CORPORACIÓN TECNOLÓGICA DE BOGOTÁ

ANÁLISIS INSTRUMENTAL
DOCENTE: CARLOS DAVID OVIEDO LEÓN
TALLER NO 2: MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN Y LEY DE BEER

1. Una solución presenta una absorbancia de 0,520, ¿Qué dilución hay que hacerle a esta solución para que la
absorbancia sea 0,130 en la misma celda?

2. Determine el rango de concentraciones de una sustancia M con absortividad molar 3500M -1 cm-1, para que las
absorbancias estén entre 0,100 y 1,000 al leerlas en una celda de 1,0 cm.

3. Una muestra particular coloreada que se sabe que sigue la ley de Beer, muestra un 80% transmitancia cuando se
mide en una celda de 1cm de longitud.
a. Calcule el porcentaje de transmitancía para una disolución de doble concentración, usando la misma celda.
b. Cuál debe ser la longitud de la celda, para obtener la misma transmitancía (80%) para una solución que tenga
el doble de concentración original.
c. Calcule el % de transmitancía de la solución original cuando ésta esté contenida en una celda de 0,5cm de
longitud
d. Si la concentración original fue de 0,5 mg/L. ¿Cuál es el factor de absortividad a?

4. El amoníaco puede ser determinado espectrofotométricamente mediante su reacción con fenol en presencia de
hipoclorito, dando lugar a una sustancia de color azul que tiene su absorción máxima a 625 nm. Una muestra de 4.37
mg de proteína se digiere químicamente para convertir en amoníaco todo el nitrógeno presente, y al final del
tratamiento el volumen de la muestra es de 100.00 mL. Una alícuota de 10.00 mL de esta disolución se trata con 5.00
mL de fenol y 2 mL de hipoclorito de sodio, y la muestra se diluye a 50 mL, midiéndose su absorbancia a 625 nm en
una celda de 1.00 cm de espesor después de 30 minutos. Se prepara también una disolución de referencia patrón con
1.00 x 10-2 g de cloruro de amonio disueltos en un litro de agua; una alícuota de 10 mL de esta disolución patrón se
trata de la misma manera que la disolución problema. El blanco se prepara usando agua destilada en lugar del
problema.

PM (NH4Cl) = 53.50 [Link]-1

PA (N) = 14.006 [Link]

a. Calcule la absortividad molar del producto azul.

b. Calcule el porcentaje en masa de nitrógeno en la proteína.

5. El ion cobre (I) forma un complejo coloreado con la neocupreína el cual presenta un máximo de absorbancia a 454
nm. Dicho complejo puede extraerse con alcohol isoamílico, el cual no es soluble en agua. Suponga que aplica el
siguiente procedimiento: 1) una roca que contiene cobre se pulveriza y los metales se extraen con un ácido fuerte. La
disolución ácida se neutraliza con una base, y la disolución resultante se lleva a 250 mL. 2) una alícuota de 10 mL de
la misma se trata con 10 mL de agente reductor para pasar todo el cobre a ion cuproso, agregándose 10 mL de buffer
para mantener el pH en un valor adecuado para la formación del complejo. 3) Se toman 15 mL de esta disolución, se
agregan 10 mL de neocupreína y 20 mL de alcohol isoamílico. Luego de agitar fuertemente, las dos fases se separan
y el complejo de cobre está en su totalidad en la fase orgánica. Se mide la absorbancia de la fase orgánica a 454 nm
en una celda de 1.00 cm. El blanco preparado presenta una absorbancia de 0.056.

a. Si la muestra de roca tiene un miligramo de cobre, ¿cuál es la concentración del mismo presente en la fase orgánica?
b. Si ε = 7.90 x 103 [Link]-1 para el complejo, ¿cuál será el valor de absorbancia medido?
c. Si se analiza una roca diferente y se obtiene una absorbancia no corregida de 0.874 ¿Cuántos miligramos de cobre hay
en la roca?
PA (Cu) = 63.546 [Link]-1
d. Calcule la absortividad molar del producto azul.
e. Calcule el porcentaje en masa de nitrógeno en la proteína.
6. El ion nitrito se emplea como conservador para el tocino y otros alimentos, generándose una controversia con relación
a su potencial efecto carcinogénico. En una determinación espectrofotométrica de nitrito, se llevan a cabo una serie de
reacciones que concluyen con la formación de un producto coloreado con absorbancia máxima a 520 nm. El procedimiento
seguido para desarrollar color puede abreviarse de la siguiente manera:
1) a 50.00 mL de la disolución problema que contiene nitrito, se le agrega 1.00 mL de disolución de ácido sulfamílico
(reacción 1:1).
2) luego de 10 minutos, se agregan 2.00 mL de disolución de 1- aminonaftaleno (reacción 1:1) y 1.00 mL de disolución
buffer.
3) 15 minutos más tarde, se lee la absorbancia a 520 nm en una celda de b = 5.00 cm.
Con esta técnica se analizan 3 soluciones:

a. Calcule la absortividad molar del producto coloreado.

b. ¿Cuántos microgramos de nitrito están presentes en los 50,0 mL del extracto de alimento B?
PM (NO2-) = 46.004 [Link]-1

7.. El análisis espectrofotométrico de fosfatos puede realizarse mediante el siguiente procedimiento:

a) se coloca la toma de muestra en un matraz aforado de 5 mL y se agregan 0.500 mL de disolución de molibdato de sodio
y ácido sulfúrico y 0.200 mL de disolución de sulfato de hidrazina, y se diluye casi hasta el enrase con agua destilada.
b) la disolución diluida se calienta 10 minutos a 100 ºC, formándose un compuesto azul (ácido 1,2 molibdofosfórico).
c) se enfría el matraz, se enrasa con agua destilada y se mide la absorbancia de la disolución resultante a 830 nm
empleando una celda de 1.00 cm.
a. Al analizar 0.140 mL de disolución patrón de fosfato - KH2PO4 (PM 136.09 [Link]-1) - preparada por disolución de 81.37
mg del mismo en 500.00 mL de agua, se obtiene una absorbancia de 0.829. Un blanco preparado en forma idéntica tiene
absorbancia 0.017. Halle la absortividad molar del producto coloreado.
b. 0.300 mL de disolución de ferritina (proteína almacenadora de hierro que contiene fosfato) obtenidos por digestión de
1.35 mg de proteína en 1.00 mL de solvente se analiza con este procedimiento, obteniéndose una absorbancia de 0.836.
El blanco da una absorbancia de 0.038. Halle el porcentaje en masa de fosfato en la ferritina.
PM (PO43-) = 94.972 [Link]-1

8. Una toma de 25.00 mL de muestra problema que contiene hierro es analizada tratándola con ácido nítrico y haciéndola
reaccionar con un exceso de cianuro de potasio para formar un complejo rojo. La disolución se diluye a 100.00 mL y
una alícuota de la misma es colocada en una celda de camino óptico variable. Una muestra de referencia de 10.00
mL cuya [Fe3+] = 6.80 x 10-4 M se trata de la misma forma diluyéndose a 50.00 mL y colocándose una alícuota de la
misma en una celda de 1.00 cm. La disolución problema da la misma absorbancia que la disolución de referencia
cuando se coloca en una celda de 2.48 cm. ¿Cuál es la concentración de hierro en la muestra problema?

9. La determinación simultánea de cobalto y níquel se puede basar en la absorción de sus respectivos complejos con
8-hidroxiquinolinol. Las absortividades molares correspondientes a sus máximos de absorción son las siguientes:

Calcular la concentración molar de níquel y cobalto en cada una de las siguientes disoluciones, basándose en los
siguientes datos:
10. Una disolución de concentración C tiene una transmitancia del 80%. Determinar el porcentaje de transmitancia de
una disolución de la misma sustancia de concentración 3C.

11. Una disolución tiene una transmitancia de 0,10 a una cierta λ,

A. Determinar su absorbancia
B. Si su concentración es de 0,020 g / L, su masa molecular de 100 y su transmitancia fue medida en celdas de 1,0
cm, determinar su absortividad molar
C. Calcular la transmitancia para una disolución que tenga la mitad de concentración pero se mida en cubetas de
5,0 cm.

12. Una solución 15 μg/mL de un compuesto de masa molecular 280 g/mol absorbe el 65% de la radiación incidente, a
una longitud de onda característica de dicho compuesto. Si el camino óptico es de 2 cm, determine la absortividad
molar del compuesto.

13. Para la determinación de Cu en una aleación se pesa 1,843 g de muestra, se disuelve y se afora a 500 mL. Se miden
25 mL de esta solución y se diluye hasta un volumen final de 250 mL. De esta última solución se miden 10 mL y se
afora hasta 100 mL, la cual presenta una absorbancia de 0,045. Por otra parte, se mezclan 10 mL de la última
solución diluida, con 20 mL de una solución patrón que contiene 0,5 ppm de Cu y se diluye a 100 mL. Esta solución
presenta una absorbancia de 0,098. Determine el % de Cu en la muestra.

14. En la determinación de cinc en dos muestras de agua potable, se utilizó la espectroscopia de absorción atómica y se
obtuvieron los datos siguientes:

M1 y M2 corresponden a las señales obtenidas para las

muestras de agua potable. Para el análisis se tomaron 10 mL
de las muestras de agua potable, y se diluyeron a un volumen
final de 25 mL. Construya la curva de calibración y determine la
cantidad de Zn en las muestras.

15. La adenina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos nucleicos (ADN y ARN) y tiene
una absortividad molar de 13.100 L/cm mol, a una longitud de onda de 263 nm. Calcule la concentración molar de
una solución de adenina, que presenta un porcentaje de transmitancia del 75% cuando 2 mL de la solución, son
colocados en una celda de 1 cm.

16. Para la determinación de aluminio en muestras de agua de río se aplicó el método de adición de estándar. En todos
los casos se utilizó un volumen de la muestra de 10 mL, a las cuales se les adiciono una solución patrón (S) de
aluminio 0,15 mM. Finalmente, todas las soluciones se diluyeron a un volumen de 25 mL y se obtuvieron los resultados
siguientes:

Determine la concentración de aluminio en la muestra de agua de río.

17. Una muestra de una amina de peso molecular desconocido, es convertida en el picrato de amina (una reacción 1:1)
por tratamiento con ácido pícrico (PM = 229 g/mol). La mayoría de los picratos de aminas tienen más o menos las
mismas absortividades molares, log ε = 4,13 a 380 nm en etanol al 95%. Una disolución de picrato de amina fue
preparada disolviendo 0,03 g del material en exactamente 1 litro de etanol al 95%. La absorbancia de la solución en
una celda de 1 cm, a 380 nm es de 0,8. Estimar el peso molecular del picrato de la amina.