1.
Recogida de la muestra Recogida del tejido de interés del paciente para su
análisis, así sea una biopsia en la que obtenemos la muestra de un sujeto vivo, o
un análisis histopatológico donde se hace un muestreo de diversos o todos los
órganos luego de una necropsia previa.
2. Fijación Hay diferentes agentes fijadores sin embargo el más usualmente
usado para el procesado histológico es el formaldehído al 4 % (también conocido
como formol), que es un tipo de fijador químico que funciona por inmersión de la
muestra en la solución fijadora. La rapidez de fijación de la muestra va a
depender del tamaño de la muestra y del tipo de tejido.
3. Recepción y registro de la muestra Una vez que llega la muestra, se le asigna
un número interno del laboratorio y se registra.
4. Especificación macroscópica y corte Se explica exactamente el tipo de
material remitido para su análisis, incluyendo sus magnitudes y las heridas que
tiene, así como se especifica su morfología, aspecto, coloración. Después, se
seleccionan las regiones más significativas de las heridas halladas sobre las que
va a desarrollarse el análisis microscópico y se hace el corte en pequeñas
cantidades (no tienen que superar los 3 -5 mm de espesor) para después
introducirlo en una casete de plástico y cerrarlo.
5. Integración Esta dureza se consigue por medio de la integración en un medio
sólido, como la parafina, que es una sustancia cérea que a temperatura ambiente
es sólida. Para conseguirlo se hace una deshidratación por medio de una
secuencia de alcoholes de gradación creciente (50°C, 70°C, 80°C, 95°C y alcohol
absoluto) y un subsiguiente aclaramiento, en el cual sustituimos el mánager
deshidratante por una sustancia miscible con la parafina, como es el xileno.
6. Fabricación de bloques Para obtenerlo se usa un molde antes rellenado con
parafina líquida donde se sitúa el tejido de análisis y se cierra con una de las
piezas del casete para que el bloque tenga un soporte una vez que se saque el
molde. Después se pone en una superficie gélida a 4 °C para que el molde se
solidifique y ya poder proceder al corte.
7. Corte histológico – Microtomía La microtomía es la técnica por medio de la
cual se consiguen cortes con medida de micras usando un microtomo. La época
de la ejecución de los cortes va a depender del número de bloques que haya.
8. Tinción de los cortes histológicos: La tinción es un proceso por el que se
ponen en prueba las construcciones celulares y tisulares por medio de la
utilización de colorantes. • Hematoxilina: es un colorante fundamental que
reacciona con las construcciones de carácter ácido, los núcleos tiñéndolos de
azul purpúreo a negro.
9. Montaje El proceso de montaje tiene como finalidad que las muestras que
fueron teñidas logren ser observadas de forma óptima al microscopio y logren
seguir estando en excelentes condiciones de conservación. Este no es miscible en
agua con lo cual se necesita volver a deshidratar los tejidos (mediante la serie de
alcoholes de graduación creciente) y un siguiente aclarado con xileno, para lograr
poner el medio de montaje, el cubreobjetos y finalmente poder hacer la
observación al microscopio.
