Instituto Tecnológico Superior de Huichapan
Practica
Elaboración de PDA
Alumno: Jesus Salinas Cruz.
Matricula: 20021045
Carrera: Ingeniera en Energías Renovables.
Materia: Microbiología
Profesor: Dr. Donaji Jiménez Islas.
Indice
Introducción...............................................................................................................3
Materiales y métodos.................................................................................................4
Resultados...............................................................................................................15
Conclusión...............................................................................................................17
Perspectiva de la práctica........................................................................................18
Referencias..............................................................................................................19
Introducción
En la naturaleza los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas
muy variadas y diferentes, la microbiología se ha podido desarrollar debido a la
posibilidad de estudiar especies aisladas de microorganismos, gracias a la
aplicación de los medios de cultivos. (Fontalvo, 2020).
Hay que tener en cuenta que los microorganismos se utilizan en los diferentes
campos como en las industrias alimentarias, industrias químicas, en la
microbiología industrial, en la industria farmacéutica para la obtención de vacunas,
antibióticos a través de microorganismos y hongos además se emplea para la
producción de insecticidas, biofertilizantes, producción alimentaria en las
industrias agrícolas, en biotecnología ambiental como en el desarrollo de
biocombustibles, para así como para producción microbiana de compuestos
biodegradables. (Madigan et al, 2020)
La microbiología usa métodos bioquímicos los cuales requieren el uso de medios
de cultivo, es decir, preparaciones de nutrientes en forma sólida o líquida que
permiten que los microorganismos crezcan y se multipliquen, cuando se cultivan
en medio de agar, ciertos microorganismos, como bacterias y levaduras, se
formarán, a medida que se multiplican, dando lugar a colonias las cuales serán
visibles a simple vista, esto permite al microbiólogo observar las características
macroscópicas de las colonias, es decir forma, tamaño, color y textura
(Asociación de Microbiólogos de Quebec, 2020)
Un medio de cultivo debe cumplir con los requisitos nutricionales del
microorganismo estudiado y tener las propiedades fisicoquímicas adecuadas para
este cultivo como cubrir las necesidades de minerales y factores de crecimiento
como brindar una fuente de carbono, energía y un pH óptimo para su crecimiento
(Medios culturales, 2021)
El medio de cultivo de mayor uso en micología es el agar papa dextrosa (PDA),
que es un medio de cultivo existente, preparado a partir de infusión de papa,
dextrosa y agar, donde el valor nutritivo de la papa está compuesto principalmente
por: carbohidratos, proteínas, colorías y grasa (Suárez, 2008)
El agar dextrosa de papa (PDA) es un medio de uso general para levaduras y
mohos que se puede complementar con ácido o antibióticos para inhibir el
crecimiento bacteriano. (Sag.micro, 2015)
El PDA contiene una fuente de carbohidratos en cantidades suficientes que consta
de un 20% de extracto de papa y un 2% de glucosa, por lo que es bueno para el
crecimiento de mohos y levaduras, pero no para el crecimiento de bacterias.
(Sukamto,2019)
El Objetivo de esta práctica es: Generar un medio de cultivo PDA
Materiales y métodos
Cultivo PDA
Sanitizar el área de
trabajo
Trozar 100g de papa
Incorporar el sólido en un
100g de papa recipiente metálico
Incorporar a un 200% de
agua
Hervir durante 30
minutos
Filtrar el brebaje
15g de azúcar Agregar el Azúcar
15g de Grenetina Añadir la Grenetina
Añadir 100ml de agua
Dextrosa de papa
Homogenizar la solución
Destinar la solución en los frascos a un 10%
de su capacidad volumétrica
Pasterizar los francos 35
minutos en una olla de presión
a 100°c
Tapar los frascos
inmediatemente
Etiquetar los frascos
Monitorear los cultivos
PDA
por tres días demanera
constante
Figura 1 Diagrama de bloques del proceso
Se satirizara el área de trabajo con la ayuda de alcohol y una franela o gasa
desinfectante con la finalidad de eliminar de eliminar bacterias y microorganismos
que pudieran afectar al cultivo
Figura 2 Sanitización del área de
trabajo
Con el apoyo de un cuchillo y una base para lacerar verduras se trozara la papa
con la finalidad que su interior quede al descubierto
Ya teniendo la papa previamente dividida esta se incorporara a un recipiente
metálico
Figura 4 Incorporación de la papa en un
recipiente acerado
Se añadirá un volumen de agua en el recipiente hasta cubrir por completo las
papas
Posterior mete la mezcla se pondrá en contacto con fuego durante 30 minutos
hasta que esta alcance su punto de ebullición
Transcurridos los 30 minutos con el apoyo de un colador la mezcla se filtrara con
la finalidad de separar el suero de los trozos de papa
Figura 6 Hervor de la mezcla
Por consiguiente, con la ayuda de una cuchara limpia se incorporaran 15 g de
azúcar al suero lo cual equivale a dos cucharadas de azúcar
De igual manera se agregaran 15 g de grenetina al suero lo cual equivale a dos
cucharadas de grenetina aproximadamente
Figura 8 Incorporación de la azúcar
Figura 9 Incorporación de la grenetina
Se adicionara al suero aproximadamente 100 ml de agua purificada
Con el apoyo de un agitador o un popote totalmente limpio se mezclara la solución
hasta que se alcance una mezcla completamente homogénea
Figura 10 Incorporación del agua
Por consiguiente se destinara la solución a los frascos hasta alcanzar un 10% de
su capacidad volumétrica
Después cada uno de los frascos con la cantidad de solución satinada a ellos se
introducirán a una olla de presión esta deberá contar con 500 ml de agua en su
interior
Figura 12 Reparto de la solución
Se sellara la olla de presión y se pondrá en contacto con el fuego durante 15
minutos con la finalidad de realizar un proceso de pasteurización en su interior.
Figura 13 Incorporación de los frascos a la
olla de presión
Figura 14 Pasteurización del material
Trascurrido el proceso de hervor se retirara la tapa de la olla de presión e
inmediatamente se le colocaran sus tapas correspondientes a cada uno de los
frascos
Figura 16 Sellado de los frascos
Figura 15 Retiro de la tapa de la olla
Se identificara cada uno de los frascos para ver la progresión del cultivo durante
los próximos tres días
Figura 17 Identificación de cada uno de los
frascos
Figura 19 24 hrs después del inicio del cultivo
Figura 21 72 hrs después del inicio del cultivo
Figura 23 Cultivo 2
Figura 22 Cultivo 1
Figura 24 Cultivo 3
Figura 25 Cultivo 4
Resultados
Al iniciar con el proceso del medio de cultivo se revisó meticulosamente cada uno
de los frascos durante los tres días previos cabe mencionar que no se presentó
ningún cambio notorio a simple vista sin embargo, la consistencia del fluido si
presento un pequeño cambio ya que paso de un estado líquido a uno gelatinoso
a mi parecer el resultado de la practica fue exitoso ya que solo era preparar el
medio de cultivo PDA sin que en él se desarrollara algún tipo de microorganismo,
bacteria u hongo el cual hubiese crecido y desarrollado satisfactoriamente ya que
en el cultivo se encontraban en las condiciones ambientales necesarias para
poder inocular cualquier tipo se microorganismo además que en él se centraban
los nutrientes necesarios esenciales para el desarrollo de hongos como lo es el
carbono, Hidrogeno, presente en la dextrosa y en los azucares de la grenetina
Técnicamente los cultivos no tuvieron cambios en su superficie ni en su apariencia
solo en su consistencia y no se detectó presencia de ningún hongo, bacteria u otro
microorganismo
Conclusión
Se llevó de manera satisfactoria la práctica ya que se logró crear un cultivo libre
de crecimiento microbiano lo que queda demostrado que es vital tener una buena
planificación y un buen uso de los materiales así como buena manipulación de
ellos para evitar que algún microorganismo no deseado se incorpore en el cultivo
lo cual podría provocar el desarrollo de este, a demás queda demostrado que
esta técnica de cultivo debe ser meticulosa ya que un error podría ocasionar una
contaminación en el cultivo, en términos generales la creación de un cultivo de
PDA debe de tener las condiciones y nutrientes necesarios para que en él se
pueda desarrollar cualquier microorganismo que sea de nuestro interés investigar
o analizar su crecimiento sin que haya un microorganismo no deseado
Perspectiva de la práctica
En lo personal la practica me pareció interesante y un poco desafiante ya que se
tenía que llevar acabo de manera cuidadosa ya que él se tenía que tener cuidado
en la manera en que se manipulaban los materiales y sobre todo los futuros
cultivos PDA ya que lo más riesgos que hubiese pasado habría sido que por un
descuido o una desafección incorrecta pudiese provocado la inoculación de algún
microorganismo ajeno al medio de cultivo por lo que era elemental cuidar el
contacto de nuestras manos con otros objetos contaminados.
En general me gustaría presenciar el desarrollo de algún hongo en cualquier tipo
de cultivo ya que sería interesante observar la manera en que se desarrollan y en
qué tiempo
Referencias
Luna Fontalvo, J. A. (2020). Métodos analíticos de microbiología general y
aplicada. Santa Marta, Colombia Editorial Unimagdalena.
Madigan M. Universidad de Varsovia. (2020). Recuperado el 6 de septiembre de
2021 del Sitio web: http://informatorects.uw.edu.pl/en/courses/view
Asociación de Microbiólogos de Quebec. (2020). Métodos e instrumentos
utilizados por microbiólogos. Asociación de Microbiólogos de Quebec.
Recuperado el 5 de septiembre de 2021 del Sitio web:
https://www.microbiologistes.ca/en/methodes
Medios culturales. (2021). Recuperado el 5 de septiembre de 2021 del Sitio web:
Microbiologie-clinique.com: https://microbiologie-clinique.com/milieuxcultures.html
Suárez Lepe J. (2008). Microbiología enológica: fundamentos de vinificación (3a.
ed.). Madrid, España, Editorial Mundi-Prensa. Pág. 413
Sag.micro. (2015). Agar dextrosa de patata (PDA): principio, usos, procedimiento
y características. Recuperado el 5 de septiembre de 2021 del Sitio web:
https://microbiologyinfo.com/potato-dextrose-agar-pda-principle-uses-composition-
procedure-and-colony-characteristics/
Supardi & Sukamto. (2019) Microbiología en el procesamiento e inocuidad de
productos alimenticios. Bandung, Alemania, Editorial de antiguos alumnos pág. 13
