Inmunoglobulinas
¿Qué son las inmunoglobulinas? Estructura de un anticuerpo
Son anticuerpos.
En ocasiones permiten la señalización del
patógeno.
Son proteínas.
Se unen a antígenos específicos.
activación de linfocitos b
Una molécula de anticuerpo tiene una estructura
nuclear simétrica compuesta de dos cadenas ligeras
idénticas (verde) y dos cadenas pesadas idénticas
(rojo).
Tiene una región variable a la cual se une al
antígeno y es específica para reconocerlo.
Los linfocitos B al activarse pueden proliferar y
Las inmunoglobulinas están compuestas por un
llegar a un fenotipo productor de anticuerpos.
dominio llamado Ig, este le confiere estabilidad a la
Estos linfocitos son capaces de captar el antígeno
molécula y en ocasiones se involucra con el sitio de
por ellos mismos, pues también actúan como
unión a antígeno.
células presentadoras de antígeno, se activan o
pueden ser activados por linfocitos CD4+ (linfocitos Esta imagen muestra a un anticuerpo en términos de
T Helper) y dicha activación conlleva a una dominios estructurales. A la izq (a) hay una IgG y a la der
proliferación (expansión clonal) y a una (b) una región de una IgM.
diferenciación de diferentes tipos celulares que van
Estas dos estructuras son muy similares, no obstante,
a llevar a la producción de anticuerpos.
varían en su región variable.
El linfocito B se diferencia a una cel plasmática
cuyo fenotipo productor es IgM. IgG
La célula B puede cambiar el isotipo y puede
Se compone por una región variable Fab y una
secretar IgG, la cual es la principal inmunoglobulina
región constante Fc.
que podemos encontrar en los mamíferos.
La región variable es la que posee la unión al
También está el fenotipo del linfocito B de
antígeno, por ende, le entrega especificidad al
memoria, este es aquel que anda rondando por el
anticuerpo.
organismo y es capaz de recordar un antígeno o un
Tiene dos regiones variables.
patógeno y cuando aparece este antígeno, el
Las cadenas pesadas y ligeras están unidas por
linfocito es desencadena una producción excesiva
residuos de cisteína, pues al unirse una cisteína
de anticuerpos para proteger al organismo. En este
con otra forma un puente disulfuro
tipo de linfocito se sustentan las vacunas.
entregándole una estabilidad a la proteína al
ser un enlace covalente.
Región de IgM unida a la membrana de células B
5 de estas moleculas en el caso de las solubles.
Están unidas en forma de pentámero lo que le
permite la capacidad de detectar una mayor
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variedad de antígenos debido a que tiene 10 Una Ig se puede destruir o separar.
regiones variables expuestas. La cistein proteasa (papaína) es una enzima que
Los linfocitos B tienen IgM expuestos en su mb que corta cadenas polipeptídicas en los residuos de
le permiten detectar antígenos y activarse. cisteína liberando fragmentos.
La papaína corta la cisteína y separa los fragmentos
Dominio Ig
Fab de los Fc.
Generalmente esto se realiza en técnicas cuando se
quiere bloquear diferentes moléculas utilizando
fragmentos Fab como péptidos o regiones
especificas que son capaces de detectar dichas
molec. Bloqueándolas para que otros anticuerpos
se unan a ese lugar.
La pepsina en vez de separar dos fragmentos Fab,
elimina por completo el fragmento Fc quedando un
fragmento Fab doble que también es utilizado
como marcaje de distintas técnicas.
La finalidad de esto es que se puede manipular la Ig
para ocuparlas según los requerimientos científicos
que haya.
Epítope o determinantes antigénicos
Las dos cadenas pesadas y livianas contienen una
Son porciones de las moléculas de antígeno que
serie de unidades estructurales homólogas
interactúan físicamente con paratopos (sitios de
repetidas, cada una de unos 110 aa de longitud, que
combinación) de moléculas de respuesta inmune y,
se pliegan independientemente en una estructura
por lo tanto, "determinan" la especificidad del
globular.
antígeno.
El dominio Ig son diferentes estructuras
El antígeno se debe encontrar en la superficie
secundarias de proteínas que interaccionan entre
(expuesto) para que el anticuerpo pueda detectarlo
ellas.
y unirse a él.
Es la misma cadena polipeptídica compuesta por
El epítope es la región especifica que detecta al
dos laminas plegada antiparalelas unidas por el anticuerpo, la cual puede tener distintas
puente disulfuro. conformaciones.
Las inmunoglobulinas detectan al patógeno por su
región variable, sin embargo, hay muchas células
inmunes que presentan receptores contra la región
constante de las Ig.
Ejemplo: cuando hay una bacteria que ha sido
opsonizada, es decir, se le han unido muchos
anticuerpos, esta opsonización conlleva a que es un
marcaje para que un macrófago fagocite a la bacteria.
¿Cómo detecta la opsonización? El macrófago posee
receptores que son capaces de detectar a las regiones Fc
del anticuerpo activando la maquinaria el macrófago y
comienza a fagocitar a la bacteria.
Fragmentos proteolíticos de una IgG
Hay diferentes determinantes, estos son:
Conformacional (A)
El anticuerpo detecta al epítope (regiones
amarillas), pero si se desnatura la proteína (se
rompe su estructura más estable) y se separa de
forma lineal, los epítopes también se separan, lo
cual provoca que los anticuerpos ya no lo puedan
detectar, por lo tanto, el epítope tiene una
determinante conformacional la cual es única para
cada anticuerpo.
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Lineal (B)
Son diferentes moléculas de superficie asociadas a
Si el epítope no está accesible, es decir, se distintas funciones, pero tienen en común ser parte de
encuentra dentro de la proteína, el anticuerpo no lo la Ig ya que tienen dominios Ig que las conforman.
puede detectar, pero cuando se desnatura la
El MHC 2 no posee el dominio Ig, por lo tanto, no es parte
proteína, el epítope queda accesible por lo que es
de esta familia.
detectado por el anticuerpo aumentando la opción
de unión a las proteínas. Isotipos de anticuerpos humanos
El Western blot tiene una etapa inicial por lo que
este método es una técnica inmunológica que
permite identificar proteínas de manera específica a
través del uso de anticuerpos, pero su gracia es que
parte con una electroforesis en poliacrilamida que es
denaturante (SDS-PAGE).
Al ser una técnica denaturante, se rompe la Todas tienen diferentes funciones y ubicaciones.
determinante lineal. Al desnaturar la proteína se
dejan expuestos todos los epítopes que puedan
tener, por ende, aumenta la probabilidad de que los
anticuerpos detecten la molécula a estudiar siempre
y cuando no sea conformacional.
Neoantigenético (C)
Es cuando ocurren procesos de proteólisis y gracias
a esta se genera un sitio nuevo que le confiere una
actividad antigénica.
Es el caso más raro, pero existe.
La antigenicidad depende de la estructura, cuando se
habla de esta última hace referencia a la accesibilidad,
hidrofobicidad, entre otros.
Mientras más hidrofóbico sea un epítope, está más
escondido dentro de la proteína.
IgM es el principal anticuerpo primario en la
Proteínas de la superfamilia de Ig en el sistema respuesta.
inmune IgG es la principal inmunoglobulina en respuestas
con diferentes tipos de estímulos.
IgA se secreta en el mucus, lágrimas y saliva.
IgE esta directamente relacionada con las alergias, se
produce cuando estamos en presencia de eventos
alérgicos.
IgD está asociada al receptor de células B.
Las proteínas de superficie y que tienen Ig son muchas y
están asociadas a la inmunidad, algunas de estas son:
IgG.
TCR.
MHC I.
CD4.
CD28.
ICAM-1.
La IgG tiene subclases (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4).
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Cuando se generan anticuerpos pueden ser de dos tipos: Anticuerpos monoclonales
policlonales o monoclonales. Se generan anticuerpos que son capaces de detectar
un solo antígeno de manera muy específica.
Anticuerpos policlonales
Se hace de la siguiente manera:
Es un anticuerpo que va a activar diferentes clones
de células B, por ende, los clones producirán
diferentes anticuerpos.
Pueden detectar más de un epítope.
Se pincha al ratón, se obtienen las cels B y se fusionan
con células tumorales formando hibridomas.
Las cels B se van seleccionando.
La característica de las cels tumorales es que tienen
una proliferación constante y descontrolada.
El hibridoma es una célula productora de
anticuerpos que esta proliferando todo el tiempo
provocando una expansión clonal constante y por
Ejemplo: se tiene un antígeno que tiene dos tipos de
ende una producción cte de un mismo anticuerpo
epítopes (verde y naranjo), pincha al ratón, le saca suero
contra un mismo epítope.
y este va a estar rico en anticuerpos policlonales.
Como tiene dos epítopes, el ratón va a generar
anticuerpos contra el naranjo y el verde activándose
diferentes sets de células B.
Es mas sencillo de obtener este tipo de anticuerpos,
pero su limitante es que pueden tener rxs cruzadas
o puede ocurrir que las células B activadas
produzcan anticuerpos de diferentes
especificidades, pues sabemos que cuando las
células B detectan antígenos se activan y comienzan
su proliferación y diferenciación. Una vez que
proliferan se producen diferentes clones de células B
los cuales van a generar anticuerpos, pero puede que
c/u de ellas tenga diferente especificidad, es decir
puede que haya un cel B que genere mejores
anticuerpos que otra, esto es bien azaroso.
Para evitar que esto ocurra se producen anticuerpos
monoclonales.
En el laboratorio para evitar rxs cruzadas, en vez de
inmunizar al ratón con moléculas que tienen mas de un
epítope, se inmuniza solo un epítope generando
anticuerpos policlonales monoespecíficos. Estos son
anticuerpos generados por diferentes clones de cels B,
pero detectan la misma molécula.
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