caudal. La concentración de oxígeno varió en la fase


de estabilización del sistema en las cuatro condiciones. En la condición 1 y 4, donde el oxígeno fue
aportado en cada columna por el agua de infiltración, se determinó una variación de concentración
entre 0.22 mg/l y 5.5 mg/l. En la condición 2 y 3, donde la concentración de oxígeno fue aportada
tanto por el agua de infiltración como por la inyección artificial de aire, la concentración varió entre
7 mg/l y 8 mg /l.
Los resultados obtenidos del seguimiento bacteriano al elutriado de las columnas, reflejó el
alto impacto del diésel sobre los microrganismos en todas las alternativas de remediación utilizadas.
En las técnicas de Atenuación Natural y Bioaumentación se observó un descenso de la población
microbiana en el primer mes de muestreo y una recuperación gradual pero mínima en los meses
subsiguientes, como se observa en la gráfica 1. En la condición 4 (Bioaumentación) se presentó
disminución de los microorganismos al final del monitoreo.

Gráfica 1. Crecimiento
microbiano en el elutriado.
Atenuación natural (Condición1)
y Bioaumentación (Condición 4)

En las técnicas de Bioventing y Bioaumentación-Bioventing se observa igualmente un descenso


en la población microbiana inicial y posteriormente una leve y lenta recuperación gradual debido a la
estimulación del crecimiento de bacterias aerobias con el oxígeno presente en el caudal de aireación,
como se observa en la gráfica 2.

Gráfica 2. Crecimiento microbiano


en el elutriado. Bioventing
(Condición2) y Bioaumentación-
Bioventing (Condición 3)

La cuantificación de la población bacteriana en el suelo se realizó al iniciar y finalizar la fase


experimental y en esta última en tres zonas de la columna. De los resultados se pudo observar una
reducción significativa y drástica de la población bacteriana del suelo contaminado con respecto al suelo
sin contaminar y se evidenció que los microorganismos no presentaron una recuperación importante
a través del tiempo en ninguna de las tres zonas de la columna muestreadas. Sin embargo, en cada
una de las columnas se observó un mayor crecimiento en el área superior y aunque este no fue
significativo, si se evidenció que la técnica en la que se produjo una mejor recuperación microbiana
fue la de atenuación natural seguido por el de Bioaumentación- Bioventing, Bioventing y finalmente
Bioaumentación. La gráfica 3 muestra los resultados obtenidos del análisis bacteriano en suelo.
Los análisis de la concentración de diésel en el elutriado mostraron en todas las columnas
una variación en las concentraciones de diésel durante los meses de seguimiento del ensayo; esto
fue debido a las dificultades presentadas para la estabilización del flujo de entrada y salida en las
columnas y al consecuente arrastre y transporte de diésel desde el interior de las mismas. Sin

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para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al

embargo, comparando las concentraciones obtenidas mensualmente en cada uno de los tratamientos
y observando los valores finales de grasas y aceites en cada una de las columnas, se pudo determinar
que el tratamiento que presentó mejor resultado fue el de Bioventing, seguido por el de Bioaumentación-
Bioventing, Bioaumentación y Atenuación Natural.

Gráfica 3. Conteo bacteriano


en suelo al inicio y al final del
proceso.

De acuerdo a los resultados de los análisis de las concentraciones finales de diésel en el


suelo, realizadas en tres zonas de cada columna (zona alta, zona media y zona baja), mostraron
que en todos los casos se obtuvieron mayores remociones en la zona alta de la columna. También
se pudo observar que la mayor remoción de diésel se presentó en el suelo tratado por Bioventing,
seguido por la Bioaumentación – Bioventing, Bioaumentación y por último la de Atenuación Natural.
De igual manera se pueden analizar los porcentajes de remoción de diésel en el suelo teniendo en
cuenta cada uno de los tratamientos aplicados, obteniéndose los mejores resultados de remoción en
la técnica de Bioventing con porcentajes de eliminación del diésel entre el 75% y el 97% en la parte
alta de la columna y entre el 50% y el 30% en las zonas medias y bajas, como se observa en la gráfica
4. Debido a lo anterior, se puede establecer que en esta técnica la adición de oxígeno favoreció el
crecimiento de las bacterias aerobias que utilizaron el diésel como fuente de carbono, promoviendo
una degradación biológica, evidenciada en el crecimiento microbiano, y una degradación por oxidación
química, debida a la presencia de oxígeno a lo largo de toda la columna.

Gráfica [Link]ón de diésel en


Suelo: Bioventing (Condición 2)

Gestión y 89
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Revista Gestión y Ambiente

Analizando la técnica de Bioaumentación- Bioventing se observan porcentajes de remoción


en la parte alta de la columna entre el 65% y el 75% y en las zonas media y baja entre el 60% y el
25%, como se muestra en la gráfica 5. En esta técnica se puede establecer que la disminución en la
concentración de diésel se debe más a la oxidación química, debido a la influencia de la aireación
constante en la columna y a los fenómenos de transporte y arrastre del contaminante por acción del
caudal de infiltración que por la biodegradación, ya que el crecimiento microbiano no fue significativo.

Gráfica [Link]ón de diésel en


Suelo: Bioaumentación-Bioventing
(Condición 3)

La gráfica 6 muestra que las eficiencias de remoción en la técnica de Atenuación Natural, fueron
homogéneas en todas las zonas de la columna evaluadas y se encontraron remociones entre el 26%
y 47%. Analizando los resultados anteriores, se puede establecer que no se produjo ningún proceso
de degradación biológica porque no hubo crecimiento de microorganismos, pero si hubo una escasa
degradación por procesos de oxidación química, puesto que se presentó oxígeno aportado por el
caudal de entrada; además también se deben tener en cuenta los posibles fenómenos de transporte
y arrastre del contaminante por parte del caudal de infiltración.

Gráfica [Link]ón de diésel


en Suelo: Atenuación natural
(Condición 1)

Finalmente, en la técnica de Bioaumentación también se obtuvo un comportamiento similar en


las tres zonas de la columna estudiadas, obteniéndose los valores más bajos de remoción de todas
las técnicas analizadas de entre el 20% y el 48%, como se observa en la gráfica 7. Con los resultados
anteriores se puede establecer que la adición del consorcio bacteriano no produjo una degradación
significativa, debido a que no hubo un crecimiento de microorganismos durante todo el tiempo del
experimento; sin embargo sí ocurrió una leve degradación por oxidación química, la cual se evidencia
en los valores de la concentración de oxígeno aportado por el agua de entrada.
Contrastando los datos anteriores con el descenso en la concentración de diésel en el suelo
y el aumento en la concentración de diésel determinada en el agua, se estableció que fue causado
por fenómenos de transporte y arrastre del contaminante por acción del agua de infiltración, mas no
por su degradación.

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Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y bioaumentación- bioventing,
para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en experimentos en columna. - Muskus et al

Gráfica [Link]ón de Diésel en


Suelo: Bioaumentación (Condición
4)

CONCLUSIONES

• La evaluación del consorcio microbiano inoculado en un suelo arenoso contaminado artificialmente


con diésel, mostró que no realizó una biodegradación significativa del contaminante en ninguna
de las dos técnicas analizadas (Bioventing-Bioaumentación y Bioaumentación), infiriendo que las
relaciones bióticas entre los microorganismos autóctonos, como la competencia, influyeron en el
crecimiento y en consecuencia en el porcentaje de remoción de diésel.
• La técnica de Bioventing, con aireación a flujo constante, constituyó el mejor proceso de
biorremediación para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, ya que las características
del sustrato permitieron una rápida distribución y desplazamiento del oxidante, lo que favoreció la
oxidación química y biológica del contaminante y estimuló el crecimiento de la microbiota oxigénica
autóctona del suelo, la cual utiliza como fuente de carbono el diésel.
• Los porcentajes de remoción en la zona alta de las columnas correspondientes a las técnicas
con suministro continuo de aire, Bioventing y Bioaumentación - Bioventing, resultaron ser los más
altos entre las tres zonas analizadas, lo cual indica que el oxígeno se almacenó principalmente en
la parte superior de la columna, debido a su fácil desplazamiento y transporte desde los puertos
inferiores hacia arriba, favorecido por la textura arenosa del suelo.
• Debido a la dificultad en el control de la concentración de oxígeno y caudal del agua de entrada
al sistema, las tres columnas de cada condición operaron como sistemas independientes y por
lo tanto no es recomendable evaluar las técnicas de biorremediación a escala de laboratorio
utilizando réplicas de cada condición.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecemos a la Universidad Pontificia Bolivariana, seccional Bucaramanga y al Instituto


Colombiano de Petróleos - ICP por su apoyo técnico y económico que permitió la realización
del presente trabajo de investigación.

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