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Juana Inés Ramírez De Azbaje16100993
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Juana Inés Ramírez De Azbaje1
UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA
PROPUESTA PARA LA OBTENCION DE UN COLORANTE NATURAL
A PARTIR DE LA PULPA SECA DEL Coffea arabica (CAFE)
TRABAJO DE GRADUACION PRESENTADO POR:
MARILYN YASMIN DIAZ GIRON
GLENDY NOHEMI ELIAS MARROQUIN
PARA OPTAR AL GRADO DE
LICENCIATURA EN QUIMICA Y FARMACIA
AGOSTO 2009
SAN SALVADOR, EL SALVADOR, CENTRO AMERICA.
2
UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
RECTOR
MSC. RUFINO ANTONIO QUEZADA SANCHEZ
SECRETARIO GENERAL
LIC. DOUGLAS VLADIMIR ALFARO CHAVEZ
FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA
DECANO
LIC. SALVADOR CASTILLO AREVALO
SECRETARIA
MSC. MORENA LIZETTE MARTINEZ DE DIAZ
3
COMITE DE TRABAJO DE GRADUACION
COORDINADORA GENERAL
Licda. María Concepción Odette Rauda Acevedo
ASESORA DE AREA ANALISIS DE ALIMENTOS: FISICOQUIMICO
Ing. Rina Lavinia Hidalgo de Medrano
ASESORA DE AREA GESTION AMBIENTAL: CALIDAD AMBIENTAL
Licda. Cecilia Haydee Gallardo de Velásquez
DOCENTE DIRECTOR
Lic. Guillermo Antonio Castillo Ruiz
4
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a Dios Todopoderoso, el habernos permitido concluir este
trabajo, logrando así nuestra meta académica.
A nuestro docente director Lic. Guillermo Antonio Castillo, por su confianza y
guía constante.
A Licda. Odett Rauda, Licda. Cecilia de Velásquez, Ing. Rina de Medrano
gracias por sus conocimientos y experiencia profesional para la realización de
este trabajo.
5
DEDICATORIA
A Dios Todopoderoso por todas sus Bendiciones.
A mis padres Fernando Díaz y Gladis de Díaz por su gran sacrificio, brindarme
siempre amor y por todos sus consejos en los momentos adecuados.
A mis hermanas Wendy, Jessica por su constante apoyo, cariño y por
desearme siempre lo mejor.
A Lic. Guillermo Castillo por su guía en la realización de este trabajo.
A Glendy por su cariño y ayuda.
A toda mi familia por su cariño.
Marilyn
6
DEDICATORIA
A Dios Todopoderoso, a Jesucristo y Espíritu Santo por haberme ayudado,
iluminado y darme inteligencia en cada momento de mi formación académica.
A mis padres: Eleodoro Elías y Gladys de Elías por su amor, sus consejos su
sacrificio y su apoyo incondicional; por que ellos permitieron que alcanzara mi
meta.
A mi hijita: Rebeca por que su amor y alegría hacen que cada obstáculo sea un
triunfo en mi vida.
A mis hermanos: Omar, Samuel, Judith, Debora, por su cariño y consejos.
A Lic. Guillermo Castillo por su apoyo y guía en la realización de este trabajo.
A Marilyn por su cariño, comprensión, paciencia y ayuda.
A mis amigos y compañeros que me animaron a salir a delante.
A aquellas personas que me han demostrado su cariño y apoyo con sus
oraciones y consejos.
Glendy
7
ÍNDICE
Pág.
Contenido
Resumen
Capítulo I.
1.0 Introducción xx
Capítulo II.
2.0 Objetivos
2.1 Objetivo General 23
2.2 Objetivos Específicos 23
Capítulo III.
3.0 Marco Teórico
3.1 Monografía de Coffea arabica 25
3.1.1 Historia 26
3.1.2 Habitat 29
3.1.3 Usos 30
3.2 Colorantes 33
3.3 Clasificación de Colorantes 34
3.3.1 Colorantes de Origen Animal 34
3.3.2 Colorantes de Origen Natural 35
3.3.3 Colorantes de Origen Mineral 37
3.3.4 Colorantes Sintéticos 38
8
3.3.5 Otra Clasificación de Colorantes 39
3.4 Extracción del Colorante 40
3.5 Fibras Naturales a Teñir 42
3.6 Tinción 43
3.7 Clasificación de Mordientes 44
3.7.1 Mordientes de Origen Mineral 44
3.7.2 Mordientes Vegetales 45
3.7.3 Teñido y Mordentado 46
3.8 Espectroscopía 47
3.8.1 Espectroscopía Ultavioleta Visible 48
3.8.2 Espectroscopía Infrarroja 48
Capítulo IV.
4.0 Diseño Metodológico
4.1 Tipo de Estudio 51
4.2 Investigación Bibliográfica 51
4.3 Investigación de Campo 52
4.3.1 Universo 52
4.3.2 Muestra 52
4.3.3 Recolección de la Muestra 52
4.3.4 Preparación 52
4.4 Parte Experimental 53
9
Capítulo V.
5.0 Resultados e Interpretación 58
5.1 Extracción del Colorante 58
5.2 Identificación Fitoquímica de Metabolitos Secundarios 59
5.3 Análisis del Colorante por Espectrofotometría Infrarroja 64
5.4 Análisis del Colorante por Espectrofotometría UV-Visible 67
5.5 Comparación del poder de Tinción del Extracto Colorante 69
Capítulo VI.
6.0 Conclusiones 82
Capítulo VII.
7.0 Recomendaciones 86
Bibliografía
Glosario
Anexos
10
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro Nº. Pág.
1. Contenido de Compuestos en la Pulpa de Café 32
2. Clasificación de Colorantes según Composición Química 36
3. Extracción del Colorante de la Pulpa seca del Café 58
4. Identificación de Metabolitos Secundarios con
Extracto Acuoso de la Pulpa seca del Café 59
5. Identificación de Metabolitos Secundarios con
Extracto Alcohólico de la Pulpa seca del Café 61
6. Resumen de las bandas características del colorante
del Coffea arabica por Espectroscopia Infrarroja 65
7. Comparación del poder de Tinción del Extacto Colorante
de la Pulpa seca del Coffea arabica, utilizando Mordientes al 25% 69
8. Cálculos de Ultravioleta máximos para Cromóforos Conjugados 117
9. Valores de rangos de Ultravioleta Visible de Flavonoides 121
11
ÍNDICE DE FIGURAS
Fig. Nº Pág.
1. Fruto del Café 25
2. Semilla del Café 26
3. Diagrama de diferentes Métodos de Extracción de
las especies vegetales 41
4. Esquema de Proceso de Extracción del colorante de la pulpa
seca del Café con NaOH 0.5 N 53
5. Esquema de Proceso de Extracción acuosa y alcohólica
de la Pulpa seca del Coffea arabica, para determinación
de Metabolitos Secundarios 54
6. Esquema de Identificación por Espectroscopía Ultravioleta Visible,
Espectroscopía Infrarroja en extracto obtenido con NaOH 0.5 N
del Coffea arabica 55
7. Esquema del Proceso de Tinción del extracto colorante alcalino
de la Pulpa seca del Café en fibras de algodón, lino, seda 56
8. Identificación de Flavonoides en extracto acuoso 59
9. Identificación de Taninos en extracto acuoso 60
10. Identificación de Flavonoides en extracto alcohólico 61
11. Identificación de Taninos en extracto alcohólico 62
12. Identificación de Alcaloides en extracto alcohólico 62
13. Espectro del extracto alcalino de coffea arabica 64
12
14. Banda del grupo C=O 64
15. Bandas del grupo C=C de alquenos y de fenol 64
16. Espectro UV – Visible del Extracto Alcalino 67
17. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Sulfato ferroso 25% 70
18. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Alumbre 25% 71
19. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Sulfato de Cobre 25% 72
20. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Cloruro de Sodio 25% 73
21. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Cloruro de Estaño 25% 73
22. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Ceniza – Limón 25% 74
23. Fibras de Lino, Algodón, Seda con Ácido Tánico 25% 75
24. Fibras de Lino, Algodón, Seda sin Mordiente 75
25. Fibra de Algodón con Sulfato Ferroso 25% 77
26. Fibra de Lino con Sulfato Ferroso 25% 78
27. Fibra de Seda con Sulfato Ferroso 25% 78
28. Fibra de Lino con Cloruro de Estaño 25% 79
29. Fibra de Algodón con Cloruro de Estaño 25% 79
30. Fibra de Algodón con Ceniza – Limón 25% 80
13
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo. Nº
1. Material, Equipo y Reactivos
2. Preparación de Reactivos
3. Preparación de Agentes Mordientes
4. Parte Experimental, Procedimientos
5. Fotografías
6. Tabla de Fiesser Kunh
7. Cálculo de Longitud de Onda Teórica
8. Tabla de Rangos de UV–VIS de Flavonoides
14
ABREVIATURAS (9) (12)
Abreviatura Significado
ºC Grados Celcius
cm. Centímetro
CO2 Dióxido de carbono
Fig. Figura
FeCl3 Tricloruro de Hierro
g Gramo
Ha Hectáreas
Hrs Horas
IR Infrarrojo
M Molar
mL Mililitro
msnm Metro sobre el nivel del mar
N Normal
NaOH Hidróxido de sodio
p/p Peso sobre peso
sln Solución
Tº Temperatura
UV-VIS Ultravioleta Visible
15
Alfa
Beta
Gamma
Sigma
16
RESUMEN
17
RESUMEN
Uno de los grandes problemas que ocurren en la actualidad, es el empleo de
colorantes químicos utilizados en la industria textil, su material de desecho es
depositado en los ríos, contribuyendo a la contaminación del medio ambiente
produciendo enfermedades al hombre. Por lo que en el presente trabajo de
investigación se implementó el uso de colorantes naturales a partir de la pulpa
seca del Coffea arabica (café); una alternativa para disminuir el problema de la
contaminación es el empleo de este material, utilizado algunas veces como
abono orgánico.
La parte experimental de este trabajo fue realizada en el Laboratorio de
Química y Farmacia de la Universidad de El Salvador; se realizó la extracción
del colorante de la pulpa seca del café por el método de reflujo utilizando
Hidróxido de sodio 0.5 N como solvente; este extracto también fue utilizado
para realizar las pruebas espectrofotométricas por los métodos de
espectrofotometría infrarroja y espectrofotometría ultravioleta visible. Se realizó
extracción alcohólica al 70% y extracción acuosa de la especie vegetal para
identificar metabolitos secundarios para flavonoides, taninos y alcaloides.
Luego se comparó el poder de tinción del extracto colorante utilizando
diferentes mordientes al 25% sulfato ferroso, alumbre, sulfato de cobre, cloruro
de sodio, cloruro de estaño, ceniza-limón, ácido tánico, en telas de lino, algodón
18
y seda, observando que la tela de algodón retiene mucho más colorante que las
telas de lino y seda.
Se concluye que el Sulfato ferroso, Cloruro de estaño, Ceniza - limón son los
mordientes que mejor realizaron su efecto de fijación en las diferentes telas
luego del proceso de lavado y secado, por lo que se recomienda que el
colorante obtenido sea utilizado en la industria textil.
19
CAPITULO I
INTRODUCCIÓN
20
xx
1.0 INTRODUCCIÓN
Desde la época prehispánica, las plantas han tenido un papel primordial en el
desarrollo del hombre, además de aportar la mayor cantidad de los
componentes de la dieta alimenticia; de ellas obtenían productos medicinales,
materiales para la confección de su vestuario, construcción, e importantes
productos ceremoniales, entre otros usos. La especie humana ha tenido un
gran aprecio por la belleza; de esta manera utiliza la mente y crea formas para
embellecer las cosas, de aquí surge la idea de extraer de la naturaleza sus
colores brillantes y bellos, para poderlos plasmar en los lugares y objetos
creados por el hombre. Tales colorantes eran extraídos principalmente de todas
las partes de las plantas. Los colorantes naturales se utilizaron principalmente
para teñir telas, fibras, hilos, así como en la decoración de vasijas o utensilios,
para expresar sus creencias y sentimientos plasmando figuras y líneas.
Las técnicas que perduran hasta ésta época constituyen la evidencia de una
antigua tradición, que hoy tiende a desaparecer por el amplio uso de colorantes
de origen químico que producen efectos nocivos al medio ambiente y al
hombre.
La investigación tuvo como finalidad extraer el colorante en solución a partir de
la pulpa seca de Coffea arabica (café), utilizando el método de reflujo
empleando Hidróxido de sodio 0.5 N como solvente, para emplearlo en la
industria textil y así disminuir el uso de algunos colorantes sintéticos. Se
realizaron pruebas cualitativas para identificar metabolitos secundarios en
xxi
21
extracto acuoso y alcohólico, a la vez se realizaron pruebas espectroscópicas
(infrarroja y ultravioleta visible) para determinar grupos funcionales
característicos del colorante y sus máximos de absorción en la región
ultravioleta visible. Se utilizaron fibras de algodón, lino, seda, en las que se
realizaron pruebas de fijación del extracto colorante utilizando diferentes
mordientes en una concentración del 25 % para conocer el poder de tinción de
dicho extracto colorante y así tener una alternativa en la industria textil. La
investigación se realizó en el Centro de Investigación y Desarrollo en Salud
(CENSALUD), laboratorios de la Facultad de Química y Farmacia de la
Universidad de El Salvador y en Laboratorios López en un período que
comprende Enero 2008 - Julio 2009.
22
CAPITULO II
OBJETIVOS
23
2. 0 OBJETIVOS
2.1 - OBJETIVO GENERAL
Proponer la obtención de un colorante natural a partir de la pulpa seca del
Coffea arabica (café)
2.2 - OBJETIVOS ESPECÍFICOS
2.2.1 Preparar la pulpa seca del Coffea arabica (café), para realizar
la extracción del colorante.
2.2.2 Identificar metabolitos secundarios en extracto acuoso y alcohólico,
a través de pruebas fitoquímicas.
2.2.3 Identificar bandas características de grupos funcionales por medio
de Espectroscopía Infrarroja.
2.2.4 Identificar longitud de onda de máxima absorbancia por medio de
Espectroscopía Ultravioleta Visible.
2.2.5 Comparar el poder de tinción del extracto colorante, utilizando
diferentes mordientes al 25% en fibras de algodón, seda, lino.
24
CAPITULO III
MARCO TEÓRICO
25
3.0 MARCO TEÓRICO
3.1 Monografía de Coffea arabica (café)
Clasificación taxonómica (13)
Reino: Vegetal
Familia: Rubiaceae
Nombre científico: Coffea arabica
Nombre común: Cafeto, Planta del café Figura Nº 1 Fruto del café
Origen: Etiopía, regiones tropicales y subtropicales de África.
Descripción botánica. (15)
Los cafetos son arbustos con hojas persistentes y opuestas de color verde
oscuro y brillante, con una altura entre 3 – 7 metros en cultivo y alcanzando los
10 metros en estado silvestre, que agradecen disponer de algo de sombra. No
florecen hasta el 3º ó el 4º año y cada flor apenas dura unas horas.
Producen frutos carnosos, rojos o púrpuras, raramente amarillos, llamados
cerezas de café, con dos núcleos que contienen cada uno un grano de café (la
cereza de café es el ejemplo de una drupa poliesperma).
Cuando se abre una cereza, se encuentra el grano de café encerrado en un
casco semirrígido transparente de aspecto apergaminado, que corresponde a la
pared del núcleo. Una vez retirado, el grano de café verde está rodeado de una
piel plateada adherida, que se une con el tegumento de la semilla.
26
Estructura del fruto y del grano de un cafeto
1- Corte central
2- Grano de café (endosperma)
3- Piel plateada (tegumento)
4- Pergamino (endocarpio)
5- Capa de pectina
6- Pulpa (mesocarpio) Figura Nº 2 Semilla del café
7- Piel exterior (pericarpio)
3.1.1 Historia (2) (6)
El café es uno de los productos más versátiles que más se destacan en la
industria y en la economía moderna. Raro es el país en donde no se ha
generalizado su uso, por las múltiples virtudes que atesora. La planta es
originaria de África, tuvo su cuna en Abisinia (Etiopía), de donde paso al Yemen
en el Medio Oriente y empezó a extenderse por Asia, las Indias Orientales
Holandesas hasta llegar a Oceanía. De este Continente fue llevada por los
holandeses a Europa de donde pasó a Francia y desde estos dos puntos pasó
al continente americano a principios del siglo XVIII, entre los años 1715 y 1723.
Actualmente el café se produce en cuatro de los cinco continentes del mundo;
África, Asia, Oceanía y América. De todos estos continentes es América la que
lleva la supremacía en cuanto a los métodos de cultivo, formas de producción,
número de países que lo producen.
27
Ubicación de algunos de los países que cultivan el café.
AFRICA: Camerún, Etiopía, Guinea, Costa de Marfil, Kenia,
Madagascar, Nigeria, otros.
ASIA: India, Indonesia, Filipinas, Tailandia y otros
OCEANÍA: Hawai, Nueva Caledonia, Nueva Guinea y otros.
AMERICA: Brasil, Colombia, México, El Salvador, Guatemala, Costa Rica,
Nicaragua, Bolivia, Venezuela, Cuba, Honduras, Ecuador, entre
otros.
Se han señalado tres regiones en América, como las primeras en que se cultivó
café, Surinam (Guyana Holandesa), probablemente entre los años 1714 y 1718;
Haití y Santo Domingo, probablemente por el año 1715 y Martinica 1720 y1723.
A las primeras dos regiones se dice que lo transportaron los Holandeses; en
Martinica, se asegura que las primeras semillas de café fueron llevadas a
Colombia de las Antillas Francesas y los primeros cultivos en pequeña escala
se registraron en los últimos tiempos coloniales en 1785. Las primeras
plantaciones a mediana escala se registraron en 1808 en Cúcuta y en 1813
Ignacio Ordóñez de Lara fue el primero en contar con un cultivo de 7.000
árboles de café. Durante el siglo XVIII, la bebida se hace popular en Europa, y
los colonos europeos introducen el cultivo del café en numerosos países
tropicales, como un cultivo de exportación para satisfacer la demanda europea.
En El Salvador se extendió el cultivo del café a fines del siglo XVIII o principios
28
del XIX. La primera mención histórica del café como producto nacional de la
provincia de Cuscatlán (antiguo nombre de El Salvador), data de 1820.
Investigadores de historia informan que el café llegó a El Salvador por la región
de Ahuachapán y que las semillas o arbustos fueron traídos posiblemente de la
hacienda de los señores Álvarez de Asturias, denominada “El Soyate” la cual
se encontraba ubicada en la jurisdicción de Jutiapa Guatemala. De Ahuachapán
lo trasladaron a Santa Ana, extendiéndose al resto de la República en el año
1840. Originalmente en El Salvador se cultivó la variedad “arabica”, que fue
también la que se propagó a los demás países caficultores. Posteriormente se
introdujo el “Maragogipe” y el “Bourbon”, el primero en forma transitoria y el
segundo en forma definitiva, el arabica todavía es cultivado en las regiones del
país. Los cafetales de El Salvador están situados en la región que se extiende
desde el litoral del Océano Pacífico a las altas mesetas. Cubren
aproximadamente-150.000Ha—repartidas-en--40.000—plantaciones
aproximadamente. Las pequeñas plantaciones son muy numerosas, existiendo
algunos centenares de grandes propiedades. Las principales regiones
productoras están situadas en los departamentos de Santa Ana, La Libertad,
Usulután, Sonsonate, etc.
Existen diez especies de café que se cultivan mayoritariamente para obtener
sus granos. Las variedades más extendidas son robusta y arabica.
La variedad robusta se caracteriza por su sabor, es la variedad fuerte, amarga y
perfumada, tiene mayor contenido de cafeína, es más resistente a las plagas; la
29
variedad arábiga tiene un aroma suave y es de mayor calidad, el contenido en
cafeína es menor que en la variedad robusta.
El cultivo del arabica es más difícil porque el arbusto soporta mal el calor y es
afectado más fácilmente por las plagas, esta variedad se cultiva principalmente
en Colombia, Centroamérica y Brasil. El tiempo necesario para un cafeto joven
que se establece para comenzar a producir es de 3 - 4 años, el arbusto puede
vivir numerosas décadas.
Cuando los frutos llegan a la madurez, de 6 - 8 meses después de la floración,
puede comenzar la cosecha del café.
3.1.2 Hábitat (13)
La planta de café requiere para su cultivo unas condiciones que son difíciles de
conseguir, que influyen en el sabor y la calidad del producto.
En primer lugar se necesita un clima templado y húmedo, con frecuentes lluvias
y temperaturas comprendidas entre los 15 y los 25 grados celcius, suelos
ácidos preferiblemente con pH entre 5.5 y 6.5. También se necesitan suelos de
cultivos profundos, permeables, bien regados y con un subsuelo que elimine el
agua fácilmente. Por esta razón, las mejores zonas para su cultivo suelen ser
las zonas montañosas y especialmente los terrenos de origen volcánico. La
altitud ideal para su cultivo es entre 600 y 1200 metros.
El café requiere cuidados constantes y los arbustos han de ser protegidos
durante sus etapas de crecimiento.
30
Por esta razón, en muchas zonas el café se cultiva simultáneamente con otros
árboles que proporcionan sombra y protección contra vientos.
Coffea arabica o cafeto arábica es el que se cultiva desde más antiguamente y
representa el 75% de la producción mundial de café. Produce un café fino,
aromático y necesita un clima más fresco.
3.1.3 Usos (16) (17)
Entre los usos más importantes del fruto del café podemos citar los siguientes:
-Alimentación: en bebida, confitería y en repostería, como aromatizante en
helados, bombones, etc.
-Industria textil: como colorante (las hojas, el fruto completo o solamente la
pulpa).
-Medicamentos: en la actualidad existen multitud de medicamentos con cafeína,
tanto sola como asociada con otros principios activos como en el caso de los
analgésicos. Aquellos medicamentos que sólo contienen cafeína están
indicados oficialmente para casos de astenia (cansancio de origen intelectual o
físico), aunque se suele recurrir a ellos cuando es necesario mantenerse
despierto, como por ejemplo el caso de los transportistas.
-Fertilizante: Los restos de café son buenos fertilizantes para los jardines debido
a su contenido en nitrógeno. Los restos de café molido también contienen
potasio, fósforo, y muchos otros microminerales que ayudan al desarrollo de la
planta.
31
Propiedades que se atribuyen al consumo del café son las siguientes
- Previene el cáncer de colon.
- Alivia dolores de Cabeza.
- Reduce la incidencia del mal de parkinson en 80%.
- Estimula al cerebro (memoria, la atención y la concentración).
Efectos secundarios que se le atribuyen al café:
Produce insomnio, trastornos gástricos, nerviosos, estimulante cardíaco, activa
la circulación, contraindicado por tanto en hipertensos, diurético y estimulante
del peristaltismo.
Composición del Café. (2)
- Cafeína
- Sales minerales
- Potasio
- Magnesio
- Calcio, sodio, hierro
- Vitamina B, lípidos, azúcares y aminoácidos.
32
La Pulpa (30) (32).
La pulpa del café es uno de los subproductos del cultivo del café que presenta
una gran variedad de alternativas para ser recicladas en su totalidad, entre los
que tenemos como abono orgánico, biocombustible, en algunas bebidas
alcohólicas y refrescante, y en últimos estudios como alimento para animales
por la cantidad de proteínas que posee.
Cuadro Nº 1 Contenido de compuestos en la pulpa de café (31)
COMPUESTO BASE SECA (%)
Taninos 1.80-8.56
Sustancias pécticas 6.5
Azúcares reductores 12.4
Azúcares no reductores 2.0
Cafeína 1.3
Ácido clorogénico 2.6
Ácido cafeíco total 1.6
En su composición también se encuentran los flavonoides, grupo responsable
del color en la pulpa del café. Encontramos los taninos que son metabolitos
secundarios cuyo papel primordial en la planta es como medio de defensa, son
compuestos polifenólicos de alto peso molecular. Se utilizan principalmente
para la preservación del cuero, pero también se utilizan cantidades menores
33
para teñir y en las industrias químicas. Hay dos grandes tipos de taninos; los
hidrolizables y los condensados, ambos se utilizan para la industria del curtido.
Los alcaloides se encuentran en la pulpa como cafeína y constituyen un grupo
muy heterogéneo de bases vegetales nitrogenadas la mayoría de los alcaloides
se haya en los vegetales como sales de ácidos orgánicos, también se les ha
asociado con la protección del vegetal ante insectos y animales herbívoros,
algunos alcaloides intervienen en el crecimiento vegetal.
3.2 COLORANTES (18) (7)
Los colorantes son compuestos orgánicos que sirven para dar color a
diferentes sustancias: fibras animales, vegetales, sintéticas y productos
similares (lana, seda, algodón, lino, rayón, naylon, papel, cuero o pieles).
En estos casos el colorante puede formar una combinación química con la
sustancia que se ha de teñir o bien unirse a esta físicamente.
Dentro del término colorante es necesario distinguir dos tipos diferentes de
material colorante; tinte y pigmento estos pueden ser similares químicamente,
sin embargo son muy diferentes en sus propiedades, especialmente en el modo
en que son utilizados, se diferencian por sus características de solubilidad, los
tintes son solubles y los pigmentos son insolubles. El uso tradicional de los
tintes es la coloración de los tejidos, su aplicación en el área textil es en medio
acuoso. Los pigmentos son materiales colorantes, los que son completamente
insolubles en el medio en el cual se hallen incorporados, su aplicación en
34
pintura, tintas de imprenta, plástico, materiales de construcción tales como el
hormigón, cemento, cerámica y vidrio.
Una distinción adicional entre tinte y pigmento es que la molécula de tinte es
diseñada para ser atraída fuertemente hacia las moléculas del polímero que
constituye la fibra textil, las moléculas de pigmento no poseen tal afinidad, son
atraídas fuertemente unas a otras en la estructura de su red cristalina sólida,
para así impedir su disolución en los disolventes.
Los tintes poseen dos tipos de grupos que son responsables de su color. El
primero denominado cromóforo, es el responsable del color del tinte. En
segundo lugar están los auxocromos que son grupos de átomos que modifican
en color producido por los cromóforos realzando el color.
Para que un colorante sea útil, debe ser capaz de unirse fuertemente a la fibra,
y por lavado no debe perder su color. Debe ser relativamente estable
químicamente y soportar bien la acción de la luz.
3.3 CLASIFICACIÓN DE COLORANTES
3.3.1 COLORANTES DE ORIGEN ANIMAL (20)
Son compuestos orgánicos que sirven para dar color a diversas sustancias
textiles.
Cochinilla: se cultivó en gran parte del continente americano en la época
colonial. Sin duda, los fuertes tributos impuestos, sumados a la demanda
europea, hicieron que muchos pueblos tuvieran que dedicarse a esta actividad.
35
Púrpura: tuvo gran importancia en épocas pasadas, es el obtenido del molusco
Murex brandaris , aunque no alcanzó la importancia que se le dio a la
cochinilla, fue muy estimado en la época colonial. Este molusco se encuentra a
lo largo de la costa rocosa del pacífico, desde México a Perú, se obtiene un
color violeta púrpura.
3.3.2 COLORANTES DE ORIGEN NATURAL (8) (19)
La lista de plantas usadas para teñir puede resultar interminable. Uno de los
colorantes naturales muy usado hasta esta época es el obtenido del fruto del
nogal, que produce una amplia gama de tonos que van del café muy oscuro
hasta el beige. El añil para teñir de azul, el campeche para teñir la lana de
negro, palo brasil para el color rojo, la chilca para el color amarillo.
Para teñir lana o algodón también están: Artemisia, Aliso, Papa, Achiote, entre
otras. Los colorantes naturales pueden ser clasificados según su naturaleza
química en diversos grupos. Como fuentes naturales de estos colorantes se
puede considerar las plantas superiores, las algas, hongos y líquenes, algunos
insectos, así como algunos organismos marinos vertebrados.
36
Cuadro Nº 2 Clasificación de colorantes según composición química. (18)
Naturaleza química Algunos ejemplos Color predominante
Ficobilinas Azul-verde
Tetrapirroloe
Clorofila Verde
Carotenoides Carotenoides Amarillo-anaranjado
Flavonas Blanco-crema
Flavonoles Amarillo-blanco
Flavonoides Chalconas Amarillo
Auronas Amarillo
Antocianinas Rojo-azul
Xantonas Xantonas Amarillo
Quinonas Naftoquinonas Rojo-azul-verde
Derivados
Indigo Azul-rosado
indigoides e
Betalaínas Amarillo-rojo
Índoles
-Flavonoides: son glicósidos formados por una aglicona que derivan del 2-
fenilbenzopirona. El color que presentan es amarillo los encontramos en casi
toda la planta, son insolubles y muy estables al calor.
-Xantofilas: son derivados de los carotenoides, el color que presentan es
amarillo son compuestos hidrosolubles y son sensibles al calor.
-Carotenoides: Estructura química básica de estos compuestos es poliénica de
40 átomos de carbono, presentando coloraciones que van de amarillo, rojo,
incoloros. Fuente principal de obtención animales y plantas, son liposolubles,
estables al calor, sensibles a la oxidación.
37
Tienen la ventaja de no verse afectados como otros colorantes, por la presencia
de ácido ascórbico, el calentamiento y la congelación.
-Clorofila: En los vegetales se encuentran dentro de ciertos orgánulos, son
insolubles en agua pero solubles en alcohol, con el que pueden extraerse, son
sensibles al calor dando coloraciones verde pardo y son extraídas de las
plantas.
-Quinonas: Son dicetonas cíclicas de estructura tal que se pueden convertir por
reducción en hidroquinonas. Presentan coloración que van desde el amarillo
hasta el negro, sus fuentes de obtención son las plantas, bacterias, algas, son
hidrosolubles y estables al calor.
-Colorantes Indigos: Es el colorante vegetal cuyo empleo es el más antiguo. Las
vestiduras de las momias egipcias fueron teñidas con índigo. En muchas
plantas se encuentra en forma de un glucósido: La fórmula molecular del índigo
es C16H10N2O2. Es una sustancia insoluble en agua, es de color azul oscuro con
reflejos bronceados, se aplica en la industria textil. Es resistente a la luz y al
lavado y su bajo costo hace que sea el colorante azul más empleado.
3.3.3 COLORANTES DE ORIGEN MINERAL (20)
Los colorantes de origen mineral fueron poco empleados y existen pocas
referencias de cronistas sobre su utilización; se les llamó colorantes en polvo.
-Colorantes Azufrados o Fosforados: incluyen los colorantes preparados por
calentamiento de materias orgánicas con Azufre y Sulfato de Sodio (tionación).
Los primeros colorantes azufrados eran amarillos y pardos y se producían
38
calentando aserrín, estiércol y azufre. Más tarde se produjeron tinturas negras,
azules, verdes, amarillas y naranjas. Se emplean estos colorantes solamente en
tintura de algodón, ya que atacan a las proteínas y fibras de éster.
3.3.4 COLORANTES SINTÉTICOS (22)
-Colorantes Azoicos: Estos colorantes se preparan copulando una amina
aromática diazotada con un fenol o una amina aromática. El más sencillo de
estos colorantes es el “amarillo de anilina”, que corresponde al “para-amino
azo-benceno”. Se usa para teñir lana y seda, su color es fugaz. Se emplea para
preparar otros colorantes con dos grupos azo.
- El Pardo de Bismark: Se emplea para teñir el cuero.
- Rojo de Metilo: Es un valioso indicador.
- El Rojo Congo: Tiñe el algodón de color rojo, pero el color cambia a azul por la
acción de los ácidos minerales. Se emplea por ello como indicador.
Los requisitos exigidos para los colorantes de síntesis son (22)
1- Ser inocuo.
2- Constituir una especie química definida y pura.
3- Tener gran poder tintorial, con objeto de utilizar la mínima cantidad posible y
ser fácilmente incorporables al producto.
4- Ser lo mas estable posible a la luz y al calor.
5- Poseer compatibilidad con los productos que deben teñir.
6- No poseer olor ni sabor desagradables.
39
7- Ser indiferente pH, agentes oxidantes y reductores.
8- Ser lo más económico posible.
Factores que contribuyen a la inestabilidad (23)
- Trazas de metales
- Altas temperaturas
- Agentes óxido-reductores
- Luz, pH.
3.3.5-Otra-clasificación-de-colorantes (18)
-Colorantes Sustantivos: Son colorantes que pueden teñir directamente las
fibras-de-algodón.
-Colorantes Mordientes: El mordiente es un producto que se adiciona a la fibra y
es absorbido por ella, pudiendo consecutivamente atraer el colorante. Este
término, se usa principalmente para los colorantes que se adicionan usando
óxidos metálicos como mordiente. Especialmente se emplean como mordientes
los óxidos de aluminio y cromo para formar precipitados insolubles.
-Colorantes a la Tina: Son sustancias insolubles que se pueden reducir a
materiales alquil-solubles. El colorante se aplica en su forma reducida y se
re-oxida-en—presencia-de-la--fibra.
-Colorantes Directos: Se absorbe directamente por las fibras en soluciones
acuosas, hay colorantes ácidos y básicos de este tipo.
40
Estos dos tipos de colorantes se emplean especialmente en el teñido de lanas y
en poliamidas sintéticas.
-Los colorantes básicos son sales amónicas o complejos formados por cloruro
de cinc o aminas. Algunos colorantes básicos de elevado peso molecular, son
absorbidos-por-el-algodón-y—el-rayón.
-Los colorantes ácidos son sales de los ácidos sulfúricos o carboxílicos que se
precipitan sobre la fibra. La familia de los colorantes ácidos se llama así, porque
en la constitución química del colorante se encuentran moléculas de grupos
ácido. Son colorantes solubles en agua y se aplican generalmente en fibras de
lana, naylon y fibras acrílicas.
3.4 EXTRACCIÓN DEL COLORANTE. (20)(8)
El método de extracción depende de la textura y contenido de agua en la
planta, así como de la sustancia a extraer.
Se parte de la especie vegetal, se realiza un proceso extractivo para aislar los
principios activos directamente de la especie vegetal.
Extracción con disolvente: consiste en poner en contacto la especie vegetal con
un disolvente capaz de solubilizar los principios activos. Los principios activos
deben pasar de la especie vegetal al disolvente de manera que se obtenga un
extracto líquido.
41
Figura Nº 3. Diagrama de diferentes métodos de Extracción de las Especies
Vegetales
Para que la extracción con disolventes se lleve a cabo correctamente hay que
tener en cuenta diversos factores:
a) Características de la especie en estudio: Se deben trabajar con muestras
desecadas con un grado de división adecuado
b) Naturaleza del disolvente: Principalmente es utilizada el agua y mezclas
hidroalcohólicas en proporción variable y otros disolventes orgánicos.
c) Temperatura: Es necesario controlar la temperatura para conseguir una
máxima extracción en la especie vegetal sin consecuencias indeseables.
42
3.5 FIBRAS NATURALES A TEÑIR (24)
Existen dos grupos de fibras, las artificiales que son producidas mediante
síntesis química como el poliéster, entre otros y las naturales que pueden ser
de origen vegetal o animal.
Las fibras representan para muchos países una fuente económica de gran
importancia, sobre todo para los productores de fibras vegetales, ya que son
consideradas el segundo grupo comercial después de los cereales, pues su
cultivo, procesamiento y mercado ofrecen empleo a millones de personas
alrededor del mundo.
Las fibras de origen vegetal son estructuras celulósicas, la celulosa es el
polímero de azúcar más común en las estructuras de soporte de las plantas, por
lo que las fibras tienen su base en este material.
ALGODÓN, fibra suave, es la planta textil más importante del mundo por su
volumen de producción. El algodón pertenece al género Gossypium de la
familia Malvaceae, las especies cultivadas son: G. herbaceum, G. hirsutum y
G. barbadense, que producen fibra corta, media y larga respectivamente.
LINO, planta que genera una fibra suave, ligera y lustrosa, además es más
fuerte que el algodón, el principal productor es Rusia, sin embargo, el Reino
Unido es el principal exportador de telas de lino. El lino pertenece a la familia
Linaceae, la especie que se utiliza para la obtención comercial de fibra es
Linum usitatissimum.
43
Las fibras animales están compuestas por una serie de moléculas proteínicas,
que son ordenaciones atómicas en estructuras alargadas, que se encuentran
unidas unas a otras, éstas cadenas a su vez se encuentran enlazadas entre si
de forma paralela por eslabones laterales. Por su parte los puentes de
hidrógeno son los que se rompen en presencia de soluciones salinas o
metálicas, dichas soluciones vienen a ser los denominados mordientes. Los
puentes sulfurados son los más fuertes, aunque es posible romperlos no
conviene hacerlo, ya que la fibra se torna quebradiza e inservible.
SEDA, esta fibra es producida por larvas de ciertos tipos de mariposas, existe la
seda de la morera (Bombix mori) la seda de "gusanos" silvestres.
Es de llamar la atención que la seda es la única fibra de uso textil que no se
hila, ya que de forma natural se produce el hilo, la seda es quizá la fibra de
origen animal de mayor aceptación por la fineza del hilado.
3.6 TINCIÓN (24) (25)
La tintura es el proceso en el que la materia textil, al ser puesta en contacto
con una solución de colorante, absorbe éste de manera que habiéndose teñido
ofrece resistencia a devolver el colorante al baño.
La mayoría de los tintes naturales requieren de ciertos fijadores o asistentes
para poder teñir, estas sustancias son denominadas mordientes (es una
sustancia usada en tintorería y estampado, para fijar o para desarrollar el color
en la fibra), mismas que pueden ser de origen natural o químico, las cuales
44
facilitan la fijación del tinte a la fibra, además funcionan como elementos de
uniformidad y brillo de color. El mordentado puede realizarse antes o después
del teñido e implica generalmente agregar el mordiente en agua caliente junto
con la fibra que puede estar o no teñida.
Antiguamente se empleaban productos naturales como: cenizas, hojas de
aguacate, corteza de nogal, etc. Hoy en día el empleo de mordientes son de
origen químico, la mayoría son sales metálicas como: aluminio, alumbre, oxido
de hierro, cobre y estaño, las cuales se disuelven en agua caliente separando el
metal de la sal para posteriormente unirse a la fibra para fijar el tinte. Sulfato
alumínico potásico, un mordiente no tóxico y excelente para el teñido artesanal.
3.7 CLASIFICACIÓN DE MORDIENTES
3.7.1. -MORDIENTES-,DE-.ORIGEN-MINERAL (26)
-Alumbre (Sulfato de Aluminio): Se presenta en forma de piedras transparentes,
su resistencia a la luz es mediana, se emplea generalmente con el crémor
tártaro. El alumbre sirve para preparar la fibra antes del teñido, y no altera el
color pero aviva los colores. Da mejores resultados con colores-claros.
-Crémor tártaro (Tartrato Ácido de Potasio): Polvo blanco con apariencia de
azúcar. Es un ácido que se obtiene del sedimento que se forma en el fondo de
los turriles de vino. Es generalmente utilizado antes del teñido y en muchos
casos en combinación con el alumbre. Se utiliza para lana de oveja, alpaca,
llama, en la seda y otras fibras animales. No se recomienda en fibras vegetales.
45
- Caparrosa verde (Sulfato de Hierro) (venenoso): Se utiliza después del teñido.
Generalmente oscurece el color y vuelve las fibras más ásperas.
-Caparrosa azul (Sulfato de Cobre): Polvo cristalino de color verde pálido. Se
usa al final del teñido. Tiene buena resistencia a la luz y al agua.
-Bicromato o dicromato de potasio (Sulfato de Cromo): Polvo de color
anaranjado. Se utiliza del mismo modo que el alumbre antes de teñir, pero
puede aplicarse también después del teñido. Tiende a cambiar el color de los
tintes de las maderas.
- Ceniza o lejía: Se utiliza con frecuencia las cenizas de banano y cenizas de
diferentes clases de maderas. La ceniza de molle tiene un fuerte efecto sobre el
color. La lejía de quinua es también muy utilizada
- Barro negro: es utilizado todavía en varias regiones de Bolivia y América. La
fibra teñida generalmente con aserrín de diferentes maderas es enterrada
posteriormente en el barro por uno o varios días.
- Carbonato de sodio, cloruro de sodio, oxido de calcio, arcilla, estaño, etc.
3.7.2. MORDIENTES VEGETALES (26)
- Taninos: El tanino funciona mejor con fibras vegetales (algodón, yute, etc.) y
se aplica en un segundo baño de mordiente después del alumbre. Produce
colores profundos y resistentes a la luz solar. Está contenido en varios frutos y
cortezas como el coco, el orejón, la tara, el té, el café, el roble y otros.
46
- Tara, espino o guarango (Caesalpinia Tinctoria). Sus vainas, hojas y
corteza contienen tanino. Utilizando sulfato u óxido de hierro en el teñido da un
color gris oscuro y negro. Las vainas maduras dan un tinte marrón. La tara se
utiliza como un excelente mordiente para colores oscuros, marrones, grises y
negros.
- Lengua de vaca (Rumex Crispis): Se usaba en el antiguo Perú como planta
tintórea y como mordiente. Se emplea en el teñido de colores oscuros
- Cenizas y lejía de plantas: Se utilizan cenizas de diferentes maderas. La
ceniza del molle tiene un fuerte efecto sobre el color final, pero casi todas las
cenizas y lejías influyen en el color final.
3.7.3 TEÑIDO Y MORDENTADO (17) (21)
El teñido de la fibra, comprende dos etapas, preparación de la fibra y proceso
de tinción. Aunque el proceso de tinción puede sufrir variaciones.
1- Preparación de la fibra:
Las fibras que se van a teñir deberán estar limpias de impurezas para que
pueda retener mejor el colorante, pues elementos como la grasa y la suciedad
impiden la retención del mismo. Se recomienda lavarlas con agua tibia y jabón
en cantidades suficientes para un lavado normal, realizando repetidos
enjuagues con agua fría.
2- Proceso de tinción: Se realiza utilizando los siguientes métodos:
A-Método directo en frío y en caliente.
B-Método indirecto con mordiente.
47
- Método directo: Utilizado desde la antigüedad y consiste en introducir la fibra
directamente al tinte, este puede estar frío o caliente, dejar reposar, secar, lavar
con jabón y volver a secar.
- Método indirecto: este consta de dos procesos
1- Premordentado: Se introduce la fibra sin teñir en agua tibia que contenga un
mordiente en suficiente cantidad para que cubra la fibra. Se deja calentar a un
punto de ebullición por un lapso de 30 minutos a una hora agitando
constantemente. Luego colocar la fibra premordentada en el baño que contiene
el colorante y calentar por espacio de 35 - 60 minutos, si es necesario, dejar
toda la noche en reposo. Secar, lavar con detergente y secar nuevamente.
2- Postmordentado: Se coloca la fibra previamente teñida en un baño de agua
tibia que contenga un mordiente, se deja reposar por 30 min. Luego dejar
secar, lavar con un detergente y secar nuevamente. Este procedimiento tiene
por objeto cambiar la tonalidad del baño o reforzar la solidez al lavado.
3.8 ESPECTROSCOPÍA (9)
Es una ciencia que estudia las interacciones que suceden entre la radiación y la
materia. Los métodos espectroscópicos de análisis miden la cantidad de
radiación producida o absorbida por las especies atómicas o moleculares que
se analizan. También han aportado las herramientas que, posiblemente, son las
que más se utilizan para elucidar estructuras moleculares y obtener la
identificación cuantitativa y cualitativa de sustancias orgánicas e inorgánicas .
48
3.8.1 ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA VISIBLE (27)
La espectroscopia ultravioleta-visible utiliza radiación electromagnética (luz) de
las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del
espectro electromagnético. La espectroscopia UV-Visible se utiliza para
identificar algunos grupos funcionales de moléculas, y además, para determinar
el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la
determinación cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de
metales de transición y compuestos orgánicos-altamente-conjugados.
El principio de la espectroscopia ultravioleta visible involucra la absorción de
radiación ultravioleta por una molécula, causando la promoción de un electrón
de un estado basal a un estado excitado, liberándose el exceso de energía en
forma de calor. La longitud de onda (λ) comprende entre 190 y 800 nm.
El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma
sustancia.
3.8.2 ESPECTROSCOPIA INFRARROJA (11) (28)
Es una de las herramientas más poderosas e importantes de la química,
además es la rama de la espectroscopía que trata con la parte infrarroja del
espectro electromagnético. Esta cubre un conjunto de técnicas, siendo la más
común una forma de espectroscopía de absorción. Así como otras técnicas
49
espectroscópicas, puede usarse para identificar un compuesto que posee
moléculas orgánicas e inorgánicas e investigar la composición de una muestra.
La espectroscopía infrarroja es ampliamente usada en investigación y en la
industria como una simple y confiable para realizar mediciones, control de
calidad y mediciones dinámicas. Tiene el potencial para determinar un
sinnúmero de sustancias en virtud de que casi cualquier especie absorbe en
esta región. Algunas máquinas indican automáticamente cuál es la sustancia
que está siendo medida a partir de miles de espectros de referencia
almacenados.
Además la peculiaridad de cada espectro IR proporciona un alto grado de
especificidad que solo es igualado o superado por pocos métodos analíticos.
50
CAPITULO IV
DISEÑO METODOLÓGICO
51
4.0 DISEÑO METODOLÓGICO
4.1 Tipo de estudio
Retrospectivo: Porque la investigación se basa en hechos ocurridos en el
pasado (antecedentes).
Prospectivo: Porque en la investigación se registra la información, según
van ocurriendo los fenómenos.
Experimental: Porque la investigación se realizó en los laboratorios de
CENSALUD, Facultad de Química y Farmacia de la
Universidad de El Salvador y Laboratorios López.
Metodología
La-metodología se desarrolla en tres etapas:
- Investigación bibliográfica
- Investigación de campo
- Investigación de laboratorio
4.2-Investigación-bibliográfica
Se realizó en los siguientes lugares y en sitios de Internet.
-Biblioteca-Central-de-la-Universidad-de-El-Salvador.
-Biblioteca Benjamín Orozco de la Facultad de Química y Farmacia de la
-Universidad-de-El-Salvador.
52
-Biblioteca de la Facultad de Ciencias Agronómicas de la Universidad de El
-Salvador.
4.3-Investigación-de-campo
4.3.1 Universo:
Especies vegetales de la flora Salvadoreña que producen colorantes.
4.3.2 Muestra:-Pulpa-seca de-Coffea-arabica
4.3.3 Recolección de la muestra:
La especie vegetal se recolectó en la Finca San Lorenzo en la ciudad de
Tonacatepeque Municipio de San Salvador, se encuentra a 702.0 msnm
(metros sobre el nivel del mar), es considerada una altitud media para el cultivo,
la muestra fue recolectada en el mes de enero de 2008.
4.3.4 Preparación:
se recolectó el fruto y se obtuvieron 10 libras del fruto maduro de Coffea
arabica, se lavó con una solución de Hipoclorito de sodio al 10% para eliminar
cualquier partícula que pudiera interferir en el proceso, posteriormente se
coloca en una bandeja para ser secada a la luz solar, se separó la pulpa seca
de la semilla obteniéndose cuatro libras y media, luego se fraccionó
manualmente hasta obtener pequeñas fracciones. La cantidad utilizada para la
investigación fue de tres libras y media aproximadamente.
53
4.4 PARTE EXPERIMENTAL
1- Pesar 25.0 g de 2- Colocar en un
pulpa seca previamente balón de 500.0 mL
fraccionada.
3- Añadir 350.0 mL
de Na0H 0.5 N
5- Filtrar el extracto 4- Reflujar por dos horas
colorante para realizar a 70ºC utilizando un
la tinción. hot plate
Ver Anexo Nº 4
Figura Nº 4. Esquema de Proceso de Extracción del colorante de la pulpa
mmmmmmmm seca del café con NaOH 0.5 N.
54
Pesar 10.0 g de pulpa seca
100 mL de Agua destilada 100 mL Alcohol Etílico 70 %
Reflujar a 70ºC 2 horas Reflujar a 70ºC 2 horas
Filtrar Filtrar
Taninos: Flavonoides: Taninos: Flavonoides: Alcaloides:
FeCl3 10% NaOH 10% FeCl3 10% NaOH 10% Dragendorff
Sln Gelatina 10% Sln Gelatina 10% Mayer
Wagner
Ver Anexo Nº 4
Figura Nº 5. Esquema de Proceso de Extracción acuosa y alcohólica de la
mmmmmm pulpansecandelmCoffeamarabica, para determinación de
mmmmmm metabolitos secundarios.
55
Extracto colorante
con NaOH 0.5 N
Espectroscopía Ultravioleta visible Espectroscopía Infrarroja
- Preparación de la muestra - Extracto puro
-1
- Barrido de 900-190nm - Barrido de 4000-550cm
- Colocación del blanco - Colocar el extracto puro en HATR
- Colocación de la muestra - Homogenizar
- Lectura de la muestra - Colocar cubierta
- Hacer lectura
Ver Anexo Nº 4
Figura Nº 6. Esquema de Identificación por Espectroscopía Ultravioleta Visible,
M Espectroscopía Infrarroja en extracto obtenido con NaOH 0.5 N del
MMMMMMMCoffea arabica.
56
Fibras de Algodón, lino, seda
Proceso de Mordentado con
las diferentes fibras:
1- Ácido Tánico 25%
2- Alumbre 25%
3- Ceniza-limón 25% Aplicación del extracto
4- Cloruro de Estaño 25% colorante con NaOH 0.5 N
5- Cloruro de Sodio 25%
6- Sulfato de Cobre 25%
7- Sulfato Ferroso 25%
1-.Secado:..sombra
2-,Lavado: agua / jabón
3- Secado: sol
Ver Anexo Nº 4
Figura Nº 7. Esquema del Proceso de Tinción del extracto colorante alcalino
de la pulpa seca del café en fibras de algodón, lino, seda.
57
CAPITULO V
RESULTADOS E INTERPRETACIÓN
58
5.0 RESULTADOS E INTERPRETACIÓN
5.1 Extracción del Colorante
Cuadro Nº 3 Extracción del Colorante de la Pulpa seca del Café
Peso Método Solvente Tiempo Tº Extracto % Resultados
NaOH 0.5 N obtenido
25.0 g Reflujo 350.0 mL 2 hrs 70ºC 282 mL 94% Color café-
rojizo
Se realizaron dos extracciones utilizando en ambos el método de reflujo y los
mismos parámetros, la primera extracción se realizó con 100.0 g de pulpa seca
fraccionada (previamente tratada con solución de Hipoclorito de sodio al 10%),
para la extracción del colorante se tuvo la dificultad que los 350.0 mL de
solvente NaOH 0.5 N, fueron casi absorbidos por la pulpa lo que no permitió
que se realizara en su totalidad el proceso de reflujo, se obtuvo una masa
coloreada, la cual se filtró utilizando papel filtro de cafetera y luego apelmazada
para lograr recolectar la solución colorante, lográndose recolectar 180.0 mL. Por
este motivo se optó por disminuir la cantidad de pulpa a 25.0 g manteniendo los
mismos parámetros, se tuvo un mejor movimiento de la muestra de pulpa en el
solvente, lográndose una mejor filtración con papel filtro de cafetera,
recolectando 282.0 mL del extracto. Comparando ambos procesos en la
diferencia de pesos de las muestras, se obtiene un 94% de rendimiento del
extracto colorante al utilizar 25.0 g de pulpa y un 60% de rendimiento del
extracto colorante cuando se utilizan 100.0 g de pulpa. En ambas extracciones
el color del extracto no varia siendo este un color café – rojizo.
59
5.2 Identificación Fitoquímica de Metabolitos Secundarios
Cuadro Nº 4. Identificación de Metabolitos Secundarios con Extracto Acuoso de
la pulpa seca de café.
Extracto Metabolitos Pruebas Resultados
secundarios
Flavonoides Hidróxido de sodio 10% Coloración café-
anaranjado
Acuoso
Taninos Tricloruro de hierro 10% Coloración verde-azulado
Solución de gelatina 10% precipitado color café
Mx1 Mx2
Figura Nº 8. Identificación de Flavonoides.
Mx 1 = Referencia
Mx 2 = Identificación con NaOH 10%
60
Mx1 Mx3
Mx1 Mx2
Figura Nº 9. Identificación de taninos
Mx1 = Referencia
Mx 2 = Identificación con Tricloruro de hierro 10%
Mx 3 = Identificación con Solución de gelatina 10%
La identificación de flavonoides en extracto acuoso se realizó con el reactivo de
NaOH 10% se observó una coloración café-anaranjado (Ver Figura Nº 8) que
indica prueba positiva de flavonoides. Para la prueba de taninos se utilizaron:
Tricloruro de hierro 10% el cual presentó una coloración verde-azulada, con la
Solución de gelatina al 10% un precipitado color café (Ver Figura Nº 9), dando
ambas pruebas resultados positivos.
61
Cuadro Nº 5. Identificación de Metabolitos Secundarios con Extracto Alcohólico
de la pulpa seca del café.
Extracto Metabolitos Pruebas Resultados
secundarios
Flavonoides Hidróxido de sodio 10% Coloración café-
anaranjado
Taninos Tricloruro de hierro 10% Coloración verde-
azulado
Alcohólico Solución de gelatina 10% Precipitado color café
Alcaloides Reactivo de Dragendorff Precipitado anaranjado-
rojizo
Reactivo Mayer Precipitado blanco-
amarillento
Reactivo de Wagner Precipitado pardo-rojizo
Mx1 Mx2
Figura Nº 10. Identificación de Flavonoides.
Mx 1 = Referencia
Mx 2 = Identificación con NaOH 10%
62
Mx1 Mx3
Mx2 Mx1
Figura Nº 11. Identificación de taninos
Mx1 = Referencia
Mx2 = Identificación con Tricloruro de Hierro 10%
Mx3 = Identificación con Solución de gelatina 10%
Mx1 Mx2 Mx3 Mx4
Figura Nº 12. Identificación de Alcaloides
Mx 1 = Referencia Mx 3 = Prueba de Mayer
Mx 2 = Prueba de Dragendorff Mx 4 = Prueba de Wagner
63
El desarrollo de color en las pruebas fitoquímicas en el extracto acuoso no
fueron muy definidas, ya que este presentó un color muy oscuro y solo se pudo
apreciar al exponerlo contra la luz, por este inconveniente se optó por realizar
en la extracción alcohólica las pruebas fitoquímicas, donde se confirma
claramente la presencia de los metabolitos secundarios, utilizando 10.0 g de
pulpa seca con 100.0 mL de alcohol etílico 70% como solvente, se utilizó NaOH
al 10% dando un resultado positivo en la prueba de identificación de flavonoides
presentando una coloración café anaranjada. Para identificar taninos se utilizó
solución de Tricloruro de hierro 10% y solución de gelatina al 10% ambas
pruebas dieron resultados positivos dando una coloración verde azulado y un
precipitado café respectivamente. La identificación de alcaloides se realizó con
el reactivo de Dragendorff donde se formó un precipitado anaranjado- rojizo,
con el reactivo de Mayer un precipitado blanco-amarillento y con el reactivo de
Wagner se formó un precipitado pardo-rojizo.
La prueba más especifica y de mayor interés para este trabajo es la
identificación de flavonoides, los cuales son los causantes del color presente
en el extracto colorante obtenido de la pulpa seca del café. La coloración café-
anaranjado que presenta al reaccionar el extracto alcohólico con hidróxido de
sodio al 10% nos da la seguridad de que estén presentes los grupos flavonoles.
64
5.3 Análisis del Colorante por Espectrofotometría Infrarroja
Figura Nº 13. Espectro del extracto alcalino de coffea arabica
Figura Nº 14. Banda del grupo C=O
Figura Nº 15. Bandas del grupo C=C de alquenos y de fenol
65
Cuadro Nº 6. Resumen de las bandas características del colorante del
Coffea arabica por Espectroscopía Infrarroja.
Nº de longitud Nº de
Fig.Nº Banda de Onda longitud de Inferencia Intensidad
teórica cm-1 Onda
práctico cm-1
13 A 35253200 3371.56 OH de Banda
alargamiento fuerte, ancha
del fenol
14 B 18001690 1718.50 CO de Banda fuerte
alargamiento
de cetonas
15 C 16701600 1642.54 CC de Banda
alargamiento mediana
del alqueno
15 D 16001450 1570.13 CC de Banda
alargamiento ancha
del fenol
En el análisis del colorante por el método de espectroscopía infrarroja, al
extracto obtenido con NaOH 0.5 N se le realizó lectura directa.
La Figura Nº 13 muestra el corrido del espectro infrarrojo en un rango de
3519.3 3126.7 cm-1 , donde se localiza una banda (A) muy definida a una
3371.56 cm-1 que corresponde al grupo de los OH de alcoholes y fenoles
( 35253200 cm-1).
La Figura Nº 14 define el pico correspondiente al grupo CO de las cetonas a
una 1718.50 cm-1(B) el cual se encuentra en el rango de 18001690cm-1.
En esta misma figura se observan bandas muy cercanas a los rangos de
66
longitudes de onda de los grupos CC de alquenos ( 16701600cm-1) y
grupos CC de los fenoles ( 16001450 cm-1 ).
Por tal razón se amplió el espectro en los rangos de 1838.51371.9 cm-1 las
cuales se encuentran en la Figura Nº 15, donde se encuentra la banda (C) del
CC del alargamiento del grupo alqueno a una 1642.54 cm-1. También se
observa una banda muy característica a una 1570.13 cm-1 (D) que
corresponde al grupo CC de los fenoles.
67
5.4 Análisis del Colorante de la pulpa seca de café por Espectrofotometría
UV- Visible
Espectro de Absorción UV / Vis de extracto alcalino
(Pulpa de Café) Coffea arabiga
Longitud de Onda Máxima 265.29 nm
Absorción Máxima 0.03540
Longitud de onda teórica 267 nm
Figura Nº 16. Espectro UV – Visible del Extracto Alcalino
Para el análisis del colorante por el método de espectroscopia UV – Visible se
utilizó el extracto obtenido con solución de Hidróxido de Sodio 0.5 N, a la que se
le realizaron diluciones para facilitar la lectura (Ver Anexo Nº 5, Figura Nº 37).
Se aprecia un máximo de absorbancia = 265.29 nm, que indica que se
encuentra dentro del rango de longitud de onda a la que absorben los grupos
flavonoles.
A la vez se determinó una longitud de onda teórica, utilizando la tabla Fiesser-
Kunh (Ver Anexo Nº 6) y se presenta una estructura base del flavonol causante
68
del color, ya que esta fue tomada para la identificación de las bandas
características del espectro UV-Visible, obteniéndose como resultado = 267
nm, que se encuentra próxima al valor experimental del espectro UV – Visible.
Según la longitud de onda obtenida del espectro UV – Visible y el cálculo de
longitud de onda teórica de la estructura base del flavonol (Ver Anexo Nº 7,
Figura Nº 39), se infiere que existe la probabilidad de que este sea el causante
del color del extracto de la pulpa seca del café, por que la bibliografía reporta un
rango longitud de onda (250 - 280nm) a la que absorben estos grupos. (Ver
Anexo Nº 8)
69
5.5 Comparación del poder de Tinción del Extracto Colorante
Cuadro Nº 7. Comparación del poder de tinción del extracto colorante de la
pulpa seca de Coffea arabica , utilizando mordientes al 25%
Mordiente Telas Coloración
Lino Café
Sulfato Ferroso 25% Algodón Café intenso
Seda Café claro
Lino Beige no homogéneo
Alumbre 25% Algodón Ligeramente café
Seda Beige no homogéneo
Lino Ligeramente café claro
Sulfato de Cobre 25% Algodón Poca fijación del color verde
Seda No se fija el color
Lino Beige
Cloruro de Sodio 25% Algodón Café claro
Seda No se fija el color
Lino Café claro
Cloruro de Estaño 25% Algodón Café oscuro
Seda Café claro
Lino Poca fijación del color beige
Ceniza-Limón 25% Algodón Café
Seda Poca fijación del color beige
Lino Café claro
Ácido Tánico 25% Algodón Café oscuro
Seda Poca fijación del color beige
Lino Poca fijación del color beige
Colorante Algodón Poca fijación del color beige
Sin Mordiente Seda No se fija el color
70
Al realizar el proceso de tinción se utilizaron mordientes al 25% y diferentes
tipos de telas: algodón, lino , seda; las telas se sumergieron en cada mordiente
por un período de 30 minutos, removiendo constantemente, posteriormente las
telas mordentadas fueron introducidas en el extracto colorante obtenido con
NaOH 0.5 N, se calentaron por 15 minutos a una temperatura no superior a
70ºC, se dejaron reposar por dos días, en este período de tiempo se tuvo la
precaución de remover las telas por la mañana y por la tarde, para lograr una
tinción homogénea, las telas se retiraron del extracto, se secaron a la sombra,
fueron lavadas con agua y jabón, secado final al sol obteniéndose los siguientes
resultados:
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Sulfato
ferroso al 25%
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L A S S = Seda
Figura Nº. 17. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
El sulfato ferroso logró fijar el colorante en las diferentes telas, luego del
proceso de lavado con suficiente agua y jabón, las telas desprendieron poca
71
cantidad de colorante, obteniéndose las tonalidades plasmadas en la Figura Nº
17. El lino un color café, algodón color café intenso, seda un color café claro.
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Alumbre
al 25%
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L
A S S = Seda
Figura Nº 18. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
Con el alumbre la absorción del colorante no es uniforme, porque el
desprendimiento del colorante fue mucho después del proceso de lavado, se
presentan los siguientes resultados: en las telas de lino y seda se observó un
color beige el cual no es homogéneo ya que parte de la tela se ve clara, en
cambio en algodón la fijación del colorante es completa proporcionando un color
ligeramente café como se observa en la Figura Nº 18.
72
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Sulfato de
cobre al 25%
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L A S S = Seda
Figura Nº 19. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
El mordiente sulfato de cobre precipita al entrar en contacto con el colorante,
por que reacciona con el Hidróxido de Sodio formando un precipitado Cu(OH)2
de color verde que no permite una retención homogénea del colorante en las
diferentes telas, dando los siguientes resultados: en lino un color ligeramente
café claro y manchas de color verde en el contorno de la tela, en algodón un
color verde no uniforme, no hubo fijación en la seda como se muestra en la
Figura Nº 19.
73
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Cloruro de
sodio al 25%
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L A S S = Seda
Figura Nº 20. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
La Figura Nº 20 muestra el efecto del mordiente cloruro de sodio en las telas
de lino y algodón el colorante se fija en forma homogénea presentando un color
beige y café claro respectivamente. Por la estructura química que presenta la
seda, el cloruro de sodio no pudo romper sus enlaces por lo que el colorante no
se fijó en la tela.
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Cloruro de
estaño al 25%
P = Telas patrón
P
P P
L = Lino
A = Algodón
L A S
S = Seda
Figura Nº 21. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
74
Con el cloruro de estaño, en lino se presentó un color café claro, en algodón un
color café oscuro y en seda un color café claro (Figura Nº 21).
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Ceniza-
limón al 25%
P = Telas patrón
P
P
P L = Lino
A = Algodón
L A S = Seda
S
Figura Nº 22. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
Con el mordiente ceniza – limón en el lino parte del colorante se fija en la tela
quedando partes más claras de un color beige, en el algodón la retención del
colorante es completa presentando un color café, en la seda no se fijó
completamente el colorante presentando una coloración beige no homogénea
(Figura Nº 22).
75
Fibras teñidas con extracto de la pulpa seca del café, utilizando Acido
tánico al 25%
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L A S S = Seda
Figura Nº 23. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
Con el ácido tánico se logró obtener un color café claro en lino, café oscuro en
algodón y en la seda un color beige no homogéneo (Figura Nº 23).
Fibras teñidas con el extracto colorante de Coffea arabica sin utilizar
agente mordiente.
P = Telas patrón
P P P
L = Lino
A = Algodón
L A S S = Seda
Figura Nº 24. Fibras de Lino,
Algodón, Seda
76
En la tinción con el extracto colorante sin la utilización de agente mordiente, las
telas de lino y algodón no resisten bien el proceso de lavado, presentando un
color beige no homogéneo, en la tela de seda se eliminó completamente el
colorante durante el proceso de lavado. (Figura Nº 24)
El Lino y el Algodón son fibras de origen vegetal, por estar formadas por fibras
celulósicas son más vulnerables al rompimiento de los puentes de hidrógeno
que la forman, por lo que permiten que los diferentes agentes mordientes
utilizados en la investigación rompan estos enlaces, para que el extracto
colorante de Coffea arabica logre una fijación en las fibras.
La seda, fibra de origen animal, está compuesta por una serie de moléculas
proteicas de estructuras alargadas unidas unas a otras, estas cadenas a su vez
se encuentran enlazadas entre sí en forma paralela por eslabones laterales
formadas por puentes de hidrógeno y de sulfuros. Estos puentes sulfurados son
más fuertes y difíciles de romper. Los agentes mordientes alumbre, cloruro de
estaño, ácido tánico, al 25% logran romper parcialmente los puentes de
hidrógeno presentando una tinción no homogénea, sulfato de cobre, cloruro de
sodio, ceniza-limón, al 25% no rompieron ninguno de los enlaces por lo que no
se presentó una coloración en la fibra, solo el sulfato ferroso al 25% fue capaz
de romper estos enlaces, presentando una mejor fijación del colorante obtenido
de la pulpa seca del café.
77
De todas las tinciones realizadas con el extracto colorante de la pulpa seca del
Coffea arabica obtenido con NaOH 0.5 N. Se seleccionaron los agentes
mordientes al 25% sulfato ferroso, cloruro de estaño, ceniza-limón por haber
presentado una mayor fuerza de retención del color durante el proceso de
lavado (el desprendimiento del colorante fue insignificante) en las fibras de
algodón, lino, seda, obteniéndose una absorción uniforme de las diferentes
tonalidades. (Figuras Nº 25 – 30)
FIBRAS TEÑIDAS CON SULFATO FERROSO AL 25 %
Figura Nº 25. Fibra de algodón
78
Figura Nº 26. Fibra de lino
Figura Nº 27. Fibra de seda
79
FIBRAS TEÑIDAS CON CLORURO DE ESTAÑO AL 25 %
Figura Nº 28. Fibra de lino
Figura Nº 29. Fibra de algodón
80
FIBRA TEÑIDA CON CENIZA- LIMÓN AL 25%
Figura Nº 30. Fibra de algodón
81
CAPITULO VI
CONCLUSIONES
82
6. 0 CONCLUSIONES
1. Al utilizar cantidades pequeñas de pulpa en el método de reflujo y mantener
los parámetros constantes; temperatura, volumen, tiempo de extracción, se
obtiene una mejor extracción y mayor porcentaje de rendimiento de la
solución colorante ya que existe una mayor superficie de contacto para que
se mezcle la pulpa con el solvente.
2. En la identificación de los metabolitos secundarios taninos y flavonoides en el
extracto alcohólico de la pulpa seca del café, las reacciones colorimétricas se
apreciaron mejor ya que este extracto es traslúcido; el extracto acuoso su
color es oscuro por lo que las reacciones de identificación solo se pudieron
apreciar al exponerlo contra la luz.
3. La prueba de identificación de flavonoides, con Hidróxido de Sodio al 10%
indica la presencia de flavonoles, los cuales le dan origen al color en el
extracto de la pulpa seca del Coffea arabica.
4. Las bandas seleccionadas en el espectro IR, muestran los grupos principales
de un flavonol, el puede ser el responsable del colorante natural del extracto
obtenido en esta investigación.
83
5. El rango de longitud de onda encontrada en la literatura para un espectro
UV-Vis de los grupos flavonoles es de 250- 280nm, comparado con la
longitud de onda experimental (265.29nm) y la longitud de onda teórica
(267nm); se infiere que la estructura presente en el extracto colorante de la
pulpa seca de Coffea arabica puede ser un flavonol.
6. El lino y algodón por ser fibras de origen vegetal están constituidas por fibras
celulósicas formadas por puentes de hidrógeno, estos puentes son fáciles de
romper es por eso que los mordientes empleados lograron romperlos,
permitiendo que el extracto colorante de la pulpa seca del café se fije en cada
una de las telas.
7. La seda presenta una mejor fijación del colorante al utilizar sulfato ferroso al
25% como mordiente, las moléculas de este son atraídas fuertemente al
polímero de la fibra textil, logrando romper los enlaces de hidrógeno y sulfuro
que componen la estructura de la fibra facilitando la afinidad del colorante a
la seda, para poder resistir el proceso de secado y lavado al que fue
sometido.
84
8. Los mordientes Sulfato Ferroso 25%, Cloruro de Estaño 25%, Ceniza –
Limón 25%; son los que mejor realizaron su efecto de fijación en las telas de
lino, algodón y seda, ya que estas al ser lavadas y secadas mantuvieron su
color.
9. El extracto colorante al entrar en contacto con las telas premordentadas con
sulfato de cobre 25%, se forma un precipitado de color verde por la reacción
que ocurre entre el hidróxido de sodio y el sulfato de cobre, dificultando la
tinción, presentando en las telas una coloración no uniforme que no resisten
el proceso de lavado.
85
CAPITULO VII
RECOMENDACIONES
86
7. 0 RECOMENDACIONES
1. En futuras investigaciones utilizar cantidades pequeñas de muestra, para que
la pulpa y el solvente tenga mayor espacio de movimiento en el método de
reflujo y así lograr un mayor rendimiento del extracto colorante.
2. Realizar otros tipos de análisis como espectrofotometría de masas y
resonancia magnética nuclear, que confirme la estructura del flavonol u otro
metabolito responsable del color.
3. En futuros trabajos de investigación, donde se desee obtener un colorante
natural, realizar primero pruebas de tinción y luego el mordentado, para
conocer si hay fijación del colorante en fibras naturales o sintéticas y utilizar
otros tipos de mordientes naturales (cal, vinagre, orina humana.) para lograr
otra gama de tonalidades.
4. Utilizar los mordientes seleccionados y el extracto colorante de la pulpa seca,
con otro tipo de fibras naturales (manta cruda, lana, nylon.)
87
5. Que la Universidad de El Salvador de a conocer este tipo de trabajos por
medio de congresos sobre colorantes naturales para las áreas: textil,
alimenticia, pintura, farmacéutica, cosmética respaldados con análisis
toxicológicos y clínicos, para disminuir el uso de colorantes sintéticos.
6. Utilizar diferente calidad de Hidróxido de Sodio (industrial, técnico, reactivo)
manteniendo los parámetros constantes: temperatura, volumen, muestra,
mordiente, para evaluar si el extracto colorante mantiene sus características
físicas.
7. Realizar método de liofilización al extracto colorante de la pulpa seca del
Coffea arabica y obtener un colorante en polvo que puede ser utilizado en
la industria textil y posteriormente realizarle pruebas de estabilidad.
8. Incentivar al estudiante de Química y farmacia que realice trabajos de
investigación, encaminados a la sustitución de colorantes sintéticos a partir
de material de desecho de la flora Salvadoreña y así poder contribuir a
disminuir la contaminación del medio ambiente.
88
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ACRIBIA,S.A 2003. Pág. 24,26, 27.
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español. México, Editorial Hispano-americana. Vol 5. Pág. 131,132.
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89
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90
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Pdf. Consultado 7 mayo 2009
91
GLOSARIO (5) (10)
- Aliso: árbol que alcanza hasta dos metros de altura, de hojas escotadas en
el ápice que crece a menudo en el borde del agua.
- Apergaminado: pergamino, piel de la res, raída, adobada y estirada que
sirve para diferentes usos.
- Arcilla: roca sedimentaria clásica poco consolidada, constituida por una
mayoría de partículas de tamaño uniforme, se utiliza como materia prima en
la industria ladrillera y cerámica.
- Artemisa: planta olorosa, compuesta, de tallo herbáceo y flores de color
blanco amarillento de uso medicinal.
- Astenia: estado de fatiga y agotamiento sin causa orgánica.
- Biocombustible: combustible de origen biológico que no contamina.
- Cafeína: alcaloide blanco obtenido del café, del té y de otros vegetales.
- Campeche: madera dura y negruzca, procedente de un árbol de la familia
Papilionáceas usada para teñir.
- Casco: pedazo de una vasija, ladrillo, etc.
- Celulosa: glucósido polisacárido que forman las membranas de las células
vegetales.
- Chilca: arbolillo balsámico y resinoso, de hoja verde clara y flor amarilla,
originario del mediterráneo.
- Diurético: fármaco u otra sustancia que tiende a promover la formación y
excreción de orina.
92
- Endocarpio: endocarpo. Capa interna del pericarpio que suele corresponder
a la epidermis interna o superior de la hoja carpelar.
- Endosperma: tejido reservantes de las semillas, formado en el saco
embrional como consecuencia de un núcleo secundario espermático,
procedente del tubo polínico.
- Hormigón: aglomerado artificial de piedras menudas, grava y arena
cohesionadas mediante un aglutinamiento hidráulico.
- Líquenes: división de vegetales criptogámicos constituidas por la asociación
de una especie de hongos y otra de algas.
- Mesocarpo: mesocarpio, lo que esta entre dos cosas.
- Molle: planta arbórea de mediano tamaño propia de América Central y
meridional de hojas compuestas y muy poco dentadas perteneciente a la
familia anacardiáceas.
- Nylon: material sintético de índole nitrogenado del que se hace filamentos
elásticos muy resistentes.
- Orejón: estípula, pequeño apéndice membranoso o foliáceo. Que se
encuentra en el punto de inserción de las hojas.
- Pectina: polisacárido de alto peso molecular, de naturaleza gélica y gran
viscosidad.
- Pericarpio: parte del fruto, que rodea la semilla y la protege contra las
inclemencias del cielo y los animales.
93
- Peristaltismo: contracciones coordinadas, rítmicas del músculo liso que
fuerzan el desplazamiento de los alimentos a través del conducto digestivo,
la bilis a través del conducto biliar y la orina a través de los uréteres.
- Permeable: que puede ser penetrado por el agua u otro fluido.
- Plaga: daño grave o enfermedad que sobreviene a una planta.
- Precipitar: producir en una disolución una materia sólida que cae al fondo de
un beaker.
- Radiación: emisión de ondas por parte de una fuente.
- Rayón: nombre de diversas fibras textiles artificiales obtenidas a partir de la
celulosa regenerada.
- Reflujo: flujo de un líquido en sentido inverso al flujo anterior.
- Subsuelo: parte profunda del terreno a la cual no llegan los
aprovechamientos superficiales.
- Tara: planta arbustiva de la familia cesalpiniáceas, de cuya madera se
extrae un tinte.
- Tegumento: todo órgano o parte orgánica que envuelve a otro y le presta
protección.
- Teñir: dar a una cosa un color distinto al que tenía.
- Yute: tejido basto que sirve para hacer tela de saco, que se obtiene de los
tallos de una planta de la familia tiliáceas, cultivada en la India, Bangladesh
y China.
94
ANEXOS
95
ANEXO Nº 1
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS
96
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS
Materiales:
- Beaker de 100, 250,400, 500 mL
- Embudo de vidrio
- Tubos de ensayo
- Gradilla
- Vidrio de reloj
- Balón volumétrico de 100, 500 mL
- Ampollas de separación
- Beaker plástico de 100, 250 mL
- Cápsula de porcelana
- Agitador de vidrio
- Probeta de 100, 10 mL
- Frasco plástico
- Frascos de vidrio ámbar
- Espátula/microespátula
- Goteros
- Pizeta
- Mangueras
- Pinzas de sostén
- Pinzas de extensión
- Trípode
97
- Papel toalla
- Toallas
- Guantes
- Mascarilla
- Muestras de tela algodón, lino, seda.
Equipo:
- Baño maría
- Balanza analítica
- Balanza semianalítica
- Balanza granataria
- Hot plate
- Termómetro
- Espectrofotómetro Infrarrojo
- Espectrofotómetro Ultravioleta Visible
- Aparato de reflujo
Reactivos:
- Hidróxido de sodio 0.5 N
- Tricloruro de hierro 10%
- Hidróxido de sodio 10%
- Ácido clorhídrico 1 N
- Reactivo de Mayer
- Reactivo de Wagner
98
- Reactivo de Dragendorff
- Cloruro de Sodio 25%
- Alumbre 25%
- Sulfato Ferroso 25%
- Acido Tánico 25%
- Sulfato de Cobre 25%
- Cloruro de Estaño 25%
- Ceniza- limón 25%
- Agua destilada
- Solución de gelatina 10%
- Agua libre de CO2
- Cloroformo
99
ANEXO Nº 2
PREPARACIÓN DE REACTIVOS
100
PREPARACIÓN DE REACTIVOS. (12) (3)
- ÁCIDO CLORHÍDRICO 1 N
Medir con bureta 83.51 mL de ácido clorhídrico al 37% p/p de pureza y
densidad 1.18g / mL. Colocar en un beaker aproximadamente 500 mL de agua
destilada, en baño de agua fría y agregar el ácido lentamente con agitación
constante. Transferir la solución a un balón volumétrico de un litro de capacidad
y completar volumen. Envasar.
- REACTIVO DE MAYER
Disolver 1.358 g de cloruro de mercurio en 60.0 mL de agua destilada. Disolver
5.0 g de yoduro de potasio en 10.0 mL de agua destilada. Mezclar las dos
soluciones y diluir con agua destilada a 100.0 mL.
- REACTIVO DE WAGNER
Disolver 500.0 mg de yodo y 1.5 g de yoduro de potasio en 25.0 mL de agua
destilada.
- REACTIVO DE DRAGENDORFF
Disolver 1.0 g de subnitrato de bismuto en 3.0 mL de ácido hidroclorhídrico 10M
en caliente. Diluir a 20.0 mL con agua destilada y disolver 1.0 g de yoduro de
potasio en la mezcla. Si se oscurece el triyoduro de bismuto separar, añadir
ácido hidroclorhídrico 2 M más yoduro de potasio.
- TRICLORURO DE HIERRO 10%
Disolver 10.0 g de cloruro de hierro en agua destilada hasta 100.0 mL.
101
- HIDRÓXIDO DE SODIO AL 10%
Pesar 10.0 g de hidróxido de sodio, disolver con una porción de agua libre de
CO2 luego llevar a volumen de 100.0 mL con el resto de agua libre de CO2.
- HIDRÓXIDO DE SODIO 0.5 N
Pesar 2.0 g de hidróxido de sodio en un beaker plástico. Disolverlo con 75 mL
de agua libre de CO2, transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL.Llevar a
aforo con agua libre de CO2.
102
ANEXO Nº 3
PREPARACIÓN DE AGENTES MORDIENTES
103
PREPARACIÓN DE AGENTES MORDIENTES
- Cloruro de Sodio al 25%
Pesar 25 g de cloruro de sodio, disolverlo con una porción de agua destilada,
transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con agua
destilada.
- Alumbre al 25%
Pesar 25 g de Alumbre disolverlo con una porción de agua destilada, transferir
a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con el resto de
agua destilada.
- Sulfato Ferroso al 25%
Pesar 25 g de Sulfato Ferroso disolverlo con una porción de agua destilada,
transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con agua
destilada.
- Ácido tánico al 25%
Pesar 25 g de Ácido tánico, disolverlo con una porción de agua destilada,
transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con agua
destilada.
- Sulfato de Cobre al 25%
Pesar 25 g de Sulfato de Cobre, disolverlo con una porción de agua destilada,
transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con agua
destilada.
104
- Cloruro de Estaño al 25%
Pesar 25 g de Cloruro de Estaño, disolverlo con una porción de agua destilada,
transferir a un balón volumétrico de 100.0 mL, luego llevar a volumen con agua
destilada.
- Ceniza –Limón al 25%
Pesar 25 g de ceniza colocarla en un beaker de 250 mL agregarle 75.0 mL de
agua destilada agitar, luego adicionar 25 mL de jugo de limón y homogenizar.
105
ANEXO Nº 4
PARTE-EXPERIMENTAL PROCEDIMIENTOS
106
Parte-experimental. (3)(4)
Extracción-del-colorante de la pulpa seca del Coffea arabica-,con-
HidróxidoVde,,Sodio,-0.5-N
Pesar 25.0 g de muestra luego colocar en un balón fondo plano de 500.0 mL,
adicionar 350.0 mL de NaOH 0.5 N al material vegetal; luego armar el aparato
de reflujo utilizando hot plate, ajustando la temperatura a 70º C durante 2 horas.
Filtrar la solución en papel de cafetera.
Extracción-acuosa..y.alcohólica--de-la-especie-vegetal,para.realizar
pruebas—fitoquímicas.(3)(4)
Pesar 10.0 g de pulpa seca, colocar en un balón fondo plano de 500.0 mL
adicionar 100.0 mL de agua destilada al material vegetal; luego armar el
aparato de reflujo utilizando hot plate para ajustar la temperatura a 70ºC
durante 2 horas. Filtrar la solución en papel de cafetera, tomar 30.0 mL del
filtrado, para realizar pruebas de identificación de taninos, flavonoides.
Hacer extracción de la especie vegetal utilizando 100.0 mLde alcohol al 70%
para identificación de flavonoides, taninos y alcaloides, procediendo de igual
forma que el extracto acuoso.
107
Identificación.de-Metabolitos.Secundarios:-(3)(4)
Identificación-de-Taninos:
-Prueba de Tricloruro de hierro: A 2.0 mL del extracto acuoso agregar 3 gotas
de tricloruro de hierro 10%, el resultado es positivo si hay formación de un color
azul.verdoso.
-Prueba de Gelatina 10%: A 2.0 mL de extracto acuoso agregar 2.0 mL de
solución de gelatina, el resultado es positivo si se forma un precipitado de color
café.
Identificación-de-Flavonoides:(3)(4)
-Prueba con Hidróxido de sodio al 10%: Colocar en un tubo de ensayo 5.0 mL
del extracto acuoso y añadir 0.5 mL de NaOH 10%, observar resultados.
Flavonas y Flavonoles Coloración amarilla
Flavonas e Isoflavonas Diferentes tonos de rojo
Chalconas Coloración púrpura rojiza
Flavonoles Coloración café anaranjado
Antocianinas Coloración azul
Proceder de igual forma, en las pruebas de identificación de Taninos y
Flavonoides con el extracto alcohólico.
108
Identificación-de-Alcaloides-en-el-extracto-alcohólico:-(3)(4)
Reacciones de Precipitación: Tomar 10.0 mL del extracto alcohólico, colocarlo
en una cápsula de porcelana evaporar a sequedad en un hot plate, adicionar
10.0 mL de cloroformo y acidificar con 3 gotas de HCl 1 N luego disolver el
residuo, colorar en una ampolla de separación, tomar 1 mL de la fase ácida en
tres tubos de ensayo y agregar 10 gotas a cada tubo por separado los
siguientes-reactivos:
Reactivo-de Dragendorff: Precipitado anaranjado - marrón
Reactivo de Mayer: Precipitado blanco
Reactivo de Wagner: Precipitados floculentos color marrón.
Preparación-de-telas-con-Mordientes.al.25%.(17)(21)
Para realizar la tinción se utilizaron tres fibras naturales como: algodón, lino,
seda; Se comenzó por tratar las fibras lavándolas con jabón y agua fría, para
eliminar restos de impurezas. Se utilizaron agentes mordientes al 25% para una
mejor fijación del color tales como: ácido tánico, alumbre, ceniza- limón, cloruro
de estaño, cloruro de sodio, sulfato de cobre, sulfato ferroso.
Se sumergieron las tres muestras de tela en cada una de las soluciones de los
diferentes tipos de mordientes preparados, se dejó reposar por 30 minutos,
removiendo constantemente.
109
Procedimiento-para-la-tinción
Las telas mordentadas se sumergieron en el extracto colorante y se calentaron
por 15 minutos a temperatura no superior de 70ºC ,-dejar-reposar-por-dos-días,
teniendo la precaución de remover las telas por la mañana y por la tarde para
lograr una tinción homogénea, luego se secaron a la sombra cada una de las
fibras, se procedió a lavar las muestras con agua y jabón, se secaron las
fibras al sol para observar el grado de tinción. Posteriormente se realizó una
comparación visual de las diferentes telas para verificar el poder de tinción.
Identificación por Espectroscopia Infrarroja del Colorante con NaOH 0.5 N
Este se realizó en Laboratorios López procediendo de la siguiente manera.
- Selección del extracto puro
- Barrido del aparato 4000- 550cm ˉ¹
- Colocar el extracto puro en el HATR
- Homogenizar
- Colocar cubierta de acero inoxidable
- Hacer lectura
110
Identificación por Espectroscopia Ultravioleta del Colorante con
NaOH 0.5 N
Preparación de la muestra del colorante para la lectura en UV-V
Se procedió a realizar diluciones hasta obtener soluciones transparentes del
extracto coloreado, para que permitan ser atravesadas por el haz de luz del
equipo y de esta manera facilitar las lecturas en las mismas, este análisis se
realizó en las instalaciones de CENSALUD de La universidad de El Salvador.
2- Barrido del aparato
1- Preparación
900-190nm
de la muestra
3- Colocación del blanco
4- Sustitución del blanco por
la muestra
5- Lectura de la muestra
Figura Nº 31. Diagrama de lectura directa del colorante de la pulpa seca
del café por medio de espectroscopia Ultravioleta Visible
111
ANEXO Nº 5
FOTOGRAFÍAS
112
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Fruto Pulpa
Figura Nº 32. Muestras de Coffea arabiga
Figura Nº 33. Pesada de la pulpa seca
113
Figura Nº 34. Extracción del colorante
con NaOH 0.5 N
114
Figura Nº 35. Extracción del colorante
con Agua destilada
Figura Nº 36. Extracción del colorante
con Etanol 70%
115
PRUEBAS ESPECTROFOTOMÉTRICAS
A B C
Figura Nº 37. Diluciones para lectura
A = Solución patrón de NaOH 0.5 N
B = Primera dilución del extracto colorante
C = Segunda dilución del extracto colorante
Figura Nº 38. Espectrofotómetro UV – Visible Lambda 35
116
ANEXO Nº 6
TABLA DE FIESSER KUNH
117
UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE QUÍMICA Y FARMACIA
CÁLCULOS DE ULTRAVIOLETA MÁXIMOS PARA CROMÓFOROS
CONJUGADOS
Cuadro Nº 8. Cálculos de Ultravioleta máximos para Cromóforos Conjugados
Dienos Enonas Carbonilo conjugado
Patrón 217nm Acíclico Z=C:215 nm aciclico ó Z=H: 250nm
214nmciclico o anillo de 6 miembros Z=C: 246
heteroanular Z=C: 202 Anillo de 5 Residuo Alquilo ó
253homonoanular miembros Arilo
Z=H: 210 Z=OH, OR: 230
Z=OH: 195
Incremento C=C + 30 + 30 ---
extraconjugado
(S-Cis)C=C-C=C 39 39 ---
Posición( C=C) 5 5 ---
exociclica
Sustituyentes H 0 0 0
R ó residuo anillo 5 =10 = 12 , =18 o = 3, m = 3, p = 10
Cl 5 =15 = 12 o y m = o, p = 15
Br 5 =25, = 30 o y m = 2, p = 15
OH 5 = 35, = 30, = 50 o, m = 7
OR 5 = 35, = 30, = 17 p = 25
= 31
OCOR 0 , , = 6 ---
O - = 75 o, m = 15
p = 80
SR 30 = 85 ---
NH2 - o, m = 13, p = 58
NHR - o, m =20, p =73
NR2 60 = 95 o, m =20, p =85
O o, m =20
ll - - p =45
-NH-C-CH3
118
ANEXO Nº 7
CÁLCULO DE LONGITUD DE ONDA TEÓRICA
119
REACCIÓN DEL FLAVONOIDE CON ALCALI
NaOH
Figura Nº 39. Reacción del Flavonoide con NaOH 0.5N
Cálculo de longitud de onda
Residuo anillo de 6 miembros = 246
2 sustituyentes en Orto = 14
1 sustituyente en meta = 7
267
120
ANEXO Nº 8
TABLA DE RANGOS DE UV-VIS DE FLAVONOIDES
121
Cuadro Nº 9. Valores de Rangos de UV-VIS de Flavonoides. (33)
Banda II (n.m) Banda I (n.m.) Tipo de Flavonoide
250 - 280 310 – 350 Flavonas
250 - 280 330 - 360 Flavonoles (3-OH sustituído)
250 - 280 350 - 385 Flavonoles (3-OH libre)
245 – 275 310 - 330 Isoflavonas (5-deoxi-6,7-dioxi)
275 - 295 300 - 330 Isoflavonas, dihidroflavonoles
230 - 270 (baja intensidad) 340 - 390 Chalconas
230 - 270 (baja intensidad) 380 - 430 Auronas
270 - 280 465 - 560 Antocianinas
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