Universidad Nacional de Ingeniería
Facultad de Ingeniería Química y Textil
Departamento Académico de Ingeniería Química
Laboratorio de Bioquímica y Microbiología (PI721A)
Informe N°01
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS
Alumno 1: Gilio Nuñez Cristhian Fernando 20181251E
Alumno 2: Gonzales Valverde Ricardo David 20181471E
Alumno 3: Marin Pingus Allinson Xiomara 20182676J
Profesoras:
Dra. Jessica Ivana Nieto Juárez (responsable del laboratorio)
Ing. Janet Rojas Orozco
Fecha de realización de la práctica: 21/04/21
Fecha de Presentación del informe: 28/04/21
2021-1
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS
Introducción
Los carbohidratos son componentes esenciales para los seres vivos, estos se encuentran
en forma de azúcares, almidones y fibras y su principal función es aportar energía para que el
organismo pueda realizar sus funciones vitales. Químicamente son considerados como aldehídos
o cetonas polihidroxiladas y se clasifican en:
Monosacáridos: Azúcares simples, estos pueden pasar por absorbidos por el tracto
alimentario sin ser modificados por las enzimas digestivas.
Disacáridos: Son compuestos de azúcares simples , para ser absorbidos por el tracto
alimentario necesitan que el organismo los convierte en monosacáridos.
Oligosacáridos: Se tratan de moléculas que generalmente presentan sabor dulce
provenientes de fuentes biológicas y que tienen bastante importancia en la dieta del ser vivo ya
que se encuentra en gran variedad de alimentos.
Polisacáridos: Químicamente son los carbohidratos más complejos; algunos de ellos son
insolubles en agua ,no todos se utilizan para producir energía . Si el consumo de estos es superior
a las necesidades corporales ,el organismo los convierte en grasa depositándose como tejido
adiposo debajo de la piel.
Para determinar la presencia de carbohidratos (monosacáridos, disacáridos y
polisacáridos) se llevan a cabo las siguientes pruebas cualitativas:
Prueba de Molisch: Esta es una prueba para reconocimiento general de carbohidratos en
el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta
monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
Prueba de Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro,
permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración
azul violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Prueba de Fehling: El reactivo de Fehling se utiliza para la detección de sustancias
reductoras, particularmente azúcares reductores. Se basa en el poder reductor del grupo carbonilo
de un aldehído que pasa a ácido reduciendo la sal cúprica de cobre (II), en medio alcalino, a
óxido de cobre (I). Éste forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta
reacción es que f orma aldehído puede detectarse fácilmente, aunque exista en muy pequeña
cantidad.
Prueba de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos
reductores, también contiene ion cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente
con los monosacáridos que con los disacáridos.
Prueba de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión
de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así
complejos coloreados.
Prueba de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos
reductores, al igual que el reactivo de Fehling, el de Benedict contiene ion cúprico en medio
alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo
hemiacetálico libre.
Objetivos
Objetivo general
Entender el comportamiento de algunos carbohidratos, mediante pruebas cualitativas,
por ello identificar los carbohidratos presentes en diversas muestras.
Objetivos específicos
Prueba de Molisch: Mediante esta prueba general identificar la presencia de
carbohidratos.
Prueba de Fehling: Mediante esta prueba identificar la presencia de azúcares
reductores que son monosacáridos y algunos disacáridos.
Prueba de Barfoed: Mediante esta prueba identificar y diferenciar
monosacáridos de disacáridos reductores.
Prueba de Lugol: Mediante esta prueba identificar la presencia de polisacáridos.
Prueba de Hidrólisis para sacarosa: Mediante esta prueba identificar la
presencia de sacarosa en una muestra.
Prueba de Benedict: Mediante esta prueba se identifica azúcares
reductores. Prueba de Seliwanoff: Mediante esta prueba identificar cetosas de
aldosas.
Diagrama de flujo
Prueba de Molisch
Agregar 2 gotas de reactivo Agregar 1ml de H2SO4
Muestra
de Molisch concentrado
Solución α-naftol ¿Hay
disuelto al 5% en presencia de
etanol carbohidratos?
Si No
Aparece anillo No se forma
púrpura anillo
Prueba de Fehling
Agregar 1ml de reactivo de Calentar en
Muestra Baño maría
Fehling
Dejar
enfriar
0.5ml Fehling (B) ¿Hay presencia
0.5ml Fehling (A)
Mezcla de tartado de azúcares
CuSO4
de K/Na con NaOH reductores?
Si No
Precipitado La muestra
rojo-ladrillo queda azul
Prueba de Benedict
Agregar 2ml de reactivo de Calentar en
Muestra Baño maría
Benedict
Enfriar
Solución sulfato de
¿Hay presencia
cobre (II) con citrato
de azúcares
de sodio y carbonato
reductoress?
de sodio anhidro
Si No
Alta concentración
de azúcares
Baja concentración
de azúcares
Prueba de Lugol
Agregar 2ml de solución de Agregar 1gota de reactivo
Muestra
almidón 1% de Lugol
¿Hay presencia de Mezcla acuosa
almidón? de I2 y KI
Si No
Calentar
(baño maría) Se forma complejo No se forma
color azul intenso complejo
Dejar
enfriar
Prueba de Barfoed
Agregar 2ml de reactivo de Calentar en
Muestra Baño maría
Barfoed
Dejar en
Mezcla acuosa de reposo
acetato de cobre ¿Hay presencia
en ácido acético de
monosacáridos?
Si No
Se forma No se forma
precipitado precipitado
Prueba de hidrólisis de sacarosa
Agregar Baño maría
Muestra Gotas de HCl Calentar en
(10 minutos)
Agregar
Calentar en Gotas de NaOH al Agregar 1ml de reactivo
Baño maría
10% de Fehling
¿Hay
presencia de
sacarosa?
Si No
Precipitado La muestra
rojo-ladrillo queda azul
Prueba de Seliwanoff
Agregar 2 gotas de reactivo Calentar en
Muestra Baño maría
de Seliwanoff
Mezcla de ¿Hay
resorcinol con presencia de
HCl concentrado cetosas?
Si No
Producto rojo Indica que es
intenso una aldosa