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Tema 11

Staphylococcus aureus es una bacteria comensal de la piel y mucosa que puede causar infecciones que van desde abscesos menores hasta septicemia mortal. Produce diversas toxinas y enzimas que le permiten evadir el sistema inmunitario y diseminarse por el tejido, causando abscesos e infecciones. Es resistente a antibióticos como la penicilina debido a la producción de enzimas como la beta-lactamasa.

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Tema 11

Staphylococcus aureus es una bacteria comensal de la piel y mucosa que puede causar infecciones que van desde abscesos menores hasta septicemia mortal. Produce diversas toxinas y enzimas que le permiten evadir el sistema inmunitario y diseminarse por el tejido, causando abscesos e infecciones. Es resistente a antibióticos como la penicilina debido a la producción de enzimas como la beta-lactamasa.

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STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Bacteria que causa diversas manifestaciones clínicas que van desde un forunculum hasta un
acceso, que también puede producir septicemia y la muerte. Bacteria bien dotada para evadir al
sistema inmunitario que presenta resistencia a los antibióticos como la penicilina y se encuentra
colonizando superficies cutáneas y mucosas. Es un comensal de piel y mucosa sobre todo en vías
digestivas y vías aéreas superiores. El 60% de nosotros tenemos S. aureus en la parte anterior de la
fosa nasal sin producir ninguna patología, esperando que el sistema inmunológico mengue para
poder producirla.

Desde el punto de vista de microfotografía electronica de barrido el S. aureus se va a replicar en


los ejes de las X,Y y Z por eso al verlo tiene forma de racimos de uva. A diferencia de los
streptococcus que se replican en un solo eje o sentido formando cadenas.

Características

- Gram + (ante la tinción gram se va a teñir de color morado o violeta)


- Son esféricos
- Agrupados en racimos (staphylococcus = racimo de uvas)(aureus = dorado)
- Inmóviles (no tienen flajelos)
- Anaeróbicos facultativos (pueden vivir con o sin O2)
- Catalsas + -> Este genero tiene una enzima llamada catalasa que se caracteriza en
desdoblar el peróxido de hidrogeno en agua y oxigeno molecular. Y la catalasa le permite a
ellos al estar en condiciones adversas donde hay presencia de radicales (PEROXIDO DE
HIDROGENO H2O2), ENTONCES usan esta enzima para desdoblarlo. Esta enzima es muy
importante para diferenciar staphylococcus de streptococcus se usa la prueba de catalasa.
Ya que staphylococcus son CATALASA POSITIVA. Cuando nos cortamos y aplicamos agua
oxigenada (Peroxido de hidrogeno) el H2O2 entra en contacto con el glóbulo rojo se
produce un burbujeo por que se desdobla el peróxido de hidrogeno en agua y oxiigeno
molecular, lo mismo hace la enzima catalasa; una vez el staphycoccus se pone en contacto
con esa condición adversa(H2O2) lo desdobla en agua y oxigeno molecular, aprovecha el
oxigeno y el agua de esa reacción química que se produce.)
- Son negativos a la oxidasa: esta enzima la tienen generalmente los GRAM NEGATIVOS que
dentro del ciclo metabolico se van por la via oxidativa para obtener energía (formando 2
ATP) en vez de la del ciclo de Krebs (también llamada fermentativa y forma 32ATP). En los
staphylococcus carece de esta enzima por lo tanto son OXIDASA NEGATIVA.
- Son fermentadores de azucares: uno de los azucares más usados dentro de los procesos
fermentativos para la identificación del staphylococcus es el manitol, pero no todas las
especies de staphyloccus fermentan el manitol, ejemplo: S. saprophyticus y aureus son
fermentadores de manitol pero el epidermidis no lo es. Al decir fermentadores de manitol
se refiere a que usa el manitol como fuente de energía.
- Halófilos ( les gusta la sal)
- No forman esporas
- Cultivo agar manitol salado
Muy resistente (debido a la dosis y uso inapropiado de antibióticos)

- Antibióticos = penicilina
- MRSA
- ORSA
- Calor 60ºC por una hora
- Desecación
- Desinfectantes comunes

Toxinas

- Hemolisina (hemo: sangre, lisina: hidrolizar): hidroliza a los globulos rojos para aumentar
la disponibilidad del hierro para esta bacteria. . En el humano produce una Beta-hemolisis,
es decir, una ruptura total del globulo rojo, las hemolisis se clasifican en 3 tipo:
1. Alfa α hemolisis: hemolisis parcial
2. Beta β hemolisis: hemolisis total (genero staphylococcus . en particular
staphylococcus aureus)
3. Gamma γ hemolisis: no hay hemolisis
AGAR AGAR se le puede adicionar sangre ORH- porque no tiene antígeno n su
superficie. Medio de cultivo agar sangre y se puede visualizar la hemolisis que hace el
E.aureus.

- Leucocidina: hidrolizar los globulos blancos ( neutrófilos).

- Toxina exfoliativa: destruir las uniones intercelulares de la capa granulosa de la epidermis.


Causando exfoliación:
a- síndrome de la piel escalada o enfermedad de Ritter: dermatitis exfoliativa de la niñez,
que se inicia:
1- úlcera aislada y costrosa
2- ampolla  descamación
3- fiebre y escalofríos
4- malestar general

- Enterotoxina: clasificadas de la A hasta la E, estas enterotoxinas tienen la particularidad


de producir emesis(vomito) y diarreas en el paciente que consume esas toxinas. Se
caracterizan por ser termoestable es decir, soporta mas de 100ºC por encima de 30/45
minutos y se adquiere a traves la ingestión de alimentos contaminados por el germen o
por la toxina o incluso ambos. Ejemplo, manipuladores de alimentos que tienen en sus
manos heridas (uñeros) invadidos por staphylooccus aureus y forman microabscesos y
vierte la toxina en los alimentos, contaminandolo.
1ra sintomalogia por staphylococcus aureus es el vomito, se produce una emesis
hiperactiva donde el paciente puede llegar a la deshidratación. Luego del vomito comienza
la diarrea.
Alimentos que se contaminan por manipulación de personas con heridas en las manos
que tengan presentes el germen o la toxina (ambos también): carne, pescado, leche,
flanes, etc. PERO SOBRETODO ALIMENTOS DULCES como la crema pastelera que puede
ser usada como vehiculo del staphyloccus y verter su toxina. La crema pastelera que
posee azúcar y de allí el staphylococcus puede obtener su fuente de energía.

- Toxina del sindrome del shock toxico tipo 1 (TSST I) : síndrome del shock toxico, se asocian
en mujeres que usan tampones durante su periodo menstrual, causando prolifercion
abundante de la bacteria, también se asocia en personas que tengan infección con
staphylococcus aureus, una infección cutánea o quemaduras, o después de una cirugía. Se
caracteriza por:
1- Hipotensión
2- Fiebre
3- Vómitos y diarreas
4- Erupción eritrodermatosa
5- Disfunción multiorganica

Esta toxina es un superAntigeno, es decir, no necesita de células presentadoras antes los


linfocitos T, siendo una vía rápida que activa a la vez más linfocitos T, haciendo asi que
produzca masivamente citosinas, lo cual genera vasodilatación y genera el shock en la
persona e inclusive la muerte

Composición antigénica

Proteína A : es una proteína que se ancla a la pared o membrana de la bacteria. Esta va a


inactivar a los anticuerpos, específicamente la IgG. ¿Cómo lo inactiva? Se une a la porción
fc del anticuerpo y no a la fab (el anticuerpo se tiene que unir al antígeno mediante su
porción fab para que este pueda opsonizar y luego sea fagocitada) si se une a la porción fc
se está evitando el proceso que es opsonizar y su fagocitosis (inhibiendolo). cubre al
staphylococcus, armadura, tiene una actividad antifagocitica, eso quiere decir que el
leucocito PMN una vez que hace la apoptosis, va a querer emitir los pseudopodos y al no
reconocerlo no va a fagocitar, todo esto por la presencia de proteína A.

Enzimas

1. De protección
- Coagulasa: se caracteriza por coagular la fibrina y al hacer eso provoca un licho ecológico
para poderse resguardarse/protegerse. Al coagular la fibrina, se introduce dentro de ese
coagulo y lo usa como carcasa y le hace impenetrable a los antibióticos llegar al él. Pero
estos coágulos de fibrina prodecen bloqueos o taponamiento a nivel de la
circulación/vascular del humano, ocasionado infarto, necrosis del tejido (falta de irrigación
sanguínea). Es el único de las especies staphyloccus que es COAGULASA POSITIVA. Los
científicos usan como gold estándar la pruba de coagulasa para diferenciar de las otras
especies de staphylococcus.
- Estafiloquinasa: rompe el coagulo, a través de la conversión del plasminogeno a plasmina
(la plasmina digiere a la fibrina) junto con la leucocidina lisan granulocitos y macrófagos,
dstruyendo la primera línea de defensa de la inmunidad celular..
- Catalasa: convierte el peróxido de hidrógenos en agua y oxigeno, su función es proteger a
la bacteria del efecto toxico al peróxido de hidrogeno.
- B-Lactamasa: hidroliza a la penicilina y es la causante de esa resistencia.

2. De invasión
- Hialuronidasa: hidroliza al acido hialuronico, le permite a la bacteria diseminarse por el
tejido conectivo.
- Lipasa: le permite a la bacteria atravesar tejidos grasos. . Esta enzima al trabajar junto con
la hialuronidasa se caracterizan por actuar sobre el tejido conectivo ocacionando la
destrucción o necrosis de ese tejido, es lo que lleva a la aparición de los abscesos (cavidad
llena de detritos celulares,bacterias muertas, tejido necrótico=pus) para que el E.AUREUS
puede protegerse.

Patogenesis

Esta dada porque invaden el tejidos, una vez invadido comienzan a verter las enzimas y
toxinas antes mencionadas y aparecen los abscesos, al producirse el absceso se ve la
pustula y si el paciente no es tratado puede llevar a una septicemia y muerte del mismo.
Las neumonías por staphylococcus aerus son las mas graves, son neumonías necrotizantes
en donde el paciente puede morir en 72horas si no es tratado a tiempo.
Las enterotoxinas son factores importantes S. aureus en la patogénesis del
envenenamiento alimentario como es el caso de la emesis y diarrea.

Potegenicidad

Estará dada de acuerdo al lugar donde el staphylococcus está produciendo la patología


A. Abscesos
B. Meningitis
C. Infecciones supurativas
D. Pioderma
E. Mastitis (en mujeres por staphylococcus aureus) (en vaca por el ordeñador contaminado
con el germen)
F. Enterocolitis
G. Infecciones urinaria.
Lesiones infecciones staphylococcus: necrosis del tejido, pustulas, piodermitis extensivas,
osteomelitis, inflamación del escroto,neumonías,etc.
Enfermedades por invasión tisular:

La bacteria staphylococcus aureus se encuentra en la flora bacteriana normal de nuestra piel,


cuando las defensas de la piel fallan por producto de laceración, quemaduras o heridas. El
staphylococcus aureus se aprovecha de eso e ingresa:

- Impétigo: infección cutánea contagiosa que se da en la niñez, que produce primero


vesículas, luego se rompen y crean costras de color ambar.
- Forúnculo: un folículo piloso se infecta
- Absceso: acumulación de pus en un área tisular confinada, los síntomas incluyen dolor,
tumefacción, enrojecida y caliente.
- Ántrax: son agrupaciones de forúnculos por debajo de la piel.
- Celulitis: infección del tejido celular subcutáneo, los síntomas incluyen dolor, eritemas que
se extienden rápidamente, edema y calor.

La bacteria staphylococcus aureus puede causar otras enfermedades a través de :

- Absceso: infección en un tejido y que el cuerpo es capaz de aislar esa infección. Este tiene
un centro necrótico donde va a existir la pus (se compone de neutrófilos muertos,
bacterias vivas y muertas y liquido edematoso) va a drenar hacia el sitio que tenga menor
impedancia como la piel o hacia el torrente sanguíneo pudiendo producir una
diseminación hematógena hacia diversos órganos y es por eso que se produce:
1 la endocarditis ( la bacteria viajara por el torrente sanguíneo hasta el corazón
inflamando el revestimiento interno de este inclusive sus valvulas)
2 neumonía: no solo por el viaje interno del torrente sanguíneo, si no también por
aspiración.
3 Osteomielitis: (inflamación de los huesos) también producido por diseminación
hematógena.
4 Meningitis
5 Artritis séptica

Otras especies de staphylococcus:

- S. epidermidis y S. saprophyticus : ambas son coagulasa negativo, esto es lo que permite que se
diferencien de la S. aureus. La S. epidermidis se encuentra en todas las personas y es muy raro
que cause enfermedad, se originan en el caso que el paciente este debilitado o inmunosuprimido,
las válvulas cardiacas estén infectadas o que las prótesis ortopédicas estén infectadas también. El
S. saprophyticus esta relacionado con infecciones urinarias en mujeres jóvenes. Estas se
diferencian en que la S. saprophyticus es novobiocina resistente y la S. epidermidis es novobiocina
sensible.

- Staphyloccus camipi: se caracteriza por producir lesiones (foliculitis) a nivel del cuero cabelludo

- Staphylococcus auricularis: se caracteriza por producir lesiones a nivel del conducto auditivo
externo
- S. hemolítico: produce hemolisis de los globulos rojos porque tienen una enzima llamada
hemolisina

- Staphylococcus intermedius: habitante normal de nasofaringe y piel de perros. Causa pioderma,


otitis, mastitis, infecciones oculares y de vías urinarias.

- Staphylococcus hyicus: se caracteriza porque produce una epidermitis exhudativa.

Muestra
- Pus obtenido por raspado con hisopos (pus y raspar la cara anterior del absceso)
- Tejido afectado (retirarlo de las heridas)
- Muestra de leche (prueba de reducción de azul de metileno por reductasa) en las
empresas productoras de leche

Aislamiento, cultivo e identificación


Medios de cultivo comunes como agar sangre, básicamente se usa el agar de soya tripticasa (se
observa la hemolisis) se le agrega sangre ORH-. Se le agrega el mdio cuando el medio de cultivo
este calentado por debajo de los 40ºc con la finalidad que al agregarle a la sangre el cloruro rojo
no se rompa porque interesa que el glóbulo rojo quede indemne y se haga la mezcla lentamente
para no producir la hemolisis. Cuando se agrega la sangre por encima de los 40ºc se produce el
agar chocolate porque se vierten los elementos internos del glóbulo rojo al medio cuando se
rompen. Para que se usa? Para visualizar la hemolisis y si crecen colonias doradas (staphylococcus
aureus) las colonias crecen en 24 horas, redondas, lisas, lustrosas y el pigmento dorado.

- Al hacer la coloración de gram, las colonias adoptan el cristal violeta lo que indican que
son gérmenes gram positivos y forman racimos de uvas.
- La hemolisis que se visualiza es B-hemolisis
- La IDENTIFICACION DEFINITIVA es la prueba de COAGULASA, dando COAGULASA
POSITIVA
- LAS FORMAS DE RACIMOS LO HACEN Las 3 ESPECIES DE STAPHYLOCOCCUS
- COLONIAS DORADAS Y HEMOLISIS = PRESUNTA S.AUREUS
- COAGULASA POSITIVA = Dx STAPHYLOCOCCUS

Pruebas bioquimicas
S. AUREUS S.EPIDERMIDIS S.
SAPROPHYTICUS
coagulasa + - -
novobiocina sensible Sensible resistente
trehalosa + - +
manitol + - +
fosfatasa + + -
aureasa + - -
B-galactidasa V - +
Hemolisis-B + - -
Prueba de la
CATALASA

CATALASA
CATALASA POSITIVA
NEGATIVA

Staphylococcus Streptococcus

S. epidermidis
Staphylococcus
S. saprophyticus
S. saprophyticus
aureus.
S.lugdunensis

COAGULASA COAGULASA
POSTIVO NEGATIVA

- Manitol: El único que no usa el manitol como fuente de energía es el epidermidis.


- La aureasa. El único que desdobla la urea es el aureus.
- Hemolisis-B: el único que produce hemolisis es el aureus.

Prueba de la catalasa: peróxido de hidrogeno en una lamina porta-objeto y ponerla en contacto


con el germen a estudiar.no se debe tomar muestra de la bacteria que crecio en el medio de
cultivo agar sangre, porque de por si, la sangre sola va a reacción con el peroxido de hidrogeno si
se desdoblara el H2O2 (burbujas).

PRUEBA de coagulasa: se toma plasma fresco del paciente y se le añade el germen en estudio. Se
mantiene por 24 horas a 36/37ºc . si aparece un cuadro de fibrina. Es coagulasa + (aureus)
coagulasa- (saprophytico o epidermidis)

Prueba de manitol: si cambia de color es que usa el manitol como fuente de energía.

Prueba de hemolisis: si deja pasar la luz alrededor del germen.

Prueba de disco de novobiosina: se ve un aro oscuro alrededor del disco= resistente. 30


microgramo de antibiótico. Si no se ve nada es sensible.

Componentes de la pared celular de S. aureus (naturaleza antigénica)


a. Peptidoglucano: acido teicoico y mureina

b. Acido teicoico 80%

c. Proteína A (le sirven como pared en contra de los fagocitos)

Resistencia
A. Son susceptibles a desinfectntes comunes
B. El pus los protege por semanas (Recordar que, a través de las enzimas lipasa e
hialuronidasa que se caracterizan por producir necrosis del tejido, hacen el absceso; allí se
van depositando detritos celulares, leucocitos PMN degenerados y bacterias muertas
formando el pus. El pus tiene la particularidad de proteger un germen por semanas)
C. Algunos sobreviven a temperaturas de 60/30ºc (microbio)

Inmunidad (desde el punto de vista del hospedador para proteger): La inmunidad va estar
mediada por la celular y humoral.

Tratamiento
1. Se realizan pruebas (cultivo)

2. 80% de las cepas son meticilio resistentes

3. Vancomicina(en estado critico), oxacilina,tercoplanina

4. Trigeyclina(tigaci) no se usa en menores de 18 años

5. Linezolid (oxizolidinana) alto costo. Se deja de ultima estancia. c/8horas.

Desde el punto d vista del laboratorio


COCOS GRAM POSITIVOS

CATALASA
+ -
S LISOSTAFINA R streptococcus
S NITROFURANTOINA R enterococcus
R BACITRACINA S
+ FERMENTACION GLUCOSA -
GENERO STAPYLOCOCCUS MICROCOCCUS KOCURIA
-/+ COAGULASA +
- PROTEINA A +
- CLUMPING FACTOR +
- AURESA +
ESTALICOCOS COAGULASA NEGATIVOS S, AUREUS

GALACTIDASA + FOSFATASA +
S.SAPROPHYTICO S, EPIDERMIDES

NOTA: aproximadamente del 40% de S. aureus que son coagulasa – (no tienen coagulasa). Son
menos agresivos que los que tiene coagulasa+

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