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Tinción de Baar para Micobacterias

La tinción de Baar o Ziehl-Neelsen se utiliza para identificar bacilos ácido-alcohólicos resistentes como Mycobacterium tuberculosis. La tinción se basa en que estas bacterias retienen los colorantes incluso después del tratamiento con ácido y alcohol debido a la composición de su pared celular rica en ácidos micólicos. El procedimiento involucra teñir la muestra con fucsina, tratarla con ácido-alcohol para decolorar otras células y luego contrateñir con azul de metileno, dejando

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Tinción de Baar para Micobacterias

La tinción de Baar o Ziehl-Neelsen se utiliza para identificar bacilos ácido-alcohólicos resistentes como Mycobacterium tuberculosis. La tinción se basa en que estas bacterias retienen los colorantes incluso después del tratamiento con ácido y alcohol debido a la composición de su pared celular rica en ácidos micólicos. El procedimiento involucra teñir la muestra con fucsina, tratarla con ácido-alcohol para decolorar otras células y luego contrateñir con azul de metileno, dejando

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TINCION BAAR

Conocida también como tinción Ziehl Neelsen se usa en la microbiología para la identificación de
bacilos acido-alcohol resistente. También se puede utilizar para diferentes microrganismos que
varían s intensidad acido-resistente, como parásitos.

Fundamento
El término de ácido-alcohol resistente se deriva de algunas bacterias que resisten la decoloración
con ácidos fuertes después de que se tiñen con fucsina. La tinción se basa en las propiedades de la
pared celular de estas bacterias, que contiene ácidos micolicos que se tratan de cadenas largas de
ácidos grasos, este acido en gran cantidad lo que hace es que no se pueda utilizar la tinción Gram
debido a la dificultad de teñirse. Por lo tanto, estas bacterias incorporan los colorantes y son
capaces de retenerlos después de agregarles ácidos y alcoholes.

Se le agregara acido-alcohol para decolorar todas las células que no han sido teñidas. Las células
decoloradas absorben el azul de metileno y toman el color de este, mientras que los
microorganismos acido-alcohol resistente se conservan con un color rojo.

Procedimiento
1.- Se prepara a muestra de esputo. Debe de contar con los requisitos Establecidos para proseguir
con la tinción. (Frasco boca ancha y estéril muestra obtenida de expectoración).

2.- Dentro de la cabina destapar el frasco con la muestra. Con un aplicador de madera o plástico
recolectar una parte de la muestra, preferiblemente donde tenga coloración roja o amarillenta.

3.- Pasar esa parte de la muestra a un portaobjetos. Con la ayuda del aplicador, homogenizar
completamente dando pequeños círculos hasta que se seque por completo.

4.- Ya seco, se procede a la tinción. El portaobjetos generalmente se coloca con un lavabo, arriba
de dos varillas o dos trozos de madera.

5.- El portaobjetos se traslada al lugar de la tinción. Primeramente se le agrega el colorante


Fucsina encima de la muestra ya seca.

6.- Ya con la Fucsina aplicada, se debe de flamear por debajo del portaobjetos hasta el
desprendimiento de vapores. Evitar que se produzca ebullición.

7.- Se debe flamear durante aproximadamente 2-3 minutos. Después dejar reposar hasta enfriarse
por completo.

8.- Lavar el portaobjetos con agua de llave para desechar el colorante en exceso.

9.- Ya retirado el exceso de Fucsiona, se procede a agregar la solución acido-alcohol al


portaobjetos y dejar actuar durante aproximadamente 2 minutos

10.- Se deben hacer más lavados hasta que no se desprenda el colorante, este caso se da cuando
las muestras son muy espesas y gruesas, requerirán más tiempo.

11.- Lavar el portaobjetos con agua de la llave para desechar la solución en exceso.
12.- Ya retirado el exceso de solución decolorante, se produce agregar el colorante azul de
metileno al portaobjetos y dejar actuar durante 1 minuto.

14.- Después del tiempo, lavar con agua de la llave para quitar el exceso de colorante y dejar secar.

14.- Ya seco, se procede a la observación bajo el microscopio

15.- Se coloca una gota de aceite de inmersión al portaobjetos y se observa en el campo 100x. Se
deben de contar 100 campos y anotar las observaciones.

Resultado

Esta es una imagen que muestra a un paciente con tuberculosis, las bacterias que se observan con
color rojo son los bacilos acido-alcohol resistentes teñidos con esta prueba.

Referencia

Dario Galaviz, (2020). Tinción Ziehl Neelsen. Recuperado de: [Link]


v=FnDrE7fqKMQ

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