UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRÉS
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICAS
CARRERA: QUÍMICA FARMACÉUTICA
CÁTEDRA: FARMACOGNOSIA
DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS
EXTRAIDOS DE LA MUESTRA SECA DE LA ALBAHACA
(“Ocimumbasilicum”)EN EL LABORATORIO DE
FARMACOGNOSIA
INTEGRANTES:
Tutora:
Dra. Carola Loza Azurduy
“PROTOCOLO PARA LA APROBACIÓN DEL TRABAJO DE AÑO”
2014
FARMACOGNOSIA Pá gina 1
1. OBJETIVOS
1.1. Objetivo general.
Determinar los metabolitos secundarios extraídos de la muestra seca de la albahaca
(“Ocimumbasilicum”) en el laboratorio de farmacognosia
1.2. Objetivos específicos.
Observar las características físicas al microscopio de la planta seca de albahaca
Ocimumbasilicum.
Obtener los porcentajes de humedad y cenizas para determinar el estado de
conservación y la calidad de la planta seca de la albahaca.
Extraer los metabolitos secundarios dela albahaca para luego identificarlos
mediante la marcha fitoquímica.
2. MARCO TEÓRICO
2.1. Antecedentes.
La albahaca llegó a Europa desde Asia a través del mediterráneo. La denominación
Ocimum deriva del griego osme, que significa oloroso, fragante, en tanto
bacilicumsignifica hierba regia. Dioscórides recomendaba la albahaca para combatir el
meteorismo (Ver anexo 5).promover la diuresis e incrementar la secreción láctea. Durante
la edad media, era frecuente armar estuches o cojines con plantas aromáticas (entre las
que figuraba la albahaca) para protegerse contra la peste. Las hojas secas reducidas a
polvo también fueron empleadas como rapé.(Ver anexo 5).
La variedad que crece en India era considerada sagrada o santa, de ahí su denominación
de Ocinumsanctum encontrándose en muchos hogares como protectora de los mismos.
[ CITATION Alo042 \l 16394 ]
En otros países la albahaca es bien conocida como “la reina de la hierbas”, y es una
planta muy importante por su elevado contenido de fito-nutrientes. Por sus grandes
FARMACOGNOSIA Pá gina 2
beneficios, es denominada, en algunas culturas, como “la hierba sagrada.[ CITATION
Cop14 \l 16394 ]
En Bolivia la Albahaca o allwaka es una planta que crece en zonas sub tropicales como
Nor Yungas, Alto Beni (La Paz) y Punata (Cochabamba).
Es una plantita fraganciosa y de flores blancas que mucha gente, sabiendo los poderes
medicinales que tiene, la cría en su casa y en su huerto. El olor de esta planta, así como
atrae a las abejas, hace escapar a las moscas.[ CITATION Zal911 \l 16394 ]
2.2. Descripción botánica.
Nombre científico: Ocimumbasilicum
Familia: Lamiaceae
La albahaca es una planta anual o bianual, erecta, ramificada, pubescente, como de 80cm
de altura. Hojas de aovadas a elípticas, dentadas de 3 a 5 cm de largo, con peciolos
delgados, el ápice obtuso o agudo, la base estrechada o redondeada, verticilos
aproximados, los racimos solitarios o varios, 10 cm de largo o más cortos; pedicelos de 2
a 3 mm de largo. Cáliz de 4 a 5 mm de largo en el fruto, 5-lobado, esparcidamente ciliado;
el diente superior abovado, 2 laterales con las puntas aleznadas,(Ver anexo 5). los 2
inferiores aleznados. Corola casi blanca como de 3 mm de largo, sus lóbulos casi igual.
Estambres 4, didinamos(ver anexo 5), los filamentos superiores peludos en la base.
Ovario 4-carpelo estilo basal.
Sembrada a pleno sol presenta el tallo follaje de color verde, crece silvestre en terrenos
yermos (ver anexo 5). [ CITATION Gup951 \l 16394 ]
2.3. Composición Química
En estudios de tamizaje fitoquímico se ha identificado la presencia en estas plantas de:
aminas, flavonoides, leuco-antocianinas, esteroles y triterpenos.
Se reportan los siguientes compuestos: apigenina, 7-O-glucuronido de apigenina, acidos
ascórbico, cítrico, y ursolico, luteolina, limoneno, humuleno, moludistina y orientina.
FARMACOGNOSIA Pá gina 3
El aceite esencial de esta planta contiene eugenol, carvanol, metil-eugenolcariofileno,
metileter de chavicol, alcanfor, 1,8-cineol, carvacrol, estragol, decil aldehído, alfa y beta
pineno, gama selineno, terpinen-4-ol.[ CITATION Gup951 \l 16394 ]
Contiene flavonoides, principalmente xantomicrol y heterósidos de la quercetina y del
kaempferol.
Además de las partes aéreas se aislaron esculetina (cumarina), vicenina (glucósido),
benzenoides, acido p-cumarico(fenilpropanoide), eriodictiol(flavonoide)y sus derivados,
taninos(resto de la planta).
En las semillas se identificaron: saponinas, azucares y mucilago (contenido D-glucosa, 1-
arabinosa, D- Xilosa, D-ramnosa, D- glucoronico, D manuronico y ácidos orgánicos).
[ CITATION Alo042 \l 16394 ]
2.4. Acción farmacológica
Presenta diversas propiedades como ser antiespasmódicas, carminativas, eupépticas
(Ver anexo 5), aperitivas, sedantes, diuréticas, galactogenas(Ver anexo 5) y astringentes
(en inflamaciones nasales y faringes). Por otra parte, pomadas elaboradas a partir de
extractos alcohólicos, han sido útiles en casos de heridas ulceradas o de difícil
cicatrización.
Suelen prepararse también macerados en alcohol (para friccionar) en casos de
rinofaringitis o dolores articulares.
Asimismo, se utiliza el extracto de las hojas en aplicaciones locales contra lesiones
impetiginosas(Ver anexo 5), picaduras de insectos o también en lavado de dientes.
Por su parte las semillas son ingeridas una vez al día en la resolución de jaquecas o
migrañas.[ CITATION Alo042 \l 16394 ]
FARMACOGNOSIA Pá gina 4
En el siguiente cuadro se indica las propiedades de la albahaca.
[ CITATION
Roqnd \l 16394 ]
En Bolivia:
La infusión de hojas alivia el dolor de cabeza y es efectiva contra enfermedades de
la vejiga y riñones, gonorrea y menstruación.
También actúa contra enfermedades como el beriberi o ayawayra y el escorbuto
(Ver anexo 5), que se deben a la deficiencia de alguna vitamina, es incomparable
como tranquilizante nervioso
El cocimiento de hojas se utiliza para el dolor de la garganta e inflamación de las
amígdalas, inflamaciones intestinales, espasmos nerviosos, vértigos, vómitos,
gripes,y resfriados, aumenta la leche materna. Se recomienda para la caída del
cabello
Las hojas machacadas se utiliza para las contusiones, tumores y heridas.
Las hojas maceradas se utiliza para los dolores reumáticos, torceduras, calambres
y makhurka(Ver anexo 5).
Las semillas se usan para el dolor de oídos
Las hojas secas reducidas a polvo se utilizan para el catarro[ CITATION Zal911 \l
16394 ]
2.5. Efectos adversos y /o tóxicos
FARMACOGNOSIA Pá gina 5
Los extractos de albahaca por lo general son muy bien tolerados: en altas dosis, los
componentes de aceite esencial pineno, linalol y terpineol, pueden provocar efectos
narcóticos e irritación de las mucosas, el safrol y estragol han sido reportados como
agentes carcinogéneticos (especialmente en hígado) también en altas dosis o durante en
exposición crónica alimentaria.[ CITATION Alo042 \l 16394 ]
3. JUSTIFICACIÓN.
En Bolivia la albahaca es utilizada mayormente en la gastronomía, sin embargo sobre la
base de la información de aquellas personas entendidas en la venta de plantas
medicinales (naturistas), la albahaca es utilizada contra: dolor de cabeza, enfermedades
de la vejiga y riñones, anemia, beriberi (Ver anexo 5).dolor de garganta, inflamaciones
intestinales, espasmos nerviosos, vértigos, vómitos, gripes y resfríos, contusiones (Ver
anexo 5), tumores, dolores reumáticos, torceduras, dolor de oído. Pero se desconoce a
los componentes causantes de ese efecto farmacológico, (referencias transmitidas
oralmente).
Para lo cual con este trabajo pretendemos determinar los metabolitos secundarios
presentes en la albahaca.
4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
No existen estudios relacionados con metabolitos secundarios presentes en la planta de
albahaca en Bolivia.
5. HIPÓTESIS.
Mediante la observación microscópica se pueden encontrar cristales de oxalato de
calcio.
Existe alto porcentaje de cenizas y bajo porcentaje de humedad.
La albahaca contiene flavonoides, alcaloides y taninos.
6. METODOLOGÍA.
FARMACOGNOSIA Pá gina 6
6.1. INCLUSIONES PARAPLASMÁTICAS
6.1.1. MATERIALES Y REACTIVOS
- Microscopio - Lugol
- Porta objeto - Agua destilada
- Estilete
CONTENIDO ERGASTRICO:
Almidón – inulina- aleurona-
cristales de oxalato de calcio
Almidón: con reactivo de lugol
Inulina: polisacáridos compuesto por
fructosa se encuentra en espinas, corte
de raíz
Aleurona: proteína vegetal se
encuentra en semillas
6.2. DETERMINACIÓN DE CENIZAS
6.2.1. FUNDAMENTO
El método se basa en determinar el residuo conocido como cenizas, que queda
tras la combustión completa de los componentes orgánicos de un alimento por
calentamiento a 500 o 550 °C hasta peso constante.
6.2.2. MATERIALES
- Cápsula de porcelana
- Baño de arena
- Mufla
- Espátula
- Vidrio de reloj
- Balanza analítica
6.2.3. PROCEDIMIENTO
Pesar la capsula de porcelana vacía
Añadir a la capsula 2 gr de muestra
Calcinar previamente en el baño de arena hasta que desprenda totalmente los
vapores de la muestra (humos blancos)
Colocar la capsula en la mufla y dejar durante 2 horas (hasta obtener cenizas
blancas o grises)
Enfriar la muestra, pesar las cenizas y sacar el porcentaje
FARMACOGNOSIA Pá gina 7
6.3. DETERMINACION DE HUMEDAD EN TERMOBALANZA
6.3.1. FUNDAMENTO
Este método se basa en evaporar de manera continua la humedad de la
muestra
y el registro continuo de la pérdida de peso, hasta que la muestra se sitúe a
peso constante.
El error de pesada en este método se minimiza cuando la muestra no se
expone constantemente al ambiente.
IMPORTANCIA
Determina el estado de la conservación.
6.3.2. MATERIALES
- Termobalanza
- Espátula
6.3.3. PROCEDIMIENTO.
Homogeneizar la muestra
Con ayuda de una espátula añadir la muestra (CM= 2g) al plato porta muestra
Extender la muestra lo más regular posible y pesar (peso total) a una temperatura
de 100 a 105 º C durante un tiempo determinado
Realizar una diferencia entre estas dos pesadas y así tendremos la cantidad de
muestra exacta.
6.4. MARCHA FITOQUÍMICA
6.4.1. FUNDAMENTO
El análisis fitoquímico se basa en determinar los metabolitos secundarios
presentes en la especie vegetal a estudiar, aplicando para ello una serie de
técnicas de extracción, de separación y purificación.
6.4.2. MATERIALES Y REACTIVOS (IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES)
- Soporte universal - Gradilla
- Pinza de nuez - Embudo estriado de tallo corto
- Embudo de separación - Papel filtro
- 4 tubos de ensayo - 2 Vasos de precipitado de 50 ml
- 1 Pipeta de 5 ml
Procedimiento (ver anexo 1)
FARMACOGNOSIA Pá gina 8
6.4.2 MATERIALES Y REACTIVOS (IDENTIFICACIÓN DE TANINOS)
Materiales Reactivos
- 1 vaso de precipitado de 250 ml - Agua destilada
- 1 hornilla o baño de arena - Tri cloruro ferrico
- 1 varilla - Ferricianuro de potasio
- Embudo - Amoniaco
- Papel filtro - Acetato de plomo
- 4 tubos de ensayo - Di cromato de potasio
- Muestra seca de albahaca
Procedimiento (ver anexo 2)
6.4.3 MATERIALES Y REACTIVOS (IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES)
Materiales: Reactivos:
- Vaso de precipitado - Amoniaco
- Embudo de vidrio - Éter etílico
- Embudo de separación - Ácido clorhídrico
- Portaobjetos - Ácido pícrico
- Papel tornasol - Reactivo de Bouchar
Procedimiento (ver anexo 3)
7. RESULTADOS
7.1. INCLUSIONES PARAPLASMÁTICAS
Se hizo una descripcion general de la hoja seca de albahaca, para lo cual se utilizo como un
aclarador a la solucion de hipoclorito de sodio y observamos lo siguiente:
La hoja de albahaca es pubescente se observa pequeños tricomas o pelos, pero no hay la
presencia de cistolitos por lo cual no se hace la identificacion de cristales.
Observamos varias estomas en diferentes lados de la muestra
Identificamos la parenquima en empalizada
No se encuentra almidon en la muestra por lo cual no se realiza la prueba de lugol
FARMACOGNOSIA Pá gina 9
7.2. DETERMINACIÓN DE CENIZAS
CÁLCULOS❑❑
P final−P cap
% Cenizas totales= ×100
CM
de donde:
P cap= Peso de la cápsula vacía
P final = Peso de la cápsula + cenizas
CM = Cantidad de muestra
RESULTADOS
34.059−33.757
% Cenizas totales= ×100 = 14.98%
2.015
35.611−35.307
% Cenizas totales= ×100 = 15.08%
2.015
7.3. DETERMINACION DE HUMEDAD EN TERMOBALANZA
1Hº = 9.06% Tº= 105ºC t = 8.1 min
2Hº= 8.30% Tº=105ºC t= 9.9 min
7.4. IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES
REACCION CON: COLORACION OBTENIDA
Cl3Fe Verde (significa que existe
un oxidrilo en la estructura ).
NH3 Amarillo-naranja ( Es
debido a la formación de
ortoquinonas)
H2SO4 Pardo- café claro
Shinoda Naranja opaco (por la
presencia de flavonas y
flavonoides.
7.5. IDENTIFICACIÓN DE TANINOS
FARMACOGNOSIA Pá gina 10
REACCION CON: COLORACION OBTENIDA
Cl3Fe Verdeoscuro
Ferricianuro de potasio Pardo – rojizo
+ gotas de amoniaco
Acetato de plomo Pardo- café oscuro
Dicromato de potasio Amarillo intenso
7.6. IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES
Con ácido pícrico:Al reaccionar con este ácido si hubo la formación del color
amarillo debido a que éste se combina con aminas débilmente básicas, lo cual
indicaría que la prueba es positiva
Con reactivo de Bouchardat:Al reaccionar con este reactivo difícilmente se
pudo observar que hubo la formación del precipitado pardo, lo cual indicaría
que posiblemente la muestra contenga una mínima cantidad de alcaloides.
8. CONCLUSIONES
Para la observación microscópica no fue necesario moler las hojas secas de
albahaca debido a que podría haber la destrucción de su estructura, para lo
cual también se utilizó una solución de hipoclorito de sodio como un
aclarador.La hoja de albahaca es pubescente se observa pequeños tricomas o
pelos, pero no hay la presencia de cistolitos por lo cual no se hace la
identificacion de cristales, tambien observamos la presencia de estomas,
parenquima en empalizada y no se encuentro almidon en la muestra por lo
cual no se realizo la prueba de lugol
Los porcentajes de humedad de la muestra de hojas secas de albahaca fue de
9.06% y 8.30% ,valor que se encuentra dentro del rango establecido que es
de 12.17% y cumple con un estado de conservación adecuado.
El porcentaje de cenizas totales fue de 14.98% y 15.08 % el cual se realizó
por duplicado, valor que no se encuentra dentro del rango establecido que es
de 11.46%.
Se puede afirmar que los procesos de extracción e identificación de los
flavonoides presentes en las drogas vegetales son muy prácticos y sencillos,
una de las técnicas que más se utilizan para la identificación de flavonoides
es la reacción de coloración, la más específica es la reacción de shinoda de la
que resultan coloraciones características según el tipo de núcleo de los
flavonoides.
Los flavonoides de la albahaca protegen las estructuras celulares y los
cromosomas contra las radiaciones y los radicales libres, inhiben el crecimiento
FARMACOGNOSIA Pá gina 11
de las bacterias que se propagan en medio de los alimentos, mejoran la
circulación de la sangre y tienen la propiedad en poca proporción de ser
laxante.
Se identificó la presencia de taninos en las hojas y flores de la muestra seca de
albahaca dando como resultado positivo en el laboratorio. El ensayo
fotoquímicopermitió detectar la presencia de taninos en las hojas realizando un
ensayo de coloración y precipitación, para lo cual se identificó en ello los
compuestos fenólicos, un ejemplo de ello es la reacción de coloración con Fe
Cl3 donde nos dio un color verde oscuro lo cual nos indica que tiene un efecto
astringente.
La prueba con el ácido pícrico fue positiva, ya que al ser un ácido fuerte forma
con las aminas débilmente básicas sales de color amarillo intenso que pueden
precipitar fácilmente en solventes orgánicos y que pueden servir para la
identificación de las bases.
Pero en el caso de la reacción con el reactivo de Bouchardat la prueba
pareciera ser negativa, ya que se observó escasamente el precipitado pardo,
es por eso que debemos tomar en cuenta que no hay suficiente información
acerca de la presencia de alcaloides en la albahaca, si se menciona que lo
contiene pero no se sabe en que proporción ni cuál es ese alcaloide.
9. BIBLIOGRAFIA
Alonso, J. (2004). Albahaca. En J. Alonso, Tratado de fitofármacos y nutraceuticos
(págs. 105-108). Corpus.
Copyright ©. (2014). Cómo bajar de peso y más. Recuperado el 21 de Septiembre
de 2014, de Cómo bajar de peso y más:
http://comobajardepesoymas.com/propiedades-de-la-albahaca/
Gupta, M. (1995). Albahaca. En M. Gupta, 270 plantas medicinales
iberoamericanas (págs. 322-326). Bogotá.
Roque, G. (n.d.). cuaderno para la fencyt de albahaca. Recuperado el 20 de
Septiembre de 2014, de cuaderno para la fencyt de albahaca: 3.
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sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=16&cad=rja&uact=8&ved=0CDoQFjAFOA
o&url=http%3A%2F%2Faxelroque.files.wordpress.com
%2F2011%2F10%2Fcuaderno-para-la-fencyt-de-
albahacac3a7.doc&ei=hWgQVKiBGJLMggSm_oKgAw&usg=AFQjCNEnoQo_7FU
KH
Zalles, J. (1991). Albahaca. En J. Zalles, El verde de la salud. Manual de medicina
tradicional autóctona para uso de los agentes de atención primaria de salud (pág.
65). Cochabamba.
FARMACOGNOSIA Pá gina 12
10. ANEXOS
ANEXO 1
IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES
Recolección de la planta
Secado de las plantas
Maceración (alcohol etílico 70 grados) por una semana
Filtrar
El filtrado llevar a un embudo de separación, añadir 2 ml de benceno y agitar suavemente.
( 1ra extracción)utilizar solo la fase acuosa a la cual añadir 1 ml de benceno (2da
Enfriar con agua de grifo hasta que esté completamente frio.
Añadir un chorro de agua fría
Dejar reposar, para que se separen las 2
fases
Fase oleosa (desechar) Fase acuosa separar en un vaso de precipitado y
posteriormente fraccionar la solución en 4 tubos
de ensayo en partes iguales
2ml (F.A.) +1ml 2 ml (F.A) + 1 ml (+)2 ml (F.A.) + 1 ml 2ml (F.A.) + reactivo de
Cl3Fe FARMACOGNOSIA NH3
Pá gina 13 AmarilloH2SO4
cambia a shinoda (mg) + 1 ml
(+) (+) pardo (+)
Verde (2 ol) Amarillo intenso Amarillo naranja a Rojo naranja
Azul (3 ol) Amarillo naranja rojo pardo
ANEXO 2
IDENTIFICACIÓN DE TANINOS
Extracción con agua caliente
Filtrar
Reacción de color Reacción de precipitación
1 ml de muestra + 1ml de ferricianuro de 1 ml de muestra + gotas de
potasio + gotas de amoniaco dicromato de potasio
(Pardo rojizo)
1 ml de muestra + 1gota tri cloruro
1 ml de muestra + gotas de acetato
férrico
de plomo)
FARMACOGNOSIA Pá gina 14
ANEXO 3
IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES
Muestra seca y molida
Macerar 1 hora con NH3 + H2O, luego con éter etílico
Filtrar
Residuo Filtrado
Adicionar HCl(d), realizar separación
Verificar el pH ácido (papel tornasol)
Fase acuosa Fase orgánica
Identificar
FARMACOGNOSIA Pá gina 15
Ácido pícrico (una gota) Reactivo de Bouchard (una gota)
(+) Color amarillo (+) Color pardo
ANEXO 4
INCLUSIONES PARAPLASMÁTICAS
Presencia de tricomas
Presencia de tricomas
Presencia de estomas
Presencia de parénquima
empalizada
DETERMINACIÓN DE CENIZAS
FARMACOGNOSIA Pá gina 16
DETERMINACION DE HUMEDAD EN TERMOBALANZA
IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES
FARMACOGNOSIA Pá gina 17
IDENTIFICACIÓN DE TANINOS
REACCIONES DE COLOR
Reacción con ferricianuro
Reacción con Fe Cl3 (color de potasio (color pardo
verde oscuro) rojizo)
REACCIONES DE PRECIPITACION
Reacción con acetato de Reacción con dicromato de
plomo potasio
FARMACOGNOSIA Pá gina 18
IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES
ANEXO 5
Glosario
Aleznada: adj. Puntiagudo, en forma de lezna.
Beriberi:abarca un conjunto de enfermedades causadas principalmente por la deficiencia
de vitamina B1 (tiamina) cuyo nombre proviene del cingalés beri que significa «no puedo»,
destacando con dicho término la fatiga intensa y la lentititud que muestran los enfermos
afectados por estas deficiencias. La enfermedad afecta principalmente los
sistemas nervioso y cardiovascular.
Contusión:cuando se produce un golpe, caída o cualquier impacto sobre la piel,
pero sin llegar a romper su continuidad ni ocasionar heridas abiertas.
Didínamos: Dícese al androceo en que ocurre el fenómeno de la didinamia surgiendo
en dos pares de diferente largura.
Escorbuto: Enfermedad por carencia debida a la ausencia en la alimentación de la
vitamina C, contenida en las legumbres y en la frutas frescas
FARMACOGNOSIA Pá gina 19
Eupépticas: Es una sustancia que favorece la digestión gástrico de los alimentos.
Galactogenas: Se llaman plantas galactógenas o galactogogas a aquellas que contienen
propiedades similares a los estrógenos femeninos por lo que estimulan las glándulas
mamarias incrementando la producción de leche en las madres que amamantan con su
pecho.
Impetiginosas: Es una especie arbórea nativa de América donde crece desde el
Paraguay, Bolivia y el norte de Argentina hasta México.
Makhurka: Envaramiento muscular por exceso de actividad o esfuerzo.
Meteorismo: Acumulación de gas en el tubo digestivo. Puede producir distensión
abdominal, dolor persistente, flatulencia, etc.
Rapé:es un preparado de tabaco (Nicotianatabacum) molido y habitualmente aromatizado
dispuesto para ser consumido por vía nasal. La palabra proviene del francés râpé, que
significa rallado. Actualmente se comercializa bajo el nombre de "tabaco de aspirar".
Yermo: adj. Inhabitado. / Inculto, sin cultivo.
FARMACOGNOSIA Pá gina 20
