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Cepario

El documento describe los tipos de ceparios utilizados en el control microbiológico del agua. Explica que el cepario consiste en una colección de microorganismos mantenidos en el laboratorio con fines de uso en técnicas y pruebas. Detalla que para el control de calidad del agua, el cepario se usa para controlar la calidad de los medios de cultivo. Describe los pasos para establecer un cepario de reserva utilizando viales o tubos con medio de cultivo y glicerol, y un cepario de

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El documento describe los tipos de ceparios utilizados en el control microbiológico del agua. Explica que el cepario consiste en una colección de microorganismos mantenidos en el laboratorio con fines de uso en técnicas y pruebas. Detalla que para el control de calidad del agua, el cepario se usa para controlar la calidad de los medios de cultivo. Describe los pasos para establecer un cepario de reserva utilizando viales o tubos con medio de cultivo y glicerol, y un cepario de

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ELEARNING TOTAL Curso de Control microbiológico del agua– Unidad 3

Cepario
El cepario consta de una colección de microorganismos que se mantienen en el
laboratorio con el fin de ser utilizados luego en la práctica para diferentes técnicas y
propósitos.

Para este caso, el control de calidad del agua, el único propósito para la mantención
del cepario es el control de calidad interno de los medios de cultivo o test de
promoción de crecimiento.

Para este necesitamos obtener las cepas de referencia de interés, las cuales se
consiguen de manera comercial listas para su uso.

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Estos productos vienen listos para sembrar en placas de agar nutritivo. Se


recomienda TSA o agar sangre. Las bacterias incuban a 37°C 24-48hs 18 hs . Para el
caso de los hongos y levaduras, se incuban a 20°C entre 48-72 hs.

Cuando se obtiene un el crecimiento de la cepa se procede a la preparación del


cepario de reserva y el de trabajo.

Cepario de reserva

Para la preparación del cepario de reserva se pueden utilizar “viales para


conservación de cepas” o “tubos eppendorf”. Los primeros vienen en forma
comercial listos para usar (Fig 1). Tienen la particularidad de presentar un sistema de
“perlas”. Presentan en su interior bolitas perforadas embebidas en el medio donde se
encuentra el inoculo. Resultan muy practicas a la hora de trabajar. De manera que se
recupera una “perla” para repicar la cepa a utilizar (fig 2).

Para el caso de utilización de tubos eppendorf necesitamos preparar todos los


materiales. Esterilizar los tubos y preparar el medio que vamos a utilizar. El medio
para este caso es BHI con glicerol al 20%. Se coloca un mililitro por tubo.

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Fig 1

Fig2

Para el repique de la cepa se preparan entre 10 y 15 tubos o viales, se coloca una


ansada de las colonias y se homogeniza bien.

Estos tubos o viales se conservan en temperaturas -18°C/-20°C.

Cepario de trabajo

Este es el que utilizamos en el laboratorio para trabajar. Y se prepara a partir del


cepario de reserva.

Para el inicio se saca un tubo o vial del cepario de reserva y se coloca


inmediatamente en estufa de 37°C. Luego de 30 minutos ya se puede trabajar con el
mismo. En este momento tomamos (para el caso del vial) una perla y la colocamos en
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un tubo en pico de flauta con TSA en el caso de las bacterias y agar Sabouraud para
hongos y levaduras. Para el caso del tubo eppendorf es lo mismo con la diferencia
que se levanta una ansada en lugar de una perla.

Agar en pico de flauta

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Los cultivos bacterianos se incuban 18 hs a 35-37°C y los cultivos de hongos y


levaduras 24-72hs a 20-25 °C.

Este cepario se mantiene en temperaturas de heladera (3°C a 5 °C) y se repica una


vez al mes.

Los primeros 4 repiques se realizan desde el mismo cepario. Luego hay que trabajar
con un vial o tubo nuevo del cepario de reserva.

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