Universidad Autónoma de Chiapas
Facultad de Ciencias Químicas
Asignatura: Biología celular
Catedrático: Velia Vela Arévalo
Valeria Trinidad Paredes y Villatoro
Técnicas de tinción y fundamentos
Comprimido Conceptos
La lectura abarca el tema de tinción, ➢ Tinción: Una tinción o coloración es una técnica auxiliar
utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la
las técnicas de este procedimiento y
imagen vista al microscopio
el tipo de colorante que se requiere ➢ Célula: Es la unidad más pequeña que puede vivir por sí
para la observación de células que sola y que forma todos los organismos vivos y los tejidos
son difíciles de ver a simple vista en del cuerpo.
el microscopio, dándonos así una ➢ Microscopio: Es una herramienta que permite observar
mejor visión de cómo están objetos, que son demasiado pequeños para ser observados
a simple vista.
repartidas, la cantidad que hay y en
➢ Portaobjetos: Lámina que sirve de soporte para las
algunos casos si están vivas o preparaciones o los cuerpos que se observan en un
muertas, esto con el fin de poder microscopio.
identificar a que grupo pertenecen
Ideas principales
Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Para bacterias, la
fijación por el calor es lo más corriente, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes
Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los
constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Otros colorantes son
moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas
proteínas
La tinción negativa es el reverso del procedimiento de tinción usual: las células se dejan sin teñir, pero se colorea en cambio el medio
que las rodea
Las moléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen estructuras celulares auténticas, pero que son
formaciones completamente artificiales inducidas por el mismo colorante
montaje directo húmedo o examen en fresco: las muestras se extienden directamente sobre la superficie de un portaobjetos para su
observación
El Hidróxido de potasio al 10% (solución de KOH) permite ver elementos de hongos ya que el KOH digiere parcialmente los
componentes proteicos. La tinta china o Nigrosina permite observar células levaduriformes capsuladas. Azul de metileno de Loeffler
puede agregarse a las preparaciones en fresco de heces para observar la presencia de leucocitos.
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico y con el que el estudiante debe
estar perfectamente familiarizado
La pared de la célula bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo, así como para prevenir la lisis osmótica. La pared de la
célula gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas de peptidoglicano, así como algo de ácido teicoico.
Generalmente, 80%-90% de la pared de la célula gram-positiva es peptidoglicano. La pared de la célula gram-negativa, por otro lado,
contiene una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de
fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gram-negativa es peptidoglicano.
Debajo de las sustancias extracelulares, como son las cápsulas y cubiertas mucilaginosas, y en la periferia de una delicada
membrana que está en inmediato contacto con el citoplasma, se encuentra la pared celular, que es una estructura rígida que
da forma a la célula. Las paredes celulares pueden destruirse o romperse en condiciones especiales.
La membrana citoplásmica tiene una significación funcional de suma importancia. Se trata de una membrana
semipermeable, selectiva, que controla el paso de los elementos nutritivos dentro de la célula y la salida de los productos
de desecho.
El material celular contenido dentro de la membrana citoplásmica puede dividirse en tres partes, región citoplásmica, de
apariencia granular, la cual es rica en RNA, región nuclear o cromatínica, que es rica en DNA, y la parte líquida que
mantiene disueltos los elementos nutritivos
Las células bacterianas no contienen el núcleo característico de las células de las plantas y animales superiores. Sin
embargo, contienen en el citoplasma "cuerpos" que se consideran como una estructura nuclear
Ribosomas: tienen estrecha relación con la síntesis de proteínas (30S y 50S para formar un complejo 70S).
Plásmidos: Lazos extracromosómicos de ADN, algún código para la resistencia a drogas, toxinas y otros factores.
Algunas bacterias pueden transformarse en pequeños ovoides o esferas, que son formas celulares muy resistentes,
denominadas esporas, o endosporas, porque se producen intracelularmente
Gram-positivos cuando aparecen teñidos de color azul-violeta y de Gram negativos cuando se visualizan de color rojo-
rosado.
Micrococos, aparecen aislados y dispersos tras la división celular. Diplococos, aparecen por pares. Estreptococoss, tienden
a unirse formando cadenas. Estafilococos, aparecen en grupos irregulares, a veces de gran tamaño
Bacilos: grandes variaciones morfológicas: fusiformes, estreptobacilos, cocobacilos
Espirales (Treponemas, Borrelias ...)
El permanganato de potasio, empleado como contraste, evita la fluorescencia inespecífica.
El naranja de acridina ha sido empleado como colorante vital, que da una fluorescencia verde si el microorganismo está
vivo y roja si está muerto.
Las paredes celulares de los hongos fijan el colorante blanco de calcoflúor aumentando considerablemente su visibilidad en
los tejidos y otras muestras
Se define como la
diferenciación de Se usa
elementos principalmente
celulares de la en la
Tinción de wright sangre y es microbiología y
clasificada como parasitología
una tinción
policromática
Es una tinción •GRAM positivas
diferencial, ya
que clasifica a
Tinción de Gram
las bacterias en •GRAM negativas
dos grandes
grupos
Nos permite
diferenciar bacterias Se usa en el
Técnicas de tinción y resistentes a la diagnostico
fundamentos Tinción de ziehl-Neelsen decoloración con de
alcohol-acido y a las tuberculosis
que no son resistentes
Se utiliza para Se especialista en
preservar e observar cada uno
identificar a los de los componentes
Tinción de azul componentes y estructuras
estructurales de los fúngicas
hongos
es una técnica de esta técnica permite
microscopía que visualizar virus,
permite contrastar las flagelos, bacterias y
|Tinción negativa muestras mediante otros entes de escaso
una sustancia opaca a
tamaño.
los fotones o a los
electrones.
