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Detección de Salmonella en Muestras

Este documento describe el procedimiento para detectar la bacteria Salmonella en una muestra. Se realiza una dilución de la muestra en caldo lactosado y un preenriquecimiento. Luego se hace un enriquecimiento selectivo en caldo Selenito Cistina y caldo Rappaport Vassiliadis a diferentes temperaturas. Finalmente, se siembra la muestra en varios medios de cultivo y se incuba para identificar posibles colonias de Salmonella mediante su apariencia y pruebas de confirmación.

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Detección de Salmonella en Muestras

Este documento describe el procedimiento para detectar la bacteria Salmonella en una muestra. Se realiza una dilución de la muestra en caldo lactosado y un preenriquecimiento. Luego se hace un enriquecimiento selectivo en caldo Selenito Cistina y caldo Rappaport Vassiliadis a diferentes temperaturas. Finalmente, se siembra la muestra en varios medios de cultivo y se incuba para identificar posibles colonias de Salmonella mediante su apariencia y pruebas de confirmación.

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Microorganismos patógenos: Detección de Salmonella

Pedro Rubilar, Bryan Godoy, Nicolás Díaz

Masar 25 g de
muestra dentro
de una bolsa
Stomacher y
agregar 225 ml
de diluyente
Se debe sanitizar (caldo
el area de trabajo lactosado) y
dejar reposar
por 60 minutos
a 25°C (dilución
-1)
Fase de preenriquecimiento
Ajustar pH a 6.8 e
incubar por 24h a
35-37°C
Enrequecimiento selectivo

Se desinfecta la
superficie del
envase de la
muestra con Traspasar 1ml Traspasar 0.1 ml
alcohol al 70%

A 10 ml de
A 10 ml de
Caldo
Caldo Selenito
Rappaport
Cistina
Vassiliadis

Incubar a 35-37°C por 24h Incubar a 42°C por 24h

Sembrar por
agotamiento en
en agar SS,
XLD, BS y HE

Lectura

Agar SS Agar XLD Agar HE


Agar BS

Colonias S.
Colonias
typhi son color
transparentes marrón o negras
Colonias con o sin centro (a veces con
transparentes u oscuro. Los Colonias
brillo metálico
serotipos S. azules-verdes
opacas, lisas alrededor).
con o sin centro paratyphi A y S con o sin centro
Algunas cepas
oscuro choleraesuis. producen negro
Colonias colonias verdes
transparentes
con poco o sin
sin centro negro oscurecimiento

Incubar por 24h a 35


- 37°C

Pruebas confirmativas

Inocular
colonias
sospechosas en
medios TSI,
LIA, MIO

incubar a 35-37°C por 24h

Consultar
Desinfección
resultados
Preparación de la muestra observados en
tablas
Siembra y registro

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