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LICENCIATURA EN EDUCACIÓN CAMPESINA Y RURAL Vigencia desde:
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
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GUIA DE LABORATORIO
FICHA DE IDENTIFICACION
TEMA SOLUCIONES BUFFER
ASIGNATURA O CURSO BIOQUIMICA
SEMESTRE
DOCENTE RESPONSABLE LUCIO LINARES
FECHA SEM II – 2021
TIEMPO DE 3 HORAS
DESARROLLO
N° ESTUDIANTES
COMPETENCIAS: Al finalizar el laboratorio el estudiante estará en capacidad de:
Adquirir destreza en el manejo de implementos de laboratorio para dicha práctica.
Utiliza con eficacia materiales y espacio en el laboratorio.
Determinar experimentalmente el pH de una solución tampón
Establecer experimentalmente la respuesta de una solución tampón a la adición de
pequeñas cantidades de ácido o base
Evaluar el efecto de dilución en la capacidad amortiguadora de una solución tampón
PRECAUCIONES GENERALES: Al ingresar al laboratorio el estudiante debe tener en cuenta lo
siguiente:
Tenga en cuenta el reglamento interno del laboratorio
Aplique normas de bioseguridad de laboratorio
Dele el trato adecuado a simuladores, espacios, equipos, compañeros etc.
Maneje los asuntos de laboratorio con estricto sentido ético
Evite las bromas y tratamientos incorrectos al momento de su desarrollo
Recuerde! El laboratorio es un escenario de simulación de sus sitios de aplicación
práctica profesional, por tanto merece todo su respeto y estricto sentido de
responsabilidad.
FUNDAMENTACION TEORICA:
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS.
Muchas de las reacciones químicas que se producen en solución acuosa necesitan que el pH del sistema se
mantenga constante, para evitar que ocurran otras reacciones no deseadas. Las soluciones ""reguladoras"" o
Buffer son capaces de mantener de acidez o basicidad de un sistema dentro de un intervalo reducido de pH,
por lo cual tienen múltiples aplicaciones, tanto en la industria como en los laboratorios.
Las soluciones buffers, son soluciones que resisten cambios de su pH. Estas soluciones mantienen constante
el pH cuando se adicionan pequeñas cantidades de ácidos o bases. El control del pH es importante en
numerosas reacciones químicas, en los sistemas biológicos y en muchas otras aplicaciones. El cambio del
pH de la sangre en 0,5 unidades puede resultar fatal, pero la sangre es una solución buffer. El agua no es
un buffer y la simple adición de una gota de HCl 1M a un litro de agua cambia el pH de 7,0 a 4,3. Así pues, un
buen control del pH es esencial.
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Una solución buffer debe contener un ácido débil y una sal de éste ácido; por ejemplo ácido acético/acetato
de sodio, donde el CH3COOH es el ácido y el Ion CH3COO- es la base o una base débil y una sal de ésta base;
por ejemplo amoníaco/cloruro de amonio, donde el NH3 es la base y el Ion NH4+ es el ácido. Las soluciones
buffers trabajan removiendo los iones H+ o los iones OH- de la solución.
TITULACION: Titular o valorar una solución es determinar su concentración exacta expresada en molaridad o
normalidad. Para esta situación se debe disponer de una solución estándar o patrón que contiene la
sustancia titulante a una concentración exacta conocida. El punto final de valoración se pone de manifiesto
por la adición de un indicador (fenolftaleína, naranja de metilo, rojo Congo, azul de bromo-timol, azul de
bromo-fenol, etc). Para valorar un ácido se emplean soluciones básicas y para valorar una base se emplean
soluciones ácidas o sales ácidas; en ambos casos se produce una neutralización dando como producto final
una sal.
DESCRIPCION DE LA PRACTICA:
PRIMERA PARTE: PREPARACION DE UNA SOLUCIÓN AMORTIGUADORA DE
FOSFATO.
La solución amortiguadora está formada por un electrolito débil (ácido o base) y su especie
conjugada o (sal).
Uso: se utilizan para reducir los cambios bruscos de pH cuando el sistema es afectado por
procesos de acidosis o alcalosis.
El amortiguador fosfato es utilizado por el cuerpo para contribuir en la regulación de la acidez
proporcionada por los protones que pasan a formar parte de la orina.
1. Describa la preparación de 100 mL de una solución amortiguadora de fosfato 0,1 M con un pH
de 6,7 (considere los valores de pKa de disociación del ácido fosfórico) y luego prepárelo
2. Compruebe el pH de la solución resultante con un pHmetro bajo las instrucciones del
docente.
Nota: Utilice los fosfatos disponibles en el laboratorio.
SEGUNDA PARTE:DETERMINACIÓN DEL EFECTO AMORTIGUADOR DE PH DE
UNA SOLUCIÓN TAMPONADA ANTE LA ADICIÓN DE UNA BASE FUERTE
(NAOH):
Lave la bureta y enjuáguela con solución acuosa 0.1 M de NaOH; llénela con esta misma
solución, púrguela y enrásela. Tome tres vasos de precipitados, rotúlelos y agregue lo siguiente:
Vaso 1: 100 ml de agua destilada
Vaso 2: 100 ml de solución tampón de fosfatos preparada en la experiencia anterior
Vaso 3: 100 ml de agua destilada + 1 tableta de alka-seltzer (tampón B)
Utilizando PHmetro digital o papel indicador de pH (lo que esté disponible), mida y registre el pH
inicial de la solución en el vaso #1. Con cuidado adicione desde la bureta 1.0 ml de NaOH 0.1 M
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y registre el pH; adicione de nuevo 1.0 ml de NaOH 0.1 M y registre el pH; repita adición y
registro de la misma forma hasta completar 5.0 mL de NaOH adicionados.
Repita el procedimiento de la misma forma, con las soluciones de los vasos 2 y 3, siempre
adicionando y registrando el pH. Complete en el reporte la tabla de datos y elabore la gráfica 1
(volumen de NaOH añadido, ml, vs pH), graficando juntos los resultados del agua destilada y las
soluciones tampón A y B. Discuta el efecto amortiguador de las diferentes soluciones ante la
adición de una base fuerte.
Volumen de NaOH pH registrado
0.1 M añadido Agua destilada Tampón A Tampón B (alka-seltzer)
(mL) (fosfatos)
0
1
2
3
4
5
Tabla 1. Cambios de pH de agua sin tamponar y dos soluciones tampón diferentes,
ante la adición de NaOH 0.1 M
Utilice los datos de la tabla 1 para graficar juntos los datos de mL de NaOH 0.1 M añadidos, vs
pH. Grafique todos los datos juntos, utilizando algún tipo de marcador para diferencias las
curvas.
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
pH
Volumen de NaOH 0.1 M añadido (mL)
Grafica 1. Representación de agua destilada y dos soluciones tampón diferentes al
adicionar NaOH 0.1 M
TERCERA PARTE: DETERMINACIÓN DEL EFECTO AMORTIGUADOR DE PH DE
UNA SOLUCIÓN TAMPONADA ANTE LA ADICIÓN DE UN ACIDO FUERTE (HCl):
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Lave la bureta y enjuáguela con solución acuosa 0.1 M de HCl; llénela con esta misma solución,
púrguela y enrásela. Tome tres vasos de precipitados, rotúlelos y agregue lo siguiente:
Vaso 1: 100 ml de agua destilada
Vaso 2: 100 ml de solución tampón de fosfatos (tampón A)
Vaso 3: 100 ml de agua destilada + 1 tableta de alka-seltzer (tampón B)
Utilizando pHmetro digital o papel indicador de pH (lo que esté disponible), mida y registre el pH
inicial de la solución en el vaso #1. Adicione desde la bureta 1.0 ml de HCl 0.1 M y registre el
pH; adicione y registre de la misma forma 1.0 ml cada vez, hasta completar 5.0 ml de HCl
adicionados.
Repita el procedimiento con las soluciones de los vasos 2 y 3, siempre adicionando y registrando
el pH.
Complete la tabla 2 con base en los datos experimentales:
Volumen de HCl pH registrado
0.1 M añadido Agua destilada Tampón A Tampón B (alka-seltzer)
(mL) (fosfatos)
0
1
2
3
4
5
Tabla 2. Cambios de pH de agua sin tamponar y dos soluciones tampón diferentes,
ante la adición de HCl 0.1 M
Utilice los datos de la tabla 2 para graficar juntos los datos de mL de HCl 0.1 M añadidos, vs pH.
Grafique todos los datos juntos, utilizando algún tipo de marcador para diferencias las curvas.
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
pH
Volumen de HCl 0.1 M añadido (mL)
Grafica 2. Representación de agua destilada y dos soluciones tampón diferentes al
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adicionar HCl 0.1 M
CUARTA PARTE: TITULACION.
Mida 25 ml de NaOH 0.5N en un Erlenmeyer, añada 4 gotas de fenolftaleina y titular con una
solución de HCl hasta la formación de una coloración rosado permanente. La solución de NaOH
se coloca en una buerta como lo muestra el montaje.
Calcule la concentración del HCl con la formula V1C1 = V2C2
Consulte y explique:
1. Qué relación presenta el pH con el organismo animal y las plantas?
2. Cuál es el pH requerido para el suelo en un cultivo y explique qué ocurriría en las plantas
si el pH del agua está por encima o por debajo de lo requerido?
3. Explique fisiológicamente que puede generar la elevación de pH en las plantas
RECURSOS A UTILIZAR EN LA PRÁCTICA (Equipos / instrumentos):
MATERIALES QUE DEBE LLEVAR EL ESTUDIANTE:
1 tabletas de Alka-Seltzer por grupo
MATERIALES QUE SERAN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO:
Vasos de precipitados de 150 o 250 mL
Probeta de 50 mL
Soporte de hierro universal
Bureta de 25 mL o 50 mL
Embudo de vidrio
Pinza para bureta
pHmetro digital o papel indicador de pH (según disponibilidad)
Solución tampón de fosfatos (fosfato monobásico de potasio KH2PO4/fosfato dibásico de potasio
K2HPO4)
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Solución de HCl 0.1 M
Solución de NaOH 0.5 M
Frasco lavador con agua destilada
METODOLOGIA:
Teórico-práctica.
SISTEMA DE EVALUACION:
RUBRICA DE EVALUACION:
ITEMS DEFICIENTE ACEPTABLE BUENO
EVALUADO (0-1) (2-3) (4-5)
PREPARACIÓN El estudiante no trae la El estudiante El estudiante
guía de laboratorio a presenta la guía de presenta la guía de
desarrollar, no laboratorio a laboratorio a
demuestra conocimiento desarrollar pero no desarrollar,
del tema al ser evaluado demuestra demuestra
previamente y/o no conocimientos del conocimientos sobre
trae los materiales tema y/o trae los el tema y/o Trae
necesarios. materiales de los materiales
laboratorio completos.
incompletos.
REALIZACION El estudiante no tiene en El estudiante no El estudiante
DEL cuenta las normas del tiene en cuenta lo muestra interés en
LABORATORIO laboratorio, incluidas las indicado en la guía el desarrollo de las
de bioseguridad. de trabajo para el prácticas y sigue las
Presenta desarrollo del instrucciones dadas
comportamientos no laboratori0 y/o para llegar a los
adecuados durante el tiene dificultades resultados de
desarrollo de las para integrar la aprendizaje.
prácticas. teoría con la
práctica.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
NASSAR, Victor, QUÍMICA MÉDICA Y BIOLÓGICA 10ª Edición. Barranquilla 1998.
SALVE, Maria Luisa. LABORATORIO DE BIOQUIMICAEditorial Mc Graw Hill-interamericana. 1997.
[Link]/csg/publica/pdf/medicamentos/22_soluciones.PDF
[Link]
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