UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA
LA MOLINA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA
CURSO: QUÍMICA ANALÍTICA – TEORIA
TÍTULO: Preparación de Muestras y Generalidades sobre las técnicas
analíticas de separación.
Apellidos y Nombres: Gonzales Utani, Ivon Rosmery
Código: 20200538
Apellidos y nombres del profesor de laboratorio: Palma, Juan Carlos
Fecha de la práctica:16 /07/2021
Fecha de entrega: 19/07/2021
LA MOLINA - LIMA – PERÚ
Índice
1. Preparación de Muestras. ……………………………………………………...pág.2
1.1 Solubilización…………………………………………………………………....pág.2
1.1.1 Disolución de Muestras Sólidas……………………………………...pág.2
1.1.2 Digestión………………………………………………………………….pág.2
1.1.3 Desproteinización……………………………………………………….pág.3
1.1.4 Digestión y Disolución Asistida por Microondas………………….pág.3
1.1.5 Digestión y Disolución Asistida por Ultrasonidos………………...pág.3
1.2 Extracción………………………………………………………………………..pág.4
1.2.1 Extracción Líquido - Líquido…………………………………………..pág.4
1.2.2. Extracción Soxhlet……………………………………………………...pág.5
1.2.3 Extracción por fluidos supercríticos (SFE)....................................pág.5
1.2.3.1 Fluidos supercríticos……………………………………………pág.5
1.2.3.2 Fluidos supercríticos utilizados en el proceso de extracción
1.2.3.3 Instrumentacion en SFE………………………………………...pág.6
1.2.3.4 Modos de SFE…………………………………………………….pág.6
1.2.3.5 Aplicaciones de SFE…………………………………………….pág.6
1.2.4 Extracción en Fase sólida (SPE).....................................................pág.6
1.2.4.1 Algunos parámetros empleados en SPE…………………….pág.7
1.2.4.2 Solvatación de Columnas SPE………………………………...pág.7
1.2.4.3 Interacciones Polares en SPE………………………………....pág.8
1.2.4.4 Interacciones Apolares en SPE………………………………..pág.8
1.2.4.5 Interacciones Ionicas en SPE………………………………….pág.8
1.2.4.6 Interacciones Multiples en SPE………………………………..pág.8
1.2.4.7 Fases estacionales en SPE……………………………………..pág.8
1.2.5 Microextracción en Fase Sólida …………………………………….pág.9
1.2.5.1 Microextraccion en Fase solida con jeringa………………...pág.9
1.2.5.2 Microextraccion en Fase solida en soporte de barra magnetica
1.2.6 Bibliografía………………………………………………………………..pág.9
1. Preparación de Muestras.
1.1 Solubilización.
1.1.1 Disolución de Muestras Sólidas.
1
Se disuelve el sólido en un solvente apropiado, calentando y agitando la
disolución homogénea para que aumente la velocidad de disolución, también se
puede usar ultrasonidos.
1.1.2 Digestión.
Este proceso se usa mayormente cuando la muestra no se disuelve, se agregan
ácidos o bases de diferentes fuerzas , existen 4 tipos de digestión; por vía
húmeda, por vía seca se encuentra la calcinación, esta se puede llevar a cabo
por calentando la muestra en hornos eléctricos (muflas) esta destruye la
materia orgánica y deja la materia inorgánica, por fusión y enzimática, estos
tipos de digestión siempre deben ser usados con previo conocimiento.
A continuación se muestra una tabla por el método de digestión por vía húmeda.
Tabla 1
Comentario: Aquí se muestran los diferentes reactivos usados para la digestión
en vía húmeda.
Si la digestión no se disuelve se puede llevar a cabo el proceso de fusión, que
implica calentar el sólido con 10 a 20 veces su peso de un fundente.
A Continuación los fundentes más usados.
Tabla 2.
2
Comentario: vemos las propiedades de los diferentes fundentes , el carbonato sódico
tiene propiedades básicas por eso se usan en silicatos y sulfatos insolubles.
1.1.3 Desproteinización.
Se trata el material biológico con reactivos precipitantes de proteínas, los dos
reactivos más usados son el sulfato amónico y el ácido tricloroacético
1.1.4 Digestión y Disolución Asistida por Microondas.
Este proceso se basa en poner las muestras en recipientes de digestión y el
calentamiento por microondas se lleva a cabo porque, moléculas de agua
frenan chocando con las moléculas que circulan, esto ocasiona el calentamiento
del líquido, en los metales, la resistencia al flujo de electrones ocasiona el
calentamiento más rápido.
Figura 1. Recipiente de digestión por microondas
1.1.5 Digestión y Disolución Asistida por Ultrasonidos.
La disolución asistida por ultrasonido es más eficaz de agitación, el ultrasonido
son vibraciones que agitan la disolución produciendo burbujas microscópicas
que se dilaten y se contraen, estas pueden alcanzar tamaños enormes que
pueden explotar
Existen dos configuraciones básicas del instrumento usado para la disolución la
figura A , se muestra que se puede sumergir la sonda de ultrasonidos dentro de
disolución por otro lado la figura B,nos muestra que la sonda de ultrasonido
puede estar acoplado con un recipiente con líquido.
3
Figura 2. Posibles configuraciones en la digestión asistida por ultrasonido.
1.2 Extracción
Las muestras para analizar en los laboratorios muchas veces no están
apropiadamente en forma, por lo que se lleva a cabo el proceso de extracción para
extraer el analito de la matriz en el que se encuentre y transferirlo a la matriz
necesaria para su análisis.
1.2.1 Extracción Líquido - Líquido
Se tiene una disolución acuosa con un solvente orgánico insoluble en agua , los
analitos que se encuentren en cualquiera de las dos fases ya sea acuosa u
orgánica se repartirán entre ambas según su solubilidad una vez alcanzado el
equilibrio se tiene.
[A org ] = Es la concentración del analito en la fase orgánica.
[A ac ] = Es la concentración del analito en fase acuosa.
K = constante de reparto
A continuación visualizamos un proceso de extracción liquido liquido, se parte
con una matriz a la cual se le extraerá el analito, a la matriz se agrega cierta
cantidad de disolvente orgánico en el que el analito es mayormente soluble, se
hace una agitación y se espera que se separen ambas fases obteniendo la
matriz acuosa y el disolvente orgánico que contiene al analito, con esto ya
podremos extraer el analito de la matriz original.
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Figura 3. Representación de una extracción líquido- líquido
Los embudos de decantación son los instrumentos más usados para la
extracciones líquido líquido, se realiza mezclando ambos disolventes en el
embudo y agitandolos se espera para que se pongan en contacto ambas fases
así se observa la separación de sus componentes se recoge el analito y se
elimina la que no es.
La extracción líquido líquido usa un método matemático para hallar la
concentración remanente de analito en la disolución acuosa.
[A ac ]n= Concentración de A remanente en la disolución acuosa.
Vac = Volumen acuoso
n= número de extraccion
Vorg= Volumen orgánico
[A ac ]0= Concentración inicial de A en la disolución acuosa.
1.2.2. Extracción Soxhlet
La extracción Soxhlet es un proceso eficaz de extraccion solido- liquido, el
matraz se calienta y evapora el disolvente que pasa por el condensador, las
gotas caen sobre la muestra sólida, el disolvente caliente realiza contacto con la
muestra solda y se empieza la transferencia de masa.
1.2.3 Extracción por fluidos supercríticos (SFE)
1.2.3.1 Fluidos supercríticos
Se define en fluido supercrítico, como una sustancia sometida a
temperaturas y presiones altas en comparación con su punto crítico, este
punto crítico está por encima de la coexistencia de la fase líquida y sólida.
La densidad de estos fluidos supercríticos está en el mismo orden que los
líquidos, con la cual tienen la capacidad de disolver analitos de matrices
sólidas, estas propiedad de los fluidos hace que sean buenos agentes
extractores.
1.2.3.2 Fluidos supercríticos utilizados en el proceso de extracción
El CO2 es el fluido más usado ya que tiene mejores ventajas, ya que tiene
un punto crítico más accesible, no es tóxico, ni inflamable, es inerte y se
puede obtener con una buena pureza a un precio económico, otros fluidos
más usados para la extracción de analitos polares son el H2O y el NH3.
1.2.3.3 Instrumentacion en SFE
1) bala de gases 4) cámara o cartucho de extracción, 2) bomba para
impulso, 3) válvula que permite abrir o cerrar el paso del fluido, 5)
bloque calefactor, 6) válvula de salida,7) restrictor capilar, 8) vial de
recogida.
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Figura 7. Esquema de un extractor de fluidos supercríticos.
1.2.3.4 Modos de SFE
Se clasifican por el modo en que pasa el fluido por el cartucho de
extraccion;
- Extracción dinámica; el fluido pasa enormemente por el cartucho
de extracción a un flujo determinado aquí las válvulas 3 y 7 deben
estar abiertas en el proceso.
- Extracción estática; se llena la cámara de extracción con una cierta
cantidad de fluido supercrítico, se abre la válvula 3 y se mantiene
cerrada la 6.
- Extracción online; se acopla la salida del analito con el sistema de
detección del analito que muchas veces es el cromatógrafo de gases,
así se elimina la manipulación de la muestra.
- Extracción offline; una vez obtenido el extracto se separa y se
analiza.
1.2.3.5 Aplicaciones de SFE
- Muestras biológicas
- Sedimentos, hojas de planta, tierra y polvo, es posible la extracción
de plaguicidas por NO2.
- Papel aserrín y rocas sedimentarias, es posible la extracción
supercrítica de dibenzo dioxinas cloradas por extracción con CO2
- Aditivos de polímeros.
1.2.4 Extracción en Fase sólida (SPE)
La extracción en fase sólida se realiza en minicolumnas de SPE, aquí la SPE
separa grupos de moléculas con propiedades químicas similares.
Figura 8. Minicolumna de SPE
1.2.4.1 Algunos parámetros empleados en SPE
- Volumen muerto
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Figura 9. Proceso de separación en SPE. analit 1: 🛆, analit 2: 〇,
analit 3: ⧭
- Retención
- Elución
Figura 10. Retención en un proceso de SPE
- Capacidad
- Selectividad
1.2.4.2 Solvatación de Columnas SPE
La solvatación consiste en pasar por fase estacionaria un disolvente
orgánico de polaridad intermedia con el agua
Figura 13. Estructura molecular de una columna C8 de SPE no solvatada
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Figura 14. Estructura molecular de una columna C8 de SPE solvatada.
1.2.4.3 Interacciones Polares en SPE
Son el puente de hidrógeno, interacciones Dipolo-Dipolo, la retención de
analitos se facilita mediante solventes no polares y la elusión por solventes
polares con alta fuerza iónica.
1.2.4.4 Interacciones Apolares en SPE
Las interacciones ocurren entre carbono e hidrógeno de los analitos.
1.2.4.5 Interacciones Ionicas en SPE
Ocurren entre moléculas de los analitos con cargas opuestas, para que se
dé el intercambio iónico se debe cumplir que; la matriz y del disolvente
deben estar a un ph donde el analito y el absorbente estén cargados, la
matriz y el solvente no deben contener altas concentraciones de iones de la
misma carga que el analito.
1.2.4.6 Interacciones Multiples en SPE
Aquí es necesario vencer las fuerzas de retención para forzar la elución del
analito.
1.2.4.7 Fases estacionales en SPE
En la mayoría de los casos el soporte para la fase estacionaria es el sílice
que se le unen los grupos funcionales orgánicos, que contribuyen a la
afinidad de los grupos polares
1.2.5 Microextracción en Fase Sólida
1.2.5.1 Microextraccion en Fase solida con jeringa
La fibra está unida a un émbolo de acero inoxidable. El primer paso para
este proceso es la extracción de la muestra luego el análisis GC que es
insertar la aguja en el puerto de inyección en un cromatógrafo de gases, se
oprime el émbolo poniendo la fibra caliente al inyector para desorber los
analitos dentro de la columna.
8
Figura 15. Unidad de extracción de SPME
1.2.5.2 Microextraccion en Fase solida en soporte de barra magnetica
Se requiere un de desorción térmica, consiste en recubrir la barra de de
agitación magnética con el material absorbente que recubre el capilar de
sílice fundida en SPME.
Bibliografía
- Sanchez, M. & Vilanova, E. (2015). Preparación de Muestras. Técnica
analítica de contaminantes químicos: aplicaciones, medioambientales
y alimentarias.
1. Introducción………………………………………………………………..pág.11
2. Procesos de Separación de química Analítica………………………pág.11
3. Clasificación de las Técnicas Analíticas de separación…………..pág.12
3.1 Criterios Estáticos…………………………………………………...pág.12
3.1.1 Clasificaciones según las fases implicadas………………pág.12
9
3.1.2 Clasificación según las fuerzas puestas en juego……...pág.12
3.1.3 Clasificación según el control del proceso……………....pág.13
3.2 Criterios dinámicos………………………………………………….pág.13
3.2.1 Clasificación según el contacto entre las fases…………pág.13
3.2.2 Clasificación según el flujo relativo entre fases………...pág.13
4. Fundamentos de los procesos de separación……………………….pág.14
5. Errores genéticos originados por los procesos separativos….....pág.14
6. Bibliografía………………………………………………………………….pag.14
1. Introducción
La separación es un proceso químico que a menudo involucra dividir una muestra
en dos partes de composición distinta para incrementar porcentualmente
fracciones molares, esta técnica ha contribuido grandemente a la química
analítica.
Ejemplos:
-El aislamiento de iones lantánidos
-La separación de isómeros ópticos por cromatografía de gases
-Determinación de contaminantes atmosféricos, etc.
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La separación ya nos es muy usada en estos tiempos ya que ha sido desplazada
por la cromatografía de gases
Figura 1. Evolución de las Técnicas Analíticas de separación a través de los
artículos científicos publicados según Brooks y Smythe.
Al aplicar la quimica analitia se tiene que tener en cuenta que la técnica método y
procedimientos son absolutamente diferentes:
-Esta técnica se puede usar bajo principios científicos para la obtención de
información en la materia analizada.
-Método, es la adaptación variada de la técnica para llevar a cabo una determinación.
-Procedimiento, es un conjunto de instrucciones para aplicarlas en un método.
2. Procesos de Separación de quimica Analitica
El proceso está dividido en tres etapas fundamentales
- Operaciones previas, esta etapa comprende operaciones como la preparación de
la muestra medida (peso, volumen), disolución, desarrollo de las reacciones
analíticas.
- Medición de la señal analítica y toma,el transporte del instrumento donde se
llevará a cabo la medición.
- Tratamientos de datos, las señales procedentes de instrumentos transformados o
no, son recogidas convenientemente para ver los resultados.
3. Clasificación de las Técnicas Analíticas de separación.
Estos sistemas de clasificación son reiterativos, proporcionan una idea en la cual se
basan y sus interrelaciones.
3.1 Criterios Estáticos
3.1.1 Clasificaciones según las fases implicadas
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Estas facilitan la separación de la mezcla problema.
3.1.2 Clasificación según las fuerzas puestas en juego
Se pueden clasificar según el tipo de básico de proceso que pueda facilitar su
separación, en la interacción intervienen fuerzas relacionadas con
cristalización, cambios iónicos, reacciones químicas, etc.
3.1.3 Clasificación según el control del proceso
Esta divide a las técnicas separativas según su fundamento termodinámico,
cinemático y cinetico-termodinámico, a las técnicas separación basadas en
equilibrios entre las dos fases se le aplica las relaciones termodinámicas.
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3.2 Criterios dinámicos
Se refiere a las diferentes operaciones en los procesos de separación.
3.2.1 Clasificación según el contacto entre las fases
Se define primero la naturaleza del analito si es iónica o no, esta técnica de
clasificación está asociada a fenómenos de adsorción que posibilitan la
concentración de trazas.
3.2.2 Clasificación según el flujo relativo entre fases
Esta clasificación está relacionada con el rendimiento del proceso separativo,
con el número de veces necesarias para alcanzar el equilibrio entre las fases,
los tres tipos de tecnicas de separacion son los siguientes:
- separación simple, aquí el equilibrio del sistema se alcanza solo una vez y
la separación de A y B es completa en una técnica de separación. se cumple
que el valor de uno de los coeficientes de separación sea cero mientras que
el otro que es el analito tiene un valor altísimo.
- Separación múltiple, es la más usada en los procesos de separación se
emplea cuando los valores de los coeficientes no son favorables.
4. Fundamentos de los procesos de separación
La separación de sustancias tiene como fundamentos propiedades intrínsecas de la
sustancia que se quiere separar se requiere diferenciar la magnitud de estas
propiedades, las propiedades intrínsecas son el peso molecular, estructura molecular,
potencial de ionización, reactividad química, volatilidad, etc. Algunos procesos de
separación son; la cristalización que es la capacidad que tienen las moléculas para
adaptarse a una estructura sólida, la separación por destilación, el cambio iónico que
se centra en la diferencia de reactividad entre las especies, el fraccionamiento, los
procesos de separacion de control cinético tiene una relación constante para cadas
sustancia en el sistema así se establece una relación.
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5. Errores genéticos originados por los procesos separativos
La magnitud que nos permite definir estos errores genéticos es la eficiencia del
proceso de separación que se define como la cantidad de las sustancia A separada y
la cantidad de sustancia puesta en juego.
6.Bibliografía
- Valcárcel, M. & Gómez, H. (1988). Técnicas Analíticas de separación. Editorial:
Reverté. cap. 1
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