Las concentraciones celulares de enzimas, cofactores
Velocidad de crecimiento o y sustratos son considerados constantes.
Tasa específica de crecimiento Uno puede asumir que todas las células son idénticas
y que su tiempo de duplicación es constante sin
μ
pérdida de células.
Esta ecuación requiere medir la ln(N)/t
concentración de biomasa (células/ml, g de
células/ml) a diferentes intervalos de tiempo
(min, h).
Dos métodos para determinar la biomasa
son el peso seco o densidad óptica (OD). Esta ecuación no considera la presencia sustratos y productos.
Contenido
Introducción
Tipos de modelos cinéticos microbianos
Modelo cinético de Monod
ejemplo
Rendimiento celular
qx, qs, qp Qx, Qp, Qs, YX/S , Y P/S , y YP/X
ejemplos
Modelos de crecimiento
La cinética se encarga del estudio de la velocidad de reacción
de un proceso, ya sea químico o biológico.
Los modelos cinéticos se centran en una sola parte del
metabolismo debido a la dificultad que representa tener en
cuenta todos los factores de la población celular y el
medio que lo rodea.
Factores Propiedades Temperatura
reológicas Presión
osmótica
pH Nutrientes
Presión
Oxígeno
atmosférica
Regulación
Actividad de Heterogeneidad transcripcional
agua celular
Modelos cinéticos de crecimiento microbiano
No estructurados Estructurados La complejidad de un
No segregados CAJA NEGRA modelo cinético está dado
por el número de factores
Segregados CASO REAL incluidos.
No segregados: consideran a la población como un todo el cual interactúa con el ambiente externo y puede verse
como una especie en una solución; la concentración celular puede tratarse como una sola variable. Con este modelo
no se pueden describir aspectos como: alteraciones irreversibles en la fisiología y metabolismo celular, diferencia
fenotípica y mutaciones en el genoma relacionadas con variaciones en el metabolismo.
Segregados: segregan a la población celular en células individuales que son diferentes una de la otra en términos de
características distinguibles. Este modelo considera a una célula como un reactor, teniendo en cuenta la transferencia
de nutrientes a través de la membrana celular. Estos modelos se aplican cuando la composición de la biomasa varía
considerablemente con respecto a las etapas de crecimiento celular.
No estructurados: considera la velocidad específica de crecimiento como función de las condiciones del
microorganismo (solo variables externas a la célula). Entre estos modelos se encuentran el de Monod, Teisser, Moser,
y el modelo de inhibición por sustrato y por producto propuesto por Monod, entre otros.
Estructurados: consideran reacciones individuales o grupos de reacciones ocurrentes dentro de la célula. La
biomasa es subdividida dentro de un número de componentes como DNA, RNA, proteínas, etc., y son descritas las
reacciones que ocurren entre estos componentes. En estos modelos la velocidad específica de crecimiento se
encuentra influenciada por la fase biótica y abiótica.
Modelos cinéticos de crecimiento microbiano
Complejidad a nivel celular
A pesar de que el crecimiento de
las células es un fenómeno muy
No estructurados Estructurados
complejo, a menudo se puede
No segregados CAJA NEGRA Complejidad obtener una descripción global.
a nivel
Segregados CASO REAL población
En resumen
Los modelos cinéticos Estructurados:
▪ Incorporan atributos genéticos, morfológicos o bioquímicos que determinan el estado
fisiológico de la biomasa.
▪ Este tipo de modelos son complicados y requieren una serie de ecuaciones para resolverse.
Los modelos cinéticos No Estructurados:
▪ Ven a las bacterias como organismos independientes que interactúan con el ambiente.
▪ La tasa de crecimiento se determina en función de la concentración de biomasa y sustrato.
Existe una relación metabólica entre la limitación de nutrientes y la
tasa de crecimiento específica (μ)
Modelos cinéticos de crecimiento
microbiano no estructurados
South African Journal of Chemical Engineering, 2020;33:141-150
Modelos de crecimiento microbiano de Monod
μ : tasa específica de crecimiento (1/tiempo)
μ max : tasa máxima de crecimiento de la bacteria (constante) (1/tiempo)
S : concentración de sustrato limitante (masa/volumen)
K s : concentración de S a la cual se produce la mitad del valor de μmax (constante) (masa/volumen)
X : concentración de biomasa, número de células o masa celular
Sustrato limitante es aquel componente del medio de cultivo
que se agota primero (fuente de N, C, algún aminoácido etc.)
Limitaciones del modelo de Monod
1. A altas [S] μ max se vuelve independiente
2. A bajas [S] μ max se vuelve dependiente No aplicable Aplicabl
3. No aplicable cuando el S exhibe inhibición (toxicidad) e
¿Cuál es el sentido biológico del modelo de Monod?
Ambas μ max y K s reflejan propiedades fisiológicas
intrínsecas de un organismos en particular.
La Ks es una constante de afinidad del
microorganismo por el consumo del sustrato en el
cual está creciendo.
Entonces Ks nos indica qué tan fácil el
microorganismo puede aprovechar el sustrato en el
cual está creciendo.
Forma linearizada
Cuando Ks = [S] μ = μ max /2
Ejemplo 1 en Excel
Modelo de Monod
Archivo:
modelo_Monod_06_09_21.xlsx
Rendimiento celular
qx, qs, qp Qx, Qp, Qs, YX/S, YP/
S, y YP/X
La evaluación de la cinética de crecimiento
microbiano en un cultivo de sistema cerrado o
por lotes implica la medición del crecimiento de
los microorganismos, consumo de nutrientes
y formación de productos.
Rendimiento hace referencia a la biomasa
producida por cantidad de sustrato consumida
Cantidades absolutas
Biomasa ( X) kg de célula Rendimientos
Sustrato (S) kg de sustrato
Producto ( P) kg de producto
Rendimiento de biomasa ( rx)
Volumen ( V) L, m3
Concentraciones
Rendimiento de sustrato ( rs)
Densidad celular (x)
Rendimiento de producto (rp)
Concentración de sustrato (s) Productividad celular ( Rx)
Concentración de producto (p)
Productividad de sustrato ( Rs)
Productividad de producto ( Rp)
Velocidades específicas
Velocidad específica de crecimiento ( μ o qx)
Velocidad específica de sustrato ( qs)
Velocidad específica de producto (qp)
Velocidades específicas absolutas
Velocidad volumétrica de células formadas (rx o Qx)
Velocidad volumétrica de consumo de sustrato (rs o Qs)
Velocidad volumétrica de producto formado (rp o Qp)
Ejemplo 2
Para iniciar una fermentación para elaborar cerveza casera se usó como
inóculo un sobre liofilizado de levadura de 5 g para 20 litros. Para envasar
la cerveza se filtra, y el peso de la levadura recuperada fue de 50 g. Si el
tiempo de fermentación fue de 14 días, ¿qué productividad celular tuvo el
experimento?
Ejemplo 3
La fermentación de la cerveza se realiza en 6 días, y llega a alcanzar hasta
6% (v/v) de etanol, si suponemos que la biosíntesis de etanol es
directamente proporcional al tiempo, calcular el rendimiento (productividad
volumétrica).
Datos:
ρ = 0.789 g/ml
P0 = 0 ml / 100 ml = 0 mL/L
Pf = 6 ml / 100 ml = 60 ml/L
dt = 6 días = 144 h
Ejemplo 4
Una empresa produce levadura para panificación, dicha empresa cuenta
con un biorreactor de 1200 L de capacidad, el cual puede producir hasta
8.2 Kg de levadura después de 10 h. Calcular la productividad volumétrica
si el biorreactor fue inoculado con 0.1 Kg de levadura.
Datos:
V = 1200 L
X0 = 0.1 Kg
Xf = 8.2 Kg
dt = 10 h
Ejemplo 5
Una empresa debe entregar 5 toneladas de levadura al mes, para ello
cuenta con un biorreactor de 10 m3, si el mes tiene en promedio 20 días
hábiles, ¿qué productividad volumétrico diaria se requiere?
5 Ton células 1000000 g células 1 m3
Qx = 10 m 3 20 días 1 Ton células 1000 L
25 g de 25 Kg de células
Qx = células
o
m3 · día
L · día
Rendimientos específicos de formación de biomasa y producto
Y X/S: rendimiento específico de formación de biomasa
sobre consumo de sustrato
Y P/S: rendimiento específico de formación de producto
sobre consumo de sustrato
Y P/X: rendimiento específico de formación de producto
formación de biomasa
Ejemplo 6
Determinar los rendimientos Y X/S (formación de biomasa sobre consumo de
sustrato) y YP/S (formación de producto sobre consumo de sustrato)