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Universidad Nacional de Ingeniería: Facultad de Ingeniería Química y Textil Departamento Académico de Ingeniería Química

El documento presenta los resultados de un laboratorio de bioquímica y microbiología sobre la determinación cualitativa de carbohidratos. Se explican los tipos de carbohidratos y las pruebas realizadas como Molisch, Fehling, Barfoed, Lugol, Benedict y Seliwanoff para identificar la presencia de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos en diversas muestras a través de cambios de color u otras reacciones. El objetivo era reconocer los carbohidratos presentes mediante estas pruebas cual
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El documento presenta los resultados de un laboratorio de bioquímica y microbiología sobre la determinación cualitativa de carbohidratos. Se explican los tipos de carbohidratos y las pruebas realizadas como Molisch, Fehling, Barfoed, Lugol, Benedict y Seliwanoff para identificar la presencia de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos en diversas muestras a través de cambios de color u otras reacciones. El objetivo era reconocer los carbohidratos presentes mediante estas pruebas cual
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Universidad Nacional de Ingeniería

Facultad de Ingeniería Química y Textil

Departamento Académico de Ingeniería Química

Laboratorio de Bioquímica y Microbiología (PI721A)

Informe N°01

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS

Alumno 1: Gilio Nuñez Cristhian Fernando 20181251E

Alumno 2: Gonzales Valverde Ricardo David 20181471E

Alumno 3: Marin Pingus Allinson Xiomara 20182676J

Profesoras:

Dra. Jessica Ivana Nieto Juárez (responsable del laboratorio)

Ing. Janet Rojas Orozco

Fecha de realización de la práctica: 21/04/21

Fecha de Presentación del informe: 28/04/21

2021-1
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS

Introducción

Los carbohidratos son componentes esenciales para los seres vivos, estos se encuentran

en forma de azúcares, almidones y fibras y su principal función es aportar energía para que el

organismo pueda realizar sus funciones vitales. Químicamente son considerados como aldehídos

o cetonas polihidroxiladas y se clasifican en:

Monosacáridos: Azúcares simples, estos pueden pasar por absorbidos por el tracto

alimentario sin ser modificados por las enzimas digestivas.

Disacáridos: Son compuestos de azúcares simples , para ser absorbidos por el tracto

alimentario necesitan que el organismo los convierte en monosacáridos.

Oligosacáridos: Se tratan de moléculas que generalmente presentan sabor dulce

provenientes de fuentes biológicas y que tienen bastante importancia en la dieta del ser vivo ya

que se encuentra en gran variedad de alimentos.

Polisacáridos: Químicamente son los carbohidratos más complejos; algunos de ellos son

insolubles en agua ,no todos se utilizan para producir energía . Si el consumo de estos es superior

a las necesidades corporales ,el organismo los convierte en grasa depositándose como tejido

adiposo debajo de la piel.

Para determinar la presencia de carbohidratos (monosacáridos, disacáridos y

polisacáridos) se llevan a cabo las siguientes pruebas cualitativas:

Prueba de Molisch: Esta es una prueba para reconocimiento general de carbohidratos en

el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta

monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales

reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.

Prueba de Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro,

permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración


azul violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.

Prueba de Fehling: El reactivo de Fehling se utiliza para la detección de sustancias

reductoras, particularmente azúcares reductores. Se basa en el poder reductor del grupo carbonilo

de un aldehído que pasa a ácido reduciendo la sal cúprica de cobre (II), en medio alcalino, a

óxido de cobre (I). Éste forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta

reacción es que f orma aldehído puede detectarse fácilmente, aunque exista en muy pequeña

cantidad.

Prueba de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos

reductores, también contiene ion cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente

con los monosacáridos que con los disacáridos.

Prueba de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión

de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así

complejos coloreados.

Prueba de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos

reductores, al igual que el reactivo de Fehling, el de Benedict contiene ion cúprico en medio

alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo

hemiacetálico libre.

Objetivos

Objetivo general

Entender el comportamiento de algunos carbohidratos, mediante pruebas cualitativas,

por ello identificar los carbohidratos presentes en diversas muestras.

Objetivos específicos

Prueba de Molisch: Mediante esta prueba general identificar la presencia de

carbohidratos.
Prueba de Fehling: Mediante esta prueba identificar la presencia de azúcares

reductores que son monosacáridos y algunos disacáridos.

Prueba de Barfoed: Mediante esta prueba identificar y diferenciar

monosacáridos de disacáridos reductores.

Prueba de Lugol: Mediante esta prueba identificar la presencia de polisacáridos.

Prueba de Hidrólisis para sacarosa: Mediante esta prueba identificar la

presencia de sacarosa en una muestra.

Prueba de Benedict: Mediante esta prueba se identifica azúcares

reductores. Prueba de Seliwanoff: Mediante esta prueba identificar cetosas de

aldosas.

Diagrama de flujo

Prueba de Molisch

Agregar 2 gotas de reactivo Agregar 1ml de H2SO4


Muestra
de Molisch concentrado

Solución α-naftol ¿Hay


disuelto al 5% en presencia de
etanol carbohidratos?
Si No

Aparece anillo No se forma


púrpura anillo
Prueba de Fehling

Agregar 1ml de reactivo de Calentar en


Muestra Baño maría
Fehling

Dejar
enfriar
0.5ml Fehling (B) ¿Hay presencia
0.5ml Fehling (A)
Mezcla de tartado de azúcares
CuSO4
de K/Na con NaOH reductores?

Si No

Precipitado La muestra
rojo-ladrillo queda azul

Prueba de Benedict

Agregar 2ml de reactivo de Calentar en


Muestra Baño maría
Benedict

Enfriar
Solución sulfato de
¿Hay presencia
cobre (II) con citrato
de azúcares
de sodio y carbonato
reductoress?
de sodio anhidro

Si No

Alta concentración
de azúcares

Baja concentración
de azúcares
Prueba de Lugol

Agregar 2ml de solución de Agregar 1gota de reactivo


Muestra
almidón 1% de Lugol

¿Hay presencia de Mezcla acuosa


almidón? de I2 y KI

Si No
Calentar
(baño maría) Se forma complejo No se forma
color azul intenso complejo

Dejar
enfriar

Prueba de Barfoed

Agregar 2ml de reactivo de Calentar en


Muestra Baño maría
Barfoed
Dejar en
Mezcla acuosa de reposo
acetato de cobre ¿Hay presencia
en ácido acético de
monosacáridos?
Si No

Se forma No se forma
precipitado precipitado

Prueba de hidrólisis de sacarosa


Agregar Baño maría
Muestra Gotas de HCl Calentar en
(10 minutos)

Agregar
Calentar en Gotas de NaOH al Agregar 1ml de reactivo
Baño maría
10% de Fehling

¿Hay
presencia de
sacarosa?
Si No

Precipitado La muestra
rojo-ladrillo queda azul

Prueba de Seliwanoff

Agregar 2 gotas de reactivo Calentar en


Muestra Baño maría
de Seliwanoff

Mezcla de ¿Hay
resorcinol con presencia de
HCl concentrado cetosas?
Si No

Producto rojo Indica que es


intenso una aldosa

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