Tinciones
El procedimiento de coloración o tinción consiste en que una estructura celular o tisular
adquiere específicamente un color bajo la acción de una sustancia colorante. Se considera
que una estructura se ha coloreado o teñido cuando al ser lavada con el líquido que
disuelve al colorante, no se decolora.
La coloración proporciona diferencias evidentes entre las estructuras
Se denomina sustancia colorante a aquella que puede transferir su color a otro cuerpo.
Teoria de coloración física>>>Adsorción. las partículas de las sustancias colorantes
disueltas penetran en los espacios intra e intercelulares en los que se mantienen adheridas
en razón de la cohesión molecular.
Teoría e coloración quimica >>>El colorante se une a la sustancia coloreable combinándose
con ella íntimamente debido a la presencia de agrupaciones moleculares ácidas o básicas
en los componentes celulares o tisulares que se unen respectivamente a los cromógenos
básicos y ácidos de los colorantes, formando sales insolubles. Los colorantes se unen
(ligan) a los tejidos por enlaces iónicos, covalentes o de hidrógeno.
LOS CROMÓFOROS IMPARTEN COLOR A LA MOLÉCULA Y LOS
AUXOCROMOS INTENSIFICAN EL COLOR Y MEJORAN LA AFINIDAD DEL
COLORANTE POR LA FIBRA.
Clasificación de los colorantes
Por su origen
Colorantes naturales, se extraen de:
● Animales. Como el carmín, que se extrae de la cochinilla,
● Vegetales. Como la hematoxilina, obtenida de la corteza de un árbol, el “palo de
campeche”
Colorantes artificiales o sintéticos. Son productos derivados de la destilación de la hulla o
carbón. Genéricamente se les conoce como colorantes derivados de la anilina
Son compuestos orgánicos formados por las modificaciones que experimenta el anillo
bencénico cuando se reemplazan dos átomos de hidrógeno por un átomo de oxígeno o con
otro átomo o por un grupo químico que tenga enlaces de doble valencia en vez de uno,
dando como resultado un compuesto coloreado.
● Ácidos: son sales cuya parte básica es incolora y el componente ácido posee color.
Los colorantes ácidos tienen carga eléctrica negativa, por lo tanto la designación
correcta es la de colorantes aniónicos. También se les conoce como colorantes
citoplasmáticos, pues tiñen al grupo químico, cargado eléctricamente, localizado en
un extremo de la cadena de aminoácidos que integran las proteínas citoplasmáticas.
● Básicos. Son sales que poseen la base coloreada e incolora la porción ácida.
Poseen una carga eléctrica positiva, por lo tanto son colorantes catiónicos. Se les
denomina también colorantes nucleares, pues tienen afinidad por los ácidos
nucleicos.
● Neutros. Son sales en las que tanto la parte básica como la parte ácida
proporcionan color. Estos colorantes tienen la propiedad de teñir de manera
simultánea, a los componentes nucleares y a los citoplasmáticos, inclusive pueden
proporcionar colores distintos (metacromasia) a determinados componentes
citoplasmáticos como las granulaciones específicas de los granulocitos.
● Indiferentes.- No forman sales. Son compuestos no iónicos incapaces de la
disociación electrolítica. Son insolubles en agua pero solubles en solventes
orgánicos como el alcohol y también en las grasas o lípidos y, aunque ellos poseen
color, en realidad estrictamente hablando no son colorantes. Basándose en que son
solubles en las grasas, estas sustancias se utilizan para demostrar la presencia de
ellas en células y tejidos, pues tiñen selectivamente a los lípidos.
Clasificación
-Directas.
-Indirectas
-Regresivas
-Especiales
-Fluorescentes
-Citológicas
-Histoquímicas
TIPOS DE TINCIONES:
H-E
La tinción de hematoxilina eosina se conoce desde la segunda mitad del siglo XIX. Sin embargo
existen diversas variaciones, cambiando el tipo de eosina (existen la eosina Y, llamada amarilla
o yellow y la eosina B, azul o blue) y de hematoxilina (existen la hematoxilina de Harris, de
Mayer) específica para obtener resultados más nítidos dependiendo del tejido a tratar.
Hematoxilina: este compuesto se extrae de Haematoxylum campechianum, una planta
leguminosa originaria de la península de Yucatán, Méjico. Como curiosidad, el nombre de esta
planta significa madera que sangra. De la planta se obtiene una sustancia que al oxidarse
adquiere un color morado. Para aumentar su capacidad colorante se combina con iones
metálicos de hierro o aluminio, consiguiéndose así la hematoxilina. La hematoxilina se une
intensamente a las cargas negativas (aniones), como los ácidos. Es por esto que se une
fuertemente al ADN (ácido desoxirribonucleico). La tinción con hematoxilina tiñe de color azul los
núcleos.
Eosina: las diferencias prácticas en el uso de la eosina amarilla o azul son mínimas, siendo más
utilizada la eosina Y. Ambos compuestos se obtienen de la interacción del bromo con la
fluoresceína. Las cargas negativas del compuesto hacen que se una a compuestos con cargas
positivas, es decir, básicos, como el citoplasma. Sin embargo, ésta misma carga es la que
impide que penetre dentro de células vivas, puesto que la membrana celular las expulsa.
Una de las ventajas de esta tinción es que resulta fácil de llevar a cabo y requiere poca
instrumentación. Primeramente si la muestra está incluida en parafina debe hidratarse.
Usualmente se emplea la parafina para incluir la muestra de forma que puedan realizarse cortes
de microtomía, obteniéndose cortes muy finos.
