UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

ASIGNATURA: CITOLOGÍA I
DOCENTE: MgS. GISNELLA CEDEÑO
TERCER SEMESTRE “A”
ESTUDIANTE:
SALGADO MANRIQUE LAURA PAOLA

PRÁCTICA DE LABORATORIO
INFORME 03
TEMA:
FIJACIÓN DE LA MUESTRA CERVICO-VAGINAL

FECHA DE ENTREGA:
29 DE MAYO DE 2019

PERIODO:
ABRIL-AGOSTO 2019
 FIJACIÓN DE LA MUESTRA CÉRVICO - VAGINAL

OBJETIVO GENERAL:
Realizar una correcta fijación de la muestra cérvico - vaginal para conservar su estructura
morfológica intacta.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

• Identificar las principales sustancias fijadoras en citología cérvico – vaginal para su

aplicación correcta en la toma de muestra.
• Establecer semejanzas y diferencias entre el alcohol al 96% y el citospray
• Analizar las ventajas y desventajas de cada fijado utilizado en la práctica
• Crear destreza en la toma de muestra cérvico – vaginal y fijación de la misma

MATERIALES
Materiales Sustancias o reactivos Muestra
• Espéculo de acero Alcohol al 96% Fantoma
inoxidable O
• Espéculo de plástico Citospray
(desechable)
• Espátula de Ayre
• Citobrush
• Placa portaobjetos
• Porta placa
• Vaselina
• Equipo de bioseguridad
para protección personal
(guantes, mascarilla,
mandil)
MARCO TEÓRICO:
Fijación:
Se refiere al proceso que tiene como objetivo, que tiene por objeto mantener la arquitectura
tanto estructural como química de un tejido o muestra lo más inalterada posible, de tal forma
que sus componentes celulares mantengan las mismas características que cuando dicho tejido
estaba vivo, por lo tanto, detener el funcionamiento y metabolismo de la célula, conservando
su estructura y detalle morfológico impidiendo su oxidación y putrefacción. Esto se consigue
utilizando sustancias que penetren la membrana celular, deshidraten las células, inactiven las
enzimas autolíticas y coagulen las proteínas. No existe el fijador perfecto, todos causan
contracción celular y cada uno actúa con una velocidad diferente. Un fijador adecuado es un
paso esencial en la preparación de frotis de cuello uterino, asegura la adecuada coloración de
las células para el análisis microscópico y su preservación para revisiones inmediatas y a
futuro [1].
Fijadores más usados en la toma de muestra cérvico – vaginal:
Requisitos de un fijador adecuado [1].
• Debe penetrar las células rápidamente para mantener el detalle de la morfología
celular.
• El encogimiento celular debe ser mínimo y uniforme de forma que no ocurran
distorsiones morfológicas.

• Debe permitir la permeabilidad de las tinciones a través de las barreras celulares y ser
apropiado para los métodos de tinción usados.

• Debe permitir la adhesión celular a la lámina de vidrio para el análisis microscópico.

• Debe ser bactericida, no tóxico y permanente
Como fijadores se recomiendan, el alcohol al 96% o el citospray.

• Alcohol al 96% (fijación húmeda): es el fijador de elección cuando la tinción posterior

es la de Papanicolaou. Produce resultados muy satisfactorios. La extensión se pone
en un baño de etanol al 96 % durante 15 - 20 minutos, aunque puede conservarse
indefinidamente siempre que el baño este tapado en el frigorífico. Sumergir
completamente la lámina mínima durante 20 minutos, luego retirarla y dejar que se
seque al aire. Dentro de la cubeta del fijador, se debe evitar el contacto entre las
láminas y para ello es recomendable utilizar gradillas con separadores o en caso de
no contar con éstas, engancharlas con un clip e irlas sosteniendo separadas sobre el
palo de un hisopo. El alcohol debe se debe limpiar cada día, teniendo el nivel óptimo
que cubra las láminas. Se hará su cambio cuando el nivel de solutos en la parte inferior
contamine las láminas. Se le puede añadir ácido acético al 2,5 % con lo que se lisan
los hematíes, por ello en las preparaciones en que se sospecha existencia es una buena
solución para evitar la dificultad que representaría una existencia masiva de hematíes
 recubriendo a los elementos celulares motivo de estudio. Esta mezcla no debe
realizarse en casos en que se desee realizar una valoración citológica hormonal ya
que se produce una falsa eosinofilia que puede llevar a confusión al realizar el
recuento para el índice de eosinofilia [2].
• Citofijador spray (fijación en forma de cubierta): Es una mezcla de alcohol, sustancias
como el polietilglicol y un bacteriostático, éste se coloca a una distancia de 25 a 30
centímetros de la lámina para obtener una película delgada y homogénea,
posteriormente se deja secar al medio ambiente, aproximadamente unos 7 minutos, o
según las indicaciones del fabricante. s un fijador en forma de aerosol. Es un producto
comercial que contiene una mezcla de alcohol isopropílico y una materia plástica, el
polietilglicol, protectora de la desecación. Con este spray se pulveriza toda la
superficie del portaobjetos de forma rápida y sencilla, se debe aplicar a 25 - 30 cm.
de distancia de la muestra. Se aplica al material citológico inmediatamente después
de su extensión en el portaobjetos. Es muy usado por su simplicidad y buenos
resultados, se recomienda sobre todo cuando las extensiones deben ser enviadas a
otros laboratorios para su tinción (extensiones ginecológicas, cepillados orofaringeos,
esofágicos, bronquiales...). Por el contrario, debe evitarse su uso en extendidos de
materiales líquidos realizados en el propio laboratorio y en los hemáticos para no
provocar agrupamientos de los hematíes. Antes de teñir debe extraerse el citospray
mediante pases sucesivos de 5 - 10 minutos cada uno por etanol al 96 %.
Alternativamente y dado que el líquido del aerosol es soluble en agua, a la extensión
puede ser teñida inmediatamente después de rociarla, con lo que se acorta el tiempo
total del proceso. El secado al aire sin fijar se emplea cuando se van a realizar ciertas
tinciones como por ejemplo la de May Crundwald Giemnsa, con esta tinción no se ve
bien la cromatina nuclear y se usa en citologías hematológicas [2].

Fijación de la muestra cérvico – vaginal:

Es muy importante que el tiempo transcurrido entre la recogida de la muestra y su fijación
sea el menor posible, a fin de evitar que se seque el material objeto de estudio. Nunca debe
esperarse por la siguiente toma para hacer fijación [3].
Después de obtenido el frotis, la lámina debe colocarse inmediata mente en un frasco de boca
ancha que contiene el líquido fijador. Este puede ser una mezcla de alcohol éter a partes
iguales o alcohol al 96 % sólo, si no se dispone de éter. La fijación también puede hacerse
utilizando citospray, la sustancia fijadora debe cubrir toda la preparación. Si se utiliza
citospray debe colocarse el frasco a 15 cm de distancia de la lámina y aplicar la nebulización
una sola vez moviendo la mano hacia un solo sentido [3].
Para evitar que las láminas se peguen, si se utiliza el citospray, deben esperarse unos 10
minutos antes de juntarlas, si se utiliza el frasco con alcohol éter debe colocarse a una de las
láminas una presilla movible de alambre de las que se utilizan en las oficinas para unir varios
papeles. El tiempo que tarda en fijar el alcohol al 96% es mínimo 20 minutos, mientras que
el citospray fija en 10 minutos. El tiempo que media entre la fijación de las láminas y su
coloración en el laboratorio no debe ser superior a los 10 días [3].

PROCEDIMIENTO:
• Indicar a la paciente las condiciones para una toma satisfactoria de la muestra,
éstas son:
‣ No estar menstruando (5 días antes o 5 días después de la menstruación)
‣ No haber tenido relaciones sexuales en mínimo 48 horas
‣ No haber usado óvulos, cremas, lubricantes y/o duchas intravaginales en mínimo
48 horas

• Llenar el consentimiento informado y el pedido de examen, éste último contiene

los siguientes datos:
‣ Código de ingreso
‣ Nombres y apellidos
‣ Cédula de identidad
‣ Teléfonos (celular y convencional)
‣ Edad
‣ Fecha de la última menstruación
‣ Número de hijos (vivos y muertos)
‣ Número de partos (normales – cesáreas)
‣ Número de abortos (cuanto tiempo ha transcurrido)
‣ Fecha de la última citología
‣ Procedencia de la muestra (cérvix o muñón vaginal)
‣ Observaciones

• Informar a la paciente que el procedimiento es sencillo y que le puede ocasionar

algunas molestias, especialmente al introducir el espéculo, por lo que hay que explicar
cada paso; dura sólo unos minutos y que no tiene riesgos.

• Realizar la toma de muestra

‣ Tener todos los materiales listos, indicar a la paciente que van a ser usados solo
con ella y que todos son desechables.
‣ Indicar a la paciente que se retire todas las prendas de la cintura hacia abajo y que
se coloque la bata.
‣ Ayudarle a subirse a la camilla y a ponerse en posición ginecológica
‣ Hacer una inspección visual (sin tocar) de los órganos externos del aparato
reproductor de la paciente (describir en las observaciones que constan en el
pedido)
‣ Tomar el espéculo estéril o desechable, colocarlo en la palma de la mano con las
valvas cerradas. Con los dedos índice y medio de la mano contraria, separar los
labios y visualizar el vestíbulo vaginal. Introducir el espéculo en forma vertical y
 una vez dentro girar en forma vertical. No deben usarse lubricantes de ningún
tipo, en caso de resequedad en el canal vaginal se debe usar solución fisiológica
para evitar dolor a la paciente.
‣ Abrir las valvas hasta visualizar el cuello del útero y asegurarlas.
‣ Realizar una inspección visual del cuello del útero (describir en las observaciones
que constan en el pedido)
‣ Tomar primero la muestra del exocérvix con la espátula de ayre, introduciendo en
el orificio cervical y girando 360° de 2 a 3 veces
‣ Colocar la muestra en la mitad placa en forma de barrido por ambos lados de la
espátula
‣ Tomar la muestra del endocérvix con el citobrush introduciendo todo el cepillo
en el orificio cervical y girando 360° de 2 a 3 veces
‣ Colocar la muestra en la otra mitad de la placa con un movimiento de rodamiento
en el cepillo (no en forma de barrido)
‣ Fijar la placa: Pulverizar el citospray bajo la mesa de toma, colocar el
pulverizador frente a la placa a unos 15 cm. Aplicar el fijador moviendo la
mano en un solo sentido, cuidando de que rocíe toda la placa.
‣ Quitar el seguro de las valvas
‣ Halar un poco el espéculo para que se retire del cuello y cerrar las valvas, girar el
espéculo en forma vertical y retirar lentamente.
‣ Indicar a la paciente que ya finalizó el procedimiento y ayudarle a levantarse de
la camilla para que pueda vestirse.
Durante la práctica se realizó la toma con espéculo de con espéculo desechable, se usó
vaselina para simular la lubricación vaginal en la fantoma y se fijó la muestra con citospray.
CONCLUSIONES:

• Las principales sustancias fijadoras en citología cérvico – vaginal son el alcohol al

96%, en el cual deben sumergirse las placas por un espacio de 20 minutos cuidando
que no se peguen entre sí, y el citospray que debe colocarse a 15 cm de la muestra y
pulverizarse cuidando de que cubra toda la placa.

• Se establecen las semejanzas y diferencias entre los dos fijadores en la siguiente tabla:

SEMEJANZAS DIFERENCIAS
Tiempo de fijación:
No alteran la morfología celular • Alcohol 96% - 20 minutos
• Citospray – 10 minutos

Composición:
Ambos son ideales cuando la tinción • Alcohol 96% - Alcohol y agua
posterior es la de papanicolaou destilada
• Citospray – Alcohol isopropílico
y polietilglicol
 Forma de fijación:
• Alcohol 96%: Debe sumergirse
la placa completamente.
Protegen las células de la desecación • Citospray: Debe pulverizarse
sobre la placa a 15 cm de
distancia cuidando que cubra
toda la muestra.
Pasos a seguir después de la fijación:
• Alcohol al 96%: dejar secar al
Los dos se usan de manera simple y se aire y proceder a la tinción.
obtienen buenos resultados • Citospray: Retirar el fijador con
baños sucesivos en etanol y
luego proceder a la tinción

• Las ventajas y desventajas de cada fijador se puntualizan en la siguiente tabla:

ALCOHOL AL 96% CITOSPRAY
Ventajas Desventajas Ventajas Desventajas
Simplicidad: Solo
se debe sumergir la Costo elevado
placa Rapidez, tanto en
Bajo costo Mayor tiempo de la aplicación como Si no es aplicado
fijación en el tiempo de de forma adecuada,
Se puede diluir
fijación puede causar daños
para resaltar
en el extendido o
estructuras
fijación inadecuada

• La técnica de toma de muestra se perfecciona mediante la práctica. Se realizó todo el

procedimiento, teniendo cuidado en cada paso y se añadió la fijación de la muestra
con citospray: Inserción del espéculo con las valvas cerradas, frotis con la espátula de
ayre en la mitad de la placa en forma de barrido, frotis con el citobrush en la otra
mitad de la placa en forma rotatoria, fijación de la muestra pulverizando el citospray
a 15 cm de la placa, retiro del seguro del espéculo y cierre de las valvas, conclusión
del procedimiento quitando el espéculo, ayudando a la paciente a incorporarse y
desechando los materiales utilizados en los recipientes de desecho infeccioso.

RECOMENDACIONES:

• Uso del equipo de bioseguridad y protección personal (guantes, mandil, mascarilla y

gafas protectoras de ser posible).
• Diligenciar adecuadamente la hoja de pedido
• Elegir los materiales de acuerdo con los datos de cada paciente
• Tener listos todos los materiales antes de la toma de muestra
• Durante la toma de muestra: No hacer tacto vaginal, usar espéculo sin lubricante (en
caso de resequedad aplicar solución fisiológica), visualizar muy bien el cérvix,
limpiar el exceso de secreciones con pinzas y gasa.
• Elegir el fijador antes de la toma de muestra y prepararlo junto con los demás
materiales. Se debe tener en cuenta que el citospray debe aplicarse en un solo sentido
y con movimiento rápido, cuidando que cubra toda la placa; por otro lado, si se fija
con alcohol al 96% la muestra debe sumergirse por completo.
BIBLIOGRAFÍA:
1- Varela, S. (2005). Citología cervical. Revisión bibliográfica para Revista Médica
Hondur 2005 Vol. 73; pp. 131 – 136 [PDF] [Citado 2019 mayo 27] Disponible en:
[Link]
2- Ramos, L; Rivera, C… Otros (sf) Manual de citología cérvico – uterina. Secretaria
Seccional de Salud y Protección Social de Antioquia. [PDF] [Citado 2019 mayo 27]
Disponible en:
[Link]
3- Sintes, R; Presno, C & Marín, L. (1995). Toma de la muestra citológica. Rev Cubana
Med Gen Integr v.11 n.4 Ciudad de La Habana jul.-ago. 1995. versión impresa ISSN
0864-2125versión On-line ISSN 1561-3038 [Internet] [Citado 2019 mayo 27]
Disponible en: [Link]
21251995000400011
 ANEXOS

Anexo 1. Procedimiento de la toma de muestra:

Inserción del espéculo

Funete: Laboratorio de Citología UNACH

Toma de muestra
Funete: Laboratorio de Citología UNACH
 Fijación de la muestra con citospray
Fuente: Laboratorio de Citología UNACH

Retiro del espéculo

Fuente: Laboratorio de Citología UNACH