Microscopio electrónico
Un microscopio electrónico usa electrones en lugar de fotones o luz visible para
formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten
alcanzar amplificaciones mayores antes que los mejores microscopios ópticos,
debido a que la longitud de onda de los electrones es bastante menor que la de
los fotones.
El primer electrónico fue diseñado por Ernst Ruska y Max Knoll entre 1925 y
1932, quienes se basaron en los estudios de Louis-Victor de Broglie acerca de las
propiedades ondulatorias de los electrones.
Índice
Limitaciones del microscopio electrónico
Tipos de microscopios electrónicos
Microscopio electrónico de transmisión (TEM)
Microscopio electrónico de barrido (MEB)
Otros tipos de microscopios electrónicos
Aplicaciones en distintas áreas
Referencias
Enlaces externos
Limitaciones del microscopio electrónico
La limitada apertura no permite que la información detallada alcance
la imagen, limitando de este modo la resolución.
El contraste de amplitud (que radica en la naturaleza corpuscular de
los electrones) se debe al contraste de difracción, provocado por la
pérdida de electrones del rayo. Es un contraste dominante en
especímenes gruesos.
El contraste de fase (que radica en la naturaleza ondulatoria de los
Microscopio electrónico
electrones) se debe al contraste de interferencia provocado por los
de 1964.
desplazamientos en las fases relativas de las porciones del rayo. Es
un contraste dominante en especímenes finos.
Existen también distintas aberraciones producidas por los lentes: astigmática, esférica y
cromática.
El problema de la función de transferencia de contraste (CTF en inglés): la CTF describe la
respuesta de un sistema óptico a una imagen descompuesta en ondas cuadráticas.
El material biológico presenta dos problemas fundamentales: el entorno de vacío y la transferencia de energía.
Para resolverlos, se utilizan distintas técnicas dependiendo del tamaño de la muestra:
para muestras grandes como órganos, tejidos o células, se utilizan tres técnicas:
1. la fijación química o la criofijación;
2. la inclusión en resinas (criosustitución);
3. la réplica metálica.
para muestras pequeñas como complejos macromoleculares se utilizan las siguientes
técnicas:
1. la tinción negativa: los agentes de tinción más usados son el molibdato amónico, el
fosfotungstato sódico y sales de uranio como acetato y formiato. Todos ellos presentan las
siguientes propiedades: interactúan mínimamente con la muestra y son estables en la
interacción con los electrones, son altamente solubles en agua, presentan una alta densidad
que favorece el contraste, tienen un punto alto de fusión, tienen un tamaño de grano pequeño;
2. la réplica metálica: para construir la réplica metálica se evapora el metal (estaño), que se
deposita sobre la muestra a la vez que esta, por el vacío, se disuelve;
3. la criomicroscopía.
Tipos de microscopios electrónicos
Existen dos tipos principales de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de transmisión y el
microscopio electrónico de barrido.
Microscopio electrónico de transmisión (TEM)
El microscopio electrónico de transmisión (TEM en inglés) emite un haz de electrones dirigido hacia el objeto
cuya imagen se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan contra la muestra, formando así una
imagen aumentada. Para utilizar un microscopio electrónico de transmisión debe cortarse la muestra en capas
finas, no mayores de unos 2000 ángstroms. Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar la
imagen de un objeto hasta un millón de veces.
Microscopio electrónico de barrido (MEB)
En el microscopio electrónico de barrido (SEM en inglés) la muestra es recubierta con una capa de metal
delgado, y es barrida con electrones enviados desde un cañón. Un detector mide la cantidad de electrones
enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz de mostrar figuras en tres dimensiones,
proyectados en una imagen de TV. Su resolución está entre 3 y 20 nm, dependiendo del microscopio. Permite
obtener imágenes de gran resolución en materiales pétreos, metálicos y orgánicos. La luz se sustituye por un
haz de electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen conductoras metalizando la superficie.
Apoyándose en los trabajos de Max Knoll de los años 1930 fue Manfred von Ardenne quien logró inventar el
MEB en 1937 que consistía en un haz de electrones que barría la superficie de la muestra a analizar, que, en
respuesta, reemitía algunas partículas. Estas partículas son analizadas por los diferentes sensores que hacen que
sea posible la reconstrucción de una imagen tridimensional de la superficie.
Otros tipos de microscopios electrónicos
Microscopio electrónico de reflexión (REM) 1
Microscopio de efecto túnel (STM)
Microscopio de sonda de barrido (SPM)
Microscopía electrónica de transmisión de alta resolución (HRTEM)
Aplicaciones en
distintas áreas
En el estudio de los circuitos
integrados se suele utilizar el
microscopio electrónico
debido a una curiosa
propiedad: Como el campo
eléctrico modifica la
trayectoria de los electrones,
en un circuito integrado en Imagen de una hormiga tomada con
funcionamiento, visto bajo el un MEB (microscopio electrónico de
microscopio electrónico, se barrido).
puede apreciar el potencial al
que está cada elemento del
circuito.
La cristalografía de electrones es un método utilizado para determinar
la disposición de átomos en sólidos a través de un microscopio
electrónico de transmisión. Este método se utiliza en muchas
situaciones donde no se puede usar cristalografía de rayos X y fue
inventado por Aaron Klug.2
Referencias
1. Smith, Yolanda (23 de agosto de 2018). News Medical Life
Sciences, ed. «Tipos de microscopios electrónicos» (https://w
ww.news-medical.net/life-sciences/Types-of-Electron-Microsc
opes-(Spanish).aspx).
2. A. Klug 1978-1979 . Análisis de imágenes y la reconstrucción
en la microscopia electrónica de macromoléculas biológicas. '
Chemical Scripta ' ' ' 14 ' ' ' . 245 a 256
Enlaces externos
(1) carcasa, (2) emisor de
electrones, (3) electrones, (4) Wikimedia Commons alberga una galería multimedia sobre
cátodo, (5) ánodo, (6) Lente Microscopio electrónico.
condensador, (7) muestra analizada,
(8) Lente objetivo, (9) Lente
proyector, (10) Detector (sensor o
película fotográfica).
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