UNIVERSIDAD RICARDO PALMA
Facultad de Ciencias Biológicas
Escuela Profesional de Biología
Biología Molecular
Extracción de ADN de la fresa
Alumno: Andrews Daniel Diestra Moreno
Código: 201910842
Profesor: Flor de María Madrid Ibarra
2021 - I
INTRODUCCIÓN
Se conoce como extracción al método que utilizamos para obtener ADN a partir de material
biológico mediante técnicas físicas y químicas. Esto consiste en la homogenización y,
posteriormente, en la separación y purificación del ADN con la finalidad de poder estudiarlo
y/o analizar su composición. Así mismo, cabe resaltar, que la extracción y purificación de
los ácidos nucleicos constituye la primera etapa de la mayoría de los estudios de biología
molecular y de todas las técnicas de recombinación de ADN. Otros aspectos importantes
dentro de la extracción de esta macromolécula son la calidad y la pureza de lo extraído; si se
requiere obtener ácidos nucleicos muy purificados, que no contengan ciertos contaminantes
inhibidores, es preciso aplicar métodos de extracción adecuados para lograrlo. Otros
procedimientos que se realizan para llevar a cabo el proceso de purificación son la
cromatografía, la centrifugación y la separación por afinidad.
MATERIALES
-Fresas (5unidades) -Jeringas (2) -SDS
-Cloruro de sodio (sal común) -Bicarbonato de sodio -Agua mineral
-Alcohol de 96º -Papel toalla -Colador
PROCEDIMIENTO
I. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
1. Primero iniciamos preparando la muestra, para lo cual, con la ayuda de una licuadora y un
poco de agua mineral embotellada (en reemplazo de agua destilada), trituraremos las fresas
con la finalidad de romper las células de la muestra.
Fresa antes de licuar. Fresa licuada.
2. Luego de la trituración de las fresas, pasaremos a colar para eliminar algún trozo de pulpa
o resto de cáscara que pueda quedar en la muestra.
Restos de pulpa y/o
cáscara
Fresa colada
II. PREPARACIÓN DEL TAMPÓN DE LISIS
Como se conoce, en el caso de las fresas, encontraremos al ADN contenido en el núcleo, en
las mitocondrias y en los cloroplastos; organelos rodeados de membrana. Por dicha razón
pasaremos a preparar una solución que nos permitirá romper aquellas membranas.
1. En un vaso con agua mineral, agregaremos 2 cucharadas de cloruro de sodio (sal de mesa),
los cual permitirá obtener el ADN con mayor pureza, puesto que esto tiende disminuir la
solubilidad de las proteínas, facilitando la separación con el ADN, mediante su precipitación.
Por otro lado, ayuda a inhibir aquella acción natural de defensa que tienen las células de
destruir su propio ADN mediante enzimas como la ADNasa.
NaCl
2. Luego agregaremos 6 cucharaditas de bicarbonato de sodio a la solución salina anterior.
Este componente tendrá la función tampón, lo cual evitará que hallan cambios bruscos de
pH, es decir, que se vuelva muy bajo o muy alto el valor del pH.
Bicarbonato de sodio
3. Posteriormente, agregaremos dos chorritos de SDS (detergente líquido), para poder romper
aquellas membranas de lípidos de las organelas mencionadas en un inicio.
SDS
III. SOLUBILIZACIÓN DE LAS MEMBRANAS
1. Pasamos a mezclar aproximadamente 15ml de la muestra con 30ml del tampón de lisis y
agitamos. Durante este periodo la solución de lisis estará disolviendo las membranas.
Mezcla de la muestra
Y el tampón de lisis
2. Luego filtramos una vez más esta nueva solución con la ayuda de un papel toalla.
IV. EXTRACCIÓN DEL ADN
1. Traspasamos 15ml de la nueva solución a un nuevo vaso de menor tamaño.
15ml de mezcla de muestra y tampón
2. Luego agregamos 15ml de alcohol de 96° previamente refrigerado. Cabe resaltar que se
debe “dejar caer” el alcohol por los bordes del vaso. El alcohol nos permitirá aislar el ADN,
puesto que estos tienden a disminuir la solubilidad de esta macromolécula, ocasionando su
desenrollamiento y precipitación.
ADN en interface de la solución. Precipitación de ADN en la solución.
RESULTADOS
Como se puede observar en las imágenes, encontramos primero que, una vez agregado el
alcohol de 96° previamente refrigerado, las hebras de ADN se posicionarán en la interfase
de la solución; la cual recolectaremos y colocaremos en una cucharita para una mejor
observación.
Precipitación de ADN en la solución.
ADN
Vista superior del precipitado de ADN. Vista superior del precipitado de ADN.
(fotografía con flash) (fotografía sin flash)
ADN
Precipitado de ADN extraído. Precipitado de ADN extraído.
(fotografía con flash) (fotografía sin flash)
REFERENCIAS
-Burgot, J.-L. (2020). The Citric Acid Cycle. Thermodynamics in Bioenergetics, 4, 247–
254. [Link]
-Tammelleo, A. D. (1995). MI: independent living home pt. drowns: failure to follow
nursing care plan. The Regan Report on Nursing Law, 36(4), 3.
-Conogasi. (s.f.). Extracción de ADN. [Link]
