MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
UNIVERSIDAD CATOLICA DE SANTA MARIA
FACULTAD DE ENFERMERIA
ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERIA
“TRABAJO GRUPAL CLASE 06”
CURSO : MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
PRACTICA
DOCENTE : MARIELLA ISABEL GUERRERO
BENAVIDES
INTEGRANTES :
ARRIBASPLATA CERQUIN TANIA
ANCO SEQUEIROS NICOLE DARLYN
BELLIDO DIAZ FRANCESCA LORENA
CAMAQUE APAZA VALERIA NICKOLL
CHALCO SALINAS VIVIAN PAOLA
NUÑEZ ORTIZ ALISSON GRETHE
MOLLO SULLA NOELY
SAENZ MENDOZA DIANA
TANTALEAN DAVILA ANDREA
UVA ANCCO NIKOLE FERNANDA
II SEMESTRE
2020
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
CUESTIONARIO
1. INDIQUE QUE COLORES PUEDEN PRESENTAR LAS MUESTRAS DE
ORINA PATOLÓGICAS Y RELACIONE CON LA PATOLOGÍA POSIBLE.
COLOR POSIBLE PATOLOGIA
DE LA
MUESTRA
Amarillo Orina más concentrada, existe bilirrubina directa
intenso o urobilina
Hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria, porfirinas (por
Rojizo
firias) o síndrome carcinoide.
Naranja Pigmentos biliares, bilirrubina, pirimidina.
Metahemoglobinemia, hematina ácida, mioglobina,
Marrón
pigmentos biliares.
Melanina, alcaptonuria (ácido
Pardo o homogentísico), hematuria, intoxicación por ácido
negro fénico y sus derivados, fiebre hemoglobinúrica
del paludismo.
Intoxicación por fenol, infección por especies
Azul de Pseudomonas, trastornos de absorción
verdoso de triptofano (usualmente
congénitos), metahemoglobinuria, biliverdina.
Blanco-
Quiluria, piuria intensa, hiperoxaluria.
lechosa
Incolora o
transparent Poliuria o diuréticos.
e
Turbia Piuria, fosfaturias, fecaluria.
2. INDIQUE QUE CILINDROS PUEDO ENCONTRAR EN EL SEDIMENTO
URINARIO.
Cilindro hialino. Son de morfología tubular con puntas redondeadas,
alargados, transparentes y poco birrefringentes. Son consecuencia de
un aumento en la permeabilidad del glomérulo, lo cual permite el paso
de ciertas micro proteínas las cuales se unen a la proteína de Tamm-
Horsfall adquiriendo la morfología antes mencionada.
Cilindro granuloso. Es un cilindro hialino con diferentes grados de
saturación por material granular de origen proteico y tamaño uniforme
distribuido a lo largo del cilindro. Se pueden observan en pielonefritis,
infección viral, intoxicación crónica por plomo, etc.
Cilindro eritrocitario. Su aspecto es la de un cilindro hialino con
abundantes eritrocitos en su interior y es indicador de glomerulonefritis.
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Cilindro leucocitario. Cilindro hialino con la presencia de abundantes
leucocitos. Es indicador de pielonefritis.
Cilindro epitelial. Se observa un cilindro hialino cuyo contenido interno
es de células epiteliales provenientes de los túbulos renales. Se
presentan en nefrosis, eclampsia, amiloidosis, necrosis tubular aguda y
en rechazo del trasplante renal. Cuando se observa la degeneración del
material celular contenido dentro del cilindro se le conoce como cilindro
granular o de granulación gruesa.
Cilindro céreo. Se forma como consecuencia de la falta de excreción de
cilindros, lo cual permite la continua degeneración celular. Su aspecto
asemeja un cilindro hialino con invaginaciones internas o muescas. Su
presencia índica insuficiencia renal crónica.
3. ¿QUÉ SIGNIFICA TENER PH ÁCIDO EN UNA MUESTRA DE ORINA?
Reflejan una acidosis metabólica manifiesta y son sinónimo de
enfermedad.
4. INVESTIGUE QUE COMPOSICIÓN Y FUNDAMENTO TIENE EL AGAR
CLED, AGAR EMB Y EL AGAR MAC CONKEY
Agar CLED
Composición
Peptona de gelatina 4,0 g
Extracto de carne 3,0 g
Peptona de caseína 4,0 g
Lactosa 10,0 g
L-Cistina 0,128 g
Azul de bromotimol 0,02 g
Agar-Agar 15,0 g
(Fórmula por litro)
Fundamento
El medio de cultivo CLED posee como fuente de energía extracto de
carne, hidrolizado pancreático de caseína e hidrolizado de gelatina. Los
mismos proporcionan los nutrientes para el desarrollo de bacterias poco
exigentes.
También contiene cistina, un aminoácido que permite el crecimiento de
coliformes, distinguibles por su pequeño tamaño.
Así mismo, contiene como carbohidrato fermentable la lactosa, por este
motivo este medio es diferencial; pudiéndose distinguir las bacterias
fermentadoras de las no fermentadoras de lactosa.
Las bacterias fermentadoras hacen virar el pH del medio por la
producción de ácidos, desarrollando colonias de color amarillo, mientras
que las bacterias no fermentadoras no generan cambios en el medio, por
tanto toman la coloración del agar original, color verde.
La reacción de fermentación es revelada gracias a la presencia del
indicador de pH, que en este medio es el azul de bromotimol.
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Por otra parte, la baja concentración de electrolitos del medio inhibe el
típico crecimiento invasivo del género Proteus, denominado efecto
swarming. Esto genera una ventaja con respecto a otros medios, ya que
permite el contaje de las UFC, incluyendo si está presente el género
Proteus.
Sin embargo, la baja concentración de electrolitos inhibe el crecimiento
de algunas especies del género Shigella, siendo esta una desventaja
con respecto a otros medios.
AGAR EMB
Composición
Fórmula* por litro de agua destilada
Digerido pancreático de gelatina 10,0 g
Lactosa 5,0
Sacarosa 5,0
Fosfato dipotásico 2,0
Agar 13,5
Eosina Y 0,4
Azul de metileno 0,065
Fundamento
Selectivo
El agar EMB es sutilmente selectivo porque contiene los colorantes
anilínicos (eosina y azul de metileno), los cuales actúan como
inhibidores, impidiendo el crecimiento de la mayoría de las bacterias
Gram positivas y de algunos bacilos Gram negativos exigentes.
Sin embargo, este agar tiene el inconveniente de que algunas bacterias
Gram positivas pueden resistir la presencia de las sustancias inhibidoras
y crecer como pequeñas colonias puntiformes incoloras, tal como el
Enterococcus faecalis y algunos Staphylococcus.
También pueden crecer ciertas levaduras, como el complejo Candida
albicans, que dará colonias rosadas muy pequeñas. Inclusive se pueden
desarrollar clamidosporas a partir de esta levadura si la muestra es
sembrada por profundidad.
AGAR Mac Conkey
Composición
Peptona pancreática de gelatina 17,0 g
Triptona 1,5 g
Peptona de carne 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Sales biliares 1,5 g
Cloruro sódico 5,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar agar 13,5 g
(Fórmula por litro)
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Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes ne- cesarios
para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los
agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva.
5. INVESTIGUE EN INTERNET LOS SIGUIENTES MEDIOS DE CULTIVO DE
LABORATORIO BRITANIA TSI ( THREE SUGAR IRON AGAR) / LIA
(LISINE IRON AGAR) / CITRATO DE SIMMONS / UREA / SIM
1.TSI AGAR (Triple Sugar Iron Agar)
(Agar triple azúcar hierro), cuando se utiliza como medio en placa, se
emplea para la diferenciación de Enterobacteriaceae, en especial
Salmonella de otras bacterias entéricas.
USO
Medio universalmente empleado para la diferenciación de ente-
robacterias, en base a la fermentación de los hidratos de carbono
glucosa, lactosa y sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.
FUNDAMENTO
Hajna desarrolló la fórmula de agar TSI añadiendo sacarosa a la
fórmula de azúcar doble (glucosa y lactosa) de agar Kligler hierro1,2.
El agar triple azúcar hierro contiene tres carbohidratos (glucosa, lactosa
y sacarosa). Cuando dichos carbohidratos se fermentan, la producción
resultante de ácido es detectada por el indicador rojo fenol.
Se producen cambios de color: amarillo para la producción de ácido y
rojo para la alcalinización. Dado que la lactosa y la sacarosa se
encuentran presentes en concentraciones mucho más elevadas que la
glucosa, la formación de ácido en la base del tubo se debe a dichos
azúcares, mientras que la formación de ácido a partir de la glucosa es
suprimida por la rápida oxidación de una pequeña cantidad de ácido en
el área inclinada del tubo, lo que genera una reacción de pH neutro o
alcalino cuando se fermenta sólo glucosa.
La sacarosa añadida permite la exclusión de determinados organismos
coliformes y las especies Proteus que pueden atacar la sacarosa, pero
no la lactosa, en un período de incubación de 24 – 48 h. Con un pH
neutro o alcalino, el ácido sulfhídrico (producido por el tiosulfato sódico)
reacciona con la sal de amonio ferroso, lo que produce sulfuro de hierro
de color negro.
El cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico del medio.
La aplicación original de la fórmula de TSI es como medio en tubo, con
una base de tubo y un área inclinada. Permite la diferenciación de los
organismos fermentadores de glucosa, lactosa y/o sacarosa, además
de la detección de la producción de sulfuro de hidrógeno.
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Cuando se utiliza como medio en placa, las reacciones observadas en
la capa de agar en la placa se limitan a la formación de productos
alcalinos (producidos a partir de las peptonas del medio, si no se
fermentan la glucosa, lactosa y/o sacarosa) o los productos ácidos de
la lactosa y/o sacarosa que constituyen los azúcares más importantes
del medio.
Además, se produce sulfuro de hidrógeno si no se fermenta ningún
azúcar hasta formar productos ácidos, dado que la formación de sulfuro
de hidrógeno requiere un pH de neutro a alcalino.
La mayoría de las cepas de Proteus, de las que se sabe que producen
sufuro de hidrógeno en pH neutro o alcalino, acidifica el medio, dado
que fermentan sacarosa y no presentarán color negro en este medio,
mientras que las cepas de Salmonella no fermentadoras de sacarosa ni
de lactosa producen colonias de color negro.
FÓRMULA (en gramos por litro)
EXTRACTO DE CARNE..........3.0
PLURIPEPTONA....................20.0
CLORURO DE SODIO..........5.0
LACTOSA.............................10.0
SACAROSA............................10.0
GLUCOSA..............................1.0
SULFATO DE HIERRO Y AMONIO 0.2
TIOSULFATO DE SODIO. . 0.2
ROJO DE FENOL............0.025
AGAR....................................13.0
pH FINAL: 7.3 ± 0.
INSTRUCCIONES
Suspender 62,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada.
Dejar reposar 5 minutos.
Mezclar bien, calentar con agitación frecuente y hervir 1 o 2 minutos
hasta disolución total.
Distribuir en tubos, llenandolos con un volumen que ocupe hasta la
tercera parte de los mismos.
Esterilizar en autoclave a 121°C por 15 minutos.
Enfriar y dejar solidificar el agar en pico de flauta profundo.
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CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
deslizamiento.Medio de cultivo preparado: color rojo.
ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
PROCEDIMIENTO
1. Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio
con aguja de inoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo
y ex- tendiendo sobre la superficie del mismo.
2. Incubación
Incubar las placas en condiciones aerobias a una temperatura entre 35
y 37 °C, por un período de 18 a 24 horas.
Incluye un medio no selectivo tal como el agar Columbia con sangre de
carneo al 5% como referencia de crecimiento
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
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Diferentes cultivos de
microorganismos en agar
TSI:(de izquierda a
derecha)
E. coli, Shigella
flexneri, Salmonella Typhim
urium, P. aeruginosa
LIMITACIONES
Los resultados de la prueba deber ser leídos luego de 18 a 24 horas
de incubación.
Si la lectura se efectuara a tiempos menores pueden existir falsos
positivos por la presencia de acidez o la acidez generada no sea
suficiente para producir el viraje del indicador rojo de fenol del color
rojo al amarillo.
Si se lee luego de 24 horas se pueden obtener resultados falsos
negativos por consumo de peptonas durante el crecimiento de los
microorganismos con la consecuente alcalinidad del medio de cultivo.
Si la generación de SH2 es elevada puede llevar al ennegrecimiento
de todo el fondo del medio de cultivo y dificultar la visualización de la
acidez producida
Para la siembra utilizar aguja de inoculación. No utilizar ansas de
inoculación ya que pueden llevar a resultados falsos positivos de
producción de gas por alteraciones mecánicas del medio de cultivo.
PRECAUCIONES
Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado.
No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro,
así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y
manipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
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Las características del producto pueden alterarse si no se conserva
apropiadamente.
Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son:
Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificará el medio
haciendo virar a amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras
que, si no es fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de
color rojo.
Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el
medio en su superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que, si
no lo es, la superficie del medio continuará de color rojo.
Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de
las sales de hierro), se presentará un ennegrecimiento del tubo. La
producción de sulfhídrico y el consiguiente ennegrecimiento pueden
impedir ver la fermentación de la glucosa (fondo amarillo), pero este
hecho implica directamente que la bacteria es fermentadora de
glucosa.
Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la
bacteria es productora de gas.
2.AGAR LIA (Lisine Iron Agar)
Uso
Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente
Salmonella spp., basado en la decarboxilación y desaminación de la lisina
y en la producción de ácido sulfhídrico
FUNDAMENTO
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los
nutrientes para el desarrollo bacteriano.
La glucosa es el hidrato de carbono fermentable y la lisina es el
sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa
y deaminasa
El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de sodio son los indicadores
de la producción de ácido sulfhídrico.
El purpura de bromocresol, es el indicador de pH (su color es amarillo
a pH igual o menor a 5.2 y violeta a pH igual o mayor a 6.8) y el agar
es el agente solidificante.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el medio y
provocan el viraje del color púrpura al amarillo.
El ambiente ácido favorece la actividad enzimática decarboxilasa y se
metaboliza la lisina a cadaverina elevando el pH del medio de cultivo y
tornándolo al color púrpura o violeta.
Los microorganismos fermentadores de glucosa que no tienen ac- tividad
lisina decarboxilasa, producen un viraje de la totalidad del medio de
cultivo al color amarillo.
A las 24 horas de incubación se observa el fondo del tubo color
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amarillo y la superficie de color vio- leta debido al consumo de las
peptonas que producen alcalinidad. La generación de sulfuro de
hidrógeno, se visualiza por el ennegre- cimiento del medio debido a la
formación de sulfuro de hierro.
Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas de
Morganella, desaminan la lisina. Esto produce un ácido alfacetocarbónico,
el cual con la sal de hierro y bajo la influencia del oxígeno forma un
color rojizo en la superficie del medio
PREPARACIÓN
Disolver 29,5 gramos en 1 litro de agua bidestilada.
Calentar, agitando, hasta ebullición, para la total homogeneización.
Autoclavar a 121 ºC durante 10 minutos.
Preparar tubos inclinados con pico corto.
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su
laboratorio siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin
usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando
adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de
caducidad teórica de la etiqueta,…)
DESHIDRATADO: Polvo fino, Beige
PREPARADO: Estéril, Púrpura
CONTROL DE CRECIMIENTO
24-48 h a 37°C aproximadamente
Escherichia coli MKTA 25922, P alcalina (azul), B alcalina (púrpura),
H2S .
Salmonella abony MKTN 6017, P alcalina (azul), B alcalina
(púrpura), H2S +(ennegrecimiento).
Shigella flexneri MKTA 12022, P alcalina (azul), B ácida amarilla,
H2S .
P = Pendiente, B = Base.
PRESENTACION: MEDIO DESHIDRATADO
Medio diferencial para Enterobacterias, recomendable para la
identificación de las Salmonella y las Arizona que en Kligler Iron Agar
pueden obtenerse como falsos negativos. Por ello es necesario utilizar
en paralelo ambos medios.
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SIEMBRA
Sembrar en estría y en picadura la colonia.
Incubar a 35-37 ºC aproximadamente, durante 24 horas.
INTERPRETACIÓN
Los microorganismos que descarboxilan la lisina provocan una fuerte
alcalinización del medio, que se traduce en un viraje a azul púrpura.
Los que no, hacen virar el fondo a amarillo, por acidificación. E. coli,
Shigella, Salmonella, Citrobacter, Edwarsiella, Enterobacter
aerogenes y Hafnia provocan viraje del pico a azul.
Proteus hace virar el pico a rojo (P. morganii a veces a azul).
Shigella, Salmonella paratyphi A, Citrobacter, Enterobacter cloacae y
Proteus viran el fondo a amarillo.
Salmonella typhi y Edwarsiella viran el fondo a azul.
El resto reacciona variable.
ESPECIE Pendiente Fondo SH2
Salmonella Alcalina (azul) Alcalino (púrpura) +
Proteus Roja Acido (amarillo) –
Providencia Roja Acido (amarillo) –
Citrobacter Alcalina (azul) Acido (amarillo) +
Escherichia Alcalina(azul) Neutro –
Shigella Alcalina (azul) Acido (amarillo) –
Klebsiella Alcalina (azul) Alcalino (púrpura) –
Edwarsiella Alcalina Alcalino (púrpura) +
Enterobacter cloacae Alcalina Acido –
Enterobacter aerogenes Alcalina Alcalino (púrpura) –
Hafnia Alcalina Alcalino –
Serratia Alcalina Alcalino –
3.CITRATO DE SIMMONS
Medio de cultivo para la diferenciación de Enterobacterias.
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USO AL QUE ESTA DESTINADO
Se lo utiliza en una diferenciación de las Enterobacterias basado en el
hecho de la utilización o no del citrato como única fuente de carbono y
del amonio como única fuente de nitrógeno. Las sales de amonio se
desdoblan en amoníaco con la consiguiente alcalinidad. El medio al ser
alcalinizado cambia de color del verde al azul, por acción del azul de
bromotimol
PREPARACION
Medio Deshidratado Suspender 21,3 gramos del polvo en 1 litro de
agua destilada.
Dejar 5 a 10 minutos a temperatura ambiente.
Llevar a ebullición durante unos minutos agitando de vez en cuando.
Esterilizar 15 minutos a 121ºC.
Dispensar en tubos estériles y dejar enfriar en posición inclinada.
Medio Preparado Colocar los frascos que se van a usar en un
recipiente con agua que los cubra, calentar a ebullición hasta la
completa licuación, agitar firmemente para homogeneizar, abrir
sacando el precinto de aluminio y distribuir en tubos estériles, dejar
enfriar en posición inclinada.
PROCEDIMIENTO
Sembrado
Partiendo de un cultivo puro, del microorganismo en estudio, tomar una
colonia, bien aislada, y estriar sobre la superficie inclinada del tubo.
Incubación
Colocar en estufa de cultivo a 35-37 ºC durante 24-48 hs, en
aerobiosis.
Hay microorganismos que requieren hasta 6 días de incubación.
EXPRESION DE RESULTADOS
Positivo: se observa crecimiento en el medio, con un intenso color azul.
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Negativo: se observa ausencia o muy poco crecimiento y el medio
permanece de color verde.
4.UREA / SIM
MEDIO DE SIM:
Este es un medio usado para la diferenciación de bacilos entéricos con
base a la producción de ácido sulfhídrico, indol y la movilidad.
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FUNDAMENTO:
Las bacterias reductoras de sulfato producen sulfhídrico el cual
reacciona con el amonio ferroso y se produce un sulfato ferroso (H2S)
que se forma como un precipitado oscuro a lo largo de la línea de
inoculación.
El medio contiene caseína rica en triptona la cual es usada por ciertos
microorganismos quienes finalmente producen indol, el cual es
revelado por reactivos como el de KovacS.
La movilidad es visible ya que es un medio semisólido y siendo
positivo el crecimiento se ve por fuera de la línea de siembra, en forma
de turbidez alrededor del canal de siembra.
La no mobilidad se caracteriza por el crecimiento exclusivamente a lo
largo de dicho canal. La demostración de indol se efectúa mediante el
reactivo según Kovacs. La formación de indol da lugar a una coloración
rojo-púrpura de la capa de reactivo.
COMPOSICIÓN DEL MEDIO EN G/L:
Triptona 20.0
Peptona 6.1
Sulfato amónico ferroso 0.2 Tiosulfato sódico 0.2
Agar-agar 3.5
pH final: 7.3 +- 0.2
PROCEDIMIENTO:
Tomar una colonia a inocular e introducir el asa recta en el tubo (en el
centro) hasta aproximadamente 2/3 de la profundidad del medio.
El medio se incuba a 35 °C 18-24 horas y se observa para ver la
movilidad, la producción de sulfhídrico y finalmente la producción de
indol a partir del triptofano. –
Prueba para producción de indol: se adicionan 3 o 4 gotas (200 uL) de
reactivo de Kovacs al tubo y se observa la producción de un anillo de
color rojo (positivo).
Interpretación:
Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende más
allá de la línea de siembra (3).
Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de
siembra (4).
Cepas H2S positivas: ennegrecimiento a lo largo de la línea de
siembra o en todo el medio(5).
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Cepas H2S negativas: el medio permanece sin cambio de color (1,
2, 3, 4).
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el
reactivo de Kovac´s o de Erlich (2). Cepas indol negativas: sin
cambio de color (1).
LIMITACIONES
En las bacterias aerobias estrictas, que sólo crecen en superficie, la
movilidad puede ser difícil de observar.
Algunas bacterias productoras de melanina como M. morganii, pueden
dar un color parduzco, que no debe confundirse con el color negro
debido a la producción de ácido sulfhídrico.
6. DIGA LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS QUE SE COLOCAN EN UN
ANTIBIOGRAMA PARA INFECCIONES URINARIAS.
Antibiograma "reducido" para cepas de Escherichia coli, Proteus
mirabilis y Klebsiella en infección urinaria no complicada. Consta de
un máximo de 7 antimicrobianos cabezas de serie. Resistencia a
cefazolina, ácido pipemídico o gentamicina implica la ampliación del
mismo.
Antibiograma "ampliado" para otros bacilos gramnegativos (excluidas
Pseudomonas spp., y Acinetobacter spp.), cepas con resistencias del
grupo anterior y en infecciones complicadas, pielonefritis y sepsis de
origen urológico. Se ha sugerido formalmente que para probar la
actividad sobre gramnegativos de todas las fluoquinolonas actuales
basta la inclusión de norfloxacina y ciprofloxacina, pudiéndose
extrapolar los resultados para el resto de la serie, considerando, sobre
todo para gramnegativos, la resistencia cruzada entre ellas.
Antibiograma "selectivo" para Pseudomonas aeruginosa y
Acinetobacter.
Antibiograma "selectivo" para grampositivos.
Antibiograma "selectivo" para prostatitis.
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7. ¿QUÉ OTROS MICROOGANISMOS PUEDEN PROVOCAR INFECCIONES
URINARIAS?
Las infecciones de las vías urinarias más habituales son las producidas por
bacterias (85 por ciento de los casos), aunque también pueden presentarse
a causa de virus, hongos o parásitos. De muchas de ellas es responsable la
bacteria llamada Escherichia coli, que normalmente vive en el intestino.
También hay otras bacterias que pueden causar infección urinaria, como las
denominadas Chlamydia y Micoplasma; éstas, a diferencia de la anterior,
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pueden transmitirse sexualmente, de manera que, en dicho caso, ambos
miembros de la pareja deben someterse a tratamiento.
Virus: las infecciones por el virus del herpes simple tipo 2 (VHS-2)
afectan al pene en los varones y pueden afectar a la vulva, al
perineo, a las nalgas, al cuello del útero o a la vagina en las mujeres.
Si afecta a la uretra, la micción puede ser dolorosa y dificultarse el
vaciado de la vejiga.
Hongos: las infecciones por hongos de las vías urinarias están
provocadas principalmente por Candida (levadura que causa
candidiasis) y se producen sobre todo en personas con una sonda
vesical. En casos raros, otros tipo de hongos, incluyendo los que
provocan blastomicosis (Blastomyces) o coccidioidomicosis
(Coccidioides), pueden también infectar las vías urinarias. Con
frecuencia, los hongos y las bacterias infectan a los riñones al mismo
tiempo.
Parásitos: Un cierto número de parásitos, incluyendo las lombrices,
pueden provocar infecciones de las vías urinarias. El paludismo, una
enfermedad causada por parásitos protozoarios transportados por los
mosquitos, puede obstruir los pequeños vasos sanguíneos de los
riñones o lesionar rápidamente los glóbulos rojos (hemólisis),
provocando insuficiencia renal aguda. La tricomoniasis, causada
también por un protozoo, es una enfermedad transmitida por vía
sexual que puede producir un copioso flujo espumoso de color
amarillo verdoso por la vagina. La vejiga se infesta muy rara vez. La
tricomoniasis en los varones generalmente no produce síntomas,
aunque puede provocar la inflamación de la próstata (prostatitis).
La esquistosomiasis, una infección provocada por lombrices, puede
afectar a los riñones, los uréteres y la vejiga y es una causa
frecuente de insuficiencia renal grave entre las personas que viven
en Egipto y Brasil. La infección causa infecciones persistentes de la
vejiga que pueden finalmente terminar en cáncer. La filariasis, una
infección provocada por una lombriz intestinal, obstruye los vasos
linfáticos, provocando la presencia de linfa en la orina (quiluria). La
filariasis provoca una enorme hinchazón de los tejidos (elefantiasis),
que puede incluir el escroto y las extremidades inferiores.
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8. INVESTIGAR EN INTERNET Y EXPLICAR 2 TRABAJOS DE
INVESTIGACIÓN DE ITU PROVOCADAS POR E. COLI
INVESTIGACION N°1
“FACTORES ASOCIADOS A LA PRESENTACION DE INFECCIONES
URINARIAS POR Escherichia coli PRODUCTORAS DE
BETALACTAMASA DE ESPECTRO EXTENDIDO EN EL AÑO 2016, EN
EL HOSPITAL CAYETANO HEREDIA, LIMAPERÚ.”
RESUMEN
Objetivos. Estudiar los factores asociados al desarrollo de infecciones
del tracto urinario causadas por Escherichia coli productora de
betalactamasas de espectro extendido (BLEE) en pacientes del Hospital
Cayetano Heredia (HCH) en el año 2016. Materiales y Métodos. Se llevó
a cabo un estudio caso y control, con 150 casos y 150 controles,
definiéndose como caso al paciente con urocultivo positivo para E. coli
BLEE y como control al paciente con urocultivo positivo para E. coli no
BLEE. Se realizó un análisis bivariado, y una posterior regresión
logística binaria para aquellos factores que resultaron significativos en el
análisis bivariado. Resultados. Después de la regresión logística binaria,
los factores asociados a la presentación de infecciones urinarias por E.
coli BLEE encontrados en el estudio fueron sexo masculino (OR 5,13 -
IC 95% 2,37 – 11,07), edad mayor a 45 años (OR 2,65 - IC 95% 1,61 –
4,38) y hospitalización previa (OR 2,57 - IC 95% 1,39 – 4,75).
Conclusiones. Los pacientes varones, mayores de 45 años y con
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antecedente de hospitalización en el último año estuvieron más
propensos a presentar infecciones urinarias por E. coli BLEE, lo cual se
debe tomar en cuenta para el manejo empírico de esta clase de
pacientes.
MATERIAL Y MÉTODO
Se realizó un estudio retrospectivo de casos y controles en el HCH. La
población de estudio fueron pacientes con urocultivo positivo a E. coli
procesado durante los meses de enero a diciembre del 2016 en dicho
hospital. Los casos se definieron como pacientes con urocultivo positivo
para E. coli BLEE, mientras que los controles se definieron como
pacientes con urocultivo positivo para E. coli no BLEE. Se consideraron
E. coli BLEE positivo a los urocultivos que presentaron una diferencia
mayor o igual a 5 milímetros en los halos de inhibición entre los discos
de cefotaxima y cefotaxima más ácido clavulánico o de ceftazidima y
ceftazidima más ácido clavulánico, estandarizada por el CLSI M100-S26
(34). La calidad del laboratorio de microbiología del HCH contaba con
aprobación por el Ministerio de Salud, siendo corroborado al momento
de registrar los datos sobre resistencia antibiótica para los casos, los
cuales presentaron en su totalidad resistencia a cefalosporinas. Los
criterios de inclusión fueron: pacientes de edad de 18 años a más, que
contaran con historia clínica en el HCH y que tuvieran urocultivo positivo
registrado en la ficha de urocultivo perteneciente al Laboratorio de
Microbiología del HCH. Se excluyó a los pacientes que no contaran con
estos requisitos.
RESULTADOS
Se recolectaron en total 300 urocultivos positivos para Escherichia coli
en el Hospital Cayetano Heredia según lo expuesto en Materiales y
Métodos. Se obtuvo 150 urocultivos positivos para E. coli BLEE (casos)
y 150 urocultivos positivos para E. coli no BLEE (controles).
En este análisis, las variables que adquirieron significancia fueron: sexo
masculino, edad mayor a 45 años, hospitalización previa, procedimiento
urológico previo, hiperplasia benigna de próstata, uso de dispositivo
urológico, leucocituria en la muestra del sedimento urinario, resistencia a
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
los siguientes fármacos: ampicilina, ciprofloxacino y gentamicina. Las
variables restantes no mostraron significancia estadística.
El modelo final mostró que el sexo masculino, la edad mayor a 45 años y
la existencia de al menos una hospitalización previa fueron las
definitivas. Este modelo no incluyó las variables de resistencia antibiótica
ni los hallazgos del sedimento de orina por cuanto su estructura no
estuvo definida como variables dicotómicas y el objetivo esencial del
estudio fueron las variables dependientes de la persona y el urocultivo.
Conclusiones. Los pacientes varones, mayores de 45 años y con
antecedente de hospitalización en el último año estuvieron más
propensos a presentar infecciones urinarias por E. coli BLEE, lo cual se
debe tomar en cuenta para el manejo empírico de esta clase de
pacientes.
CONCLUSIONES
Nuestro estudio concluye que el sexo masculino, la edad mayor a 45
años y la hospitalización previa son factores asociados a infecciones
urinarias por E. coli BLEE en nuestra población. Este resultado permite
sugerir considerar el riesgo al que se ven expuestos los varones de edad
avanzada durante su hospitalización; y en lo posible, disminuir ese
riesgo a través de medidas como un menor tiempo de hospitalización, un
menor número de procedimientos urológicos y una menor exposición a
antibióticos. Finalmente, debido al haberse incluido varones en la
muestra de estudio, estos pueden haber enmascarado asociaciones
relevantes para el género femenino, y siendo este género el más
afectado por infecciones del tracto urinario, se sugiere realizar un estudio
caso-control con el objetivo de estudiar los factores asociados a
infecciones urinarias por E.coli BLEE en mujeres.
INVESTIGACION N°2
“FACTORES ASOCIADOS A LA PRESENTACION DE INFECCIONES
URINARIAS POR Escherichia coli EN LA COMUNIDAD DE
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
PACIENTES AMBULATORIOS DEL HOSÌTAL NACIONAL DANIEL
ALCIDES CARRION CALLAO – PERU-“
RESUMEN
En el presente estudio encontramos a Escherichia coli como el agente
causal más frecuente de las I.T.U. extrahospitalarias
MATERIALES Y METODOS:
Se realizó un estudio transversal analítico; se seleccionó la población
muestral de los pacientes atendidos por el Servicio de Emergencia ó
por Consulta Externa con diagnostico de I.T.U. según los criterios de
inclusión y exclusión previamente establecidos, se recolectaron los
datos en una ficha elaborada para dicho fin (Anexo 1), se tomó la
muestra del chorro medio para Urocultivo, a los positivos se les realizó
el antibiograma por el método de disco difusión estandarizado de
Bauer y Kirby, se clasificó en sensible, intermedio ó resistente por el halo
de inhibición según criterios de la NCCLS, los resultados se
sistematizaron en una base de datos computarizada, y se analizaron en
el programa estadístico EPI INFO 6.04 OMS/CDC.
RESULTADOS:
Se atendieron en Emergencia 3217 pacientes, se diagnosticó I.T.U. a
117 (3.6%), seleccionados según criterios 41 (35%), fueron positivos 23
urocultivos (56%); por Consulta Externa se recopilaron 113 urocultivos,
fueron positivos 40 (35.4%). De los 63 Urocultivos positivos, 84%
provenían del sexo femenino, Escherichia coli fue el germen más aislado
63.5%.
CONCLUSIONES:
El sexo femenino es el más afectado por las I.T.U.; los casos en varones
aumentan con la edad; Escherichia coli es el germen causal más
frecuente de I.T.U. Extra hospitalaria.
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
9. INVESTIGAR EN INTERNET Y EXPLICAR 2 TRABAJOS DE
INVESTIGACIÓN DE ITU PROVOCADAS POR STAPHYLOCOCCUS
SAPROPHYTICUS
INVESTIGACION N° 1
Las infecciones del tracto urinario (ITU), luego de las respiratorias, son
las más frecuentes en el ámbito hospitalario y comunidad general; son
definidas por los Centers for Disease Control and Prevention (CDC)
como un proceso inflamatorio que implica la invasión y multiplicación de
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
microorganismos en el tracto urinario, con presentación de disuria,
tenesmo, dolor supra púbico, fiebre y urgencia miccional, aunque es muy
común su forma asintomática.
Estas infecciones se clasifican con base en diferentes criterios, así:
según su localización pueden ser de vías urinarias altas o bajas, por
epidemiología se dividen en adquiridas en la comunidad o asociadas al
cuidado de la salud, por los factores asociados y gravedad, en
complicadas o no complicadas, y por la presentación clínica, en
sintomática o sintomática.
Las ITU se presentan en todos los grupos etarios; en la primera infancia
tienen un mayor predominio en los hombres frente a las mujeres, hecho
que se atribuye a la presencia de fimosis en los niños que favorece la
colonización del meato urinario y la uretra; mientras que en adultos es
más frecuente en las mujeres con edad entre 20 y 56 años. Se estima
que entre 40 y 50% de las mujeres presenta ITU en algún momento de
su vida y de éstas, 11% tendrá al menos una infección por año; contrario
a la situación de los hombres menores de 50 años, en quienes donde las
ITU presentan una baja prevalencia.
La mayor prevalencia de ITU en mujeres se ha explicado por
condiciones anatómicas, básicamente la menor longitud de la uretra y su
proximidad al ano, aspectos que aumentan el riesgo de infección por
enterobacterias. Estudios previos han reportado frecuencia de ITU de 53
067 casos/100 000 mujeres y de 13 689/100 000 hombres; las
diferencias por sexo sólo disminuyen después de los 65 años cuando la
relación se invierte debido a la retención e incontinencia urinaria y al
aumento de hiperplasia benigna de próstata.
Los microorganismos que con mayor frecuencia son aislados en este
tipo de infecciones son Escherichia coli (E. coli), Klebsiella spp,
Enterobacter spp, Enterococcus spp, Pseudomonas spp, Proteus spp y
Staphylococcus saprophyticus, aunque con diferencias importantes en
su magnitud y sus factores asociados, según la población de estudio.
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
INVESTIGACION N°2
Esta es una investigación de un caso clínico realizado a una mujer joven
de 19 años, tenía pareja estable y era negativo a VIH, no tenía ITU
previas. Los síntomas inician con un Síndrome Urinario Bajo (SUB), 4
días después un dolor lumbar derecho con fiebre y al día 12 se produce
una intolerancia digestiva.
Se le hace un estudió bacteriológico:
Sabiendo el resultado del estudio bacteriológico, el día 17 se rota un
plan ATB a Ciprofloxacina 400 mg i/v c/8hs + Vancomicina dosis carga
de 2.0 gr i/v y luego 1.5 gr i/v c/12hs
El día 19 se obtiene sensibilidad a betalactámicos. Se inicia Cefazolina
2.0 gr i/v c/8hs + TMP/SMX a 10 mg/kg día de TMP.
Para el día 19 se cambia a ATB intravenoso dirigido a S. saprophyticus
El caso tiene una buena evolución sin clínica infecciosa
Para el día 30 ya se le da de alta al paciente con TMP/SMX 3
comprimidos v/o c/8hs por 16 días (cumplir 4 semanas de tratamiento
ATB total)
A las conclusiones que se llegó en la investigación de ITU por S.
saprophyticus fueron:
Staphylococcus coagulasa negativo resistente a la noboviocina
Segunda causa mas frecuente de ITU no complicada en la mujer
joven
Supone entre el 5%-15% de las cistitis agudas en mujeres jóvenes
Predilección estacional (finales de verano y otoño)
Aparición frecuente tras el coito o la menstruación y simultáneamente
a la candidiasis vaginal
La mayoría son infecciones urinarias bajas en mujeres, pero existen
formas invasivas con bacteriemia
En una serie de abscesos renales y perirrenales, S. saprophyticus fue
la causa en 4% de los casos
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
10.
INVESTIGAR EN INTERNET Y EXPLICAR 2 TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN
DE ITU PROVOCADAS POR PSEUDOMONAS AERUGINOSA
INVESTIGACION N° 1
“FACTORES DE RIESGO ASOCIADOS A ITU POR Pseudomonas
aeruginosa MULTIRRESISTENTE EN PACIENTES HOSPITALIZADOS -
HOSPITAL NACIONAL DOS DE MAYO, 2017”
En la investigación que se encontró nos dice que se investigó sobre los
factores de riesgo asociados a ITU por Pseudomonas aeruginosa
multirresistente en pacientes hospitalizados en el Hospital Nacional Dos
de Mayo en el año 2017 lo que se quiere lograr con dicha investigación
es encontrar los factores por que los pacientes adquieren esta infección
del tracto urinario y que sexo y edad son de más incidencia
Esta bacteria afecta tanto a hombres como a mujeres y también se
caracteriza por tener resistencia a diversos antibióticos por su
adquisición de nuevos genes y por eso se hace difícil el tratamiento de
los pacientes y puede subir las tasas de morbilidad y mortalidad en el
centro de salud y para el personal de salud en de importancia conocer
de dicha bacteria para prevenir y disminuir las incidencias y saber más
sobre la resistencia que hacen a los antibióticos la bacteria. Son una de
las bacterias que en el centro hospitalario causa más infecciones
urinarias afecta más que todo a pacientes de UCI
En la muestra que se realizó del total de 150 pacientes hospitalizados
con ITU por Pseudomonas aeruginosa en el Hospital Nacional Dos de
Mayo en el año 2017 el 33% es decir 50 Pacientes de 150 fueron
determinados con ITU por Pseudomonas aeruginosa multirresistente y el
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
67% que equivale 100 pacientes se encuentran con ITU por
Pseudomonas aeruginosa no multirresistente donde están asociados
con el uso previo de antibiótico.
Se dice que los factores que ayudan que se contraiga esta infección
urinaria en el centro hospitalario es la utilización de antibióticos a las que
ya hicieron resistencia y el uso continuo de catéter urinario
También nos explica cómo se diagnostica la bacteria de la
Pseudomonas aeruginosa pueden ser por coloración Gram y sedimento
urinario y urucultivo.
Las recomendaciones que se nos da dicha investigación es no utilizar
indiscriminadamente los antibióticos para que las bacterias no hagan
resistencia y si tiene un aumento de incidencia informar lo más pronto
posible para no tener incrementos de infecciones a esta bacteria.
INVESTIGACION N°2
Esta infección es una de las más frecuentes en el ser humano, puede
ser una carga a la sociedad y al sistema de salud por su la morbilidad y
por alta demanda, también por los gastos económicos y estancias
hospitalarias. Ocurre en cualquier etapa de la vida y más del 50% de
casos se da en mujeres.
En Estados Unidos son más de 7 millones las atenciones las atenciones
dadas por un cuadro de ITU, un 15% de antibióticos están dirigidos a
tratar ésta enfermedad. En el Hospital Cayetano Heredia debido a la
carencia de estudios que determinen su impacto es muy difícil
determinar la frecuencia en la población.
Se ha observado un número ascendente de estas infecciones, se publicó
que en el Hospital se registraron ingresos de mayores de 18 años y se
encontró un 8.5% de Pseudomonas aeruginosa, se recomienda que las
instituciones de salud realicen un estudio de mapa microbiológico para
que puedan brindar un tratamiento precoz y eficaz a los pacientes. Se
realiza un estudio descriptivo retrospectivo, donde se usan los
urocultivos positivos de los pacientes ingresados sea por emergencia o
consultorio mayores de 18 años, estas muestras deben ser procesadas y
registradas por el área de microbiología del laboratorio del Hospital
Cayetano Heredia, los criterios de inclusión fueron urocultivos positivos
con un número mayor o igual a 100.000 (UFC)/ml de orina, en estos
urocultivos se aísla un solo agente bacteriano, los criterios de exclusión
son los urocultivos negativos, que son urocultivos positivos de agentes
no bacterianos o de flora bacteriana mixta.
Hay una ficha de recolección diseñada para la base de datos y una
codificación para las variables, donde de extraen los resultados de los
registros del laboratorio. En 2013 se registraron 85 casos de urocultivos
positivos a Pseudomona aeruginosa, en 2014 se registraron 65 casos,
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PRACTICA G-01
en 2015 unos 95, en 2016 se registraron 66 casos y en 2017 se
registraron 63. El uropatógeno Pseudomona aeruginosa es un agente
etiológico aislado que se halla con mayor frecuencia y de mayor
importancia clínica, este es un hallazgo que coincide en la mayoría de
investigaciones, a pesar de que esta bajo unos puestos se ha decidido
considerarla como una de las principales por su importancia clínica.
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