PRACTICA DE MICROSCOPIO

INFORME DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGIA N° 3

PRESENTADO A:

SEÑOR ALBERTO ENRIQUE MAESTRE PACHECO

INTEGRANTES:

MAIRA ALEJANDRA FUENTES CAUSIL

CAMILO ANDRÉS PÉREZ MARTÍNEZ

SARA JULISSA REDONDO DÍAZ

MARÍA FERNANDA MUÑOZ MARTÍNEZ

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS

PROGRAMA DE BIOLOGÍA

MONTERÍA, MES: 11 DIA: 12 DE 2021

 INTRODUCCIÓN

Al observar diversas muestras en el microscopio podemos analizar detalladamente

cada fragmento de esta en varios tamaños, algunos de estos requieren ya sea
agua destilada o algún colorante para poder observar de una mejor manera, los
oculares nos permiten ver 10 veces la imagen de la que nos proporcionan los
objetivos y con estos podemos percibir (4x, 10x, 40x, 100x) en algunos casos
hasta más pero en este informe trabajaremos con los anteriores

OBJETIVOS

 Reconocer las distintas partes del microscopio y sus funciones.

 Conocer los cuidados básicos que se debe tener en cuenta en el uso y
manejo del microscopio.
 La importancia del microscopio en el laboratorio de biología.

MATERIALES

Equipos

 Microscopio
Cristalería

 Portaobjetos
 Cubreobjetos
Reactivos y colorantes

 Agua destilada
 Tinta
Materiales a observar

 Letra e en tinta
 Corcho
 Granos de polen
 Fibras de lana
 Polvillo de mariposa
PROCEDIMIENTOS REALIZADOS EN EL LABORATORIO (VIRTUAL)

MANEJO DEL MICROSCOPIO

 Se enciende el microscopio.
 Encendemos la luz del microscopio y comprobamos que la luz esté
prendida a través del ocular.
 Se baja completamente la platina.
 Se ubica el objeto en el portaobjeto.
 Giramos el tornillo macrométrico hasta que el objetivo esté lo más cerca
posible de la preparación.
 Mirando por el ocular, giramos el tornillo para ir separando el objetivo de la
preparación hasta ver una imagen los más enfocada posible.
 Movemos el tornillo micrométrico para conseguir una imagen más
enfocada.
 Podemos observar la muestra con más aumentos, cambiando el objetivo
(mediante el revólver) y ajustando el enfoque con el tornillo micrométrico.

MÉTODOS

Se inicia la observación con el objetivo de rastreo 4x, ofrece el aumento más

pequeño, para que pueda observar un área grande de la muestra. Esto le permite
encontrar fácilmente el área deseada para una mejor observación microscópica.

Se prosigue con una observación del objetivo de baja potencia 10x. Mediante la
ampliación, el objetivo 10x ofrece un mayor enfoque sobre el área de la muestra.

Se finaliza con una observación con el objetivo de alta potencia 40x, este objetivo
utiliza el método de amplificación para ver la imagen con mayores detalles.
RESULTADOS

Hoja de reporte:
PREPARACIÓN: A la muestra de la letra e, se le
agregó una gota de agua destilada para tener una
mejor visión.

AUMENTO EMPLEADO: 10X x 4X = 40X

(Ocular) (Objetivo) TOTAL

DESCRIPCIÓN: En esta muestra de la letra e, la

observamos de manera invertida, como la vemos
en 40x podemos ver tiene unos espacios y no es
completamente unido como lo vemos normalmente

PREPARACIÓN: A esta muestra del corte fino de

corcho se le agrego 1 gota de agua destilada, para
mejor visión al momento de ver por los oculares.

AUMENTO EMPLEADO: 10X x 40X = 400X

(Ocular) (Objetivo) TOTAL

DESCRIPCIÓN: En este corte fino de corcho

observamos, que son paredes del corcho con
espacios vacíos, con tamaños no uniformes.
PREPARACIÓN: A esta muestra de polen se le
agregó una gota de agua destilada para mejor
visión

AUMENTO EMPLEADO: 10X x 10X = 100X

(Ocular) (Objetivo) TOTAL

DESCRIPCIÓN: En estos granos de polen

observamos que a 10x están de una manera
unidos, y como con ramificaciones súper pequeñas
saliendo de cada uno.

PREPARACIÓN: A la muestra de lana se le agregó

una gota de agua destilada para facilitar la
visualización de la muestra

AUMENTO EMPLEADO: 10X x 4X = 40X

(Ocular) (Objetivo) TOTAL

DESCRIPCIÓN: Al ver a través del microscopio

estas fibras de lana, podemos apreciar más su
contextura a tal nivel si encontramos alguna
bacteria, o algún espacio, o algo que nos pueda
generar una duda o algo que no se pueda ver a
simple vista.

PREPARACIÓN: A la muestra de polvillo se le

agregó una gota de agua destilada para observar
mejor en el microscopio.

AUMENTO EMPLEADO: 10X x 10X = 100X

(Ocular) (Objetivo) TOTAL

DESCRIPCIÓN: En estas muestras de polvillo

mariposa, podemos observar, como son realmente,
que son como mayas, dentro de cada una, y tiene
un color como verdoso.
 SOCIALIZACIÓN DE RESULTADOS

Al compartir resultados y observaciones con el grupo, pudimos tener un panorama

completo de lo que es el uso del microscopio y su importancia para la carrera de
biología. Este instrumento óptico es primordial para poder llevar a cabo los
procesos y experimentos que cada biólogo debería aprender, también tuvimos una
introducción a lo que es la observación de muestras y sustancias, hacer
observaciones y cálculos de aumento, basándonos en las imágenes que fueron
mostradas en la clase de laboratorio. Aunque esta práctica desafortunadamente
fue llevada a cabo en virtualidad y no se pudo tener un acercamiento más preciso
a lo que es la práctica del microscopio, por medio de las herramientas virtuales
que se nos pusieron a disposición, pudimos tener una práctica acercada a lo que
es el manejo del microscopio.

ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS

1. Indague sobre los fundamentos de los diferentes tipos de microscopios ópticos

y electrónicos.

2. ¿Por qué el microscopio electrónico tiene mayor poder de resolución que el

microscopio óptico?, ¿Qué procesos fundamentales permiten la alta resolución
de un microscopio de barrido con focal?

3. ¿En qué casos se utiliza el microscopio de inmunofluorescencia?, ¿Qué

ventajas se tiene el uso del microscopio de inmunofluorescencia?

4. Explique la trayectoria del rayo de luz a través del microscopio y ¿por qué se
invierte la imagen que observamos?

5. ¿Por qué se usa aceite de inmersión para utilizar el objetivo de 100x?

6. Explique las principales propiedades básicas del microscopio de luz: poder de

aumento, poder de penetración o profundidad de foco, poder de definición,
poder de resolución, campo visual del microscopio.

7. ¿Cómo se determina el aumento total del microscopio óptico compuesto?

8. Establezca la diferencia existente entre los objetivos secos y los objetivos de

inmersión. ¿Qué material se usa para la inmersión y cuál es su importancia?
¿Qué importancia tiene el índice de refracción del aceite de inmersión?
 Desarrollo
1. Fundamentos:

Microscopio óptico estándar: El microscopio es un instrumento que amplia

objetos en dos pasos con sistemas ópticos que enfocan la luz en un solo punto,
luego una segunda lente recoge este enfoque para colocarlo en el punto focal
delantero.

Microscopio invertido: Este microscopio usa los mismos fundamentos básicos

que el microscopio óptimo estándar, con la diferencia que, este microscopio está
montado de forma totalmente opuesta. La luz proviene de la parte de arriba de la
platina y el objetivo por la parte de debajo de esta misma, lo cual es muy útil al
momento de observar sustancias situadas en el fondo de un recipiente.

Microscopio de barrido confocal: Este microscopio permite obtener imágenes

de un único plano confocal, es decir, elimina la luz que proviene de los planos
fuera de foco. El microscopio trabaja con muestras que reflejan la luz o emiten
fluorescencia, siendo esto posible al usar puntos de luz suministrados por láser.

Microscopio de Inmunofluorescencia: Este microscopio trabaja marcando la

muestra con una sustancia fluorescente llamada fluoróforo, la cual es iluminada
con un lente de luz de energía alta.

Microscopio de contraste de fases: Es un microscopio especial para observar

muestras vivas, sin usar métodos de tinción o parecidos. La luz que pasa por
regiones de mayor índice de refracción experimenta una desviación y queda fuera
de la fase con respecto al haz principal de hondas de luz.

Microscopio de interferencia de Nomarski: Este microscopio usa una técnica

llamada óptica de Nomarski u Óptica de contraste interdiferencial, que consiste en
emplear filtros polarizantes y prismas para reducir imágenes impresionantes con
bastante tridimensionalidad.

Microscopio de campo oscuro: Este microscopio utiliza una técnica donde sólo
se toma la luz que el espécimen o muestra difracta hacia el lente y con esta
difracción crear una imagen de lo que se está viendo. Cuando no hay muestra en
la latina, la zona de observación se ve completamente oscura.

Microscopio electrónico de transmisión: Este microscopio emplea electrones

por medio de la transmisión y/o dispersión de estos mismos y así poder formar
imágenes, también se emplea la difracción de electrones para obtener información
acerca de la estructura cristalina y la emisión de rayos X característicos para
conocer la composición elemental de la muestra.
Microscopio electrónico de barrido MEB: Tiene el mismo fundamento que el
anterior, con la diferencia que este microscopio se emplea para visualizar la forma
tridimensional o topografía de una muestra.

2. Diferencia entre MEB y microscopio óptico:

Un microscopio electrónico de barrido utiliza un haz de electrones para poder

formar una imagen, los cuales tienen una alta energía y permiten escalas de
observación mucho más amplias, mientras que un microscopio óptico depende de
los rayos de luz, es decir, de los fotones que proceden desde la fuente de luz que
hay bajo el microscopio. Lo que permite las altas resoluciones en un microscopio
electrónico de barrido es que la longitud de onda que proveen los electrones es
muy corta y por ende, el poder de resolución es mayor. La longitud de onda de los
electrones en un MEB es de alrededor de 0,5 angstroms, mientras que en los
Ópticos utilizan la luz visible, cuya longitud de onda oscila entre 370 - 770 nm, el
poder de resolución teórico nunca puede superar los 200 nm.

3. Microscopio de Inmunofluorescencia:

Se puede utilizar en los estudios de proteínas en su contexto celular, estudios

bacteriológicos, virales, parasitológicos y la distribución intracelular de las
moléculas.
La microscopía de fluorescencia permite incluso a los usuarios determinar la
distribución de una sola especie de molécula, su cantidad y su ubicación dentro de
una célula. Esta técnica se ha convertido en el fenómeno físico más importante en
la medicina y la biología modernas.
Tras un lento comienzo, la posibilidad de tinciones específicas con fluorescencia
impulsó esta aplicación a principios de los años 30 del siglo pasado. Hacia 1950,
tuvo lugar una segunda fase con la invención del marcaje de inmunofluorescencia.

4. El haz luminoso que procede de la lámpara pasa a través del diafragma, el cual
regula la cantidad de luz que pasa y luego va hacia el condensador que
concentra la luz en la preparación que se va a observar. El haz de luz penetra
en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar al ocular, donde es captado por el
ojo del observador. Las imágenes se perciben al revés porque el microscopio
posee un lente (la lente ocular) que proyecta una imagen virtual, es decir, una
imagen reflejada o refractada por los rayos de luz, por lo tanto también se ve
aumentada.

5. Razones de uso para el objetivo 100x:

Este aceite se usa por su alto índice refractivo, es decir, que tiene una capacidad
muy alta de hacer que un haz de luz se mueva lentamente en su medio (El aceite),
lo cual permite que las muestras se vean con una mejor claridad, esto también
ayuda a proteger el lente para evitar rayones.
6. Propiedades de un microscopio:

Poder de aumento, es la capacidad de un microscopio de hacer imágenes

virtuales, aumentadas de una muestra. Indica en qué medida este puede
aumentar la imagen de dicha muestra.
Poder de penetración o profundidad de foco, es la capacidad que tiene el
microscopio de poder observar dos o más planos simultáneamente
Poder de definición, Es la capacidad que tiene el microscopio de definir los
bordes o límites con respecto al fondo que lo rodea.
Poder de resolución, Es la capacidad que tiene el microscopio de observar y
percibir la separación mínima que hay en los puntos de un objetos.
Campo visual del microscopio, Es el área circular que se observa al mirar a
través del microscopio. Es una propiedad geométrica que se da porque los lentes
de aumento son circulares y el circulo es la mayor área de visibilidad posible.

7. Determinar el aumento:
Para calcular el aumento total se multiplica la ampliación del ocular del
microscopio por la ampliación del objetivo. La ampliación total de un microscopio
compuesto normal es de 10x, y objetivos de 4x, 10x, 40x 100x, serán 40x, 100x,
400x, y 1000x en función de los objetivos utilizados.

8. Diferencias de objetivos:
La principal diferencia que se puede obtener de ambos es que, en el objetivo seco
solo se encuentra el aire como principal intermediario, mientras que en el objetivo
de inmersión utiliza aceite de inmersión de intermediario.
Los lentes de inmersión tienen una resolución mucho más amplia que la de los
lentes secos y permiten ampliar muestras hasta mil veces.

Para la inmersión se usa un aceite llamado aceite de inmersión, el cual tiene un

índice muy alto de refracción. Este aceite muy importante para aplicaciones que
necesiten un gran poder de aumento y alta resolución, puesto que es un muy buen
medio para que la luz tenga menos incidencia de refracción.

El índice de refracción es muy importante para evitar que la luz proveniente tenga
que pasar por el aire y así tener menos refracción de luz incidente. Esto se traduce
como un aumento significativo en la calidad de imagen.
 CONCLUSION
Con este proyecto de investigación para ver a través del microscopio tenemos la
conclusión que, no todo lo que vemos a simple vista está compuesto como tal,
pudimos ver a través de objetivos que tenían medidas de 4x, 10x, 40x y 100x.

También pudimos ver incluso los espacios que pudieron dejar células en su debido
tiempo de vida en un material que es utilizado con regularidad.

Y por último, gracias a las actividades complementarias, pudimos aprender y tener

conocimiento más a fin de las clases de microscopios que existen, cuál es la
función de cada uno de estos y en qué ámbitos se usan.

Referencias Bibliográficas

J.S Raisman, Ana M. Gonzales. (2013) Microscopía electrónica: Barrido y

Transmisión. http://www.biologia.edu.ar/microscopia/meb.htm

Universidad de Arizona (28 de Octubre, 1998). El proyecto Biológico.

http://www.biologia.arizona.edu/cell/tutor/cells/cells2.html

Leyca Mycrosystems (2021) Microscopía de fluorescencia. https://www.leica-

microsystems.com/es/aplicaciones/ciencias-biologicas/fluorescencia/

Guías de laboratorio de Biología General

https://www.lifeder.com/partes-microscopio-optico/

https://kitlab.exa.unicen.edu.ar/microscopio.html

https://slideplayer.es/slide/3097686/

http://www.az-microscope.on.ca/main.html (historia del microscopio).

http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/tutorials/cells/cells2.html (microscopia)

http://www.cbc.umn.edu/~mwd/cell_www/cell.html (curso biología celular).

http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?index-1.html (manual biología

celular).

http://www.ufrj.br/LabImgBio/banco.htm (cortes histológicos).

http://canal.unad.edu.co/laboratorio/index/main.html