Fosfatasa Alcalina FS*
DGKC
Reactivo para la determinación cuantitativa In Vitro de la fosfatasa alcalina (ALP) en suero o plasma en
equipos fotométricos
Información de Pedido Advertencias y Precauciones
Nº de pedido Tamaño del envase 1. Reactivo 1: Peligro. H315 Provoca irritación cutánea. H318
1 0401 99 10 021 R1 5x 20 mL + R2 1x 25 mL Provoca lesiones oculares graves. H373 Puede provocar
1 0401 99 10 026 R1 5x 80 mL + R2 1x 100 mL daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o
1 0401 99 10 023 R1 1x 800 mL + R2 1x 200 mL
1 0401 99 10 704 R1 8x 50 mL + R2 8x 12,5 mL
repetidas. P260 No respirar los vapores. P280 Llevar
1 0401 99 10 930 R1 4x 20 mL + R2 2x 10 mL guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P302+P352
1 0401 99 90 314 R1 10 x 20 mL + R2 2x 30 mL En caso de contacto con la piel: Lavar con agua y jabón
abundantes. P305+P351+P338 En caso de contacto con los
Resumen [1,2] ojos: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios
La fosfatasa alcalina (ALP), una enzima hidrolítica que actúa minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil.
óptimamente en pH alcalino, existe en la sangre en numerosas Seguir aclarando. P310 Llamar inmediatamente a un centro de
formas distintas las cuales se originan principalmente del hueso y información toxicológica/un médico.
el hígado, pero también de otros tejidos como el riñón, placenta, 2. El reactivo 2 contiene ácida sódica (0,95 g/L) como
testículos, timo, pulmones y tumores. Se encuentran incrementos conservante. ¡No ingerir! Evitar el contacto con la piel y las
fisiológicos durante el crecimiento óseo en la niñez y el embarazo, membranas mucosas.
mientras los incrementos patológicos están altamente asociados 3. Durante la reacción es producido p-nitrofenol el cual es
con las enfermedades óseas y hepatobiliares. En la enfermedad venenoso cuando se inhala, ingiere o absorbe a través de
hepatobiliar ellos indican la obstrucción de los conductos biliares la piel. Si la mezcla de reacción entre en contacto con la piel
como en la colestasia causada por cálculos biliares, tumores o o membranas mucosas se debe lavar copiosamente con agua.
inflamación. También se observan elevadas actividades en la 4. Excepcionalmente pueden obtenerse valores erróneos en
hepatitis infecciosa. En las enfermedades óseas las elevadas muestras de pacientes con gammapatías [7].
actividades de ALP son originadas por una actividad osteoblástica 5. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar
incrementada como en la enfermedad de Paget, osteomalacia las precauciones necesarias para el uso de reactivos de
(raquitismo), metástasis ósea e hiperparatiroidismo. laboratorio. Para un correcto diagnóstico, se recomienda
evaluar los resultados según la historia médica del paciente,
Método los exámenes clínicos así como los resultados obtenidos con
Test cinético fotométrico, método estándar optimizado de acuerdo otros parámetros.
a la Sociedad Alemana de Química Clínica (DGKC) 6. ¡Únicamente para el empleo profesional!
Principio Preparación del Reactivo
p-Nitrofenilfosfato + H2O ALP > Fosfato + p–Nitrofenol Inicio con sustrato
Los reactivos son listos para usar.
Reactivos Inicio con muestra
Componentes y Concentraciones Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2
R1: Dietanolamina pH 9,8 1,2 mol/L (p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = mono reactivo
Cloruro de Magnesio 0,6 mmol/L Estabilidad: 4 semanas de 2 a 8 °C
R2: p-Nitrofenilfosfato 50 mmol/L 5 días de 15 a 25 °C
¡El mono reactivo debe ser protegido de la luz!
Instrucciones de Almacenamiento y Estabilidad del Reactivo
Los reactivos son estables hasta el final del mes indicado como Tipo de muestra
fecha de expiración, si es almacenado entre 2 y 8 °C, y si se evita Suero o plasma heparinizado
la contaminación. ¡No congelar los reactivos! ¡Proteger los Estabilidad [4]: 7 días de 20 a 25 °C
reactivos de la luz! 7 días de 4 a 8 °C
Manipulación de Desechos 2 meses a –20 °C
¡Congelar sólo una vez!
Por favor remítase a los requerimientos legales locales.
¡Desechar las muestras contaminadas!
Material requerido y no suministrado
Solución de NaCl 9 g/L Procedimiento del Ensayo
Equipo general de laboratorio Hay disponibles a petición aplicaciones para sistemas
automáticos.
Longitud de onda Hg 405 nm, (400 – 420 nm)
Paso óptico 1 cm
Temperatura 25 °C/30 °C/37 °C
Medición Contra el aire
Fosfatasa Alcalina FS DGKC – Página 1 *Fluid Stable = líquido estable
Inicio con sustrato Precisión (a 25 °C)
Muestra/Calibrador 20 µL En la serie Valor medio DE CV
Reactivo 1 1000 µL n = 20 [U/L] [U/L] [%]
Mezclar, incubar durante aprox. 1 min., luego añadir: Muestra 1 114 1,71 1,50
Reactivo 2 250 µL Muestra 2 222 2,05 0,92
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 min. y empezar a Muestra 3 275 2,91 1,06
cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia después de 1, 2
y 3 min. De un día a otro Valor medio DE CV
n = 20 [U/L] [U/L] [%]
Inicio con muestra
Muestra 1 120 1,93 1,60
Muestra/Calibrador 20 µL Muestra 2 223 1,89 0,85
Mono reactivo 1000 µL Muestra 3 279 2,36 0,85
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 min. y empezar a
cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia después de 1, 2 Comparación de métodos
y 3 min. Una comparación de Fosfatasa Alcalina FS (DGKC) de DiaSys (y)
con un test comercialmente disponible (x) utilizando 78 muestras
Cálculo dio los siguientes resultados:
y = 0,98 x – 2,21 U/L; r = 0,999
Con factor
De las lecturas de absorbancia calcular ∆A/min. y multiplicar por el Rango de Referencia [6]
factor correspondiente de la tabla de más abajo: 25 °C 30 °C 37 °C
Niños
∆ A/min. x factor = ALP actividad [U/L]
1 – 12 años [U/L] < 480 < 596 < 727
Inicio con sustrato 405 nm 3433 [µkat/L] < 8,00 < 9,93 < 12,1
Inicio con muestra 405 nm 2757 13 - 17
femenino [U/L] < 296 < 367 < 448
años
Con calibrador
[µkat/L] < 4,93 < 6,12 < 7,47
masculino [U/L] < 617 < 767 < 935
∆A / min Muestra
ALP [U / L] = x Conc. Calibrador [U / L] [µkat/L] < 10,3 < 12,8 < 15,6
∆A / min Calibrador Adultos [U/L] < 170 < 211 < 258
[µkat/L] < 2,83 < 3,52 < 4,30
Factor de conversión
ALP [U/L] x 0,0167 = ALP [µkat/L] Cada laboratorio debe comprobar si los valores de referencia
indicados son adecuados para sus pacientes y si es necesario,
Calibradores y Controles determinar sus propios valores de referencia.
Para la calibración de sistemas fotométricos automatizados se
Bibliografía
recomienda utilizar el calibrador DiaSys TruCal U. Este método es
trazable al coeficiente de absorbancia molar. Para el control interno 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt:
de calidad deben utilizarse los controles DiaSys TruLab N y P. TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 36-46.
Cada laboratorio debería establecer medidas correctoras en caso 2. Moss DW, Henderson R. Clinical enzymology. In: Burtis CA,
de obtener valores fuera del intervalo preestablecido. Ashwood ER. eds. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed.
Philadelphia: W. B. Saunders Company, 1999. p. 617-721.
Nº de pedido Presentación 3. Deutsche Gesellschaft für klinische Chemie. Empfehlungen
TruCal U 5 9100 99 10 063 20 x 3 mL
5 9100 99 10 064 6 x 3 mL
der deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC).
TruLab N 5 9000 99 10 062 20 x 5 mL Standardisierung von Methoden zur Bestimmung von
5 9000 99 10 061 6 x 5 mL Enzymaktivitäten in biologischen Flüssigkeiten.(Recommen-
TruLab P 5 9050 99 10 062 20 x 5 mL dation of the German Society of Clinical Chemistry.
5 9050 99 10 061 6 x 5 mL Standardization of methods for measurement of enzymatic
activities in biological fluids.) Z Klin Chem Klin Biochem 1972;
Características 10: 182-92.
4. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples.
Rango de medida
1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 14-5.
En equipos automatizados, el test sirve para determinar actividades 5. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 5th
de la fosfatasa alcalina hasta 4500 U/L. ed. Volume 1 and 2. Washington, DC: The American
En caso de un procedimiento manual, el test es apropiado para Association for Clinical Chemistry Press 2000.
mesurar actividades de la fosfatasa alcalina que correspondan a un 6. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of
máximo de ∆A/min. de 0,25. several enzymes in plasma at different measuring
Si tal valor es excedido la muestra debe ser diluida 1 + 9 con temperatures. Klin Lab 1992; 38: 555-61.
solución de NaCl (9 g/L) y los resultados multiplicados por 10. 7. Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical
Especificidad/Interferencias chemistry assays: mechanisms, detection and prevention.
ClinChemLabMed 2007;45(9):1240-1243.
No aparece ninguna interferencia con el ácido ascórbico hasta
30 mg/dL, bilirrubina hasta 40 mg/dL, hemoglobina hasta Fabricante
150 mg/dL y lipemia hasta 2000 mg/dL de triglicéridos. Para más
información sobre interferencias, véase Young DS [5]. DiaSys Diagnostic Systems GmbH
IVD Alte Strasse 9 65558 Holzheim Alemania
Sensibilidad/Límite de Prueba
El límite más bajo de detección es 3 U/L.
Fosfatasa Alcalina FS DGKC – Página 2 844 0401 10 06 00 Julio de 2016/16
