UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN
MARCOS
(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
Escuela profesional de Farmacia y Bioquímica
Semana N° 11 - MITOSIS EN CÉLULAS DE LA RAÍZ DE CEBOLLA Y
OBSERVACIÓN DEL CORPÚSCULO DE BARR
Asignatura:
Biología celular
Docente:
RUIZ QUIROZ, Julio Reynaldo
Integrantes:
COTRINA CARMENES, Katiuska Elaine
TADEO PORTERO, Roberto Carlos
PAJUELO CERVANTES, Sheyla Sofía
CHAPOÑAN RIOJAS, Dania Esmeralda
TRUJILLO CAQUI, Renzo Giusepe
Ciclo:
2020 - I
Lima, Perú
2020
MITOSIS EN CÉLULAS DE LA RAÍZ DE CEBOLLA Y OBSERVACIÓN DEL CORPÚSCULO DE BARR
OBJETIVOS
● Observar las células meristemáticas de la cebolla en mitosis.
● Observar Corpúsculos de Barr en células animales.
● Observar los cromosomas politénicos en glándulas salivales de Drosophila melanogaster.
DIAGRAMA DE FLUJO
EXPERIMENTO 1: OBSERVACIÓN DE LA MITOSIS EN CÉLULAS DE CEBOLLA
Fig. 1. Diagrama de proceso para la visualización de mitosis en células de la raíz de cebolla.
(Fuente: Elaboración propia)
EXPERIMENTO 2: OBSERVACIÓN DEL CORPÚSCULOS DE BARR.
Fig. 2. Diagrama de proceso para la visualización de corpúsculo de Barr en mucosa bucal.
(Fuente: Elaboración propia)
EXPERIMENTO 3: OBSERVACIÓN DE CROMOSOMAS POLITÉNICOS
Fig. 3. Diagrama de proceso para la visualización de cromosomas politénicos.
(Fuente: Elaboración propia)
RESULTADOS Y DISCUSIONES
RESULTADOS
EXPERIMENTO 1: OBSERVACIÓN DE LA MITOSIS EN CÉLULAS DE CEBOLLA
Se usa la raíz de cebolla, debido a que en este órgano del vegetal habrá crecimiento y división celular,
primero se rompe la cofia que es un tejido protector de las células meristemáticas y para obtenerla se
debe retirar la cofia. Se agrega la Orceína, quien dentro de su composición tiene a la Orceína A y B,
mientras la A ayuda a detener la división celular, la B ayudará a complementar con el proceso de
tinción, como resultado en microscopio se observa las diferentes fases de la mitosis, entre ellas la
Profase, Metafase, Anafase y Telofase.
EXPERIMENTO 2: OBSERVACIÓN DEL CORPÚSCULOS DE BARR.
Fig. 5. Corpúsculos de Barr a 40X Fig. 6. Corpúsculo de Barr a 100X
La muestra de mucosa bucal extraía con ayuda de un depresor bucal, es puesta sobre una gota de agua
destilada que se colocó con anterioridad en un portaobjetos, a esta se agregó un gota de orceína acética para
que esta tiña el corpúsculo y se visible con la ayuda de un microscopio. A una mira de 40X (Fig. 5) el
corpúsculo es apenas visible dentro del núcleo pero a un mayor aumento (Fig. 6) este es fácilmente
reconocible. Es necesario resaltar que los corpúsculos de Barr son característicos del género femenino, puesto
que son cromosomas X inactivos.
EXPERIMENTO 3: OBSERVACIÓN DE CROMOSOMAS POLITÉNICOS
Fig.7 Larva de Drosophila Fig. 8 Glándulas salivares de Fig.9 Cromosomas politécnicos
en tercer estadio larva de Drosophila en el microscopio
En las glándulas salivares de una larva de Drosophila en tercer estadio (Fig 8), es posible apreciar las partes de
los cromosomas politénicos (Fig 9) como son centrómero, puff, anillo de Balbiani, telómero. Se pueden
apreciar una zonas más teñidas, las cuales son denominadas bandas y contienen la heterocromatina.
DISCUSIÓN
D1: En el Experimento 1 se observa la mitosis y sus diferentes fases, como la Profase, Metafase Anafase y
Telofase, en las células meristemáticas de la raíz de cebolla (Allium cepa). Teniendo en cuenta los pasos y
cuidados descritos en el artículo de Segura, Cruz, López, Zavala y Jiménez en el reconocimiento de las células
se confirma lo realizado en clase. Sin embargo, algo adicional y diferente a nuestro procedimiento es el empleo
de acetorceína envés de orceína, esto puede generar un cambio en los resultados, debido que en el artículo
expuesto se aprecia las fases tales como Profase, Metafase, Anafase y Telofase, adicional a su resultado se
observa la Interfase y la Prometafase, fases no observadas en nuestro resultado. Con el empleo del
microscopio de fuerza atómica se obtienen resultados similares a lo expuesto, sin embargo el procedimiento
difiere en muchos puntos (1).
D2: En experimento realizado por Ber, Daher y Youlton en la observación de corpúsculos de Barr en mucosa
bucal se logró la visualización siguiendo los siguientes procedimientos. Se recolectó células de la mucosa bucal
mediante el raspado con espátula; las células fueron transferidas a una lámina portaobjetos para una fijación
con etanol éter, o una solución de carbowax 1500 o citospray por no más de una hora. Las láminas se
sumergieron en etanol al 70% durante 10 a 15 minutos, y se tiñó con solución alcohólica de carbofucsina
básica al 3 % durante 15 minutos, pasado por una batería de alcoholes de etanol de 70 %, 95 % y 100% para
dejarlo en una solución de xilol durante 10 minutos. Realizados los procedimientos se observó, en su
experimento, con aumento de 1000x haciendo uso del aceite de inmersión. Por el contrario, en la práctica
realizada en clase se realizaron procedimientos totalmente distintos lo cuales llevó a desarrollar el
experimento en no más de media hora; entre los reactivos se utilizó alcohol al 95 % como primer reactivo
mientras que en el experimento presentado se tiene otras opciones como carbowax 1500 o citospray. La
función de la orceína acética fue reemplazada por carbofucsina, el traspaso por la batería de alcoholes y el
xilol. El experimento presentado conlleva a mayor gasto económico, sin embargo, sus resultados mostraron
una óptima visualización de los corpúsculos de Barr, a diferencia del experimento desarrollado en clase. (2)
D3: Según Duque, en la especie de Drosophila, se emplean los marcadores NOR (Región organizadora
nucleolar), debido a que en estas regiones se lleva a cabo la síntesis de RNAr. Se hace énfasis en la importancia
de la tinción, debido a que permiten observar los cromosomas . Según el autor, la orceína empleada en la
tinción se encarga de teñir la heterocromatina. Además, se destaca que para la formación de cromosomas
politénicos es esencial el fenómeno de la endorreduplicación. Por otra parte, en la experiencia observada en la
clase, se analizó con mayor detalle la presencia de las bandas que eran las que estaban más coloreadas, y se
destacó la presencia de heterocromatina en dichas zonas. (3)
CONCLUSIONES
● Se observó las células meristemáticas de la cebolla en mitosis.
● Se observaron Corpúsculos de Barr en células animales.
● Se observó los cromosomas politénicos en glándulas salivales de Drosophila melanogaster.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué fases se lograron observar en las muestras de meristemas de cebolla?
Se observó las fases de la mitosis como la profase el cual se descondensan los cromosomas, en
metafase se forma la placa ecuatorial de cromosomas, en anafase ocurre la disyunción de los
cromosomas hacia los polos y la telofase la division del nucleo ( citocinesis.).
2. Desarrolle las características del ciclo celular.
Es un proceso por el cual las cèlulas nuevas surgen de otras células vivas se llaman divisiòn celular,
además sirven para reemplazar las cèlulas que han envejecido o muerto y conlleva una serie de fases
comprendiendo la interfase que a su vez se divide en G1 donde la célula crece y duplica sus organelos,
en la S se duplica el ADN y cromosomas y en G2 se prepara para la mitosis que posteriormente
pasará a fase M donde ocurrirá una serie de eventos como la
profase,prometafase,metafase,anafase,telofase y citocinesis. (4)
3. ¿A que se denomina la fase G0?
Ocurre cuando muchas células en el cuerpo permanecen inactivas, lo que significa que no podrán
llevar divisiòn celular. Estas células inactivas se encuentran en el estado G0 como las neuronas. (4)
4. ¿Qué relación existe con los cuerpos de barr y las enfermedades genéticas?
Las células femeninas presentan corpúsculos de barr en su membrana nuclear, mientras que las
células masculinas no la presentan y su relación tiene que ver con el número de corpúsculos de
cromatina mantiene una conexiòn con el número de cromosomas x, de manera que el número de
corpúsculos es uno menos como por ejemplo en el síndrome de Turner presenta un cariotipo 45 X _
no presenta corpúsculos de barr; un paciente con síndrome de klinefelter con cariotipo 47 XXY tiene
un corpúsculo de cromatina y una mujer con cariotipo 47 XXX posee dos corpúsculos. (5)
5. ¿A qué se debe el tamaño desproporcionado de los cromosomas politénicos?
Se debe a que estos cromosomas politénicos presentan un aumento de ADN, producto de la
consecuencia de ciertos números de ciclos de replicación. En este mecanismo de politenizacion la
mayoría de los eventos del ciclo celular han desaparecido siendo la fase S la más importante es por
ello la repetida duplicación del ADN. Como resultado se originan se originan grandes células, donde
las numerosas copias de cada tipo cromosómico permanecen unidas, de manera que cada
cromosoma está amplificado, siendo su longitud de aproximadamente 100-200 veces la del
cromosoma mitótico. (6)
6. ¿Cómo podríamos observar cromosomas en división?
Regularmente los cromosomas no no se pueden ver con un microscopio óptico, pero durante la
división celular se condensan lo suficiente como para poderse analizar fácilmente a 1.000 aumentos.
Para obtener células con sus cromosomas en este estado condensado, se las expone a un inhibidor de
la mitosis, que bloquea la formación del huso mitótico y detiene la división celular en la etapa de
metafase. (7)
7. ¿A qué se le denomina cariotipo?
Durante el ciclo celular los cromosomas pasan de estados de menor a mayor compactación. El grado
más alto de enrollamiento se aprecia en el estadio o etapa denominada metafase, donde la cromatina
de los cromosomas se muestra en un estado de condensación similar al de la heterocromatina en la
interfásica. Aquí es el punto donde tal grado de compactación permite observar a los cromosomas en
estructuras individuales, las cuales una vez que es fijada y fotografiada, pueden ser aislados,
clasificados y ordenados con relativa facilidad. El conjunto de cromosomas ordenados según un
criterio preestablecido recibe el nombre de cariotipo .
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Segura ML, Cruz SJ, López R, Zavala G, Jiménez LF. Visualización de la Mitosis con el Microscopio de
Fuerza Atómica . TIP Rev Esp Cienc Quim Biol. [Internet] Nov 2008. [Recuperado 31 Ago 2020]; 11(2):
87-90. Disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/revespciequibio/cqb-2008/cqb082c.pdf
2. Daher VN, Ber C, Youlton RR. Cromatina de Barr: análisis de su valor actual [Internet] Nov 2008.
[Recuperado 31 Ago 2020]. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/pdf/rcp/v57n6/art06.pdf
3. Duque C. Cromosomas politénicos: Una mirada al fenómeno de la endorreduplicación. Universidad
Nacional de Colombia. [Internet]. Marzo 2016. [Recuperado 29 agosto 2020]. Disponible en:
https://d1wqtxts1xzle7.cloudfront.net/53344484/Cromosomas_Politenicos.pdf?
1496243543=&response-content-disposition=inline%3B+filename
%3DUNIVERSIDAD_NACIONAL_DE_COLOMBIA_Cromoso.pdf&Expires=1598683120&Signature=Z2fSJ
DerK0JbE8UcybOGPJzSxDpm3NhDmnrvv7tZjNuychyt7eS00-
OmMzk8rAquIdm5OlTmNcwiaWebLxsYu0d9ESric7OjB83f6pRE1SuDbV0RLdkSrUUPGm2QDVUEeb2WS
uYaVvlMhGBss-xipTt~SRxI9qlo5-fHzl2A9Kq-
GpWrH~SH7yXLavMvnBRVvfgcr1PLsmth~JZm4EsE39CECLnxBiJi79eyTX5vYGvfnw13fmPugidx8tNvVicJS
9x0fk74ZKu07rRbJltdCkA-4uaw1wvOBjwJloa9n30XIMJQOToklYdfGndxSCWxQ-
i~~WUBJbkHtJTQdVr~gQ__&Key-Pair-Id=APKAJLOHF5GGSLRBV4ZA
4. Iwasa J. Marshall W. Biología celular y molecular conceptos y experimentos. 8ª ed. Ciudad de México:
Mc-GrawHill; 2019
5. Salamanca Gomez F. Trastornos genéticos de la diferenciación sexual en el humano. Gaceta med. de
Mex. [Internet] 1992 [Recuperado 31 Ago 2020] ; 28 (1):57-80. Disponible en:
http://www.anmm.org.mx/bgmm/1864_2007/1992-128-1-57-79.pdf
6. Molto Ruiz D. Estudio de la expresión génica en cromosomas politénicos de tres especies de
Drosophila del grupo obscura [Tesis Doctoral]. Valencia, España: Universitat de Valencia; 1991
[Recuperado 31 Ago 2020] Disponible en: https://core.ac.uk/download/pdf/71029895.pdf
7. McDonald D. Citogenética básica [Internet] Estados Unidos:Herraez A. ; 2014[Recuperado 31 Ago
2020] Disponible en: http://www3.uah.es/biomodel/citogene/dynacare/geninfo.htm
8. De Robertis E, Hib J. Biología celular y molecular. 16°ed.Buenos Aires: Hipocrático; 2012.
