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675 vistas10 páginasUso y Cuidado del Microscopio en Biología
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Manual de précticas y talleres en Biologia General - Universidad det Valle — Departamento de Biologia 11
F. Castro, M.C. Vélez, F. Rondén, C.Rosero - Agosto 2004
PRACTICA 1
MICROSCOPIA E INSTRUMENTACION EN BIOLOGIA
1, EL MICROSCOPIO COMPUESTO
INTRODUCCIO!
El Microscopio es un instrumento éptico que permite observar, medir y cuantificar objetos
y organismos muy pequefios. Existen diferentes tipos de Microscopios los cuales varian en
su poder de aumento y resolucién. Los rangos aproximados de magnificacién se encuentran
entre 4X y 40X (Microscopio Estereoscépico), 20X-25X (Microscopio Simple o Lupa),
40X-1500X (Microscopio Compuesto), 10.000X-16.000X (Microscopio Electrénico),
donde X es el ntimero de veces que se avmenta el tamaifio real del objeto. Ademis de estos
existen algunos Microscopios especiales como los Microscopios de Contraste de Fase y los
Microscopios Invertidos. Una comparacién entre la forma como acttian los Microscopios
Optico, Electrénico de Transmisi6n y Microscopio Electrénico de Barrido.
OBJETIVO
E] propésito del siguiente ejercicio es Ia adquisicién de experiencia sobre el uso y cuidado
del Microscopio. Asf, podremos aprender; Primero: cémo disponer el Equipo para las
observaciones; Segundo: los nombres de las diferentes partes del Microscopio y sus
funciones; Tercero: la técnica de observar objetos y de preparar materiales para la
observacin, as{ como el ajuste y enfoque corrects; Finalmente, estudiaremos las formas
de medir los tamafios de los objetos microscépicos. Al finalizar el Laboratorio Usted debers
haber adquirido desireza en el cuidado y uso del Microscopio.
IATERIALES ¥ PROCEDIMIEN
1. Disposicién del Microscopio: Al recoger El Microscopio tmelo con ambas manos, de
tal forma que una lo sostenga por el Brazo, y la otra por debajo de la Base. Deposite 0
descargue el instrumento suavemente y oriéntelo de manera que el Brazo quede mirando
hacia Usted. Enciéndalo y apaguelo con fa menor intensidad lumfnica; no mover ni golpear
cuando este encendido.
2. Partes del Microscopio: Utilizando la figura 1. distinga los nombres de las distintas
partes del Microscopio localizndolas en su propio aparato: Oculares, Objetivos, Revolver,
Porta-Objetos, Diafragma-Iris, Condensador, Fuente de uminacién, Base, Brazo, Platina,
Carro Mecénico, Tomillo Macto y Micrométrico.
Coloque el Objetive de Menor Aumento (el mas pequefio), haciendo rotar tinicamente
desde el revolver. Gradue Ja intensidad de luz reflejada y sea observable en el
Condensador. Observe a través del Microscopio y ajuste el Diafragma, de manera que el
Campo Visual se encuentre ilumiiado en forma homogénea. Si el Ocular o ci Objetivo se
encuentran empolyados 0 empaiiados, limpieles cuidadosamente con una porcién de Papel ‘Manual de practicas y talleres en Biologia Generst - Universidad det Valle - Departamento de Biologia 12
F Castro, M. C. Vélez, F.Rondén, C. Rosero - Agosto 2004
Lente. NO USE en ningiin caso, otto tipo de material para tal efecto. Si la visién no se
aclara consuite al Instructor.
3. Preparacién de Materiales: Los materiales para Observacién MicroscSpica se colocan
en una Lamina de Vidrio que generalmente es de 1" x 3" y tiene el nombre de Porta-
Objeto y/o Lamina y se cubren con Laminillas ylo Cubre-Objetos. Tanto éste como el
Porta-Objetos deben estar dpticamente limpios, la limpieza del Porta-Objetos debe hacetse
con agua y sosteniéndolo por los bores y luego se trota suavemente con una Toalla de
Papel Absorbente para secarlo. Los Cubre-Objetos son muy frdgiles y por tanto deben
manejarse con mucho cuidado, su limpieza debe hacerse en forma similar a la descrita antes
teniendo asi mismo el cuidado de no tocar la superficie con los dedos.
Corte un cuadro de Papel Periédico que tenga unos 7 mm, que contenga Ia letra e.
Coldquelo Iuego en el centro del Porta-Objetos con el lado derecho de la letra e hacia
arriba. Ponga una gota de agua sobre el papel, Después de esperar unos segundos hasta que
el agua haya empapado el papel, cologue la Laminilla 0 Cubre-Objetos sobre la
preparacién; evitando que queden burbujas de aire que pueden dificultar la observacién.
4. Como enfocar El Microscopio: Coloque Ia preparacién sobre la Platina en forma tal
gue el cuadro de papel quede justamente encima de la abertura y luego fije la Lémina
mediante las Pinzas que hay en la Platina. Enfoque a letra e con Ia ayuda del movimiento
e los Tornillos Macro, y Micrométricos. Es importante tener en cuenta que siempre que
se haga una observacién al Microscopio debe usarse en primer lugar el Objetivo de Menor
Aumento Deseriba ia posicién de la letra € (como es la imagen o su orientecién) Mueva
ahora la Lamina sobre la Platina de derecha a izquierda, mueva la Platina hacia delante 0
hacia atrés en qué direccién se mueve la imagen?. Suba ahora el Tubo usando el Tornillo
Mactométrico y rote el Revolver para cambiar a un Objetive de Mayor Aumento (40X),
enfoque nuevamente en forma lenta evitando quebrar la Lamina Porta-Objetos, conteste:
Ha cambiado la posicién de la imagen con respecto a la observada con el Objetivo de
Menor Aumento?, {Es el Campo de Observacién mayor o menor?, ;Es la Tluminacién més
© menos brillante que con el Objetivo de Menor Aumento?, Describa y compare lo
observado en el Campo de Menor y Mayor Aumento,
Retire la preparacién cuidadosamente de la Platina y consérvela para observaciones
posteriores.
5. Medidas Microscépicas: La Unidad de Longitud mas frecuentemente usada en
Microscopia es la micra © micrén “u“que equivale a 1/1000 mm 0 1/1°000.000 m. En los
Laboratorios de Investigacién se utiliza un instrumento, el Micrémetro 0 Reticulo
Micrométrico, sin embargo, es posible estimar el tamaiio de los Objetos Microsedpicos
conociendo ej diémetro del Campo correspondiente a cada Objetivo, Manual de pricticas y alleres en Biologia General - Universidad del Valle - Departamento de Biologia 13
F Castro, M.C. Vélez, F. Rondén, C. Rosero - Agosto 2004
jercic
1- Coloque un pedazo de papel milimetrado sobre 1a Platina de tal manera que al enfocar E1
Microscopio pueda observarlo, mida entonces el didmetro del campo correspondiente al
objetivo de menor aumento en milimetros y su conversi6n en micras. También con los otros
aumentos disponibles.
2- Con el dato anterior es posible determinar el dismetro del Campo correspondiente al
Objetivo de Mayor Aumento; hasta dividir el didmetro encontrado pot la razén entre las
magnificaciones del Objetivo de Mayor Aumento y del Menor Aumento. Por ejemplo, sf el
aumento del Objetivo de Mayor Aumento es de 45 X y el otro es de 15 X, la tazn
mencionada sera 45/15 =3. Si el campo correspondiente al objetivo de menor aumento tiene
un diémetro de 1.500 1, el didmetro del campo para el de mayor aumento es, de 1.500/3 =
500 j1. Calcule ahora el didmetro del campo correspondiente a todos los objetivos de sw
Microscopio, complete Ia informacién de Ia tabla en la pagina 18.
3- {Cual es la dimensién de Ia letra € observada anteriormente en milfmetros y en micras?
4- Monte ahora un pedazo de un grabado de una revista, ,Cudintos puntos puede ver en el
Campo del Objetivo de Menor Aumento?, {Qué distancia hay en promedio entre cada dos
puntos?
Este ejercicio proporciona un ejemplo del Poder de Resolucién. Asi, a “simple vista” solo
podemos ver las diferentes densidades del grabado, mientras que con El Microscopio nos es
Posible distinguir puntos, es decir distinguimes o resolvemos los puntos.
2. EL MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO
‘oscopio Binocular Estereoscépico (también llamado Microscopio de Diseccién)
presenta ciertas ventajas én muchos tipos de trabajo microscépico: Objetivos y Oculares
dobles proveen una visién tridimensional. Puede usarse para observar objetos con luz
reflejada y con luz transmitida.
Existen varios modelos de Microscopios Estereose6picos. En la mayorfa de ellos se utiliza
un dispositive giratorio, a manera de Revolver Porta-Objetos para cambiar de aumento
‘mediante una simple rotacién del mismo, que puede tener dos o tres juegos de Objetivos.
Cuando se utiliza cualquier tipo de Estereoscopio hay que rotar el Revolver de tal manera
que quede en posicién el objetivo de menor aumento, antes de hacer las observaciones. En
tal operacién, se debe tomar el Revolver por su parte superior y no por los Objetivos
mismos.
Este instrumento se utiliza en la observacién y diseccién de objetos que por su tamaiio no
alcanzan a ser vistos por El Microscopio Optico, Los aumentos proporcionados por este Manual de précticas y taleres en Biologia General - Universidad del Valle ~ Departamento de Biologia 14
F. Castro, M.C. Vélez, F, Rondén, C.Rosero - Agosto 2004
tipo de Microscopio varfan entre SX a 60X, atin cuando hay alguno gue pueden aumentar
400 veces un objeto.
Los propésitos de los ejercicios siguientes son: 1) Aprender el manejo y las partes de un
Estereoscopio; 2) Comparar este Microscopio con El Microscopio Compuesto Corriente. 3)
Hacer observaciones sobre varios objetos opacos y transparentes.
LPROCEDIMIENTO
1. Después de sacar el Estereoscopio de su estuche coléquelo sobre ia mesa de tal manera
que su Superficie Superior quede bien iluminada, Comience las observaciones
uitilizando la menor magnificacién, tal como ya se ha mencionado.
2. Como en el caso de! Microscopio reconozca las partes del Estereoscopio con ta ayuda
de la figura 3.
3. La separacién de los Oculares debe ajustarse de tal forma que la visién sea
cémoda y que pueda observar con ambos ojos al mismo tiempo. Tal separacién
adecuada a la de los ojos de cada observador particular se obtiene mediante separacién
© aproximacién de los Oculares.
4. Coloque un pedazo de papel impreso, de 7 cm de fongitud y de ancho, sobre el Porta
objetos y haga descender o ascender los objetivos observando a través de los Oculeres
hasta que obtenga una imagen nitida del impreso. A continuacién reajuste el enfoque, Ia
iluminacién y la separaciGn de tos Oculares. Mueva ahora el impreso de izquierda a
derecha. {En qué sentido se mueve la imagen?. Mueva el impreso hacia adelante y
observe, {Se mueve la imagen en la misma direccién?. Compare os resultados
anteriores con los obtenidos pata los mismos ejercicios con El Microscopio Compuesto.
5. Aumente la magnificaci6n cambiando de Objetivos y si es necesario ajuste el enfoque y
Ia iluminaci6n. El tamafio aparente de la imagen es mayor o menor que en el caso
antetior?. {Ha cambiado el tamafio del campo?. Examine y dibuje los objetos que le
centregaré el instructor.
Redacte una nota breve donde compare El Microscopio compuesto y El Microscopio
Estereosodpico. Haga una lista de las utitidades e inconvenientes de cada uno de ellos.
NOTA:
Para una mayor informacién sobre Microscopfa pueden consultar las siguientes paginas de
Internet:
hurp/iwww funsei.com/fun3_ivsfera/sfera.htm
http/Avww.chem.uniromal.iv~chemus/pagine_sito/strumenti/strum_VET_SIN/16_strument
i/Microscopio.htm
hutp//www terra.es/personal/manmig/pages/microsco.htm
hutp//www.newnet.itveapecchi/microscopi.htm
http/Avww-salonhogar.comvciencias/Micros:opia/micro!. htm ‘Manual de précticas ytalleres en Biologta General - Universidad del Valle — Departamento de Biologia 15
F Castro, M.C. Vélez, F.Rondén, C.Rosero - Agosto 2004
hup//www macprof.macity ivtest/microseope.html
httpl/www esic.es/hispano/patrimo/microl/microevo. hun
ttp//www usuarios iponet.es/jan3d/Microscopio
hutp/www-nesa.uiue.edu/Edu/Fractal_Home.htmi
hup//www2.comune.bologna it/bologna/malpighi/mostra/micto3.htm.
http//cuhwww.upr.clu.edu/biologia/micro/portada htm
http/fusuarios.iponet.es/jan3d/2000/ordenador/MICROSCOPIO/Microscopio.htsal
http//micro.fa.uam.es/Laboratorio/Microscopio.htinl
http//www.ips.itscuola/concorso_99/aequa_I/microse.html
hupy/www.csic.es/hispano/patrimo/micro /microele.htm
hup:/www.shimadzu.com.br/analiticalesp/Productos/Microscopio/S$550.htm
ittp://edafologia.ugr.es/Oy line/intro/microse.htm
http://www aldeaeducati va.com/aldea/tareas2.asp?which=40
hutp://www.drpez.com/demicro.htm
|ttp://www.crosswinds.net/~librostecnicos/comofunciona/eomofunciona23.html
http:/Avww.monografias.com/trabajos/miczoscopio/microscopio.shtml
BIBLIOGRAFIA:
HAWELLS, MR. & J.
Abril 1991. pag 52.
LICHTMANN. J. W. 1994. Microscopia cofocal. Investigacién y Ciencia, Octubre 1994,
, 1991, Microscopia de Rayos X. Investigacién y Ciencia.
pig 20. :
WICKRAMASINGHE, H. K. 1989. Microscopio de sonda de barrido, Investigacién y
Ciencia, Diciembre 1989. pig 28. 8,7
BINNGNG, G. & H. ROHRER. 1985. Microscopio de"efecto de tunel. Investigacién y™
Ciencia, Octubre de 1985. pag 30 Manual de pricticas ytalleres en Biologia General - Universidad det Valle - Departamento de Biologia 16
F. Castro, M.C. Vélez, , F- Rondon - Agosto 2003
OCULAR
pee
REVOLVER » “Pi
onemns GAO
PLATINA-
CARRO.
MECANICO
CONDENSADOR
SS 4 TORNILLO
| MACROMETRICO
LAMPARA
TORN!
MICROMETRICO.
Figura 1. Microscopio Compuesto Manval de précticas y talleres en Biolovia General - Universidad del Valle ~ Departamento de Biologia 17
F. Castro, M. C. Vélez, F.Rond6n, C.Rosero - Agosto 2004
ANEXO 1
El Microscopio
£Cé6mo funciona?
Partes del Microscopio 6ptico
‘Aunque conto ¢s légico, Ja forma y partes de un Microscopio pueden variar y varian de un modelo a ols,
cexisten unas partes comunes que aparecen representadas a manera de esquemia en el dibujo adjunto y cuya
