ESCUELA DE INGENIERIA

BIOTECNOLOGICA
CURSO: BIOTECNOLOGIA ANIMAL
• I FASE. Clase 5 : Semen, Crioconservación de
Semen, Sexaje de Espermatozoides
• 09.09.2021
Semen
• Está compuesto por espermatozoides y plasma seminal
• Se forma por el aporte de los testículos, el epidídimo, las
vesículas seminales, la próstata, las glándulas de Cowper, las
glándulas de Littre y los vasos deferentes.
• Menos de un 10% del volumen del semen de una eyaculación
corresponde a los espermatozoides, y más del 90% al plasma
seminal.
Espermatozoides
• Espermatozoide es la célula reproductora sexual masculina o
gameto masculino encargada de fecundar al óvulo, aportando la
información genética complementaria a la de la célula femenina.
Su tamaño es unas 10.000 veces más pequeño que el óvulo.
Son microscópicas y una de las más pequeñas del cuerpo.
• Es una célula haploide que constituye el gameto masculino
• Los Espermatozoides dan el sexo a la nueva célula diploide,
pues pueden llevar cromosoma sexual X o Y, mientras que el
óvulo lleva solo el cromosoma X.
 semen
Las vesículas seminales aportan entre el 40% y el 60% del
volumen del semen y sus secreciones contienen
principalmente:
• Fructosa, Prostaglandinas (E2, A, B)​, aminoácidos
• Fósforo. Potasio, ácido fólico, hormonas
• La próstata aporta de 15% a 30% del plasma seminal, con un
líquido rico en: ácido cítrico,​ colesterol, fosfolípidos, carnitina,
fosfatasa alcalina, calcio, zinc, magnesio, sodio y potasio, ​cloro
• enzimas para la separación de las proteínas: fibrolisina (una
enzima que reduce la sangre y las fibras del tejido) y fibrinogenasa.
• Las glándulas de Cowper están ubicadas bajo la próstata y aportan
la secreción mucosa al semen,que representan del 3% al 6% del
semen. Segregan una proteína espesa, clara y lubricante conocida
como moco.
• Las glándulas de Littre contribuyen con mucosa y la hormona
oxitocina.
 Baja calidad de semen
• La baja calidad del semen es un factor para la
infertilidad masculina y se define por varios factores
relacionados con los espermatozoides como:
• La oligospermia (baja concentración),
• La astenozoospermia (baja motilidad) y
• la teratozoospermia (pobre morfología).
• El aumento de la fragmentación del ADN espermático
puede causar infertilidad, aborto espontáneo recurrente
y afectar la tasa de éxito de la tecnología de
reproducción asistida.
 Formación del semen
Los lugares donde se forma el semen son:
• Túbulos seminíferos, de los testículos: Se forman los espermatozoides , influido por
testosterona y por la FSH.
• Al principio los espermatozoides carecen de movilidad y avanzan con movimientos
peristálticos. Pero, según van avanzando, se van diferenciando y adquieren movilidad.
• Epidídimo: aquí los espermatozoides son retenidos durante mucho tiempo (10 a 14 días),
recorriendo su trayecto impulsados por las contracciones peristálticas del músculo liso de
la pared de este conducto. En el epidídimo los espermatozoides aumentan su capacidad
fertilizante. Es el lugar principal de almacenamiento de los gametos masculinos.
• Vesículas seminales: producen una densa secreción que contribuye de manera muy
importante al volumen del eyaculado, que oscila entre el 46% y el 80%, siendo ésta la
última parte del semen en salir en una eyaculación. Esta secreción es rica en fructosa, que
es el azúcar principal del semen y proporciona los hidratos de carbono utilizados como
fuente de energía de los espermatozoides móviles. También contiene pequeñas
cantidades de un pigmento amarillo, flavinas en su mayor parte, que aportan al semen
una fuerte fluorescencia a la luz ultravioleta, que tiene mucho interés en medicina legal
para la detección de manchas de semen en una violación.
• Próstata: Aporta la segunda parte del contenido del s
El semen de un macho debe tener ciertas características que hacen que éste sea capaz de
fertilizar a una hembra:
Animal Volum (ml) Conc sem (10⁹/ml) Total esper((10⁹ Motili esper(%) Morf norma(%) Eyac/semana

Toro 5,0 1,1 5,5 67 80 4

Carner 1,0 3,0 3,0 75 90 20
Verraco 225 0,2 45 60 60 3
Gallo 1,0 3,5 1,8 85 90 3
Chivato 0,8 2,4 2,0 80 90 20
Pavo 0,5 7,0 3,5 60 85 3
Potro 60 0,15 9,0 70 70 3
Conejo 0,6 0,5 0,03 80 80 6
Perro 5,0 0,3 1,5 85 80 3
Gato 0,05 1,5 0,1 75 90 -
Capacitacion de semen
• Se define como capacitación espermática al proceso que permite
a los espermatozoides liberados adquirir la capacidad de
fecundar el óvulo.
• Por su estructura y movilidad que hacen que el espermatozoide
pueda penetrar la gruesa membrana que recubre el ovocito para
poder fusionarse con él y dar lugar al embrión.
• Este fenómeno se produce de forma natural a lo largo del tracto
reproductor femenino y se imita in vitro para lograr el éxito de
los tratamientos de reproducción asistida.
• En este artículo distinguiremos la capacitación natural de la
reproducida en los procesos de inseminación artificial y
fecundación in vitro .
 Capacitación del Semen
• En el tratamiento reproductivo de la inseminación artificial, los
espermatozoides no atraviesan el tracto reproductor femenino completo, ya
que son depositados en el fondo uterino. Por tanto, es necesario imitar las
transformaciones moleculares de la capacitación espermática in vivo para
que adquieran la capacidad fecundante.
• El procedimiento de capacitación en el laboratorio se puede llevar a cabo
principalmente de dos formas:
• Los gradientes de densidad
• El swim-up
• Gracias a estas técnicas, los espermatozoides se separan del líquido
seminal al mismo tiempo que se agrupan en función de su movilidad y
morfología.
• Así, obtenemos finalmente una concentración de los espermatozoides con
mejor aptitud para llevar a cabo la fecundación del óvulo.
 Gradiente de densidad
• Se emplean dos o tres medios de diferente densidad en un
intento de imitar las distintas fases del camino que hubieran
hecho los espermatozoides de forma natural por el tracto
reproductor femenino.
• Se colocan los medios en un tubo de laboratorio de mayor a
menor densidad y a continuación la muestra de semen. Tras el
centrifugado del tubo, los espermatozoides con mejores
cualidades habrán sido capaces de superar todos los gradientes y
llegar hasta el fondo. Ésta será la fracción que separaremos para
utilizar en la técnica de reproducción asistida, pues son los
espermatozoides con movilidad progresiva.
Swin-up
• Consiste en seleccionar los mejores espermatozoides en base a
su capacidad para ascender en un medio de cultivo
determinado.
• Se centrifuga la muestra de semen para concentrar todas las
células del eyaculado en el fondo del tubo y eliminar el plasma
seminal. A continuación, se añade medio de cultivo específico y
se deja el tubo en posición inclinada a la espera de que los
espermatozoides de buena calidad sean capaces de nadar
hacia arriba hasta el borde del medio.
• Pasado un tiempo aproximado de unos 45 minutos, se recoge la
fracción superior de medio de cultivo donde estarán los
espermatozoides móviles progresivos para ser empleamos en la
inseminación artificial o la FIV.
Swin-up
BIOTECNOLOGIA ANIMAL
BIOTECNOLOGIA
DE LA REPRODUCION

• SEMEN SEXADO
 Introducción
 Socialmente en humanos, la selección del sexo en la
descendencia es un tema que siempre ha interesado,
◦ por motivos sociales o culturales, y
◦ ha trascendido históricamente.
 Científicamente, hoy en día el deseo de seleccionar el sexo
de la progenie sigue vigente y ha trascendido hasta la
zootecnia,
◦ ya que predeterminar el sexo de la Progenie permite incrementar
la eficiencia productiva de alimentos en forma indirecta.
 Se ve la necesidad de que los hatos lecheros incrementen
la proporción de nacimientos de animales de sexo hembra.
Introducción
• En vacunos:
• El semen sexado es una tecnología relativamente
nueva que ha demostrado producir mayor proporción
de terneras que el semen convencional.
• El uso de semen sexado se torna atractivo debido a
que las terneras son mucho más valiosas que los
terneros en una empresa lechera. El semen sexado
es una tecnología sustancialmente más costosa que el
semen convencional.
• En consecuencia, la decisión de usar semen sexado se
debe basar en un cuidadoso análisis económico entre
la inversión adicional y los ingresos potenciales.
En Vacunos
• El semen sexado debe utilizarse en vaquillonas vírgenes de buen
desarrollo y edad (por lo tanto deben estar ciclando). Por el
momento sólo se recomienda su uso sacando celo de manera
visual (celos naturales o provocados con prostaglandinas).
 EL SEMEN SEXADO

 Se puede conseguir 90 % de crías

del sexo preferido de acuerdo a la
conveniencia de la explotación.

 La mejor técnica fué la de la

separación de los
espermatozoides a través de la
técnica de CITOMETRIA DE FLUJO
desarrollada por el Dr. Lawrence
Jhonson, técnico fisiólogo en
Maryland, patentada por el
Departamento de Agricultura de
los Estados Unidos (USDA) en
1992.
 Fundamento de la Técnica
 La técnica se basa en la mayor cantidad de ADN que existe en los
espermatozoides portadores de un cromosoma "X" respecto a
los espermatozoides portadores de un cromosoma "Y“.
 En los bovinos, los espermatozoides con
cromosoma "X" tienen un 3,8 por ciento más
de ADN que los que portan un cromosoma "Y".
 En los cerdos, los espermatozoides con cromosoma
"X" tienen 3,6 % más ADN que los "Y",
 En los humanos esa diferencia se reduce al 2,8 %;
 Mientras mayor es la diferencia en el contenido de ADN, más
fácil es la separación de los espermatozoides con un mayor
grado de pureza ó confiabilidad, la cual en el caso de los bovinos
se logra con un 90% de certeza.
 Procedimiento
 Para iniciar el proceso (citometría),
el semen tiene que ser teñido con un colorante
fluorescente:
 el cual se unirá a cada espermatozoide individual
según su contenido de ADN.
 Como el espermatozoide " x " contiene 3.8 %
más de ADN, éste atrapa más colorante, y
hace que resplandezca más brillantemente.
 Se hacen pasar luego los espermatozoides a
manera de una corriente o flujo muy delgado a
través de la máquina separadora,
 utiliza un rayo láser, que lo que esencialmente
hace es iluminar el colorante.
 Procedimiento: Clasificación de
espermatozoides
 1) Los que llevan cromosoma "x"
 2) Los que portan " y"
 3) Una población mixta de portadores de " x "
y de " y "(que no pudieron ser
clasificados con claridad).

 Aquel flujo fino de espermatozoides se

fracciona entonces en gotitas pequeñísimas
conteniendo un espermatozoide cada una de
ellas,

 Pasan por un dispositivo que les asigna

una carga eléctrica positiva o negativa, según
la clasificación previa efectuada por la
computadora,

 Después pasan por un campo magnético donde aquéllas

con carga positiva son atraídas hacia el lado negativo, y las que poseen carga negativa lo son hacia el lado
positivo.
• Así se forman tres corrientes de
gotas, que se pueden colectar en
tres tubos de ensayo diferentes para
separar los espermatozoides X e Y.
• Se puede usar fresco dentro de las
siguientes 24 horas.
• ó congelarse
 ESTÁNDAR DE CALIDAD DEL SEMEN
SEXADO
• Los laboratorios especializados que producen y
comercializan semen sexado, luego de su congelación
evalúan la motilidad progresiva y la pureza (proporción del
sexo elegido) de las dosis producidas, las cuales para ser
aceptadas deben tener como mínimo

• 35 % de espermatozoides mótiles
y 85 % de pureza
 Recomendaciones
 ♦ El tiempo y temperatura de exposición pueden afectar la
viabilidad del semen si no se extreman los cuidados durante el
manejo.

 ♦ El uso de una pajuela de semen sexado requiere de un pistolete

que se adecue a su tamaño (0,25 cc), normalmente se utilizan los de
tipo Cassou.

 ♦ Una vez que el animal esté en condiciones de ser inseminado, ,

con la vulva limpia y el personal preparado para la maniobra,
comenzar con el proceso de descongelación del semen de a una
pajuela por vez. Descongelar la pajuela en un baño térmico a 35°
durante 30 - 45 segundos.

 ♦ El material debe estar atemperado y limpio.

 Ventajas
1. Las de mejoramiento genético
 Pueden programarse los reemplazos (lecheros y carnicos)
inseminando las mejores vacas de la media hacia arriba,
 Convertirse en receptoras de embriones,
2. Las del manejo reproductivo
 Puede disminuirse la incidencia de partos distócicos.
3. Las de la productividad en l a vacada
 Mejoraría la productividad de las empresas.
 La venta de vaquillas excedentes tras la reposición del hato,
mejoraría los ingresos de la empresa,
 Desventajas
 Ampliar las instalaciones para un lote más grande de
hembras (casi el doble).
 Un aumento de inversiones y mano de obra para criar más
vaquillonas.
 Incrementar el alimento
 Baja en la variabilidad genética de la población.
 Incremento de la consanguinidad. (?)
 Inseminarse las vaquillas. Y de éstas aún no se reconoce su
genotipo ante el ambiente.
 El precio a pagar por una pajilla de semen sexado, es más
elevado que el que se paga actualmente por el semen
comercial de una alta calidad genética.
• En consecuencia, la decisión de usar semen sexado se
debe basar en un cuidadoso análisis económico entre la
inversión adicional y los ingresos potenciales.

• el semen sexado es más apropiado usarlo en

vaquillas vírgenes las cuales
tienen por naturaleza una
TC mayor que las vacas adultas.
Semen sexado en animales de carne y En Transferencia de
Embriones

• En un sistemas de cruzamiento rotacional, el semen sexado será

útil en los lotes de vientres que se reservan para producir las
hembras de reposición.
• En el caso de que algunas vacas que no tengan muy buena
descencia como lecheras , se podrían destinar a producir terneros
machos con destino a producir novillos para consumo,
• Es de gran beneficio, en programas de transferencia de
embriones aplicando semen sexado en donantes genéticamente
superiores•.
RECOLECCIÓN Y EVALUACIÓN DEL
SEMEN
RECOLECCION:
• Vagina
artificial

• Electroeyaculacíón
 Evaluacion de semen

EVALUACION en Semen fresco:

1. Exámen macroscópico:
➢ Volumen: Varía de acuerdo a la especie
➢ Color : Varía de acuerdo a la especie
en toros : blanco cremoso
➢ PH: 7 (6.9 – 7.5 )
➢ Motilidad: progresiva
en masa
➢ Concentración: se expresa en # de células/ml. Y se debe de conocer en cada
eyaculado.
➢ Morfologia: Aceptable máximo 8- 10% de anormales.
➢ Viabilidad : El % de células vivas siempre debe de ser mayor que el % de motilidad.
 Crioconservación de Semen
 Una vez que el semen ha sido recolectado
debe ser manipulado con mucho
cuidado para evitar la muerte de los espermatozoides.

 Es muy importante que todas las superficies que entren en

contacto con el semen se encuentren entre 35 y 38°C.
 Se debe así mismo evitar la exposición del semen al y la
contaminación de los implementos utilizados.
 El semen después de diluido y evaluado (movilidad,
defectos en los espermatozoides) puede
conservarse mediante la refrigeración o puede
ser congelado ó Crioconservado.
PROCESAMIENTO PARA LA CRIOCONSERVACION DEL
SEMEN DE TORO

La congelación es más avanzada en la

especie bovina
• Incluye:
• Dilución
• Enfriamiento
• Empaque y
• Congelación
 Semen
• Debe ser cuidadoso evitando el shock térmico por frío o
sobrecalentamiento,
• la contaminación por agua, orina o agentes químicos,
• la excesiva agitación y la exposición al aire o la luz solar directa.
• Si el semen no se va a diluir dentro de las 2 horas siguientes, se
lo puede dejar en un recipiente pequeño cerrado, en un lugar
oscuro a temperatura ambiente.
• El semen no diluido de toros fértiles puede utilizarse para IA
hasta 24 - 36 hs luego de obtenido; el semen se enfría
gradualmente colocando el frasco o tubo en un recipiente con
agua a una temperatura cercana a la corporal 26 - 33 º C y
poniendo luego ese recipiente en la heladera a temperaturas
entre 3 - 8 ºC.
•
 SEMEN
• Para la IA se usa por lo general semen diluido, refrigerado o
congelado, antes que semen fresco y no diluido:
• El semen diluido se almacena mejor y mantiene por más
tiempo su fertilidad
• Se puede fecundar más vacas con solo 1 eyaculado y más
aún si se diluye.
• Los espermatozoides están protegidos de cambios bruscos
de temperaturas
• Las soluciones buffer mantienen un adecuado pH del semen
• Les es proporcionado nutrientes y los antibióticos alargan la
viabilidad espermática, mejoran la fertilidad y controlan el
desarrollo de algunas bacterias.
• Antes de diluir un semen, se debe evaluar.
•
 Crioconservación de semen

 Diluir el semen en un diluyente amortiguador que contenga

antibióticos ayuda a mantener la viabilidad del esperma durante un
corto lapso antes del uso o congelación

 Antes solo las hembras caninas y

felinas se inseminaban con semen
fresco. En la actualidad ya se
crioconserva el semen de éstas
especies.
 Ingredientes en diluyentes de semen:
• Los principales ingredientes contenidos en los diluyentes y sus funciones son:
- Fuentes de energía: La energía es de suma importancia para la motilidad de los
espermatozoides. La mayoría de los diluyentes contienen glucosa como principal fuente de
energía, aunque otras fuentes como galactosa, fructosa, ribosa y trealosa han sido utilizadas
sin tener muchas ventajas sobre la glucosa.
- Buffers: El pH es 7. :
• la fracción rica del semen es 6.8 a 7.4 y de
• la fracción post-espermática es 7.0 a 7.6.
• Los espermatozoides y las bacterias contenidas en el semen, producen algunos metabolitos
como ácido láctico, por lo que las substancias buffer son necesarias en la preservación del
semen.
- Electrolitos: Se utilizan para regular la presión osmótica, principalmente el cloruro de
potasio y el cloruro de sodio.
- Antibióticos. Los antibióticos más utilizados actualmente son gentamicina, lincomicina,
neomicina y espectinomicina.
- Estabilizadores de membrana: Se adicionen con el fin de prevenir o retardar alteraciones no
deseadas en la estructura y la función de las membranas de los espermatozoides. Las
principales substancias utilizadas son seroalbúmina bovina (BSA), hidroxitolueno butilado
(BTH), etilén disódico diamino tetraacetato (EDTA), polivinil pirrolidona (PVP-40), y alcohol
polivinílico.
 Diluyentes del semen y sus
características.
1. Un diluyente tiene que proteger a los espermatozoides durante al
enfriamiento y prolongar su vida.
2. Debe de ser isotónico al semen (tener la misma concentración de
iones libres).
• . Aportar nutrientes que necesitan los zoospermios para el
metabolismo aeróbico y anaeróbico.
• Proveer sustancias químicas que tengan poder tampón sobre los productos finales
del metabolismo cito espermático.

1. Debe de tener capacidad amortiguadora (evitar cambios en el Ph al

neutralizar los ácidos producidos por el metabolismo de los
espermatozoides): Solución isotónica de citrato de sodio.
2. Los diluyentes deben de proteger a los espermatozoides de las
lesiones del choque por frio durante el enfriamiento de
temperaturas corporales a 5°C : Lecitinas, lipoproteinas de la
yema de huevo ó leche.
 Características de los diluyentes
del semen
4. Debe proporcionar nutrientes para el metabolismo de los
espermatozoides: Yema de huevo, leche y algunos azucares
simples.
5. Estar libres de productos o sustancias bacterianas o gérmenes que
sean nocivos para los zoospermios, el aparato genital femenino, el
proceso de fecundación, implantación, y desarrollo del huevo
fecundado.

6. Debe de controlar los contaminantes microbianos: antibioticos

como la Penicilina y estreptomicina
7. Los espermatozoides deben de estar protegidos contra daño
durante la congelacion: Glicerol.
8. El diluente debe preservar la vida de los espermatozoides con un
minimo de efecto sobre la fertilidad: combinacion de actores
conocidos y desconocidos.
Soluciones amortiguadoras utilizadas en los diluyentes del
semen
• La solución amortiguadora tiene un papel doble.
• Evitan los cambios mínimos en el PH, al neutralizar el
ácido a concentración adecuada de los espermatozoides.
• La concentración adecuada de las sales amortiguadoras
provoca un ambiente isotónico para los
espermatozoides.
• Tres soluciones amortiguadoras pueden utilizarse:
• Solución amortiguadora fosfatada
• Solución amortiguadora de citrato
• Solució de amortiguacion Tris
Diluyentes efectivos para el semen de
toros
1. Vitelio con fosfato.- se mezcla partes iguales de solución
amortiguadora de fosfato con yema de huevo fresco, No
se usa mucho por ser viscoso.

2. Vitelio con citrato: 20% de Yema de huevo mas 80% de

solución amortiguadora de citrato da mejores resultados.
Añadir penicilina y estreptomicina. Es solución estandar.

3. Tris-Yema: 20% de yema a la solución TRIS, se le puede

añadir el glicerol antes de que llegue a 5%.
Diluyentes para el semen de toro
4. Leche entera homogenizada y leche Descremada. La
leche pasteurizada contiene una sustancia la Lactenina
que es espermicida, que se inactiva a 90°C aplicar
antibióticos. Y glicerol para congelar.

5. Otros diluyentes: aminoacidos, enzimas etc.

Dilución del semen

En dos partes:
1ra. Predilución
Semen tibio, con 3 ó 4 volumenes de diluyente por cada
volumen de semen.
1. Calentar el diluyente en baño María para mantener la misma
T° del sémen.
2. Enfriar el semen a 25°C, y diluir ( ó con yema de huevo con
citrato ó leche descremado).
Los diluyentes aporta lecitina y lipoproteína para
proteger a los espermatozoides de un choque
por frio, en el proceso de enfriamiento.
Dilución
2da DILUCION.
4. Después de que se enfríe a 5°C el semen prediluido.

5. Se le diluye a un volumen final con el diluyente enfriado

tambien a 5°C. :
• mezcla de Citrato de sodio con yema de huevo(5 :1). ó
• leche en polvo descremada

6. Adicionar 1000 UI de penicilina y 1 mgr. de

estreptomicina/ml. de diluyente, ó 0.03 grs/ml. de
sulfanilamidas
FACTOR DE DILUCION
• Para el factor de dilución : proporcionar el número optimo de
espermatozoides móviles por unidad reproductora durante la
inseminación.
• Recomendable entre 15 a 30 millones espermatozoides
móviles/pajilla de inseminación antes de la congelación.
ENFRIAMIENTO
• Colocar el fco. con semen
prediluido y tibio en un
recipiente con agua a la
misma T°. Usualmente a 25°C
Ir disminuyendo el
enfriamiento a 5°C con
intervalos de 1 a 4 horas.
Los estudios de viabilidad
apoyan El enfriamiento lento.
 GLICEROLACION
• A La mezcla enfriada a 5°C se le adiciona la misma cantidad de diluyente que
contenga 7% de glicerol gradualmente en un período de una hora.
• El semen con glicerol mantenerlo a 5°C por 6 horas y luego empaquetarlo ó
en pajillas ó en ampollas.
• El glicerol es para protegerlo durante la congelación y descongelación.

• El glicerol se une al agua y disminuye el punto de congelación de las

soluciones. Se forma menos hielo a cualquier T°

• El glicerol deshidrata parcialmente a los espermatozoides. Se han

comparado otros materiales crioprotectores con el glicerol, como el dimetil
sulfoxido con capacidad amortiguadora de sal y entra rápidamente a las
células.
• El nivel de glicerol varía de acuerdo con los ingredientes del diluyente como:
- Yema-citrato y Tris-yema tienen 7% de glicerol
EQUILIBRIO

• Tiempo de Equilibrio Es el tiempo que se

permite a los espermatozoides estar en
contacto con el glicerol a 5°C, se recomiendan
de 4 a 18 horas.
 ENVASADO DEL SEMEN
• Envasado en ampolletas
y pajillas.
• Ampolletas de vidro de 0.5,
0.8, 1.0 ml. (se usaban).
• Pipetas de plástico de 0.5 ml y de 0,25. con identificación del toro
del que proviene
cuyas ventajas son:
• Mayor espacio de almacenamiento
• Incrementa la supervivencia de los
espermatozoides
En un extremo de la pipeta hay un tapón
De 3 partes, con alcohol vinilico en polvo
entre los2 tapones de algodón, este lo sella
Herméticamente cuando el semen se mezcla.
El otro extremo se llena hidrostática ó
ultrasónicamente.
CONGELACION
• Poner una serie de pajillas de semen en una bandeja , colocarla a 5.5
cm. del nivel del nitrógeno líquido en una unidad grande.
• Los vapores congelaran el semen
• Factores que influyen en el congelamiento
• Tipo de envase
• Nivel de glicerol
• Velocidad de descongelación recomendada
• Composición del diluyente.
Luego transferir a nitrógeno líquido a -196°C. a 7°C por minuto
ALMACENAMIENTO Y MANEJO y
DESCONGELAMIENTO DEL SEMEN DE TORO
• Semen que se va a almacenar
a T°s por encima de
la congelación :
mantenerse a 5°C
• Semen congelado se
debe almacenar por
debajo de -75°C.
• Almacenamiento a
-196°C, en nitrógeno líquido

El tiempo y temperatura de descongelamiento depende del

congelamiento
.
Semen de Caballos
• Semen de caballos contiene una fracción gelatinosa
• El semen se recomienda usar una dilución de 1:4 y enfriar
gradualmente a una T°C de conservación de 5°C, éste se puede
conservar por 72 horas.
DILUTOR
• DILUTOR: Tris – glucosa – yema de huevo.
• COMPOSICION:
• Tris 3.634 g.
• Glucosa 0.5 g.
• Ac.Citrico M 1.990 g.
• Penicilina 100 000 UI
• Estreptomicina 100 mg.
• Glicerol 5 ml
• Yema de huevo 15 ml