Pontificia Universidad Javeriana
Facultad de Ciencias
Departamento de Química
Especialización en Análisis Químico Instrumental
Módulo: Métodos de emisión molecular y de dispersión.
Gerson José Vélez Peinado1
Practica 3: Análisis cuantitativo de una mezcla cuyos espectros se solapan
parcialmente.
Objetivos
• Realizar la curva espectral tanto para dos compuestos (permanganato de
potasio y dicromato de potasio) haciendo uso de radiación UV-Vis, con la
finalidad de encontrar la longitud de onda máxima de absorción de cada
compuesto
• Determinar la cantidad de cada uno de los compuestos en una muestra
problema la cual tiene cantidades desconocidas de ambos compuestos.
Introducción
El fundamento de la espectroscopia se debe a la capacidad de las moléculas
para absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV-
visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede
absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura
atómica y de las condiciones del medio (pH, temperatura, fuerza iónica,
constante dieléctrica), por lo que dicha técnica constituye un valioso instrumento
para la determinación y caracterización compuestas. Las moléculas pueden
absorber energía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Cuando
la luz (considerada como energía) es absorbida por una molécula se origina un
salto desde un estado energético basal o fundamental, E1, a un estado de mayor
energía (estado excitado), E2. Y sólo se absorberá la energía que permita el
salto al estado excitado. Cada molécula tiene una serie de estados excitados (o
bandas) que la distingue del resto de moléculas. Como consecuencia, la
absorción que a distintas longitudes de onda presenta una molécula esto es, su
espectro de absorción constituye una seña de identidad de la misma. Por último,
la molécula en forma excitada libera la energía absorbida hasta el estado
energético fundamental. En espectroscopia el término luz no sólo se aplica a la
forma visible de radiación electromagnética, sino también a las formas UV e IR,
que son invisibles. En espectrofotometría de absorbancia se utilizan las regiones
del ultravioleta (UV cercano, de 195-400 nm) y el visible (400-780 nm).
Como la energía se conserva, la diferencia de energía entre el estado excitado
(A*) y el fundamental de la molécula (A) debe ser exactamente igual a la energía
del fotón. Cada molécula tiene una serie de estados excitados discretos (o
bandas) que dependen de su estructura electrónica y que la distinguen del resto
de moléculas. Como consecuencia, el espectro de absorción, es decir, la luz
absorbida en función de la longitud de onda, constituye una verdadera seña de
identidad de cada molécula. Dos moléculas distintas presentarán espectros de
absorción distintos, como se representa esquemáticamente en la siguiente
figura1.
Metodología
Resultados
• Curva espectral KMnO4
KMnO4
Longitud de
%T
onda A Curva espectral KMnO4
-
400 100,4 0,060
0,002
- 0,050
420 100,8
0,003
0,040
-
440 100,5
0,002 0,030
A
460 99,3 0,003 0,020
480 96,5 0,015 0,010
500 92,6 0,033 0,000
390 440 490 540 590
520 88,3 0,054 -0,010
Longitud de onda
540 88,8 0,052
545 88 0,056
560 92,9 0,032
580 96,9 0,014
• Curva espectral K2Cr2O7
K2Cr2O7
Longitud de Curva espectral K2Cr2O7
%T A
onda 0,060
420 91 0,041
440 89,2 0,050 0,050
460 89,8 0,047 0,040
480 93,1 0,031
0,030
500 96,8 0,014
A
520 99,4 0,003 0,020
540 100,6 -0,003
0,010
545 100,8 -0,003
560 101 -0,004 0,000
400 450 500 550 600
580 100,9 -0,004 -0,010
600 100,8 -0,003 Longitud de onda
• Curva de calibración KMnO4 a 545 nm
Tabla 1 Datos curva de calibración KMnO4
ID Xi (M) A
1 0,00003 0,014
2 0,00006 0,056
3 0,00012 0,131
4 0,00018 0,199
5 0,0003 0,315
6 0,00042 0,443
7 0,0006 0,573
Tabla 2 Análisis estadístico curva de calibración KMnO4
Residuales de Residuales de M M corregida
Xi (M)
ID A A corregido (Y) Y Y^2 Corregidas ^2 M^2
1 0,00003 0,014 0,03564 -0,02164 0,0004681338 -0,000214 0,000000046 0,00000000090
2 0,00006 0,056 0,06527 -0,00927 0,0000859848 -0,000184 0,000000034 0,00000000360
3 0,00012 0,131 0,12455 0,00645 0,0000416593 -0,000124 0,000000015 0,00000001440
4 0,00018 0,199 0,18382 0,01518 0,0002304810 -0,000064 0,000000004 0,00000003240
5 0,0003 0,315 0,30236 0,01264 0,0001596685 0,000056 0,000000003 0,00000009000
6 0,00042 0,443 0,42091 0,02209 0,0004879858 0,000176 0,000000031 0,00000017640
7 0,0006 0,573 0,59873 -0,02573 0,0006619300 0,000356 0,000000127 0,00000036000
∑ Xi ∑ Yi ̂
∑𝒀 ̂
∑ Yi − 𝒀 ∑(𝑌𝑖 − 𝑌̂ )2 ∑(𝑋𝑖 − 𝑋̅ ) ∑(𝑋𝑖 − 𝑋̅ )2 ∑(𝑋𝑖)2
∑ 2,59971E-07
0,002 1,731 1,731 0,000 0,002 0,000000 0,000
Curva de calibración KMnO4 a 545 nm
0,7
0,6 y = 987,88x + 0,006
R² = 0,9917
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,0001 0,0002 0,0003 0,0004 0,0005 0,0006 0,0007
Ilustración 1 Curva de calibración de KMnO4 a 545 nm
n=7
X promedio= 0,000244
Y promedio= 0,2472
Regresión lineal e incertidumbre de las medidas
Tabla 3. Datos regresión lineal
̂ = bXi + a
𝒀
Intercepto a 0,006
Pendiente b 987,88
Concentración de RAZR (ppm) Xi C
Coeficiente correlación momento R 0,9958
producto
Coeficiente determinación R^2 0,9917
Por tanto, Y= 987,88C + 0,006
Incertidumbre de las medidas
• Desviación estándar y/x
̂ )𝟐
∑(𝒀𝒊−𝒀 𝟎,𝟎𝟎𝟐
𝑺𝒚⁄ = √ = =√ = 𝟎, 𝟎𝟐𝟎𝟔𝟔𝟖
𝟕−𝟐
𝒙 𝒏−𝟐
Escriba aquí la ecuación.
• Desviación estándar de la pendiente
𝑺𝒚⁄ 𝟎, 𝟎𝟐𝟎𝟔𝟔𝟖
𝑺𝒃 = 𝒙 = 𝟒𝟎, 𝟓𝟑𝟓𝟔𝟐𝟒
̅ )𝟐
√∑(𝑿𝒊− 𝑿 √𝟐, 𝟔𝑬 − 𝟕
• Desviación estándar del intercepto
∑(𝑿𝒊)𝟐
𝑺𝒂 = 𝑺𝒚⁄ x √ 𝟔, 𝟕𝟕𝟕𝑬 − 𝟎𝟕
𝒙 ̅)
𝒏 ∗ ∑(𝑿𝒊− 𝑿
𝟐
𝟎, 𝟎𝟐𝟎𝟔𝟔𝟖 ∗ √ = 𝟎, 𝟎𝟏𝟐𝟔𝟏
𝟕 ∗ 𝟐, 𝟔𝑬 − 𝟕
Límites de confianza
Para un nivel de confianza del 95% y n-2= 5, el valor de “t” es de 2,015. Por lo
tanto
• Incertidumbre de la pendiente
𝑏 + 𝑡 𝑆𝑏 = 𝟗𝟖𝟕, 𝟖𝟖 ± 𝟐, 𝟎𝟏𝟓 ∗ 𝟒𝟎, 𝟓𝟑𝟓𝟔𝟐𝟒 = 𝟖𝟏, 𝟔𝟕𝟗𝟑
• Incertidumbre del intercepto
𝑎 + 𝑡 𝑆𝑎 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟔 ± 𝟐, 𝟎𝟏𝟓 ∗ 𝟎, 𝟎𝟏𝟐𝟔𝟏 = 𝟎, 𝟎𝟐𝟓𝟒𝟏
La ecuación de la recta para una incertidumbre del 95% es
̂
𝒀 = (987,88 ±𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟒𝟔)* Xi + (0,006 ±𝟎, 𝟎𝟐𝟓𝟒𝟏)
Límite de detección y cuantificación
• Límite de detección
𝑌𝐿𝐷𝐷 = 𝑌𝐵 + 3 𝑆 𝑥⁄𝑦 𝟎, 𝟎𝟎𝟔 + 𝟑 ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟎𝟔𝟔𝟖
= 𝟎, 𝟎𝟔𝟖𝟎𝟎𝟒𝟏𝟕𝟒
𝑌𝐿𝐷𝐷 − 𝑎 𝟎, 𝟎𝟔𝟖𝟎𝟎𝟒𝟏𝟕𝟒 − (𝟎, 𝟎𝟎𝟔)
𝑋𝐿𝐷𝐷 = 𝟗𝟖𝟕, 𝟖𝟖
𝑏
= 𝟔, 𝟐𝟕𝟔𝟒𝟗𝑬 − 𝟎𝟓
• Límite de cuantificación
𝑌𝐿𝐷𝐶 = 𝑌𝐵 + 10 𝑆 𝑥⁄𝑦 𝟎, 𝟎𝟎𝟔 + 𝟏𝟎 ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟎𝟔𝟔𝟖 = 𝟎, 𝟐𝟏𝟐𝟔
𝑌𝐿𝐷𝐶 − 𝑎 𝟎, 𝟐𝟏𝟐𝟔 − (𝟎, 𝟎𝟎𝟔)
𝑋𝐿𝐷𝐶 = = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟐𝟎𝟗𝟐
𝑏 𝟗𝟖𝟕, 𝟖𝟖
• Curva de calibración KMnO4 a 440 nm
ID Xi (M) A
1 0,00003 -0,012
2 0,00006 -0,001
3 0,00012 0,0223
4 0,00018 0,032
5 0,0003 0,019
6 0,00042 0,028
7 0,0006 0,011
Curva de calibración KMnO4 a 440 nm
0,035
0,03
0,025
0,02
0,015
0,01
0,005
0
0 0,0001 0,0002 0,0003 0,0004 0,0005 0,0006 0,0007
-0,005
-0,01
-0,015
Al observarse poca linealidad, se procede a eliminar los valores sospechosos. Al
ser tan obvio el desface, no se hace necesario utilizar el “Test Q” para valores
sospechosos. La nueva tabla de datos nos queda
ID Xi (M) A
1 0,00003 -0,012
2 0,00006 -0,001
3 0,00012 0,0223
4 0,00018 0,032
Curva de calibración KMnO4 a 440 nm
0,04
y = 300,51x - 0,019
R² = 0,9669
0,03
0,02
0,01
0
0 0,00002 0,00004 0,00006 0,00008 0,0001 0,00012 0,00014 0,00016 0,00018 0,0002
-0,01
-0,02
• Curva de calibración K2Cr2O7 a 440 nm
ID Xi (M) 440 nm
1 0,00015 0,022
2 0,0003 0,55
3 0,0006 0,1361
4 0,0009 0,225
5 0,0015 0,288
6 0,0021 0,199
7 0,003 0,554
Curva de calibración K2Cr2O7
0,6
y = 85,107x + 0,1781
0,5 R² = 0,1923
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,0005 0,001 0,0015 0,002 0,0025 0,003 0,0035
Al observar la gráfica, se ve claramente que hay poca correlación entre los datos,
con lo cual se hace necesario el uso del “Test Q” para valores sospechosos2
Q tabulada n=7 nivel de confianza 95% 0,568
Q calculada = Divergencia/ Recorrido Divergencia 0,335
Q calculada 0,63 Recorrido 0,532
Q calculado > Q tabulado
El punto 6 puede ser eliminado por Test Q de datos sospechosos
La nueva tabla de datos nos queda
ID Xi (M) 440 nm
1 0,00015 0,022
2 0,0003 0,55
3 0,0006 0,1361
4 0,0009 0,225
5 0,0015 0,288
7 0,003 0,554
Curva de calibración
0,6
y = 113,99x + 0,1733
0,5 R² = 0,3072
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,0005 0,001 0,0015 0,002 0,0025 0,003 0,0035
De manera similar a la primera curva de calibración, se observa un dato
desfazado, por lo cual se procede a aplicarle el “Test Q” para valores
sospechosos
Q tabulada n=6 nivel de confianza 95% 0,625
Q calculada = Divergencia/ Recorrido Divergencia 0,3839
Q calculada 0,72 Recorrido 0,532
Q calculado > Q tabulado
El punto 2 puede ser eliminado por Test Q de datos sospechosos
La nueva tabla de datos nos queda
ID Xi (M) 440 nm
1 0,00015 0,022
3 0,0006 0,1361
4 0,0009 0,225
5 0,0015 0,288
7 0,003 0,554
Curva de calibración K2Cr2O7
0,6
y = 179,29x + 0,0245
0,5 R² = 0,9842
0,4
0,3
A
0,2
0,1
0
0 0,0005 0,001 0,0015 0,002 0,0025 0,003 0,0035
Concentracición (M)
La nueva curva de calibrado posee una mayor correlación en sus datos con
respecto a la anterior, con lo cual se procede a realizar el respectivo análisis
estadístico.
A corregido Residuales Residuales de ppm ppm corregida
Xi (M)
ID A (Y) de Y Y^2 Corregidas ^2 ppm^2
1 0,00015 0,022 0,05139 -0,02939 0,0008639778 -0,00108 0,0000012 0,0000000225
2 0,0006 0,1361 0,13207 0,00403 0,0000162087 -0,00063 0,0000004 0,0000003600
3 0,0009 0,225 0,18586 0,03914 0,0015318613 -0,00033 0,0000001 0,0000008100
4 0,0015 0,288 0,29344 -0,00544 0,0000295392 0,00027 0,0000001 0,0000022500
5 0,003 0,554 0,56237 -0,00837 0,0000700569 0,00177 0,0000031 0,0000090000
∑ Xi ∑ Yi ̂
∑𝒀 ̂
∑ Yi − 𝒀 ∑(𝑌𝑖 − 𝑌̂ )2 ∑(𝑋𝑖 − 𝑋̅ )2 ∑(𝑋𝑖)2
∑(𝑋𝑖 − 𝑋̅ )
0,006150 1,22510 1,22513350 -0,00003350 0,00251164 0,00000000 0,00000488 0,00001244
n=5
X promedio= 0,001230
Y promedio=
Regresión lineal e incertidumbre de las medidas
Tabla 4. Datos regresión lineal
̂ = bXi + a
𝒀
Intercepto a 0,0245
Pendiente b 179,29
Concentración de RAZR (ppm) Xi C
Coeficiente correlación momento R 0,9921
producto
Coeficiente determinación R^2 0,9842
Por tanto, Y= 179,29C + 0,0245
Incertidumbre de las medidas
• Desviación estándar y/x
̂ )𝟐
∑(𝒀𝒊−𝒀 𝟎,𝟎𝟎𝟑𝟎𝟕𝟖
𝑺𝒚⁄ = √ = =√ = 𝟎, 𝟎𝟐𝟖𝟗𝟑𝟓
𝟓−𝟐
𝒙 𝒏−𝟐
Escriba aquí la ecuación.
• Desviación estándar de la pendiente
𝑺𝒚⁄
𝒙
𝟎, 𝟎𝟐𝟖𝟗𝟑𝟓
𝑺𝒃 = = 𝟏𝟑, 𝟏𝟎𝟎𝟖
̅ )𝟐
√∑(𝑿𝒊− 𝑿 √𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟒𝟖𝟖
• Desviación estándar del intercepto
∑(𝑿𝒊)𝟐
𝑺𝒂 = 𝑺𝒚⁄ x √ 𝟏, 𝟐𝟒𝟒𝟐𝟓𝑬 − 𝟎𝟓
𝒙 ̅)
𝒏 ∗ ∑(𝑿𝒊− 𝑿
𝟐
𝟎, 𝟎𝟐𝟖𝟗𝟑𝟓 ∗ √ = 𝟎, 𝟎𝟏𝟕𝟒𝟔𝟔
𝟓 ∗ 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟒𝟖𝟖
Límites de confianza
Para un nivel de confianza del 95% y n-2= 3, el valor de “t” es de 2,3534. Por lo
tanto
• Incertidumbre de la pendiente
𝑏 + 𝑡 𝑆𝑏 = 𝟏𝟕𝟗, 𝟐𝟗 ± 𝟐, 𝟑𝟓𝟑𝟒 ∗ 𝟏𝟑, 𝟏𝟎𝟎𝟖 = 𝟑𝟎, 𝟖𝟑𝟏𝟒
• Incertidumbre del intercepto
𝑎 + 𝑡 𝑆𝑎 = 𝟎, 𝟎𝟐𝟒𝟓 ± 𝟐, 𝟑𝟒𝟑𝟓 ∗ 𝟎, 𝟎𝟏𝟕𝟒𝟔𝟔 = 𝟎, 𝟎𝟒𝟏𝟏𝟏
La ecuación de la recta para una incertidumbre del 95% es
̂
𝒀 = (179,29 ±𝟑𝟎, 𝟖𝟑𝟏𝟒)* Xi + (0,0245 ±𝟎, 𝟎𝟒𝟏𝟏𝟏)
Límite de detección y cuantificación
• Límite de detección
𝑌𝐿𝐷𝐷 = 𝑌𝐵 + 3 𝑆 𝑥⁄𝑦 𝟎, 𝟎𝟐𝟒𝟓 + 𝟑 ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟖𝟗𝟑𝟓
= 𝟎, 𝟏𝟏𝟏𝟑𝟎
𝑌𝐿𝐷𝐷 − 𝑎 𝟎, 𝟏𝟏𝟏𝟑𝟎 − (𝟎, 𝟎𝟐𝟒𝟓)
𝑋𝐿𝐷𝐷 = = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟒𝟖
𝑏 𝟏𝟕𝟗, 𝟐𝟗
• Límite de cuantificación
𝑌𝐿𝐷𝐶 = 𝑌𝐵 + 10 𝑆 𝑥⁄𝑦 𝟎, 𝟎𝟐𝟒𝟓 + 𝟏𝟎 ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟖𝟗𝟑𝟓
= 𝟎, 𝟑𝟏𝟑𝟖𝟓
𝑌𝐿𝐷𝐶 − 𝑎 𝟎, 𝟑𝟏𝟑𝟖𝟓 − (𝟎, 𝟎𝟐𝟒𝟓)
𝑋𝐿𝐷𝐶 = = 𝟎, 𝟎𝟎𝟏𝟔𝟏
𝑏 𝟏𝟕𝟗, 𝟐𝟗
• Curva de calibración K2Cr2O7 a 545 nm
ID Xi (M) 440 nm
1 0,00015 0,0017
2 0,0003 0,009
3 0,0006 0,025
4 0,0009 0,009
5 0,0015 0,001
6 0,0021 0,006
7 0,003 0,0079
Curva de calibración K2Cr2O7 a 545 nm
0,03
0,025
y = 52x - 0,0063
0,02 R² = 0,9995
0,015
0,01
0,005
0
0 0,0001 0,0002 0,0003 0,0004 0,0005 0,0006 0,0007
Aplicando Test Q de valores sospechosos, nos quedamos solo con el tramo
lineal de la gráfica, entonces nos queda de la siguiente forma
ID Xi (M) 440 nm
1 0,00015 0,0017
2 0,0003 0,009
3 0,0006 0,025
Curva de calibración K2Cr2O7 a 545 nm
0,03
0,025
y = 52x - 0,0063
0,02
R² = 0,9995
0,015
0,01
0,005
0
0 0,0001 0,0002 0,0003 0,0004 0,0005 0,0006 0,0007
Es bien sabido que la curva ideal debe tener muchos más puntos, pero dadas
las circunstancias, se hace necesario el uso de solamente 3 puntos, lo cual
genera un error un poco alto.
• Ecuación de la recta y absortividad molar para cada compuesto
KMnO4 545 nm 440 nm
Ecuación de la recta y = 987,88x + 0,006 y = 300,51x - 0,019
Coeficiente de m= ɛ.b -> b=1; m= ɛ= m= ɛ.b -> b=1; m= ɛ=
absortividad molar ɛ 987,88 300,51
K2Cr2O7 545 nm 440 nm
Ecuación de la recta y = 52x - 0,0063 y = 179,29x + 0,0245
Coeficiente de m= ɛ.b -> b=1; m= ɛ= 52 m= ɛ.b -> b=1; m= ɛ=
absortividad molar ɛ 179,29
Ahora hallamos las concentraciones de cada compuesto en la muestra
problema
Para la mezcla problema
Absorbancia a 440 nm: 0,6079
Absorbancia a 545 nm: 0,6818
Luego, teniendo en cuenta que
𝐴1 = ε𝑀1 𝑏𝐶𝑀 + ε𝑁1 𝑏𝐶𝑁
𝐴2 = ε𝑀2 𝑏𝐶𝑀 + ε𝑁2 𝑏𝐶𝑁
Entonces, teniendo en cuenta que b=1; M= KMnO4 y N= K2Cr2O7
a 440 nm
0,6079 = 300,51𝐶𝑀 + 179,29𝐶𝑁 (1)
a 545 nm
0,6818 = 987,88𝐶𝑀 + 52𝐶𝑁 (2)
Luego
0,6079 − 179,29𝐶𝑁
= 𝐶𝑀 (3)
300,51
𝐶𝑀 = −0,59456𝐶𝑁
Sustituyendo (3) en (2), nos queda
0,6079 − 179,29𝐶𝑁
0,6818 = (987,88)( ) + 52𝐶𝑁
300,51
600,53 177117,0052
0,6818 = − 𝐶𝑁 + 52𝐶𝑁
300,51 300,51
0,6818 = 1,998 − 589,38𝐶𝑁 + 52𝐶𝑁
0,6818 − 1,998
= 𝐶𝑁
−589,38 + 52
−1,3162
𝐶𝑁 =
−537,38
𝑪𝑵 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟐𝟒𝟒𝟗 𝑴
Ahora reemplazamos CN en la ecuación 3 y obtenemos CM
0,6079 − 179,29(0,002449)
𝐶𝑀 =
300,51
𝑪𝑴 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟓𝟔𝟏 𝑴
Conclusiones
• Al realizar la curva espectral tanto para el permanganato de potasio, como
para el dicromato de potasio, se logró determinar que la longitud de onda
máxima de cada uno de los compuestos fue de 545 y 440 nanómetros
respectivamente, asimismo se calcularon las absortividades molares para
cada uno a las diferentes longitudes de onda. Para el caso del
permanganato de potasio, los coeficientes de absortividad molar a 440 y
545 nanómetros fueron 300,51 y 987,88 cm-1 M-1 respectivamente. En el
caso de dicromato de potasio, las absortividades molares fueron de
179,29 y 52 cm-1 M-1.
• Luego del análisis de datos, se encontró que las concentraciones de cada
compuesto en la mezcla fueron de 0,000561 M para el permanganato de
potasio y de 0,002449 M para el dicromato de potasio.
Bibliografía
1. Skoog, D. a, Holler, F. J. & Nieman, T. a. Principios de Análisis
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2. Harris, D. C. Análisis químico cuantitativo. (Reverté, 2007).
