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Diagrama de Flujo

Este documento describe un experimento para estudiar cómo la temperatura y el pH afectan la actividad enzimática. El experimento involucra la adición de glucosa oxidasa a tubos de ensayo y la incubación de los tubos a diferentes temperaturas y pH. La actividad enzimática se mide mediante espectrofotometría al medir la absorbancia resultante de la reacción enzimática.

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Valentina Diaz
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Este documento describe un experimento para estudiar cómo la temperatura y el pH afectan la actividad enzimática. El experimento involucra la adición de glucosa oxidasa a tubos de ensayo y la incubación de los tubos a diferentes temperaturas y pH. La actividad enzimática se mide mediante espectrofotometría al medir la absorbancia resultante de la reacción enzimática.

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FACTORES QUE

INFLUYEN EN LA
ACTIVIDAD ENZIMATICA

Efecto de la Efectos del pH sobre


temperatura sobre la la actividad
actividad enzimatica enzimatica

Tomar 7 tubos de ensayo y


raturarlos: Blanco, Patron,
Muestra, 0ºC, TA, 37ºC,
80ºC

Adicionar con la
micropipeta (100-1000µL)
1mL de reactivo "glucosa
oxidasa" .

Incubar cada tubo a la


¿Han pasado min
Esperar no temperatura o condicion
5min?
correspondiente

Sí

Sacar los tubos de las


condiciones y rapidamente
con la micropipeta
10-100µL adicionar 10µL
de glucosa "sustrato"
(utilizar una punta diferente
para cada tubo)

Incubar nuevamente los


tubos a las condiciones
respectivas y esperar
minimo 5min.

Mientras transcurre el
Realizar
¿Hay algun tiempo observar si hay
nuevamente el no
cambio? cambios en el color del
experimento
contenido de los tubos

Sí

Calibrar el
espectofotometro
utilizando el tubo marcado
como "Blanco"

Cuando se haya cumplido


el tiempo se procede a
sacar los tubos de las
condiciones y ordenarlos
en las gradillas. Dirigirse al
espectofotometro para
medir la absorbancia.

Rapidamente agregar el
liquido de los tubos en las
celdas del
espectofotometro (utilizar
una celda diferente para
cada tubo)

Medir la absorbanncia y
registrar los datos en una
libreta de apuntes.

Lavar todos los materiales Firn del


utilizados experimento

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