PRACTICA No 1
PRACTICA No 1
CURSO : Bioquímica
INTEGRANTES :
PIURA-PERÚ
2019
PRACTICA DE LABORATORIO N° 01 BIOQUÍMICA
I. INTRODUCCIÓN:
o Pipeta
Se utilizan para medir o emitir con exactitud volúmenes de
líquidos.
- TIPOS
PIPETA GRADUADA: Cuenta con una escala de
graduación, por lo que pueden medir volúmenes
diferentes, intermedios entre sus volúmenes máximo y
mínimo aunque con menos precisión que las pipetas
aforadas. Pueden ser de 2 tipos:
Mohr o no terminales: Las marcas de graduación
se extienden solo a lo largo de la pipeta sin
incluir la punta o estrechamiento del extremo
inferior, tiene la marca cero del volumen, arriba.
Son de vaciado parcial.
Serológicas: Las marcas de graduación se
extienden a lo largo de toda la pipeta incluyendo
la punta. Son de vaciado total. Existen con la
marca de volumen cero arriba y otras con el
volumen nominal arriba.
o Matraz
Un matraz volumétrico o aforado es un recipiente de fondo
plano con forma de pera, que tiene un cuello largo y delgado. El
matraz está graduado para contener un cierto volumen de
líquido a una temperatura dada. Se utilizan fundamentalmente
para preparar soluciones.
- TIPO
MATRAZ AFORADO: Es un recipiente de fondo plano y
con forma de pera, que tiene un cuello largo y angosto.
Una línea fina grabada alrededor del cuello indica
(generalmente) un cierto volumen de líquido contenido a
una temperatura definida, entonces se dice que está
graduado para contener.
- TAMAÑOS
Los tamaños de matraces aforados que se usan más
comúnmente son de 50 mL, 250 mL, l000 mL y 2000
mL. No obstante lo dicho existen otros volúmenes como
por ej. De l0 mL, 25 mL, etc.
o Probeta
Se utiliza para medir volúmenes de líquidos generalmente
mayores a 10 ml, y cuando no se requiere demasiada exactitud
en la medición. Son cilíndricas, poseen base plástica y algunas
pueden contener o no un pico vertedor en extremo abierto. Son
recipientes cilíndricos, graduados, de vidrio grueso, de boca
ancha, abierta y con pico, y las hay de distintos volúmenes.
Como la superficie libre del líquido es mucho mayor que la de
los matraces aforados, de igual volumen la exactitud es mucho
menor. Por eso solo son útiles para medidas aproximadas.
o Bureta
Son tubos largos de vidrio graduados que contienen el líquido.
Tienen una llave de paso robinete que controla el flujo de la
solución en la parte inferior, y punta capilar. El robinete puede
ser de plástico, teflón o vidrio, el mismo se debe lubricar de
forma que no se altere la solución y con un lubricante adecuado
como lo es la grasa siliconada o vaselina. Pueden ser manuales
o automáticas. Se utilizan en operaciones volumétricas en las
que se realizan descargas variables y exactas de líquidos
(titulaciones).Pueden ser de color caramelo o transparentes.
- USOS
Se usan para descargar cantidades variables de líquido
y por esta razón se subdividen en muchas divisiones
pequeñas. Las buretas se usan frecuentemente en las
titulaciones. La bureta de 50 mL graduada en décimas
de mL es la que se emplea más a menudo. Las buretas
con robinete de vidrio (Geissler) se deben preferir y son
necesarias para algunos líquidos (ej. Soluciones de
Yodo). El llenado de las buretas se debe realizar con un
embudo especial para las mismas.
b. MATERIAL NO CALIBRADO
- TIPOS
o Tubo de ensayo
Son tubos de vidrio de diferentes anchos y largos, recibiendo
en general nombres genéricos o habituales (de acuerdo a los
parámetros antedichos) de: tubos de ensayo comunes, de
hemólisis, de Kahn, de centrífuga cortos, etc.
De forma cilíndrica, de paredes delgadas, cerrados por un
extremo.
- FORMAS
- USO
Sirven para hacer ensayos.
Se pueden calentar, con cuidado, directamente a
la llama.
Si por algún experimento se quiere mantener el
líquido, se utilizan con tapón de rosca.
o Vidrio de reloj
Se utilizan como condensadores sobre los vasos de
precipitación, cuando se desea calentar un líquido sin que el
volumen varíe apaciblemente. También como elemento de
gran superficie para realizar evaporaciones de pequeños
volúmenes. Suelen utilizarse asimismo para pesar sólidos y
recibir pequeñas cantidades de reactivos.
- USO
Lámina cóncavoconvexa para pesar los sólidos y
como recipiente para recoger un precipitado
sólido de cualquiera experiencia.
- Embudo
Se utiliza para trasvasar líquidos de un recipiente a otro,
como soporte de papel de filtro, etc. Tiene forma cónica en
tubo desagüe, es importante que este último esté cortado en
biset porque se agiliza la filtración. Puede ser de vástago
corto o largo. Un embudo muy útil es el rizado o que
presenta estrías, porque aumenta la superficie de contacto y
acelera el proceso de filtración.
- USO
Trasvasar líquidos o disoluciones.
Filtrar (con filtros de papel cónico o plegado).
- Piseta
También se denomina frasco lavador o matraz de
lavado. Es un recipiente cilíndrico sellado con tapa
rosca, el cual posee un pequeño tubo con una abertura
capaz de entregar agua o cualquier líquido que se
encuentre contenido en su interior, en pequeñas
cantidades. Normalmente está hecho de plástico.
- CARACTERISTICAS
Se trata de un tubo cilíndrico.
Suele estar hecho de plástico o de vidrio.
Tiene una abertura cilíndrica y curvada parecida
a una pajita.
Las pisetas de vidrio tienen un tapón atravesado
por dos tubos (por uno se sopla y por el otro sale
agua).
- FUNCIÓN
La piseta se utiliza para enjuagar el material de
laboratorio, ya sea para disolver o para lavar. Se
suelen llenar con algún solvente como agua
destilada o desmineralizada o con solventes
orgánicos como etanol, metanol o hexano.
El uso de la piseta facilita la limpieza de los
distintos materiales de laboratorio como tubos de
ensayo, vasos de precipitados y electrodos.
También se utilizan para limpiar cristal
esmerilado como juntas de vidrio.
- CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
- Micropipeta
La micropipeta es un instrumento de laboratorio
empleado para absorber y transferir pequeños
volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las
distintas técnicas científicas.
- TIPOS
Existen micropipetas manuales, en las que el
volumen a aspirar se fija girando un botón en su
parte superior que está conectado a un sistema
analógico de confirmación de volumen, y
automáticas, en las cuales dicho sistema es
digital.
Hay micropipetas simples, que sólo acogen una
punta cada vez, y multicanales, que permiten
incorporar múltiples puntas (por ejemplo, ocho),
absorbiendo el mismo volumen en todas ellas.
Los volúmenes captables por estos instrumentos
varían según el modelo:
- CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
Asegúrese que está usando la micropipeta
correcta para el volumen que necesita.
También, asegúrese que la micropipeta está
realmente lista para el volumen que necesita
revisando la “ventana de volumen”, y, si es
necesario, cambiando el volumen mediante el
“dispositivo” del control o mando del volumen
hasta que la micropipeta corrija el volumen (la
micropipeta no lee su mente; varias personas
usarán las pipetas, no siempre se encontrará
como usted la necesita).
No trate de colocar la micropipeta para
volúmenes mayores que el máximo, o para
volúmenes menores del cero, esto descalibrará y
dañará la micropipeta.
Toda micropipeta utiliza puntas desechables (no
utilice la pipeta sin usar la punta apropiada, hacer
esto contaminará la micropipeta y la puede
dañar).
No utilizar la micropipeta con líquidos que atacan
el polipropileno.
No utilizar líquidos que estén emitiendo vapores.
La temperatura de los líquidos debe estar entre
15 y 40 º C.
Al poner la punta, asegúrese que la punta sea
del tipo correcto y que está correctamente
ajustada.
Generalmente para P1000 las puntas son azules,
para P200 son amarillas y para P20 pueden ser
amarillas o blancas.
- Propipeta
Pera de goma que consta de tres válvulas. A, S y E, y
dos bulbos, uno grande, al centro y uno pequeño, al
costado, que funcionan gracias a un balin y controlan
tanto la entrada como la salida del líquido contenido en
la pipeta.
- CARACTERISTICAS
- TIPOS
Además de las propipetas de goma, también existen
propipetas de tipo bolígrafo o pen, que son ergonómicas
y están diseñadas para utilizarse con una sola mano.
Tienen una rueda que al girarla se logra un manejo
preciso de la aspiración. Éstas suelen tener un color que
indica su capacidad:
Rojo: 25 ml
Verde: 10 ml
Azul: 6 ml
- MANEJO
- FUNCION
La propipeta se utiliza para succionar líquidos junto con
una pipeta que no pueden ser aspirados con la boca al
tratarse de líquidos tóxicos, corrosivos, radiactivos, etc.
La propipeta junto con la pipeta es utilizada para
trasvasar un líquido de un recipiente a otro de forma
precisa.
o Pinzas para soporte: Las hay de diferentes tipos y son de metal, por
un extremo se sujetan al soporte universal mediante un tornillo, el otro
extremo está provisto de dos ramas recubiertas de gomas para evitar
roturas del material de vidrio que sostienen.
o Refractómetro
Los refractómetros son instrumentos que emplean las propiedades
ondulatorias de la luz para estudiar las propiedades de muestras
atravesadas por rayos luminosos. Tal como su nombre lo indica, los
refractómetros basan su funcionamiento en el estudio de la
refracción de la luz, un fenómeno fácilmente observable cuando la
luz pasa de un medio a otro. El estudio de la refracción puede ser
interesante para muchos propósitos que incluyen desde el análisis
de las propiedades de la luz hasta el estudio de los medios que
atraviesa. Ha sido aplicado en el análisis de productos como
aceites, grasas, chocolates, esencias y otras sustancias de interés
industrial, ofreciendo, en ocasiones, datos fiables sobre la
composición cuantitativa de mezclas de dos cuerpos.(Bertomeu y
García, 2002,pg. 311).
En el laboratorio de bioquímica se usa para determinar la
concentración de azúcares en una muestra mediante la medición
del índice de refracción. La escala que usa se encuentra en grados
BRIX donde: 1° BRIX=1 g sacarosa.
- TIPOS DE REFRACTÓMETROS
Dadsize y Orchard (2001) explican: “El tipo más común
de refractómetro utilizado para evaluar la concentración
de azúcares es el refractómetro manual. Estos
refractómetro marca en la variación del grado BRIX
desde 0-20 o 0-32% en graduaciones de 0.2 0.5%. En el
mercado existen varios tipos de refractómetros según su
capacidad de lectura”(pg 10):
- MANEJO
Limpiar y secar cuidadosamente la tapa y el
prisma antes de comenzar la medición. Ponga 1
o 2 gotas de la prueba en dicho prisma; cuando
se cierra la tapa, la prueba se reparte
homogéneamente entre la tapa y el prisma.
Puede utilizar una pipeta para poner la prueba
sobre el prisma principal. Evite que se formen
burbujas de aire, ya que esto podría tener un
efecto negativo en el resultado de medición.
Moviendo ligeramente la tapa conseguirá repartir
más homogéneamente el fluido de prueba.
Sostenga el refractómetro bajo la luz solar, podrá
ver la escala a través del ocular. El valor se
podrá leer entre el límite claro / oscuro. Girando
el ocular podrá ajustar / precisar la escala.
- CALIBRACIÓN.
Colocar varias gotas de agua destilada sobre la
superficie del prisma.
Cerrar la cubierta del prisma, asegurarse no haya
burbujas de aire atrapadas en la película de
agua, luego apuntar el refractómetro hacia una
fuente de luz. Se observa a través de una mirilla
que tiene una escala vertical en un lado con
marcas de 0° a 32° BRIX. Con agua destilada
esta lectura debería ser 0°. La línea puede ser
ajustada en la escala vertical con tornillos por
encima de la caja del prisma.
- CUIDADOS
Limpiar con cuidado a la superficie del prisma del
refractómetro con un papel entre cada lectura
después de usar, lavar el prisma en agua
destilada, secar bien con un papel tisú suave y
guardar en un lugar seguro.
o Espectrofotómetro
- TIPOS
Existen en la actualidad diversos tipos de aparatos con
los mismos principios los hay mecánicos y digitales;
unos miden solo la luz visible, otros son más precisos y
miden también luz U.V. , Infrarroja, de absorción atómica
(AA), fluorescencia de rayos-X de emisión de plasma
(ICP),, multipropósitos (para medir directamente la
solución con suspensión, muestras sólidas y biológicas),
acoplado a masas, entre otros.
- MANEJO
- CUIDADO
o Mufla
La mufla es un horno de laboratorio que alcanza temperaturas muy
elevadas, desde unos 200° C a 1500° C. se utiliza para realizar
pruebas de calentamiento de muestras, incineración y tratamientos
térmicos, en general. Al usar este equipo se tiene que trabajar con
material de porcelana porque es el que soporta temperaturas tan
elevadas.
o Frigoríficos y congeladores.
Los frigoríficos y congeladores son de vital importancia en los
laboratorios. Su función es la de mantener ciertas sustancias y
muestras biológicas en un ambiente controlado, para conservarlos
correctamente. Para lograrlo es necesario que la temperatura en el
interior sea inferior a la temperatura ambiente.
Los frigoríficos trabajan a temperaturas que rondan entre los 2° C y
los 8° C mientras que los congeladores se pueden dividir en función
del intervalo de temperatura que alcancen.
o Incubadora
Una incubadora sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares, regulando factores de
crecimiento viables como por ejemplo la temperatura, la humedad y
la ventilación. Las incubadoras vienen en distintos tamaños, tan
pequeñas como una computadora portátil o tan grande como una
habitación, dependiendo de los requerimientos del usuario.
o Agitador magnético
- VARIANTE
También existe el agitador de tubos, qué se utiliza cuando la
sustancia que se quiere agitar se encuentra en un tubo. En
este caso, la agitación se consigue gracias a la vibración que
produce su cabezal.
- MANEJO
Para conseguir un funcionamiento óptico del agitador
magnético se debe seguir a paso los siguientes puntos:
Colocar el vaso de precipitado sobre la placa, con el
agitador apagado.
Para mezclar se emplea un imán recubierto de teflón
(o mosca), que se va a mover gracias al campo
magnético giratorio del agitador.
A continuación se enciende y se selecciona una
velocidad mínima para evitar salpicaduras.
Se aumenta progresivamente la velocidad de rotación
hasta llegar al punto deseado.
Una vez que se haya terminado de agitarse apaga el
equipo.
La mosca se extrae con una pinza o bien con la
ayuda de otro imán.
- CUIDADO
El equipo está diseñado para trabajar sin necesitar un
mantenimiento especial. Basta con seguir los pasos
de manejo para que se mantenga sin problemas
durante un largo tiempo. Aun así, se recomienda
seguir unas pautas bien sencillas:
Limpiar el agitador con un paño húmedo o alcohol de
70°, en posición vertical para evitar que el detergente
llegue al interior. Debe estar desconectado de la
corriente eléctrica.
Para las superficies externas, utilizar un jabón neutro
y un paño suave.
Verificar que esté completamente seco antes de
conectarlo y usarlo.
o Centrifuga.
Es un equipo de laboratorio que utiliza la fuerza centrífuga (fuerza
que se genera cuando un objeto gira alrededor de un eje) para
separar mezclas líquidas heterogéneas en función de la diferente
densidad de sus componentes. Existen una gran variedad de
centrifugas en función de la velocidad que alcanzan.
o Microscopio
Se trata de un equipo que amplifica la imagen de objetos pequeños,
permitiendo observar dicho objeto o detalles del mismo que a simple
vista no se ven.
En función del sistema que se utiliza para amplificar la imagen se
dividen en dos grandes grupos:
o pH metro
Este equipo se utiliza para realizar medidas de ph en las distintas
muestras con las que se trabaje.
ANEXOS
MANEJO DEL REFRACTOMETRO ESPECTROFOTÓMETRO
PROPIPETA MICROPIPETA
PIPETA MATRAZ