UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES - FACULTAD DE

Carrera : Química TECNOLOGIA

Industrial Laboratorio de Análisis
PRACTICA Nº1

INTRODUCCIÓN AL ANÁLISIS DE ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

VISIBLE

1. OBJETIVO
Tener conocimiento sobre el análisis instrumental por espectroscopia Ultravioleta –
Visible.

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Explicar sobre el fundamento de espectroscopia UV-VIS
 Realizar la descripción del equipo de espectrofotometría
 Explicar e identificar las partes constituyentes del equipo de espectrofotometría UV-
Visible
 Obtener conocimiento sobre las aplicaciones por UV-VIS.

3. FUNDAMENTO TEORICO
Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de
radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la
Absorbancia, y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de interés
en dicha muestra.
Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda
características de la radiación electromagnética. En este proceso, la radiación es
transferida temporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intensidad
de la radiación. Dicha disminución, debida a la absorción experimentada por el analito,
puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia, A, la más
comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se define
por la expresión:
A = log [Po/P]
Donde: A es la Absorbancia, Po la potencia del haz de radiación incidente y P la potencia
de dicho haz tras atravesar la muestra.
3.1. Ley de Beer
De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la
concentración de la especie absorbente, C, y con la longitud de la trayectoria de la
radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es:
A = log[Po/P] = a b C
Donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la
concentración C se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante de
proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo ɛ, y
puesto que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1 mol-
1
En este caso, la ley de Beer adquiere la forma.

A=ɛBc

1
3.2. Espectrofotómetro Ultravioleta visible
El diagrama del espectrofotómetro con las principales partes constituyentes es la
siguiente:

Diagrama de espectrofotómetro ultravioleta-visible

La lámpara más común que se utiliza para la región visible es la lámpara de filamento de
Tungsteno para la región de longitud de onda entre 350 y 2500 nm y para la región
ultravioleta la lámpara de Deuterio como la de Hidrogeno dan lugar a un espectro
continuo utilizable en la región de 160 a 375 nm.
La celda o cubeta que contiene la muestra y el disolvente, esta fabricado de un material a
través del cual pase la radiación de la región espectral de interés, para trabajar en la región
ultravioleta se necesita una celda de cuarzo o sílice fundida, ambas sustancias son
transparentes en la región visible. En la región entre 350 y 2000 nm se pueden usar celdas
de vidrio de silicato. Los recipientes de plástico se utilizan también para la región Visible.

3.3 Luz visible

Es una región muy estrecha pero la más importante, ya que nuestra retina es sensible a las
radiaciones de estas frecuencias. A su vez, se subdivide en seis intervalos que definen los
colores básicos (rojo, naranja, amarillo, verde, azul y violeta).

3.4 Radiación ultravioleta

Los átomos y moléculas sometidos a descargas eléctricas producen este tipo de radiación.
No debemos olvidar que la radiación ultravioleta es la componente principal de la
radiación solar. La energía de los fotones de la radiación ultravioleta es del orden de la
energía de activación de muchas reacciones químicas lo que explica muchos de sus
efectos
3.5 Aplicaciones
La espectrometría UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinación cuantitativa de
soluciones de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos muy conjugados.
 Soluciones de iones metálicos de transición
Las soluciones de iones metálicos de transición pueden ser coloreadas (es decir,
absorben la luz visible) debido a que los electrones en los átomos de metal se pueden
excitar desde un estado electrónico a otro. El color de las soluciones de iones
metálicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos aniones
o ligandos. Por ejemplo, el color de una solución diluida de sulfato de cobre es muy
azul; agregando amoníaco se intensifica el color y cambia la longitud de onda de
absorción máxima.
 Compuestos orgánicos
Los compuestos orgánicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugación,
también absorben luz en las regiones del espectro electromagnético visible o
ultravioleta. Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los
compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgánicos solubles. Los
disolventes orgánicos pueden tener una significativa absorción de UV, por lo que no
todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometría UV. El etanol
absorbe muy débilmente en la mayoría de longitudes de onda. La polaridad y el pH
del disolvente pueden afectar la absorción del espectro de un compuesto orgánico. La
tirosina, por ejemplo, aumenta su máximo de absorción y su coeficiente de extinción
molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la polaridad de los
disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga también dan lugar a colores, éstos son
a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas.
Se debe recordar que la ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una
solución es directamente proporcional a la concentración de la solución. Por tanto, la
espectrometría UV/VIS puede usarse para determinar la concentración de una
solución. Es necesario saber con qué rapidez cambia la absorbancia con la
concentración. Esto puede ser obtenido a partir de referencias (las tablas de
coeficientes de extinción molar) o, con más exactitud, determinándolo a partir de una
curva de calibración.
El espectrofotómetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografía
Líquida de Alta Resolución (hplc). La presencia de un analito da una respuesta que
puede ser proporcional a la concentración. Para resultados precisos, la respuesta del
instrumento al analito debe compararse con la respuesta a un estándar, lo que es muy
similar al uso de curvas de calibración. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura)
para un concentración particular se conoce como factor de respuesta.

4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama de procedimiento experimental.
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Permanganato de Potasio
 Agua destilada
 Tabletas de Ranitidina
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
(en la hoja de solicitud de Material y Reactivos)
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
Solución A
Preparar una solución de permanganato de potasio 0,05M. (Volumen 100mL)
Realizar una dilución de la solución para obtener una concentración final de 0,0005
M (Volumen 100mL)
Solución B
Preparar una solución acuosa de Ranitidina, que contenga una concentración final de
12µg/mL.(volumen final de 100mL)
V. Observar y explicar las partes que constituyen el espectrofotómetro
Ultravioleta Visible.
VI. LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO
c) Realizar las siguientes operaciones en el espectrofotometro
Un barrido en el espectrofotómetro en la región visible, de ambas soluciones
Un barrido en el espectrofotómetro en la región Ultravioleta, de ambas soluciones.
VII. DATOS OBTENIDOS, GRAFICAS PARA;
A) SOLUCION DE PERMANGANATO DE POTASIO
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA REGION VISIBLE
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

B) SOLUCION DE RANITIDINA
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA REGION ULTRAVIOLETA
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

6.- CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº2

DETERMINACIÓN DE MÁXIMA ABSORBANCIA

(VERIFICACIÓN DE LA LEY DE BEER)

1. OBJETIVO
Determinar la longitud de onda especifica de un analito en solución, realizando un
barrido en función de absorbancia y longitud de onda

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Seleccionar la longitud de onda de un analito orgánico en la región ultravioleta y de
un analito inorgánico en la región visible, en función de su máxima absorbancia.
 Verificar la preparación óptima de las soluciones patrones y la ley de BEER,
realizando lecturas de absorbancia a la longitud de onda determinada.
 Determinar por interpolación la concentración del analito orgánicocon concentración
desconocida en una solución.
 Determinar por interpolación la concentración del analito inorgánico con
concentración desconocida en una solución.

3. FUNDAMENTO TEORICO
3.1 Espectros de absorción
Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito
(ode otra magnitud equivalente) en función de la longitud de onda de la radiación, λ, (o de
otroparámetro relacionado con la energía de la radiación utilizada). El máximo de
absorbancia obtenidoen el espectro de absorción de un analito, nos dará la longitud de
onda que proporciona la mayorsensibilidad posible, y por tanto será la que se utilizará en
el análisis espectrofotométrico de dicho analito.

3.2 Análisis Cuantitativo

Para llevar a cabo el análisis cuantitativo de una especie mediante la espectroscopia
deabsorción molecular, es preciso realizar una etapa previa de calibración. En dicha etapa
se mide la absorbancia de varias muestras de concentración conocida, las cuales serán
utilizadas para mediante "comparación", calcular la concentración de una muestra
problema tras medir su absorbancia.
Para llevar a cabo la etapa de calibración, se representa la absorbancia de las muestras de
concentración conocida (llamadas patrones) a la longitud de onda de máxima absorbancia,
frente a la concentración de dichas muestras. De esta manera se obtiene la Curva de
Calibración.
Según la ley de Beer, el resultado obtenido será una línea recta, cuya expresión
matemática puede ser obtenida mediante un tratamiento de ajuste estadístico por mínimos
cuadrados.
La espectrofotometría Ultravioleta-Visible detecta las transiciones electrónicas de los
sistemas conjugados y proporciona información sobre el tamaño y la estructura de la parte
conjugada de la molécula.
4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental.
 Realizar el diagrama de procedimiento experimental.

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Ácido Sulfúrico
 Agua destilada
 Sulfato ferroso heptahidratado
 Tabletas de Acetaminofeno
 Ortofenantrolina
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
(en la hoja de solicitud de Material y Reactivos)
III. Equipos
EspectrofotómetroUltravioleta Visible
Balanza Analítica
Hornilla
IV. Preparación de soluciones y diluciones
a) Preparar las siguientes soluciones
 Acido Sulfúrico 2N (25 mL)
 Ortofenantrolina 125mg/100mL (calentar hasta disolución completa)
 Solución A
Preparar una solución equivalente a 1mg/mL de Sulfato ferroso con agua destilada
Adicionando 2mL de solución de Ácido Sulfúrico 2N por cada 100 mL de solución
preparada.
 Solución B
Pesar el equivalente a 100 mg de Acetaminofeno, disolver en 100mL con Agua
destilada
b) Realizar las siguientes diluciones primarias
 5mL de la solución A (Sulfato ferroso)/50mLcon agua
 5mL de la solución B (Acetaminofeno)/50mL con solución de Acido Clorhidrico 0,1N
c) Realizar las siguientes diluciones sucesivas
DILUCIONES (A) DILUCIONES (B)
SULFATO FERROSO ACETAMINOFENO
1) 1mL/50mL 1) 4mL/50mL
2) 2mL/50mL 2) 5mL/50mL
3) 3mL/50mL 3) 6mL/50mL
4) 5mL/50mL 4) 8mL/50mL
5) 6mL/50mL 5) 10mL/50mL
NOTA.- Adicionar a las soluciones de Sulfato ferroso 5mL de solución de
Ortofenatrolina antes de aforar. Todas las diluciones sucesivas aforar con agua destilada.
d) ¿Cuál es la concentración en µg/mL de las diluciones preparadas?
V. LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO:
Realizar lecturas en el espectrofotómetro.
a) Con la dilución (3) de Sulfato Ferroso realizar un barrido y lecturas de 10 en 10 nm,
desde 380nm a 620nm de longitud de onda . Registrar los datos
b) Con la dilución (3) de Acetaminofeno realizar un barrido y lecturas de 5 en 5nm
desde 200nm a 300 nm de longitud de onda . Registrar los datos
c) Luego de determinar la absorbancia máxima realizar las lecturas Absorbancia y % de
Transmitancia de las diluciones preparadas de las soluciones A y B
d) Realizar la lectura de absorbancia y % T de una solución X de Sulfato ferroso
e) Realizar la lectura de absorbancia y % T de una solución X de Acetaminofeno.
VI. DATOS OBTENIDOS, GRAFICAS Y CÁLCULOS PARA;
A) SOLUCIONES DE SULFATO FERROSO
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia
 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

 DATOS DE ABSORBANCIA Y TRANSMITANCIA

CONCENTRACIÓ
N

Muestra x
 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA OBTENIDA

Y CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”
 GRÁFICA DE % DE TRANSMITANCIA VS CONCENTRACION

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA OBTENIDA

Y CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”
B) SOLUCIONES DE ACETAMINOFENO
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

 DATOS DE ABSORBANCIA Y TRANSMITANCIA

CONCENTRACIÓ
N

Muestra x

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA OBTENIDA

Y CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”
 GRÁFICA DE % DE TRANSMITANCIA VS CONCENTRACION

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA OBTENIDA

Y CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”
6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº3
VERIFICACIÓN DE LA LEY DE BEER
DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA MEZCLA DE DOS
COMPONENTES

1. OBJETIVO
Adquirir destreza en la realización de medidas experimentales de absorbancia y su
aplicación a la determinación de la concentración de una mezcla de Permanganato de
Potasio y Dicromato de Potasio en una solución, que no tienen reacción entre sí.

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Evaluar la identificación las partes constituyentes del equipo de espectrofotometría
UV- Visible
 Seleccionar la longitud de onda de los analitos en la región visible, en función de su
máxima absorbancia.
 Verificar la preparación óptima de las soluciones patrones y la ley de BEER,
realizando lecturas de absorbancia a la longitud de onda determinada.
 Hallar los coeficientes de absortividad molar
 Determinar la concentración de los dos analitos en una solución utilizando la
aplicación de la ley de Beer.

3. FUNDAMENTO TEORICO
Cuando en una disolución hay varias sustancias que absorben radiación es posible, en
muchos casos llevar a cabo su determinación sin necesidad de separar previamente los
distintos componentes. Cuando se trata de dos componentes, M y N cuyos espectros de
absorción están superpuestos a todas las longitudes de onda, la forma de proceder es
medir las absorbancias A1 y A2 a las longitudes de onda λ1y λ2 respectivamente y plantear
las ecuaciones siguientes.
A1 = ɛM1 b CM + ɛN1 b CN( aλ1 ) A2
= ɛM2 b CM + ɛN2 b CN( aλ2 )

Esto es posible porque la ley de Beer establece que la absorbancia es una propiedad
aditiva, de forma que la absorbancia total de una disolución a una longitud de onda dada
es igual a la suma de las absorbancias de los componentes individuales presentes.
En las ecuaciones anteriores, b representa el camino óptico y ɛM1, ɛM2,ɛN1, ɛN2 las
absortividades molares de M y N a las longitudes de onda λ1 y λ2, que deben ser
determinadas previamente a partir de disoluciones patrón, o mejor, a partir de las
pendientes de sus representaciones de la ley de Beer.

3.1 Limitaciones a la Aplicabilidad de la Ley de Beer

Se encuentran pocas excepciones a la generalización que la absorbancia está relacionada
linealmente a la longitud del camino óptico.
En cambio, las desviaciones de la proporcionalidad directa entre la absorbancia medida y
la concentración, para b constante, son más frecuentes.
Estas desviaciones son fundamentales y representan limitaciones reales de la ley.
Algunas ocurren como una consecuencia de la manera en que las mediciones de
absorbancia se hacen, o como un resultado de cambios químicos asociados con cambios
en la concentración.
Otras ocurren a veces como desviaciones instrumentales.

3.2 Limitaciones Propias de la Ley de Beer

La ley de Beer es exitosa en describir el comportamiento de absorción de soluciones
diluidas solamente; a concentraciones bajas (generalmente menores que 0,01 M), la
distancia promedio entre las especies responsables de la absorción está disminuida hasta
el punto que cada una afecta la distribución de cargas de sus vecinas. Esta interacción, a
su vez, puede alterar la habilidad de las especies para absorber en una longitud de onda
de radiación. Debido a que la extensión de la interacción depende de la concentración, la
ocurrencia de este fenómeno provoca desviaciones de la relación lineal entre absorbancia
y concentración.
Un efecto similar se encuentra a veces en soluciones que contienen altas concentraciones
de otras especies, particularmente electrolitos. La proximidad de iones a la especie
absorbente altera la absortividad molar de la última por atracciones electrostáticas, este
efecto se disminuye por dilución.
Se encuentran algunas excepciones entre ciertos iones o moléculas orgánicas grandes, que
presentan interacciones significativas a concentraciones debajo de 0,01 M.
Desviaciones de la ley de Beer también surgen porque ε es dependiente del índice de
refracción de la solución; entonces, si cambios de concentración provocan alteraciones en
el índice de refracción de la solución, se observan desviaciones de la ley.
Desviaciones Químicas Aparentes
Surgen cuando un analito se disocia, se asocia, o reacciona con el solvente para producir
un producto teniendo un espectro de absorción diferente del [Link] función del pH va
ha absorber diferente.
Desviaciones Instrumentales Aparentes con Radiación Policromática
Se observa una adhesión estricta a la ley de Beer solamente cuando la radiación es
monocromática verdadera; esta observación es otra información del carácter limitante de
la ley. El uso de radiación que está restringida a una longitud de onda simple es raro
porque los elementos que aíslan porciones de la salida de una fuente continua producen
una banda ma o menos simétrica.
Es conveniente hacer las mediciones en un máximo del espectro, para tener mayor
sensibilidad y menor error.

4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental.

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Permanganato de Potasio
 Dicromato de Potasio
 Agua destilada
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
(en la hoja de solicitud de Material y Reactivos)
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
a) Preparar las siguientes soluciones
 Solución de Permanganato de Potasio 0,003M
 Solución de Dicromato de Potasio 0,015M
b) Realizar las siguientes diluciones sucesivas
DILUCIONES DE DILUCIONES DE
KMnO4 K2Cr2O7
1) 1mL/50mL 1) 1mL/50mL
2) 2mL/50mL 2) 2mL/50mL
3) 3mL/50mL 3) 3mL/50mL
4) 5mL/50mL 4) 5mL/50mL
5) 10mL/50mL 5) 10mL/50mL
c) Calcular las concentraciones molares de las diferentes diluciones
V. LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO
a) A ambas longitudes de onda definidas para KMnO4 y K2Cr2O7 realizar las lecturas
de absorbancia de las diluciones preparadas
b) Realizar la lectura de la muestra X a ambas longitudes de onda
VI. DATOS OBTENIDOS, GRAFICAS Y CÁLCULOS PARA;

A) MUESTRA “X”

LONGITUD DE
ONDA
ABSORBANCIA

B) SOLUCIONES DE PERMANGANATO DE POTASIO

 DATOS DE ABSORBANCIA

CONCENTRACIÓ
N
 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Longitud de onda:

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Longitud de onda:

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRÁFICA

C) SOLUCIONES DE DICROMATO DE POTASIO
 DATOS DE ABSORBANCIA

CONCENTRACIÓ
N

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Longitud de onda:

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRAFICA

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS CONCENTRACION

Longitud de onda:

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CÁLCULOS PARA AJUSTE DE LA GRÁFICA

D) CALCULO DE LA CONCENTRACION DE LOS DOS COMPONENTES DE
LA MUESTRA “X”
4. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº4

VALORACION DE DOS COMPONENTES ORGANICOS EN UNA MEZCLA

(MÉTODO DE EXTRACCIÓN)

1. OBJETIVO
Realizar un análisis cualitativo y cuantitativo en una muestra de dos componentes
orgánicos.
2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Realizar la separación de los analitos mediante extracción física.
 Determinar la máxima absorbancia de los dos componentes por separado, mediante un
barrido en un rango definido de longitud de onda en la región ultravioleta.
 Determinar la concentración de los dos componentes en la muestra
3. FUNDAMENTO TEORICO
La Química Analítica, considerada por muchos la rama más antigua de la Química, es la
ciencia que estudia el conjunto de principios, leyes, métodos y técnicas cuya finalidad es
la determinación de la composición química de una muestra natural o artificial. Es, por
tanto, la ciencia creadora y elaboradora de esos métodos y técnicas y puede definirse
como la rama de la química que se ocupa de la identificación y cuantificación de uno o
varios componentes químicos en una muestra dada.
De acuerdo con esta definición la Química Analítica se divide en cualitativa y
cuantitativa.
La Química Analítica Cualitativa tiene por objetivo el reconocimiento o identificación de
los elementos, compuestos o grupos químicos presentes en una muestra dada; mientras
que el de la Química Analítica Cuantitativa,
es la determinación de las cantidades en las cuales tales elementos, compuestos o grupos
químicos se encuentran en la muestra. Para complementar cualquiera de estos objetivos
(cualitativo o cuantitativo), la química analítica se vale del procedimiento denominado
método analítico, el cual puede definirse como el conjunto de operaciones físicas y
químicas que permite identificar y/o cuantificar un componente químico o un grupo dado
de estos (el analito) en el sistema material que lo contiene (la muestra)
La complejidad en la composición (matriz) de la muestra será la que determine el
procesamiento a que deberá ser sometida esta última a fin de lograr resultados óptimos en
el análisis. Un ejemplo de muestra con matriz compleja es la sangre, frecuentemente
analizada con múltiples objetivos. Los métodos de análisis químico pueden clasificarse de
diferentes formas aunque, la más aplicada, es la que los divide según la naturaleza de la
medida final que se realiza. De acuerdo con esto, los métodos de análisis químico pueden
clasificarse en clásicos e instrumentales.
3.1 Métodos instrumentales
Constituyen un conjunto de procedimientos basados en la medición instrumental de
alguna propiedad físico-química de las sustancias que proporciona información sobre su
estructura o composición química (métodos cualitativos) o que resulta proporcional a la
masa o concentración de las mismas en el sistema estudiado (métodos cuantitativos).
Estos métodos, por lo general, no involucran reacción química alguna y presentan una
enorme diversidad. En ocasiones, requieren de equipos que pueden resultar altamente
sofisticados y muy caros, pero que ofrecen resultados imposibles de lograr por otras vías.
Los métodos instrumentales son aplicados ampliamente tanto con fines cualitativos como
cuantitativos y, a diferencia de los métodos clásicos que han experimentado poco cambio
con el transcurso de los años, están sometidos a un constante desarrollo y constituyen una
herramienta fundamental en casi todas las ramas de la ciencia.
3.2 Extracción
Es una técnica de separación y purificación para aislar una sustancia de una mezcla
sólida o líquida en la que se encuentra, mediante eluso de un disolvente.
La extracción puede clasificarse dependiendo del estado físico de los materiales: sólido-
líquido o líquido-líquido. Por sus características, la extracciónpuede ser continua o
discontinua.
En la extracción líquido- líquido, el compuesto se encuentra disuelto en un disolvente A
y para extraerlo se usa un disolvente B, inmiscible en el primero. Cuando se usa un
embudo de separación, las dos fases A y B se agitan entre sí, con lo que el compuesto
se distribuye entre las dos fases de acuerdo con sus solubilidades en cada uno de los dos
líquidos. Cuando las dos fases se separan en dos capas, se dará un equilibrio tal entre la
concentración del soluto en cada capa, a una temperatura dada, que la razón de la
concentración del soluto en cada capa viene dado por una constante, llamada
coeficiente de distribución o de partición.
Los disolventes orgánicos utilizados en extracción deben tener baja solubilidaden agua,
alta capacidad de solvatación hacia la sustancia que se va a extraer y bajo punto de
ebullición para facilitar su eliminación posterior. Cuando el coeficiente de reparto es
muy pequeño y se necesita un número grande de extracciones para aislar el compuesto
deseado, es preferible emplear un aparato de extracción continua líquido-líquido. Para
esto existen dos tipos de aparatos uno para cuando se usa un disolvente más ligero que
el agua (por ejemplo éter) y otro diferente cuando el disolvente es más pesado que el
agua (por ejemplo. cloroformo o diclorometano)
4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental.
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Cloroformo
 Etanol
 Hidróxido de Sodio
 Muestra de Cotrimoxazol (Sulfametoxazol SFMT y Trimetoprima TRMA)
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
Solución de Hidróxido de Sodio 0,1N (2L)
 V. Realizar el siguiente procedimiento:
 Pesar el equivalente a 100mg de SFMT y 20 mg de TRMA.
 Transferir a un embudo de separación cuantitativamente.
 Añadir al mismo 50mL de Solución de NaOH 0,1N y agitar por el tiempo de
5 minutos.
 Luego añadir 30mL de cloroformo agitar durante 5 minutos recibir la fase
clorofórmica en un matraz volumétrico de 50mL
 FASE ACUOSA: Trasvasar en un matraz volumétrico de 100mL añadir hasta el aforo
solución de NaOH 0,1N, agitar nuevamente y filtrar.
Realizar una dilución, tomando una alícuota de 1mL con una pipeta volumétrica y
transferir a un matraz de 100mL añadir solución de NaOH 0,1N hasta el enrase.
 FASE ORGANICA: Adicionar hasta el enrase Etanol , agitar
Realizar una dilución, tomando una alícuota de 5mL con una pipeta volumétrica y
transferir a un matraz de 100mL añadir etanol hasta el enrase,agitar-
V. LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO:
a) Con las diluciones preparadas realizar el barrido del componente SFMT desde 200 a
300nm tanto de la muestra como del estándar. Cuál es el blanco que se va ha
utilizar?
b) Realizar la lectura de absorbancia de la muestra y el estándar a la longitud de onda
encontrada de su máxima absorbancia
c) Con las diluciones preparadas realizar el barrido del componente TRMA desde 230
a 320nm tanto de la muestra como del estándar. Cuál es el blanco que se va ha
utilizar?
d) Realizar la lectura de absorbancia de la muestra y el estándar a la longitud de onda
encontrada de su máxima absorbancia.

VI. DATOS OBTENIDOS, GRAFICAS Y CÁLCULOS PARA;

A) SOLUCION DE SULFAMETOXAZOL
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

 DATOS DE ABSORBANCIA DE LA SOLUCION MUESTRA Y SOLUCION

PATRON

ABSORBANCI ABSORBANC
A DE LA IA DEL
MUESTRA PATRON

CÁLCULOS PARA CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”

A) SOLUCION DE TRIMETOPRIMA
 DATOS DE ABSORBANCIA Y LONGITUD DE ONDA
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
A
bs
λ
¿Cuál es el valor de la máxima absorbancia?
Máxima Longitud
Absorbanc de onda
ia

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS. LONGITUD DE ONDA

  DATOS DE ABSORBANCIA DE LA SOLUCION MUESTRA Y SOLUCION
PATRON

ABSORBANCI ABSORBANC
A DE LA IA DEL
MUESTRA PATRON

CÁLCULOS PARA CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA “X”

6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº5

CALIBRACION DE ESPECTROFOTOMETRO UV-VIS

1. OBJETIVO
Realizar la calibración del Espectrofotómetro UV- Visible
2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Realizar la separación de los analitos mediante extracción física.
 Determinar la máxima absorbancia de los dos componentes por separado, mediante un
barrido en un rango definido de longitud de onda en la región ultravioleta.
 Determinar la concentración de los dos componentes en la muestra
3. FUNDAMENTO TEORICO
 Control de la exactitud de la longitud de onda: Es definida como la desviación de la
longitud de onda leída a una banda de absorción o emisión de una banda de longitud
de onda conocida. Esta desviación puede ser causas de errores significantes en las
medidas de los análisis cualitativos y cuantitativos. La exactitud de longitud de onda
es determinada por comparación entre las medidas obtenidas de un material de
referencia y el valor estándar establecido en el certificado del material de referencia.
Entre los materiales de referencias utilizados tenemos un material óptico neutro el cual
tiene poca dependencia de la longitud de onda para las transmitancias o absorbancias
es deseable porque este elimina la dependencia del ancho de banda espectral de las
mediciones.
 Control de la Exactitud fotométrica: Es determinada comparando la diferencia entre
la absorbancia medida del material estándar de referencia y el valor estándar
establecido. Entre los materiales de referencia utilizados tenemos un material óptico
neutro el cual tiene poca tendencia de la longitud de onda para la transmitancia o
absorbancias es deseable porque este elimina la dependencia del ancho de banda
espectral de las mediciones.
 Control de la precisión fotométrica: Se denomina precisión fotométrica a la medida
de la dispersión de una serie de mediciones de absorbancia alrededor de la media y se
expresa como coeficiente de variación porcentual.
 Control de la Linealidad fotométrica : El rango dinámico lineal de las mediciones
está limitado por la luz difusa a grandes valores de absorbancia y por el ruido a bajos
valores de absorbancia

 Control de luz difusa o parásita: La luz difusa puede tener varios orígenes: luz de
órdenes superiores de la red de difracción, reflexiones internas en el monocromador,
en los montajes de componentes ópticos y en superficies ópticas deterioradas, luz
dispersada por partículas de polvo flotando en el camino óptico.
Control de luz difusa o parásita: La luz difusa causa una disminución de
absorbancia y reduce el rango lineal del instrumento. Las absorbancias altas se ven
más afectadas por la luz difusa.
4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama de procedimiento experimental
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. MATERIALES
Cubeta de Oxido de Holmio (patrón para calibración)
Vasos de Precipitado de 250 mL
Vasos de Precipitado de 100mL
Vidrios de reloj
Probetas
Bureta de 50mL
Pipetas graduadas de 5mL
Matraces volumétricos de 100mL
Matraces volumétricos de 250mL
Matraces volumétricos de 1000 mL
II. REACTIVOS
Acido Sulfúrico
Sulfato de cobre p.a.
Dicromato de Potasio p.a.
Nitrito de sodio p.a.
III. EQUIPOS
Balanza
Estufa de Secado
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A) PREPARACIÓN DE SOLUCIONES DE CALIBRACIÓN

 SOLUCIÓN DE SULFATO DE COBRE EN ÁCIDO SULFÚRICO
Disolver en un vaso de precipitado de 250mL,5 g de Sulfato de Cobre pentahidratado,
de una pureza mayor al 99.9% en cantidad suficiente de agua destilada.
Adicionar con cuidado 2,5mL de Ácido Sulfúrico concentrado y trasvasar
cuantitativamente la solución a un matraz volumétrico de 250mL, enrasar y agitar
mecánicamente durante 1 minuto para homogeneizar la solución.
 SOLUCIÓN DE ÁCIDO SULFÚRICO 0,005 M
Pesar en un vaso de precipitado de 250mL, 0,49g de ácido sulfúrico (d=1,84g/mL),
diluir con agua destilada y trasvasar cuantitativamente a un matraz de 1L, enrasar con
agua destilada y agitar mecánicamente durante 1 minuto, para homogeneizar la
solución.
 SOLUCIÓN DE DICROMATO DE POTASIO
a) Solución de concentración 0.10 g/L
Secar aproximadamente 1g de Dicromato de Potasio, de una pureza mínima de
99.95%, en estufa a 105ºC por dos horas y enfriar en desecador. Pesar 0,10 g y
disolver en un vaso de precipitado de 250mL con la solución de ácido sulfúrico
0,005M. Trasvasar cuantitativamente a un matraz volumétrico de 1L, enrasar con
 la solución de ácido sulfúrico 0,005M y agitar mecánicamente durante un minuto,
para homogeneizar la solución.
b) Soluciones de Dicromato de Potasio.
Preparar cuatro soluciones de Dicromato de Potasio de diferente concentración,
requerida para los controles, a partir de la solución de 0,10g/L, tal como se indica
en la tabla #1, enrasando a un volumen final de 100mL con ácido sulfúrico
0,005M.
Preparación de soluciones de Dicromato de Potasio
Concentraci mL de solución
ón de concentración
(g/L) 0.10
g
/
L
0. 2
02 0
0. 4
04 0
0. 6
06 0
0. 8
08 0

 SOLUCIÓN DE NITRITO DE SODIO

Secar aproximadamente 7 g de Nitrito de Sodio en estufa a 105ºC por 2 horas y enfriar
en desecador.
Pesar 5g en un vaso de precipitado de 100mL y disolver con agua destilada, trasvasar
cuantitativamente a un matraz volumétrico de 100mL, enrasar con agua y agitar
mecánicamente durante un minuto para homogeneizar la solución.
B) PARÁMETROS A CALIBRAR EN EL ESPECTROFOTOMETRO
 CONTROL DE LA EXACTITUD DE LA LONGITUD DE ONDA
Debido a que la desviación de la longitud de onda puede causar errores en los análisis
cuantitativos. Verificar el grado de concordancia entre la longitud de onda seleccionada
para la máxima absorbancia y la longitud de onda de referencia.
 Con una cubeta, ajustar el cero (0) del instrumento que contenga solución de ácido
perclórico al 10%, según el rango espectral.
 Con una cubeta de oxido de Holmio según el rango espectral del equipo, realizar un
barrido.
Por ejemplo en un rango de longitud de onda de 250,0nm a 700,0nm
 Determinar las longitudes de onda con las máximas absorbancias emitidas, se
detectará las longitudes de onda indicadas en la siguiente tabla:

Ancho
de λ de máxima absorción (nm)
banda
(nm)
Rango
 Ultravioleta
1 241.1 249.9 278.1 287.2 333.5 345.4 361.3
2 241.0 250.1 278.1 287.6 333.5 345.5 361.1
Rango Visible
1 385.6 416.3 451.4 467.8 485.2 536.6 640.5
2 386.0 416.9 451.3 468.1 485.2 537.2 641.1
 Longitudes de onda de máxima absorción de la solución de oxido de Holmio en
ácido perclórico.
 Registrar los datos obtenidos y realizar los cálculos correspondientes en la
siguiente tabla:
TABLA DE CONTROL DE EXACTITUD DE LONGITUD DE ONDA
Longitud de
Longitud de Cálculo
Onda de
Regió Onda de máxima de
máxima absorbancia
n absorbancia diferencia
de referencia
Espect λref (experiment E= λm - λref
ral al)
λm

Ultravioleta

Visible

Cálculo de la exactitud de la longitud de onda:

E= λm - λre
Dónde:
E= Exactitud de longitud de onda
λm = Longitud de onda medida
λref = Longitud de onda de referencia

Los parámetros aceptables para la exactitud de longitud de onda son: REGIÓN UV ± 1nmREGIÓN VIS ± 3nm

 CONTROL DE LA EXACTITUD FOTOMETRICA

La exactitud fotométrica se determina comparando la absorbancia de una solución de
referencia con la lectura de ésta, obtenida en el espectrofotómetro. Para cubrir
satisfactoriamente el rango UV-VIS del espectro, se utilizan dos soluciones diferentes:
a) Dicromato de Potasio para la región espectral Ultravioleta.
b) Sulfato de Cobre para la región espectral Visible.
Realizar lo siguiente:
  Con una misma cubeta ajustar el 0 de absorbancia del instrumento con la solución
de ácido sulfúrico 0,005M, la cual fue utilizada para preparar las soluciones de
referencia.
 Control en el Rango ULTRAVIOLETA:
Realizar 6 lecturas consecutivas de la solución de Dicromato de Potasio en ácido
sulfúrico de concentración 0,06 g/L, (ver preparación de soluciones), a las
longitudes de onda de 235,257,313 y 350 nm, registrar los datos en la tabla que
corresponde.
 Control en el rango VISIBLE:
Realizar 6 lecturas consecutivas de la solución de Sulfato de Cobre en ácido
sulfúrico, (ver preparación de soluciones.), a las longitudes de onda de 600,
650,700 y 750nm, registrar los datos en la tabla que corresponde.
 Con los datos obtenidos realizar los cálculos correspondientes en la tabla
correspondiente
 El cálculo del porcentaje de error, realizar con cada uno de los datos obtenidos y
confrontar con los valores de referencia en cada longitud de onda en los rangos
Ultravioleta y Visible con la siguiente fórmula:
𝐴𝑚 − 𝐴𝑟𝑒𝑓
% 𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100
𝐴𝑟𝑒𝑓

Dónde:
Am = Absorbancia medida
Aref = Absorbancia de referencia de las soluciones en el rango UV-

VIS Absorbancias de referencia de las soluciones en el rango UV-Vis.

Longitud de Absorbanci
Rango de espectro
onda a
(nm) de
referencia
235 0.748
Rango Ultravioleta
257 0.865
Solución de Dicromato
313 0.292
de Potasio en Ácido
350 0.640
Sulfúrico
600 0.068
Rango Visible
650 0.224
Solución de Sulfato de
 TABLA DE CONTROL DE EXACTITUD FOTOMETRICA
Longit Absorban Absorbanci Cálculo % Error
Regió 𝐴𝑚 − 𝐴𝑟𝑒𝑓
ud de cia de a % 𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗
n
onda referencia (experiment
espect 100
(nm) A al) 𝐴𝑟𝑒𝑓
ral
re A
f m

REGION ULTRAVIOLETA
 Los parámetros para el control de la exactitud fotométrica son: Error optimo:entre ± 2%
Error aceptable : entre ± 3%

 CONTROL DE LA PRECISIÓN FOTOMÉTRICA

 Para la determinación utilizar los datos obtenidos en el control de exactitud
fotométrica, con las soluciones de Dicromato de Potasio de 0.06 g/L a las
siguientes longitudes de onda 235, 257, 313, 350 nm.
 Con los 6 datos de las absorbancias obtenidas en cada longitud de onda, realizar
los cálculos del promedio, la desviación estándar y el coeficiente de variación, en
la tabla de Control de precisión fotométrica.
 Cálculo del promedio (X):
𝛴𝐴𝑖
𝑋= 𝑛
 Cálculo de la Desviación Estándar (DS):
𝛴(𝑋 − 𝐴)2
𝐷𝑆 = √
𝑛−1
 Calculo del porcentaje de coeficiente de Variación(CV):
𝐷𝑆
𝐶𝑉 = ∗ 100
𝑋
TABLA DE CONTROL DE PRECISIÓN FOTOMÉTRICA
Cálculo
Promedio Cálculo
Longitud Cálculo
Datos de Desviaci
de onda Coeficiente
Absorban ón
(nm) de Variación
cia estánda
experimen r
tal

rol de la precisión fotométrica son: Porcentaje de coeficiente de variación optimo :menor a 0.5% Porcentaje de coeficiente de

 CONTROL DE LA LINEALIDAD FOTOMÉTRICA

El estudio de la linealidad fotométrica permite establecer el rango de absorbancia en el
que el instrumento tiene respuesta proporcional a los cambios de concentración.
Para ello se determina la respuesta del espectrofotómetro a diferentes concentraciones
de una sustancia que cumpla con la ley de Lambert – Beer.
Para el control realizar lo siguiente
  Evaluar la linealidad fotométrica realizando lecturas de absorbancia por duplicado,
de la serie de soluciones de Dicromato de Potasio, (ver preparación de
soluciones), utilizando la solución de ácido sulfúrico 0.005M para realizar el
ajuste a cero de la absorbancia del equipo.
 Las longitudes de onda a las que se realizan las lecturas son; 235, 257,313 y 350
nm. Registrar los datos en la tabla

TABLA DE CONTROL DE LA LINEALIDAD FOTOMETRICA

Cálculo de
Longit Absorbanc
Concentraci Coeficiente
ud de ia
ón de de
onda (experiment
K2Cr2O7 Correlación
(nm) al)
(r)

 Con los datos de las absorbancias obtenidas en cada longitud de onda y a

diferentes concentraciones, calcular con una regresión lineal el coeficiente de
regresión “r”
El parámetro aceptable para el control de la linealidad fotométrica es: r ≥ 0.999

 CONTROL DE LUZ DIFUSA O PARÁSITA

Se denomina así a toda radiación electromagnética de longitud de onda distinta a la
seleccionada por el monocromador, que alcanza el detector y por lo tanto queda
registrada por el instrumento.
 Este control se basa en la medida del porcentaje de transmitancia de una solución de
Nitrito de Sodio de 50g/L. Esta sustancia tiene la propiedad de que sus soluciones
absorben toda la radiación incidente de longitudes de onda menores a 390 nm, es
decir, que es ópticamente opaca a la luz, por lo tanto la transmitancia a 340 nm de esta
solución debe ser igual a 0, y toda transmitancia detectada corresponde a luz parásita.
Para la prueba realizar lo siguiente:
 Ajustar el equipo a 0 de transmitancia con aire
 Medir la transmitancia y la absorbancia de la solución de Nitrito de Sodio, (ver
preparación de soluciones), a la longitud de onda de 340 nm
 Realizar las lecturas por triplicado y registrar los datos.
TABLA DE CONTROL DE LA LUZ DIFUSA
DATOS OBTENIDOS
Parámet
Valo Valo ro
MEDICIÓN
r r aceptab
Máxi Míni le
mo mo

Transmitan
Menor a 0.01 %
cia (
%)

Absorbancia Mayor a 2

El parámetro aceptable para el control de la luz difusa o parásita es:

Transmitancia:menor a 0.01% Absorbancia:mayor a 2

6. CONCLUSIONES.
Para cada control realizado analizar los resultados y determinar la conclusión
correspondiente
PRACTICA Nº6

TITULACIONES ESPECTROFOTOMÉTRICAS

1. OBJETIVO
Determinar la estequiometria de la reacción o relación molar y el valor de la constante de
formación de un complejo metálico, mediante el método de Joe Jones a partir de
volúmenes variables
2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Determinar en primera instancia visualmente la concentración de una solución y
posteriormente confirmar espectrofotométricamente la misma.
 Realizar la titulación de los pares de soluciones de Tiocianato de Amonio –Cloruro
Férrico, midiendo las absorbancias del complejo formado.
 Calcular el valor de la constante de formación del complejo formado.
3. FUNDAMENTO TEORICO
3.1 Titulaciones Fotométricas
Las mediciones fotométricas o espectrofotométricas se pueden emplear para localizar el
punto de equivalencia de una titulación, siempre que el analito, el reactivo o el producto
de la titulación absorban radiación. Alternativamente un indicador absorbente puede
proveer el cambio necesario de absorbancia para la ubicación del punto final.
3.2 Curvas de Titulación
Una curva de titulación fotométrica es un gráfico de absorbancia, corregida por cambios
de volumen, como una función del volumen del titulante. Si se eligen las condiciones
adecuadamente, la curva consistirá de dos regiones de líneas rectas con pendientes
diferentes, una que ocurre al comienzo de la titulación y la otra ubicada más allá de la
región del punto de equivalencia; se toma el punto final como la intersección de las
porciones lineales extrapoladas.
Experimentalmente, las medidas de absorbancia se realizan después de cada adición del
titulante, el cual se debe utilizar de una concentración 20 o mas veces mayor que la del
analito para minimizar los efectos que sobre la absorbancia tiene el aumento del volumen
de la solución o efectos por dilución.
Las gráficas obtenidas constan de dos segmentos de rectas, uno anterior y otro posterior al
punto estequiométrico, que se extrapolan y en el punto de intersección se localiza el punto
final. Si la reacción es muy incompleta o se presentan equilibrios entre el producto
formado y los reactantes, la gráfica presenta una gran curvatura en cercanías del punto de
equivalencia
4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental.
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Cloruro Férrico
 Tiocianato de Amonio
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica.
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
 Solución de Cloruro Férrico
Preparar una solución de concentración 0,1M (100mL)
Dilución a 0,02 M (volumen que se requiera)
 Solución de Tiocianato de Amonio
Preparar una solución 0,1M (100mL)
Dilución a 0,01M (el volumen que se requiera)
V. PROCEDIMIENTO Y LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO
En 9 matraces de 50mL colocar 2,5mL de solución de Cloruro Férrico 0,02M.
Añadir a cada matraz volúmenes diferentes de solución de Tiocianato de Amonio 0,01M
(4mL, 8mL, 10mL, 12mL, 14mL, 16mL, 18mL, 20mL, 22mL).
Añadir agua destilada hasta su aforo, agitar para homogeneizar la misma
Realizar las lecturas de absorbancia de cada solución a una longitud de onda de 480nm.
VI.- DATOS OBTENIDOS Y CÁLCULOS
DATOS DE ABSORBANCIA Y VOLUMEN DE TITULANTE
VOLUMEN VOLUMEN
ABSORBANCI ABSORBANCI
DE DE
A A
TITULANT TITULANT
E E
 GRÁFICA DE ABSORBANCIA VS VOLUMEN DE TITULANTE

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos

 CALCULO DE LA CONSTANTE DE FORMACION DEL COMPLEJO

6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº7

DETERMINACIÓN DE Kf DEL COMPLEJO 1:1 HIERRO III-TIOCIANATO

(MÉTODO DE JOB)

1. OBJETIVO
Determinar la constante de equilibrio de la reacción de formación del ion complejo
monotiocianato férrico.

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Realizar la titulación de los pares de soluciones de Tiocianato de Amonio –Cloruro
Férrico, manteniendo el volumen total y midiendo las absorbancias del complejo
formado.
 Calcular el valor de la constante de formación del complejo formado.

3. FUNDAMENTO TEORICO
3.1 METODO DE JOB.
Para obtener una constante de equilibrio es necesario medir la concentración (en
sentido estricto la actividad) de las especies implicadas en el equilibrio. Normalmente no
es necesario medir todas las concentraciones sino que determinando una de ellas (o unas
pocas) es posible calcular las concentraciones (o actividades) de todas dado a que hay
ecuaciones vinculantes (Balance de masa, Electroneutralidad, la constante del
equilibrio, constante de autoprotólisis). En general, cualquier propiedad física
vinculada a alguna de las concentraciones (o actividades) podría ser usada para
determinar la constante de equilibrio. Algunos de los métodos se basan en la medida de la
absorbancia.
Uno de ellos es el método de las variaciones continuas y nos permite determinar la
fórmula del complejo formado y su constante de estabilidad. Para ello se debe medir
la absorbancia del complejo para diferentes valores relativos de concentración de ligando
a metal. Las medidas deben llevarse a cabo a una longitud de onda donde el complejo
sea la única especie responsable de la absorción. En caso de que esto no sea posible, ya
sea porque el metal libre, el ligando, o ambos, también absorban a la longitud de onda
en que absorbe el complejo, se deberán efectuar correcciones.
Este método como el de la razón molar (en el cual la concentración de metal se mantiene
constante) es aplicable solo a complejos mononucleares. La reacción formación del
complejo puede escribirse como:
M+nX⇆MXn
donde M es el ion metálico, X es el ligando, y se omiten todas las cargas. Para el
método de las variaciones continuas deben prepararse una serie de soluciones en las que la
concentración total de ligando más metal se mantiene constante:
CT=CM+CT=constante
mientras que se varía la relación de uno respecto del otro. Dicho de otro modo, se varía la
fracción molar del metal (fM = CM/CT) tomando tantos valores (entre 0 y 1) como
soluciones se preparen. El máximo corresponde a la fracción molar del metal (fM) dada
por la estequiometría del complejo (MXn).
La forma de la curva depende de la constante del complejo. Si dicha constante es muy alta
y todo el metal se encuentra formando complejo la forma de la curva sería un triángulo
con vértice en fM. Con la absorbancia y la fM correspondiente a la punta del triángulo y
la concentración CT utilizada es posible obtener el coeficiente de absorción molar del
complejo. Sin embargo, a medida que las constantes de formación disminuyen se
observa que el vértice de las curvas experimentales se redondea y el punto máximo
que da la estequiometría del complejo debe obtenerse por extrapolación.

El método permite calcular constantes de complejos dentro de cierto intervalo de

valores obteniéndose la información necesaria del gráfico según se describe a
continuación.
Determinación de la constante de estabilidad del
complejo La determinación consta de cinco pasos:
1.- Determinación de la estequiometría
2.- Determinación de la absortividad molar del complejo
3.- Medida de la concentración de complejo en cada
punto 4.- Cálculo de las concentraciones de todas las
especies
5.- Cálculo de la constante
1.- En el gráfico de Abs vs fM podemos ver que cuando el metal está en defecto (a la
izquierda cuando fM --> 0) todo lo que se agrega de M se convierte en complejo y por lo
tanto la absorbancia del complejo es proporcional a la fracción del mismo. Por otro lado,
cuando es el ligando el que está en defecto (a la derecha cuando fM --> 1), cada agregado
de ligando formará complejo y por tanto la absorbancia del complejo será proporcional a
la fracción de ligando. La extrapolación de las dos rectas tangentes a la curva en fM = 0 y
fM = 1 hasta la intersección de las mismas (vértice del triángulo)
corresponde a la absorbancia que tendría si todo el metal y todo el ligando estuviese
formando

La reacción de formación del ion complejo monotiocianato férrico, Fe(SCN)2+, a partir de

ion tiocianato, SCN-, y férrico, Fe3+, se describe mediante la siguiente ecuación:
- 3+ 2+
SCN (ac) + Fe (ac) = Fe(SCN) (ac)
Para determinar la constante de equilibrio de la misma se debe conocer la concentración
de cada una de las especies presentes en el equilibrio. El ion Fe(SCN)2+ es la única
especie coloreada que se forma en concentración apreciable en las condiciones de
reacción de este trabajo práctico, y por lo tanto, es la única especie presente que presenta
absorción en la región visible del espectro electromagnético. Por ello, su concentración se
puede medir espectrofotométricamente. Las concentraciones de las otras especies pueden
calcularse a partir de ésta mediante relaciones estequiométricas.

4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental.

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Cloruro Férrico
 Tiocianato de Amonio
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
Preparar las siguientes soluciones
 Solución de Cloruro Férrico
Preparar una solución de concentración 0,1M (100mL)
Dilución a 0,0025M (el volumen que se requiera)
 Solución de Tiocianato de Amonio
Preparar una solución 0,1M (100mL)
Dilución a 0,0025M (el volumen que se requiera)
V. PROCEDIMIENTO Y LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO
Realizar el siguiente proceso:
En matraces de 25mL colocar diferentes volúmenes de solución de Cloruro Férrico
0,0025M
Añadir a cada matraz volúmenes diferentes de solución de Tiocianato de Amonio
0,0025M (según tabla), de manera que el volumen sea 24 mL en cada uno de ellos y
realizar las lecturas de absorbancia de cada solución a 445nm
VI.- DATOS OBTENIDOS Y CÁLCULOS
 DATOS DE ABSORBANCIA Y VOLUMEN DE TITULANTE

Vol.
2 2 2 1 1 1 1 1 8 6 4 2 0
FeCl3 0,0025M
4 2 0 8 6 4 2 0
Vol.
0 2 4 6 8 1 1 1 1 1 2 2 2
NH4SCN0,0025
M 0 2 4 6 8 0 2 4
Absorbancia
Lecturas de

a) Realizar la gráfica de Absorbancia vs volúmenes de Tiocianato.

b) Realizar el ajuste de las rectas, determinando el coeficiente de correlación.
c) Realizar nuevamente una gráfica de Absorbancia vs volúmenes de Tiocianato con
los datos ajustados.
d) Calcular la constante de formación del complejo

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA vs VOLUMEN DE TITULANTE

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos
 CALCULO DE LA CONSTANTE DE FORMACION DEL COMPLEJO
6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº8

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMETRICA DE YODURO DE POTASIO

EN LA SAL DE MESA COMERCIAL

1. OBJETIVO
Determinar el porcentaje de Yoduro de Potasio en sal de mesa comercial por el método
espectrofotométrico.
2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Realizar la gráfica de absorbancia vs concentración de Yoduro de Potasio
 Calcular el porcentaje de Yoduro de Potasio en la muestra por extrapolación.
 Definir las reacciones que se producen durante el tratamiento de la muestra.

3. FUNDAMENTO TEORICO
Antes de que una medición espectrofotométrica pueda ser utilizada para el análisis
químico, es necesario que el constituyente a ser determinado tenga una absortividad
adecuada. Aún cuando muchas sustancias pueden ser detectadas con una preparación
mínima.
Innumerables sustancias o analitos deben ser sometidos a algún tratamiento químico para
convertirlo en una especie capaz de absorber.
El procedimiento está en función de reacciones químicas y equilibrios y es una tarea que
continua en desarrollo como las muestras ambientales, aditivos para alimentos que son
analizados rutinariamente por métodos espectrofotométricos.
Espectrofotometricamente se pueden determinar pequeñas cantidades de agentes
oxidantes con facilidad, aún cuando ellos mismos no absorban luz.
Por ejemplo se aprovecha la reacción del Yoduro con un agente oxidante.

I- + oxidante I3- + especie reducida

Se forma el ion triyoduro en proporción directa a la cantidad de oxidante originalmente

presente, tiene un máximo de absorción fuerte a 350 nm .
Las bases químicas para la determinación de Yoduro en la muestra son:
Se trata primero una solución acuosa de la muestra con un volumen de agua de bromo,
con la que se oxida el yoduro a yodato.
Aún cuando la constante de equilibrio para esta reacción no es grande, a las bajas
molaridades de Bromuro e Hidrogenión que hay aquí, esta es virtualmente completa. Se
elimina el exceso de bromo, añadiendo Ácido formico.
Este paso no tiene ningún efecto apreciable sobre el ión yodato.
Agregando ahora un exceso de yoduro de potasio a la solución se convierte rápidamente
el ion yodato a triyoduro.
Para la muestra de sal es pequeña la cantidad de triyoduro formada para una titulación
exacta, por lo que es mejor confiar en mediciones espectrofotométricas a una longitud de
onda de 350nm, la absortividad molar del ion triyoduro es elevada alrededor de 26000.
Se puede hallar el nivel de Yoduro de Potasio en la muestra original, por medio del
método de la adición estándar, uilizando cantidades conocidas de Yodato de Potasio.
4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental y las reacciones que se producen en el proceso de
preparación de la muestra. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental
5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Yoduro de Potasio
 Yodato de Potasio
 Agua de Bromo
 Acido Fórmico
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica.
III. Equipos
Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
Balanza Analítica
Campana de extracción
IV. Preparación de soluciones
Preparar las siguientes
soluciones
 Solución de Yoduro de Potasio
Preparar una solución de concentración 0,5M (100mL)
 Solución de Yodato de Potasio
Preparar una solución de concentración 6,45ug/mL
Disolviendo 64,5 mg de Yodato de Potasio en 100mL de agua, realizando una dilución
posterior de 1mL en 100Ml
V. Realizar el siguiente proceso:
Pesar 5 g de sal de mesa comercial en un vaso de precipitado
Disolver aproximadamente en 65 mL de agua destilada, filtrar lasolución,recibiendo el
filtrado en un matraz erlenmeyer de 100mL.
Nota: Realizar la acción en una campana de extracción
Añadir aproximadamente 1mL de agua de Bromo, utilizando accesorios de protección.
Dejar en reposo durante 20 minutos
Luego agregar alrededor de 3mL de Ácido Fórmico, agitar hasta desaparición del color
amarillo existente.
Transferir la solución a un matraz volumétrico de 100mL y completar a volumen con agua
destilada, agitar mecánicamente para homogeneizar la solución.
En vasos de precipitado de 100mL realizar las adiciones siguientes según el siguiente
cuadro:

PROCEDIMIENTO 1 2 3 4 5
º º º º º
Solución de sal 1 1 1 1 1
0 0 0 0 0
Agua destilada 8 3 2 1 0
Solución de Yodato de 0 0 1 2 3
Potasio
Solución de Yoduro de 0 5 5 5 5
Potasio
NOTA: El primer vaso solo sirve como blanco, el segundo vaso tiene solo la muestra,
mientras que los demás vasos tienen adiciones sucesivas de Yodato de Potasio
correspondientes a 5, 10, 15ug de IK
Realizar las lecturas de absorbancia de cada solución a 350nm

VI.- Datos obtenidos y cálculos

 DATOS DE ABSORBANCIA

SOLUCIÓN ABSORBANCI
A
SOLUCION MUESTRA
1º SOLUCION PATRON
2º SOLUCION PATRON
3º SOLUCION PATRON

a) Realizar las gráficas de Absorbancia vs número de ug de Yoduro de Potasio

adicionado.
b) Realizar el ajuste de la recta, determinando el coeficiente de correlación.
c) Con el valor de la absorbancia de la muestra, hallar el % de IK

 GRÁFICA DE ABSORBANCIA vs ug DE YODURO DE POTASIO

Nota: La gráfica debe contener tanto los datos obtenidos

experimentalmente como los datos corregidos
6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº9

DETERMINACIÓN DE ZINC POR ABSORCIÓN ATÓMICA

1. OBJETIVO
Determinar la concentración de ion Zinc en una solución, por absorción atómica

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Preparar las soluciones patrón para realizar la curva de calibración para la
determinación de ion Zinc.
 Explicar e identificar las partes constituyentes del equipo de absorción atómica
 Verificar la preparación óptima de las soluciones patrones
 Determinar por interpolación la concentración del ion Zinc en la solución con
concentración desconocida.

3. FUNDAMENTO TEORICO
En esta técnica se utiliza una fuente de radiación específica para cada elemento a
determinar, midiéndose la disminución de la intensidad de una línea analítica tras la
interacción de la fuente. Los átomos que están atomizados poseen cada uno de las líneas
del espectro, donde una de ellas es la línea espectral característica del elemento,
denominada línea de resonancia. Entonces los átomos absorben parte de la radiación
proveniente de la fuente del mismo elemento y emplean la energía recibida para excitar
los electrones de las capas externas a niveles energéticos superiores pasando a un estado
excitado y en consecuencia, la señal disminuye; (absorción y es lo que mide el detector y
lo transforma en concentración) cumpliéndose la ley de Beer.

Las partes constitutivas de un espectrofotómetro son:

 Una fuente de radiación que emita una línea específica correspondiente a la necesaria
para efectuar una transición en los átomos del elemento analizado. (Lámpara de
cátodo hueco)
 Un nebulizador, que por aspiración de la muestra líquida, forme pequeñas gotas para
una atomización más eficiente.
 Un quemador, en el cual por efecto de la temperatura alcanzada en la combustión y
por la reacción de combustión misma, se favorezca la formación de átomos a partir de
los componentes en solución.
 Un sistema óptico que separe la radiación de longitud de onda de interés, de todas las
demás radiaciones que entran a dicho sistema. (Monocromador y red de difracción)
 Un detector o transductor, que sea capaz de transformar, en relación proporcional,
las señales de intensidad de radiación electromagnética, en señales eléctricas o de
intensidad de corriente.
 Un amplificador o sistema electrónico, que como su nombre lo indica amplifica la
señal eléctrica producida, para que en el siguiente paso pueda ser procesada
con circuitos y sistemas electrónicos comunes.
 Por último, se requiere de un sistema de lectura en el cual la señal de intensidad de
corriente, sea convertida a una señal que el operario pueda interpretar (ejemplo:
absorbancia). Este sistema de lectura, puede ser una escala de aguja, una escala de
dígitos, un graficador, una serie de datos que pueden ser procesados a su vez por
una computadora, etc.
La AA en llama es a la fecha la técnica más ampliamente utilizada para determinar
elementos metálicos y metaloides. Esta técnica tienen grandes convenientes y es
de costo relativamente bajo, pudiéndose aplicar tal técnica a una gran variedad de
muestras.
Acoplado un instrumento de absorción atómica a un horno de grafito o a un generador de
hidruros se alcanzan límites de detección hasta de ppb, lo cual lo hace indispensable en
áreas como son: estudios de contaminación ambiental, análisis de alimentos, análisis de
aguas potables y residuales, diagnóstico clínico, etc.

4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental

5. PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTAL I.- Reactivos
 Sulfato de Zinc
 Ácido Sulfúrico.
 Agua destilada
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica
Nota: Trabajar con material limpio y calibrado.
III. Equipos
Espetrofotometro de Absorción Atómica
Balanza Analitica
IV. Preparación de soluciones y diluciones
 Solución de Sulfato de Zinc
Preparar una solución de concentración 500ppm (100mL), adicionar 1mL de ácido
sulfúrico.
 Realizar las siguientes diluciones sucesivas
0,1 ppm
0,2 ppm
0,4 ppm
V. Realizar lecturas en el equipo de absorción atómica
De las soluciones patrón y de la muestra X
Bajo las siguientes condiciones:
Altura de la llama: 7 mm
Flujo de gas: 2,0 L/min
Tipo de oxidante: Aire
Longitud de onda: 213,9 nm

VI. Cálculos y Gráficas

a) Realizar la gráfica Absorbancia vs Concentración
b) Realizar el ajuste de la recta de la gráfica, determinando el coeficiente de correlación
c) Comparar con el dato de coeficiente de correlación que se registra en el equipo
d) Calcular la concentración de la muestra X

6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES
PRACTICA Nº10

DETERMINACIÓN DE COBRE POR ABSORCIÓN ATÓMICA

1. OBJETIVO
Determinar la concentración de ión Cobre en una solución, por absorción atómica

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Preparar las soluciones patrón para realizar la curva de calibración para la
determinación de ion Cobre.
 Evaluar el conocimiento de identificación de las partes constituyentes del equipo de
absorción atómica
 Verificar la preparación óptima de las soluciones patrones
 Determinar por interpolación la concentración del ion Cobre en la solución con
concentración desconocida

3. FUNDAMENTO TEORICO
Se estableció anteriormente que el sistema de absorción atómica está constituido
principalmente por tres componentes básicos.
1. Una fuente de energía lumínica a longitud de onda seleccionada (lámpara de cátodo
hueco)
2. Una fuente de transformación de iones en átomos (llama)
3. Un sistema de detección que recibe una determinada cantidad de energía de la llama
Para poder cuantificar necesitamos definir y establecer el balance energético que se
produce en el sistema.
Sea Io la intensidad inicial generada por el cátodo hueco, lo cual incide directamente
sobre la llama, en la cual se tiene la probabilidad de encontrar átomos en su estado basal.
Los que absorberían una determinada cantidad de energía, así, la intensidad inicial sufre
un decremento, que es proporcional a la cantidad de átomos en la llama.
De está manera la intensidad que llega al detector, es la que atraviesa la llama sin sufrir
alteraciones y la llamaremos It, si comparamos It con Io , podemos establecer lo
siguiente:
Que la transmitancia, está definida como la relación existente entre la intensidad final y
la intensidad inicial o sea que es la fracción de energía lumínica que atraviesa por la
llama y llega al detector.
La absorbancia es una cantidad que sale del tratamiento matemático, la operación de un
aplicador logarítmico permite que una curva sea convertida en sistema lineal.

A = 𝐥𝐨𝐠 (𝑰𝒐) = 𝐥𝐨𝐠 𝟏 = − 𝐥𝐨𝐠 𝑻

𝑰𝒕 𝑻

Pero a partir de la ley de Beer, este término define una relación de tres parámetros:
 a es una constante que define las particularidades de preparación de los patrones y de
la muestra a determinar (solventes, componentes de interferencia, efectos de dilución,
etc.)
 b es la longitud de la llama.
 C es la concentración de las especies atómicas presentes en la llama.
 𝑨 = 𝒂𝒃𝑪
La particularidad que se da en todos los sistemas de medición cuantitativos, es lograr que
a y b sean o tiendan a ser constantes, para poder de esa manera lograr métodos
cuantitativos de proporcionalidad.
𝑨𝑎𝑪

4. PLAN PREVIO
 Realizar los cálculos que corresponden a la preparación de soluciones apéndice (IV)
del procedimiento experimental. .
 Realizar el diagrama del procedimiento experimental

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
I. Reactivos
 Sulfato de Cobre
 Ácido Sulfúrico.
 Agua destilada
II. Materiales
Definido por el estudiante de acuerdo a disposición y necesario para la presente práctica.
III. Equipos
Espetrofotometro de Absorción Atómica
Balanza Analitica
Nota: Trabajar con material limpio y calibrado
IV. Preparación de soluciones y diluciones
 Solución de Sulfato de Cobre
Preparar una solución de concentración 500ppm en ión Cobre (100mL), adicionar 1
mL de ácido sulfúrico.
 Realizar las siguientes diluciones sucesivas
0,5 ppm
1,0 ppm
2,0 ppm
V. Realizar lecturas en el equipo de absorción atómica
De las soluciones patrón y de la muestra X
Bajo las siguientes condiciones:
Altura de la llama: 7 mm
Flujo de gas: 1,8
L/min Tipo de oxidante:
Aire Longitud de onda:
324,8 nm
VI. Cálculos y Gráficas
a) Realizar la gráfica Absorbancia vs Concentración
b) Realizar el ajuste de la recta de la gráfica, determinando el coeficiente de correlación
c) Comparar con el dato de coeficiente de correlación que se registra en el equipo.
d) Calcular la concentración de la muestra X

6. CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES.
 BIBLIOGRAFIA

1) ANALISIS INSTRUMENTAL, Kenneth A. Rubinson- Judith F. Rubinson.

Editorial Prentice Hall
2) PRINCIPIOS DE ANALISIS INSTRUMENTAL, Douglas A. Skoog- James
Holler-Timothy A. Nieman. Editorial Mc Graw Hill.
3) ANÁLISIS INSTRUMENTAL, Douglas A. Skoog –James J. Leary. Editorial
Mc Graw Hill.
4) METODOS INSTRUMENTALES DE ANÁLISIS, Hobart H. Willard- Lynne
L. Merritt, Jr. Jhon A. Dean. Editorial CECSA
5) METODOS MODERNOS DE ANALISIS QUIMICOS. J.A .Barnard – R.
Chayen- F. Romero Rossi. Ediciones URMO.
6) METODOS ESPECTROSCOPICOS EN QUIMICA ORGANICA. Ian
Fleming M. – Dudley H. Williams, M.A,.Ediciones URMO.
7) ANALISIS ESPECTRAL DE COMPUESTOS ORGANICOS. Clifford J.
Creswell- Olaf Runquist- Malcolm M. Campbell. Editorial Diana.
8) METODOS INSTRUMENTALES DE ANALISIS QUÍMICOS. Galen W.
Swing . Editorial Mc Graw Hill.
9) PROBLEMAS Y EXPERIMENTOS EN ANÁLISIS INSTRUMENTAL,
Clifton E. Melona- Robert. W Kiser. Editorial Reverté.